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胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ蛋白重组腺病毒载体构建及免疫原性研究
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作者 颜运秋 黎满香 +1 位作者 赵枭健 龙娉 《现代畜牧兽医》 2023年第11期21-25,共5页
研究旨在构建胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ蛋白的复制缺陷型5型腺病毒载体的重组腺病毒。构建包含胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ基因的穿梭质粒pDC316-APXⅡ,并与腺病毒骨架质粒pBHGlox(delta)E13Cre共转染Hek293细胞,获得了重组腺病毒rAd-APXⅡ,将... 研究旨在构建胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ蛋白的复制缺陷型5型腺病毒载体的重组腺病毒。构建包含胸膜肺炎放线杆菌ApxⅡ基因的穿梭质粒pDC316-APXⅡ,并与腺病毒骨架质粒pBHGlox(delta)E13Cre共转染Hek293细胞,获得了重组腺病毒rAd-APXⅡ,将纯化后的重组腺病毒rAd-APXⅡ肌肉注射小鼠进行免疫原性分析。结果显示,试验成功构建了pDC316-APXⅡ质粒以及包装了rAd-APXⅡ病毒。rAd5-Null组未产生特异的APXⅡIgG抗体;低和高浓度rAd-APXⅡ组均可产生较高的APXⅡIgG抗体,其中高浓度组产生的抗体水平显著高于低浓度组(P<0.05);某疫苗组产生的抗体水平显著高于rAd-APXⅡ低浓度组(P<0.05),但低于rAd-APXⅡ高浓度组(P<0.05)。低、高浓度rAd-APXⅡ组和疫苗组的IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3抗体显著高于rAd-Null组(P<0.05);高浓度rAd-APXⅡ组和疫苗组抗体显著高于低浓度rAd-APXⅡ组(P<0.05)。研究表明,rAd-APXⅡ重组腺病毒免疫小鼠能够产生特异性抗体并显示良好的免疫原性。 展开更多
关键词 猪传染性胸膜肺炎 胸膜肺炎放线杆菌 APXⅡ 重组腺病毒 免疫原性
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胸膜肺炎放线杆菌RTX毒素抗原优势决定簇的筛选和融合表达 被引量:2
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作者 耿琰 蔡金双 +1 位作者 伭婷 李玉峰 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2023年第5期87-94,共8页
为了制备胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)亚单位疫苗和建立配套的诊断方法,本研究在对APP的RTX毒素(ApxⅠ~Ⅲ)生物学信息分析的基础上,以APP血清5型和8型的DNA为模板对ApxⅠ~Ⅲ分段扩增后进行截短表达,获得12个... 为了制备胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)亚单位疫苗和建立配套的诊断方法,本研究在对APP的RTX毒素(ApxⅠ~Ⅲ)生物学信息分析的基础上,以APP血清5型和8型的DNA为模板对ApxⅠ~Ⅲ分段扩增后进行截短表达,获得12个截短表达蛋白。利用Western blot对12个表达蛋白进行抗原性分析,确定ApxⅠ~Ⅲ的优势抗原决定簇分别为蛋白AⅠ2、AⅡ3和AⅢ2。以蛋白AⅡ3、AⅢ2、AⅠ2的顺序排列并在蛋白间加入GPGPG氨基酸序列,无缝克隆3个蛋白片段基因,通过原核表达获得融合蛋白A231。该蛋白可与临床APP阳性猪血清特异性结合,具有良好的免疫反应性。该研究的成功开展可为研制具有交叉保护力的亚单位疫苗及建立配套ELISA检测方法奠定基础。 展开更多
关键词 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 APX毒素 抗原决定区 免疫原性
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胸膜肺炎放线杆菌分离株血清型的PCR鉴定和Apx毒素基因检测
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作者 卢碧凯 袁秀芳 +7 位作者 徐丽华 余斌 苏菲 叶十一 陈怡洁 蒋利明 张晖 李军星 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期1341-1346,共6页
旨在调查胸膜肺炎放线杆菌流行株的血清型及Apx毒素基因携带情况,采用PCR方法对APP分离株进行血清型鉴定和Apx毒素基因检测。结果表明,64个分离株分别被鉴定为2、5、7、8、12、15、19共7个血清型。7个血清型中发现12种不同的Apx毒力因... 旨在调查胸膜肺炎放线杆菌流行株的血清型及Apx毒素基因携带情况,采用PCR方法对APP分离株进行血清型鉴定和Apx毒素基因检测。结果表明,64个分离株分别被鉴定为2、5、7、8、12、15、19共7个血清型。7个血清型中发现12种不同的Apx毒力因子模式。毒力因子分析结果显示,同一血清型的不同菌株携带的Apx毒素基因存在差异,不同血清型的菌株也可能会携带相同模式的Apx毒素基因。本研究表明,血清8型胸膜肺炎放线杆菌是浙江省的优势血清型,血清19型菌株在国内首次被检测到。血清型与所携带的Apx毒素基因之间不存在必然联系。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 血清分型 APX 毒力因子 PCR
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猪胸膜肺炎放线杆菌新疆株分离鉴定及生物学特性研究
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作者 张雪丽 张金江 +4 位作者 王宏图 冷婧 赵颖婕 胡建军 敖维平 《塔里木大学学报》 2023年第4期26-33,共8页
新疆南疆某规模猪场发生疑似猪传染性胸膜肺炎,为确定其病原,对采集的发病猪肺脏样品进行了细菌分离、生化试验、PCR检测、药敏试验、动物致病性试验等。结果表明,从该规模养猪场分离获得1株猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,经生物学特性分析... 新疆南疆某规模猪场发生疑似猪传染性胸膜肺炎,为确定其病原,对采集的发病猪肺脏样品进行了细菌分离、生化试验、PCR检测、药敏试验、动物致病性试验等。结果表明,从该规模养猪场分离获得1株猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,经生物学特性分析、PCR检测鉴定为APP生物Ⅰ型、血清型1型。致病性试验结果显示该分离株对小鼠具有致病性,药敏试验显示该菌株对环丙沙星、氧氟沙星、诺氟沙星等喹诺酮类药物具有敏感性。经耐药基因检测分析,该病原为携带floR耐药基因的血清型1型猪胸膜肺炎放线杆菌。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 分离鉴定 apx基因 floR基因
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芹菜APX基因家族鉴定及其表达分析
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作者 杜佳庚 周瑾 +3 位作者 李晓燕 张颖 伍丽梅 李梦瑶 《干旱地区农业研究》 CSCD 北大核心 2023年第6期54-63,共10页
抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate peroxidase, APX)是植物活性氧代谢中重要的抗氧化酶之一,在植物抵抗氧化胁迫方面发挥重要作用。利用生物信息学方法对芹菜基因组中的APX基因家族成员进行鉴定和分析,并通过实时荧光定量PCR(quantitative ... 抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate peroxidase, APX)是植物活性氧代谢中重要的抗氧化酶之一,在植物抵抗氧化胁迫方面发挥重要作用。利用生物信息学方法对芹菜基因组中的APX基因家族成员进行鉴定和分析,并通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)验证分析AgAPXs在高温胁迫下的表达情况,为开展芹菜APX基因参与高温胁迫调控机制提供依据。结果表明:芹菜基因组中共有9个APX基因,随机分布在5个染色体上,并出现了基因片段复制现象;大多数基因被定位在细胞质中。系统发育分析表明,AgAPX基因家族可分为3个亚族,同一亚族中的成员具有相似的基因结构和基序。启动子顺式元件分析表明,大多数AgAPX基因含有多种与生长发育、植物激素和逆境胁迫相关的顺式元件。高温胁迫下,芹菜APX活性提高。qRT-PCR分析表明,AgAPXs在不同时间的高温处理下表达具有显著差异,并与转录组表达丰度相一致,AgAPX2、AgAPX3、AgAPX4、AgAPX5、AgAPX7的表达量和APX活性具有显著相关性,推测AgAPXs可能参与了芹菜抵御高温的调控过程。本研究初步鉴定并提供了芹菜APX基因家族成员信息,为今后进一步探索芹菜APX基因功能提供了重要的研究基础。 展开更多
关键词 芹菜 APX 系统进化 顺式元件 高温胁迫应答
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5-ALA对NaCl胁迫下丝瓜幼苗生长及生理特性的影响
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作者 张爱慧 冷欣兰 +3 位作者 袁颖辉 任慧羚 陈雪琼 朱士农 《江苏农业科学》 北大核心 2023年第13期137-141,共5页
以江蔬一号丝瓜为材料,研究100 mmol/L NaCl胁迫下,叶面喷施和根施5-ALA对丝瓜幼苗生长缓解效应及其生理活性的变化。结果表明,采用100 mmol/L NaCl处理幼苗后,丝瓜幼苗生长缓慢,NaCl胁迫下外源根施和叶面喷施5-ALA,均能有效地缓解盐胁... 以江蔬一号丝瓜为材料,研究100 mmol/L NaCl胁迫下,叶面喷施和根施5-ALA对丝瓜幼苗生长缓解效应及其生理活性的变化。结果表明,采用100 mmol/L NaCl处理幼苗后,丝瓜幼苗生长缓慢,NaCl胁迫下外源根施和叶面喷施5-ALA,均能有效地缓解盐胁迫效应促进幼苗的生长,在此过程中丝瓜幼苗叶片中抗坏血酸过氧化物酶(APX)及抗坏血酸氧化酶(AAO)的活性明显升高;干鲜质量及谷胱甘肽含量、抗坏血酸含量明显增加,且根施效果较喷施效果好。NaCl胁迫下外源5-ALA可以显著提高丝瓜幼苗叶片的AsA含量。因此,外源5-ALA通过提高丝瓜幼苗AsA-GSH循环的重要酶类活性,增强了幼苗的抗氧化能力,从而缓解了盐胁迫对于丝瓜幼苗的伤害。因此,生产中可以采用根施或叶面喷施5-ALA缓解盐渍化土壤对丝瓜生长的影响。 展开更多
关键词 盐胁迫 丝瓜幼苗 5-ALA APX AAO
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Genome-wide and transcriptome-wide identification of the APX gene family in rapeseed (Brassica napus L.) and their expression features under low temperature stress
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作者 Xuan Sun Guomei Liu +1 位作者 Lin Yao Chunfang Du 《Oil Crop Science》 CSCD 2023年第4期259-265,共7页
Ascorbate peroxidase(APX)is a crucial H2O2 scavenger that utilizes ascorbic acid as an electron donor and plays a significant role in plant stress resistance.This study aims to identify and characterize the Brassica n... Ascorbate peroxidase(APX)is a crucial H2O2 scavenger that utilizes ascorbic acid as an electron donor and plays a significant role in plant stress resistance.This study aims to identify and characterize the Brassica napus L.APX gene family through genome and transcriptome sequencing,while also revealing their expression profile under low-temperature stress via transcriptome and proteome analysis.The results indicate the presence of 18 genes with three different conserved domains distributed in Brassica napus L.,which can be classified into three major branches based on phylogenetic analysis.Eleven members were predicted to have the low-temperature response component(LTR).Most APX genes exhibit up-regulated transcriptional expression under low temperature stress,particularly APX2,APX4,APX12,and APX18.In terms of proteomics data,only six members(APX2,APX4,APX8,APX12,APX17,and APX18)showed temporal specificity in their expression patterns.Therefore,this study provides valuable insights into the complexity of the APX family in the functional characterization of its genes for future research. 展开更多
关键词 Brassica napus Low-temperature stress APX Bioinformatics
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音频分析仪APX515在SW100H型广播发射机指标测试中的应用
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作者 袁林云 《产品可靠性报告》 2023年第7期129-131,共3页
在大功率调幅广播传输系统中,发射机的运行指标是衡量技术维护工作质量高低的重要标志。在实际工作中,通常使用ATS-1音频分析仪、R&S FMAB调制分析仪等仪器来测量发射机的三大指标。由于专业测量仪器更新和产品迭代,一款性能高、经... 在大功率调幅广播传输系统中,发射机的运行指标是衡量技术维护工作质量高低的重要标志。在实际工作中,通常使用ATS-1音频分析仪、R&S FMAB调制分析仪等仪器来测量发射机的三大指标。由于专业测量仪器更新和产品迭代,一款性能高、经济便捷的APx系列音频分析仪设备APx515应用于广播发射机指标测试是最好的选择。本文结合广播发射机维护实践,以APx515型音频分析仪在SW100H型广播发射机指标测试操作为例,介绍其配套软件APx500的参数设置、测试步骤,并总结操作方法和注意事项。 展开更多
关键词 调幅广播 音频分析 APx515 发射机 指标测试
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白菜型冬油菜抗坏血酸过氧化物酶(APX)基因的克隆、表达及其活性分析 被引量:24
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作者 曾秀存 孙万仓 +10 位作者 方彦 刘自刚 董云 孙佳 武军艳 张鹏飞 史鹏辉 孔德晶 张腾国 何丽 赵彩霞 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1400-1408,共9页
抗坏血酸过氧化物酶(APX)是一种在逆境条件下清除细胞内氧自由基、增强植物抗逆性的关键酶。本研究根据已发表植物抗坏血酸过氧化物酶基因APX的同源保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号的DNA,获得APX基因开放... 抗坏血酸过氧化物酶(APX)是一种在逆境条件下清除细胞内氧自由基、增强植物抗逆性的关键酶。本研究根据已发表植物抗坏血酸过氧化物酶基因APX的同源保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增超强抗寒白菜型冬油菜陇油7号的DNA,获得APX基因开放阅读框,长度为753 bp,编码250个氨基酸残基,推导的氨基酸序列具有APX蛋白的典型特征。生物信息学分析显示,与已报道的大白菜的APX氨基酸序列同源性达99%,该酶蛋白具有高度的进化保守性,其保守序列属于植物的POD超家族,APX相对分子质量和理论等电点依次为27.7 kD和5.58;APX基因无信号肽,是一个亲水性蛋白,可推测其定位于细胞质中;二级结构预测表明陇油7号的APX是由不规则卷曲和α-螺旋组成的稳定蛋白。实时荧光定量PCR和酶活性分析显示,该基因表达和酶活性受低温胁迫诱导,表明该基因在白菜型冬油菜陇油7号适应低温胁迫过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 白菜型油菜 低温 APX基因克隆 表达分析 APX活性
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铅胁迫对玉米幼苗叶片光系统功能及光合作用的影响 被引量:71
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作者 姚广 高辉远 +2 位作者 王未未 张立涛 部建雯 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期1162-1169,共8页
通过同时测定玉米叶片的叶绿素荧光快速诱导动力学曲线和对820nm光的吸收、分析叶片的气体交换过程以及叶绿体活性氧清除关键酶的活性,研究了不同浓度的铅(Pb)胁迫对玉米光系统Ⅰ(PSⅠ)、光系统Ⅱ(PSⅡ)的光化学活性和光合作用的影响,... 通过同时测定玉米叶片的叶绿素荧光快速诱导动力学曲线和对820nm光的吸收、分析叶片的气体交换过程以及叶绿体活性氧清除关键酶的活性,研究了不同浓度的铅(Pb)胁迫对玉米光系统Ⅰ(PSⅠ)、光系统Ⅱ(PSⅡ)的光化学活性和光合作用的影响,并分析了Pb胁迫下两个光系统的相互关系。结果表明:铅胁迫显著抑制了玉米地上部分和地下部分的生长、降低了叶片光合色素含量、并通过非气孔因素限制了光合作用、导致过剩激发能的增加;铅胁迫显著抑制了超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性、伤害了PSII反应中心、PSII的受体侧和供体侧(放氧复合体)以及PSI光化学活性。 展开更多
关键词 铅胁迫 PSII PSI 放氧复合体(OEC) 820nm光吸收 SOD和APX
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不同抗性松树与松材线虫互作中H_2O_2及其氧化酶活性的差异 被引量:14
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作者 何龙喜 吴小芹 +2 位作者 俞禄珍 吉静 叶建仁 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期13-17,共5页
为探讨不同抗性松树接种松材线虫后过氧化氢(H2O2)、氧化酶活性变化差异与其抗性间的关系,对火炬松、马尾松和黑松接种松材线虫后针叶内H2O2含量、POD和APX酶活性动态变化进行了研究。结果发现,黑松和马尾松在接种早期(接种4 h后)针叶内... 为探讨不同抗性松树接种松材线虫后过氧化氢(H2O2)、氧化酶活性变化差异与其抗性间的关系,对火炬松、马尾松和黑松接种松材线虫后针叶内H2O2含量、POD和APX酶活性动态变化进行了研究。结果发现,黑松和马尾松在接种早期(接种4 h后)针叶内H2O2含量(分别为(470.01±47.20)μmol/g和(232.33±9.42)μmol/g)远高于火炬松((145.46±11.86)μmol/g),但在接种72 h后,火炬松针叶内H2O2含量上升幅度较大,且在达到峰值后下降幅度比黑松和马尾松的小。3种松树接种松材线虫后的POD和APX酶活性均出现两次高峰值,峰值从大到小均为:黑松、马尾松、火炬松,且在达第1次活性高峰时感病松树上升快,在达第2次活性峰时抗病的火炬松上升快。这表明不同抗性松树接种松材线虫后,其体内H2O2含量、POD和APX酶活性变化差异与其抗性存在密切关系,H2O2含量的积累程度对松树抗病性具有重要的影响。 展开更多
关键词 松材线虫 火炬松 马尾松 黑松 H2O2 POD APX
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茶树鲜叶抗坏血酸过氧化物酶活性的变化规律及测定方法 被引量:39
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作者 孙云 江春柳 +2 位作者 赖钟雄 邵巍 王秀英 《热带作物学报》 CSCD 2008年第5期562-566,共5页
探讨茶树鲜叶抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的测定条件,分析不同茶树品种以及茶树鲜叶不同叶位APX活性的变化。结果表明:聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)加入量约为鲜叶重的1.5倍,酶提取液pH为7.8,反应液pH为7.0,抗坏血酸(AsA)浓度为0.50mmol/L... 探讨茶树鲜叶抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的测定条件,分析不同茶树品种以及茶树鲜叶不同叶位APX活性的变化。结果表明:聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)加入量约为鲜叶重的1.5倍,酶提取液pH为7.8,反应液pH为7.0,抗坏血酸(AsA)浓度为0.50mmol/L时茶树鲜叶APX活性最高;茶树鲜叶APX活性随冷藏时间的延长呈下降趋势;福建7个主要茶树品种以福鼎大白茶的APX活性最高,铁观音的APX活性最低;茶树鲜叶不同叶位APX活性变化趋势为:芽>第一叶>第二叶>第三叶>老叶>嫩茎。 展开更多
关键词 茶树 鲜叶 抗坏血酸过氧化物酶(APX) 酶活性 测定方法
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NaCl和等渗PEG对荞麦SOD及APX活性的影响 被引量:13
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作者 战伟龑 张学杰 +2 位作者 杨德翠 马德源 杨洪兵 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第5期101-102,共2页
采用不同浓度NaC l和等渗PEG对2个荞麦品种进行处理,低浓度NaC l能明显促进2个荞麦品种根和叶的SOD及APX活性,等渗PEG处理时增加幅度较小;高盐度处理时苦荞根和叶的SOD及APX活性仍保持较高的水平,甜荞正相反,说明苦荞的耐胁迫性大于甜荞。
关键词 荞麦 NACL处理 等渗PEG SOD活性 APX活性
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低温胁迫下钼对冬小麦抗氧化酶活性的影响 被引量:64
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作者 孙学成 谭启玲 +2 位作者 胡承孝 甘巧巧 易长城 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期952-959,共8页
目的揭示钼提高冬小麦抗寒力的生理机制。方法采用盆栽试验的方法,以冬小麦钼高效品种97003和钼低效品种97014为材料,研究了在低温胁迫下施钼对冬小麦叶片抗氧化酶活性影响。结果低温处理2、4和6d时施钼均显著提高了超氧化物歧化酶(SOD... 目的揭示钼提高冬小麦抗寒力的生理机制。方法采用盆栽试验的方法,以冬小麦钼高效品种97003和钼低效品种97014为材料,研究了在低温胁迫下施钼对冬小麦叶片抗氧化酶活性影响。结果低温处理2、4和6d时施钼均显著提高了超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性,显著降低了2个冬小麦品种叶片中超氧阴离子产生速率;施钼后,随着低温胁迫时间的延长,2个冬小麦品种叶片中4种抗氧化酶活性均先升高而后呈下降或突降趋势,说明施钼能使冬小麦通过正常的低温锻炼过程,有利于植株在经受更长时间低温胁迫时维持较高的抗寒力;钼对冬小麦钼高、低效品种叶片中抗氧化酶活性的影响存在基因型差异,与钼高效品种相比,钼低效品种缺钼处理叶片SOD、CAT、POD和APX等抗氧化酶活性下降幅度更大,活性氧自由基积累速率更大,这可能是钼低效品种在缺钼条件下更易受到低温伤害的原因之一。结论钼通过调控活性氧代谢过程来影响冬小麦的抗寒力。 展开更多
关键词 冬小麦 低温胁迫 超氧化物歧化酶(SOD) 过氧化氢酶(CAT) 过氧化物酶(POD) 抗坏血酸过氧化物酶(APX)
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琯溪蜜柚汁胞在发育与粒化过程中APX活性变化及同工酶分析 被引量:7
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作者 钟凤林 郭志雄 +2 位作者 李开拓 王江波 潘东明 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期27-31,共5页
对不同发育时期的琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞进行APX活性测定及同工酶分析。结果表明,随着汁胞的发育,APX活性增大;而柚子衰老腐烂时,APX活性迅速降低。APX同工酶随着汁胞发育而发生变化,花后150d的APX同工酶增加了1... 对不同发育时期的琯溪蜜柚(Citrus grandis‘Guanximiyou’)汁胞进行APX活性测定及同工酶分析。结果表明,随着汁胞的发育,APX活性增大;而柚子衰老腐烂时,APX活性迅速降低。APX同工酶随着汁胞发育而发生变化,花后150d的APX同工酶增加了1个组分(迁移率0.66),且随着汁胞的成熟,其表达量增加。花后230d时柚子开始衰老腐烂,花后242d已难以看到大部分APX同工酶酶谱。粒化汁胞的APX活性比正常汁胞大,同工酶酶谱亮度和清晰度也大,推测溪蜜柚汁胞在粒化过程中APX可清除活性氧自由基,抵抗氧化损伤。 展开更多
关键词 蜜柚 汁胞 发育 粒化 APX 同工酶
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植物抗坏血酸过氧化物酶的表达调控以及对非生物胁迫的耐受作用 被引量:60
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作者 李泽琴 李静晓 张根发 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期45-54,共10页
抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate peroxidase,APX)属于I型血红素过氧化物酶,它催化H2O2依赖的L-抗坏血酸氧化作用,对抗坏血酸表现出高度的专一性。植物APX基因家族由4个亚家族组成,分别为细胞质、叶绿体、线粒体和过氧化物酶体基因亚家族... 抗坏血酸过氧化物酶(Ascorbate peroxidase,APX)属于I型血红素过氧化物酶,它催化H2O2依赖的L-抗坏血酸氧化作用,对抗坏血酸表现出高度的专一性。植物APX基因家族由4个亚家族组成,分别为细胞质、叶绿体、线粒体和过氧化物酶体基因亚家族,每个亚家族中又含有不同的APX同工酶。作为植物抗坏血酸-谷胱甘肽循环中的一个关键组分,APX在细胞H2O2代谢过程中起着至关重要的作用。研究表明植物APX是氧化还原信号系统中调节细胞水平H2O2非常重要的一种酶,APX同工酶的表达机制非常复杂,细胞质APX受多种信号调节表达,两种叶绿体APX通过选择性剪接进行组织特异性调节。通过调控产生的APX可调节细胞中的氧化还原信号,进而提高植物对非生物胁迫的耐受性。文章综述了植物APX的催化机制、表达调控机理以及响应植物非生物逆境胁迫的重要作用。 展开更多
关键词 抗坏血酸过氧化物酶(APX) 环境胁迫 活性氧(ROS) 基因表达调控 分子机理
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盐地碱蓬(Suaedasalsa)APX基因的克隆及盐胁迫下的表达 被引量:28
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作者 马长乐 王萍萍 +2 位作者 曹子谊 赵彦修 张慧 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第4期261-266,共6页
从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了抗坏血酸过氧化物酶 (ascorbateperoxidase ,APX)的全长cDNA(SsAPX) ,基因注册号为AY0 34 893。SsAPX全长 1.1kb ,推导的氨基酸序列长为 2 5 0个氨基酸残基。BLAST同源性分析表明 ,该cDNA与已报告的菠... 从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了抗坏血酸过氧化物酶 (ascorbateperoxidase ,APX)的全长cDNA(SsAPX) ,基因注册号为AY0 34 893。SsAPX全长 1.1kb ,推导的氨基酸序列长为 2 5 0个氨基酸残基。BLAST同源性分析表明 ,该cDNA与已报告的菠菜(Spinaciaoleracea)细胞质抗坏血酸过氧化物酶基因同源性最高 ,在核苷酸水平上一致性为 87% ,在氨基酸水平上一致性为 89%。Southern杂交表明APX基因在盐地碱蓬基因组中只有 1个拷贝。盐 (NaCl 40 0mmol/L)处理不同时间后的Northern杂交分析表明盐地碱蓬中SsAPX基因在盐胁迫下表达量增加 ,而且在盐胁迫下抗坏血酸过氧化物酶的活性也显著地增加 ,说明该基因受盐诱导。 展开更多
关键词 盐地碱蓬 CDNA APX 活性氧 盐胁迫
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ毒素基因的克隆与表达 被引量:14
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作者 王方昆 王一成 +1 位作者 袁秀芳 徐丽华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期657-660,共4页
以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清2型标准菌株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增ApxⅣ毒素基因特异片段1.5 kb左右,将PCR产物纯化后与pMD18-T连接并测序,结果该片段的碱基序列与GenBank中标准株序列的同源性为98%。随后将该片段亚克隆... 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清2型标准菌株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增ApxⅣ毒素基因特异片段1.5 kb左右,将PCR产物纯化后与pMD18-T连接并测序,结果该片段的碱基序列与GenBank中标准株序列的同源性为98%。随后将该片段亚克隆到原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点,经鉴定后得到重组质粒pET-ApxⅣ,将此重组质粒转化到受体菌BL21-DL3中,并用诱导剂乳糖进行诱导表达,5 h后表达达到高峰。经12%SDS-PAGE电泳检测,表达得到的融合蛋白约为61 000。经Western blotting分析,表达蛋白能与APP阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应。 展开更多
关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 ApxⅣ 克隆 表达
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猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIVA基因特异片段的克隆和表达 被引量:7
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作者 彭永刚 刘思国 +3 位作者 王牟平 宫强 王春来 沈国顺 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期103-106,共4页
以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清7型国内分离株25_4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apxIVA特异片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18_T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pGEX_6P_1中,构建成重组表达质粒pGEX_apxI... 以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清7型国内分离株25_4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apxIVA特异片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18_T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pGEX_6P_1中,构建成重组表达质粒pGEX_apxIVA,转入到大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,进行SDS_PAGE电泳。结果表明,25_4株apxIVAgene与基因库中标准7型apxIVAgene同源性达97%,所表达的融合蛋白相对分子量为44kD,与实际预测相符。apxIVA毒素特异片段的成功表达为猪胸膜肺炎放线杆菌病的诊断打下基础。 展开更多
关键词 猪胸膜肺炎放线杆菌 分泌蛋白 载体 克隆 表达 apxⅣA
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金鱼藻抗氧化酶对水体无机氮升高的响应 被引量:46
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作者 曹特 倪乐意 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期299-303,共5页
为了研究水体富营养化引起的无机氮升高对沉水植物的胁迫 ,本研究用 4种浓度的碳酸铵和 5种浓度的硝酸钾对金鱼藻进行急性处理 ,分别在 5— 4 8h内测定植株超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物... 为了研究水体富营养化引起的无机氮升高对沉水植物的胁迫 ,本研究用 4种浓度的碳酸铵和 5种浓度的硝酸钾对金鱼藻进行急性处理 ,分别在 5— 4 8h内测定植株超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶 (APX)的活力。结果表明铵盐处理下 4种酶中CAT活性变化最大 ,在 5— 15h时其活性与处理浓度正相关。更长时间 2 4h处理则导致响应停止。硝酸盐处理下SOD、APX和CAT活性在 2 4h时才有明显升高。SOD和CAT活性在 4种酶中变化最大 ,它们对处理浓度变化的响应趋势都是在低浓度处理上升然后在较高浓度下降。在铵盐和硝酸盐处理下APX活性都是在 4种酶中最低 ,其变化规律与CAT相当一致。本研究表明CAT对铵盐胁迫响应较快 ;SOD和CAT对硝酸盐胁迫的响应速度较铵盐慢 ; 展开更多
关键词 金鱼藻 抗氧化酶 水体 无机氮 SOD 胁迫 CAT POD APX
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