ALDH1和AQP-5蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及与病理学参数、预后的关系

目的观察ALDH1和AQP-5蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,并分析与NSCLC临床病理学参数、预后的关系。方法收集2010年1月至2013年12月手术切除的160例经病理学证实为NSCLC患者的组织标本及其癌旁正常组织标本,免疫组化检测ALDH1和AQP-5的表达,并分析二者与NSCLC临床病理学参数、预后的关系。结果ALDH1、AQP-5蛋白主要表达于细胞核中,ALDH1在NSCLC组织和癌旁正常组织中阳性表达率分别为90.00%和25.00%,AQP-5在NSCLC组织和癌旁正常组织中阳性表达率分别为93.75%和17.50%,NSCLC组织中ALDH1和AQP-5阳性表达率明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001);ALDH1、AQP-5蛋白表达在腺癌和鳞癌间无统计学意义(P>0.05),而在分化程度、TNM分期和淋巴结是否转移间存在统计学意义(P<0.05);Spearman相关分析结果显示ALDH1、AQP-5蛋白在NSCLC组织呈明显的正相关关系(r=0.726,P<0.001);ALDH1和AQP-5表达强度为-/+的NSCLC患者中位生存期较表达强度为++/+++的患者明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox单因素回归分析显示分化程度、TNM分期、淋巴结是否转移及ALDH1与AQP-5的表达是影响NSCLC临床预后的因素(P<0.05);而Cox多因素回归分析结果显示TNM分期、ALDH1和AQP-5表达是影响NSCLC预后的风险因素(P<0.05)。结论ALDH1和AQP-5过表达可促进NSCLC的发生发展,降低NSCLC患者的生存期,联合监测ALDH1和AQP-5的表达对NSCLC的发生发展有一定的临床价值。

虎杖对急性肺损伤大鼠肺组织AQP-1和AQP-5mRNA表达及免疫组化积分的影响

目的:探讨中药虎杖对急性肺损伤大鼠肺组织AQP-1和AQP-5 mRNA表达及免疫组化积分的影响。方法:将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组,模型组,虎杖低、中、高剂量组、强的松对照组,每组10只。造模并以虎杖煎剂治疗后,使用荧光定量RT-PCR、免疫组化方法分别测定大鼠肺组织AQP-1和AQP-5mRNA的表达以及积分情况。结果:AQP-1和AQP-5 mRNA表达显示虎杖中、高剂量组与模型组相比均明显增高,差异均有显著性(P<0.05)。虎杖低剂量组与模型组相比无显著性差异(P>0.05)。免疫组化积分结果AQP-1虎杖中剂量组最高,AQP-5高剂量组最高,低剂量组最低。3组间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:虎杖可能是通过促进肺组织AQP-1和AQP-5的表达,从而起到对急性肺损伤大鼠的治疗作用。

无创高频振荡通气对急性呼吸衰竭新生儿SP-D、AQP-5水平的影响

目的探讨无创高频振荡通气治疗新生儿急性呼吸衰竭患者对其SP-D(肺表面活性物质D,Pulmonary surfactant D)、AQP-5(肺组织水通道蛋白5,Lung tissue water channel protein 5)水平的影响。方法选择2014年1月-2017年1月在本院诊治的急性呼吸衰竭患儿(acute respiratory failure,ARF)94例,按随机数字法分为无创高频(noninvasive high-frequency ventilation,NHFOV)组和常频机械通气(Constant frequency mechanical ventilation,CMV)组。NHFOV组予NHFOV治疗,CMV组给予CMV治疗,然后观察两组的治疗效果及机械通气时间、用氧时间、住院时间、并发症等,在治疗前、治疗12、24、48、72h监测两组患者的呼吸动力学、血气指标以及血清SP-D、AQP-5水平。结果NHFOV组的有效率为93.61%,显著高于CMV组(78.32%),差异有统计学意义(P=0.037);NHFOV组的气漏、呼吸相关性肺炎、下呼吸道感染等并发症显著低于CMV组,差异有统计学意义(P<0.05);NHFOV组的机械通气时间、用氧时间、经口喂养时间、住院时间显著短于CMV组(P<0.05);两组患儿的Pa O_2、Pa CO_2、Pa O_2/Fi O_2、OI、RI、p H在治疗后均较治疗前显著改善,差异有统计学意义(P<0.05),NHFOV组的血气指标、呼吸动力学在各时间点均明显改善,均显著优于CMV组,差异有统计学意义(P<0.05);在治疗后两组患者的SP-D、AQP-5水平均较治疗前改善显著(P<0.05),在治疗24h内两组患者的SP-D、AQP-5水平差异不大,差异无统计学意义(P>0.05),24h后各时间点NHFOV组的血清SP-D、AQP-5水平显著低于CMV组,差异有统计学意义(P<0.05);结论 NHFOV治疗新生儿ARF疗效较好,可以有效改善氧合功能,并且不良反应较少,在临床上应用价值较高。

血清AQP-5与新生儿呼吸窘迫症临床特征及预后的关系

目的研究水通道蛋白-5(AQP-5)表达水平与新生儿呼吸窘迫症(NRDS)临床特征及预后的关联。方法选取2018年01月至2019年12月NRDS患儿120例进行治疗并做预后评估,采用ELISA法(酶联免疫吸附)测定不同预后状态患儿的血清AQP-5浓度,并绘制AQP-5的ROC曲线,进一步评估NRDS的预后价值;所有患儿根据ROC曲线的预测临界值分为低风险组和高风险组,比较两组患儿的治疗情况、并发症及转归情况;考察AQP-5表达与临床数据关联;COX多因素回归确定NRDS预后的关键影响因素。结果不同预后患儿的血清AQP-5水平差异有显著性(P<0.05),AQP-5水平越高,提示预后越差;以AQP-5水平2.42μg/L作为预测的临界值,ROC曲线下面积为0.867,灵敏度为75.9%,特异度为88.3%;根据预测的临界值,分为低风险组(AQP-5浓度≤2.42μg/L)88例和高风险组(AQP-5浓度>2.42μg/L)32例;低风险组患儿所需的氧疗时间、使用PS例数及其住院时间都要少于高风险组(P<0.05),且具有更少并发疾病,疾病预后及转归效果均明显好于高风险组(P<0.05);单因素分析显示,胎龄、分娩方式、出生窒息、胎盘异常、阿氏评分(Apgar评分)及妊娠高血压对NRDS预后具有显著影响(P<0.05);COX回归可知,AQP-5水平(Hr=4.685,95%CI1.833~11.974)、胎龄(Hr=4.125,95%CI1.182~14.396)、分娩方式(Hr=2.680,95%CI1.081~6.646)、胎盘异常(Hr=3.017,95%CI1.242~7.328)及Apgar评分(Hr=3.278,95%CI1.486~7.231)是NRDS患儿预后的独立危险因素。结论AQP-5与NRDS临床特征密切相关,可以作为NRDS预后的标志物。

五苓散对肾阳虚型口干燥症小鼠颌下腺AQP-5的分布表达研究

目的通过研究五苓散对肾阳虚模型小鼠颌下腺AQP-5分布表达的作用,探究五苓散治疗肾阳虚型小鼠口干燥症的机制。方法将27只ICR小鼠随机分为空白组、模型组、五苓散组,除空白组外,其余各组采用肌肉注射氢化可的松诱导联合限制日摄食量法建立气虚基础上的肾阳虚模型。造模后给予相应的药物干预10d,空白组、模型组均灌胃0.2mL/10g蒸馏水,五苓散组以每日0.2mL/10g灌胃五苓散汤剂,观察给药后的小鼠一般情况,测量小鼠的饮水量、唾液流量,检测颌下腺形态及AQP-5分布表达。结果与空白组相比,模型组出现颌下腺萎缩,饮水量减少,唾液流量减少,AQP-5主要表达在基底膜和顶膜中,较空白组染色较弱;相比于模型组,五苓散组颌下腺萎缩减少,饮水量增加,唾液流量,并且一定程度上AQP-5表达分布染色较模型组强。结论五苓散能抑制颌下腺萎缩,增加饮水量和唾液流量,可能通过改变AQP-5的分布表达改善小鼠在气虚基础上的肾阳虚证引起的口干症状。

6-姜烯酚对急性肺损伤小鼠肺水肿的治疗作用及机制研究

目的:观察6-姜烯酚(6-SH)对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肺水肿的治疗作用,探究可能的作用机制。方法:采用随机数字表法将40只无特定病原体(SPF)级Balb/c小鼠分为对照组、模型组、6-姜烯酚组、地塞米松组,每组10只。鼻腔滴注LPS构建ALI模型,对照组滴注等量生理盐水。30 min后,给予6-姜烯酚组灌胃(100 mg/kg);地塞米松组给予腹腔注射(5 mg/kg);对照组和模型组给予灌胃等量生理盐水,24 h后结束实验,收集样本。测定肺组织湿/干重比(W/D)和肺系数;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定白细胞计数和总蛋白浓度;观察肺组织病理学改变、计算病理评分;测定BALF上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)以及白细胞介素-6(IL-6)水平;检测肺组织中Toll样受体4/核因子κB/水通道蛋白(TLR4/NF-κB/AQPs)信号通路相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组肺组织损伤明显,病理评分、肺系数、W/D增加(P<0.01),白细胞计数、总蛋白浓度及TNF-α、IL-1β、IL-6的水平升高(P<0.01);与模型组比较,6-姜烯酚组的肺系数和W/D降低(P<0.01或P<0.05),白细胞计数、总蛋白浓度以及TNF-α、IL-1β、IL-6的水平降低(P<0.01或P<0.05),AQP1和AQP5的蛋白表达水平升高(P<0.01),TLR4、MyD88、NF-κB p65以及p-NF-κB p65的表达水平降低(P<0.01或P<0.05)。结论:6-姜烯酚可能通过调控TLR4/NF-κB/AQPs信号通路发挥其抗炎作用和改善肺组织水液代谢与转运,有效缓解ALI小鼠的肺组织水肿。

黄芪对急性肺损伤模型大鼠肺组织水通道蛋白-1和水通道蛋白-5表达的影响

目的探讨补气中药黄芪对急性肺损伤模型大鼠肺组织水通道蛋白-1(AQP-1)和水通道蛋白-5(AQP-5)表达的影响。方法将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组各10只,予以每ml相当于0.25g黄芪生药的煎剂干预后,使用凝胶电泳测条带积分光密度值来检测确定肺组织AQP-1和AQP-5的表达情况。结果中药组大鼠肺组织AQP-1的积分光密度值为(0.572±0.084),模型组大鼠肺组织AQP-1的积分光密度值为(0.278±0.068),中药组高于模型组(P<0.01)。中药组大鼠肺组织AQP-5的积分光密度值为(0.812±0.084),模型组大鼠肺组织AQP-5的积分光密度值为(0.525±0.045),中药组高于模型组(P<0.05)。中药组与正常对照组无明显差异(P>0.05)。结论黄芪可能是通过促进肺组织AQP-1、AQP-5的表达,从而起到对模型大鼠急性肺损伤的防治作用。

水通道蛋白1，5与肺部疾病关系的研究进展

水通道（Aquaporins，AQPs），是一组与水分子通过生物膜脂质双分子层转运有关的膜蛋白，其分布及病理生理意义日益受到各国学者的关注。目前已在哺乳动物中发现13种AQP售，其中AQP1、AQP5是分布于下呼吸道的主要水通道蛋白。研究表明，AQP1、AQP5可清除肺组织多余的水分，在肺泡和肺问质以及肺毛细血管间的水跨膜转运中发挥重要生理作用，在不同年龄阶段肺组织AQP5表达水平不同，产生一系列生理性动态变化，并且在许多肺脏疾病如哮喘、肺水肿、急性呼吸窘迫综合征、肺肿瘤等病理过程中扮演重要角色，是肺损伤的重要标记物。本文就近年来有关AQP1及AQP5的分布、功能及与肺疾病关系方面的研究进展作一综述，为临床肺脏疾病的诊治及预防提供新的思路与措施。

加味藿朴夏苓汤对温病湿热证大鼠舌组织AQP-5的影响

目的:观察加味藿朴夏苓汤干预对温病湿热证模型大鼠舌组织水通道蛋白-5(AQP-5)的影响。方法:24只SD大鼠,随机分为正常对照组、湿热模型组、药物干预组。参照多因素复合造模方法复制湿热证大鼠模型。光镜下观察舌组织病理改变,采用免疫组化方法检测AQP-5的表达情况。结果:湿热模型大鼠有腻苔形成,药物干预组腻苔出现率较湿热模型组明显减少(P<0.05);湿热模型组大鼠舌黏膜层的角质细胞层、棘细胞层增厚,不完全角化细胞增多;舌固有层组织充血水肿;药物干预组与正常对照组光镜下无明显差别。湿热模型组舌组织AQP-5表达较正常对照组明显增加(P<0.01);药物干预组AQP-5表达较湿热模型组显著减少(P<0.05,P<0.01)。结论:加味藿朴夏苓汤能显著改善温病湿热证模型大鼠腻苔和舌组织病理改变,其机制可能与减轻舌组织炎症,降低AQP-5表达有关。

雷公藤多苷联合甲氨蝶呤对干燥综合征NOD小鼠治疗作用及TNF-α、IL-1β、AQP-5的表达

目的:通过测定NOD小鼠外周血肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、颌下腺水通道蛋白5(AQP5)mRAN、蛋白表达和腺体病理分级来研究中西药联用与单用药的差别及可能机制。方法:小鼠随机分为模型组、甲氨蝶呤(MTX)组、雷公藤多苷(TG)组、MTX+TG组、ICR小鼠对照组,给药8周后检测上述指标。结果:①各治疗组病理组织形态学与模型组有显著差异(P<0.05),MTX+TG组分级最低。②各治疗组TNF-α、IL-1β表达少于模型组(P<0.05),MTX+TG组下降最多。③各治疗组间AQP5 mRAN表达差异有统计学意义(F=8.674,P=0.000)。④相关分析显示TNF-α、IL-1β、AQP5 mRAN与病理分级呈直线相关(P<0.05)。⑤交互作用分析显示两药联用,对TNF-α和AQP5 mRAN有协同作用(P<0.05)。结论:①NOD小鼠呈淋巴细胞灶性浸润;TNF-α、IL-1β,AQP5 mRAN表达异常。②MTX和TG可改善病理,改变TNF-α、IL-1β及AQP5 mRAN表达,治疗有效。③MTX+TG疗效优于单独用药。

AQP-5在结直肠癌中的表达及意义

目的探讨结直肠癌组织中AQP-5的表达情况及其与肿瘤分化程度的关系。方法收集48例结直肠癌病变的石蜡包埋标本(结肠癌17例,直肠癌31例),采用免疫组织化学S-P方法检测AQP-5在上述病变组织中的表达。结果结肠癌组织中癌细胞AQP-5(+)表达率为64.7%(11/17),其中高、中分化癌组织病例中,呈阳性者3例,阳性率为33.3%,而8例低分化病例中,阳性8例,阳性率为100.0%,二者表达差异显著(P<0.01)。直肠癌病变中癌细胞AQP-5(+)表达率为70.9%(22/31),13例高中分化病例中,阳性者6例,阳性率46.2%,18例低分化病例中16例呈阳性,阳性率为88.8%,二者具有差异(P<0.05);两种类型肠癌CD10表达无统计学差异(P>0.05)。结论 AQP-5有助于显示结直肠癌的分化程度,对选择治疗方案及判断预后有一定意义。

高原低氧环境气虚小鼠心、肺反应性变化的分子机制研究

目的探讨高原低氧环境气虚小鼠心、肺反应性变化的分子机制。方法 SPF级模型组小鼠置于低氧舱内进行减压低氧暴露,对照组在常氧环境中饲养,连续21 d。观察小鼠体征。末次低氧暴露后检测2组小鼠心乳酸脱氢酶(LDH)、Na+-K+-ATP酶活性,肺功能变化,心、肺组织缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及肺组织通道蛋白-5(AQP5)蛋白和基因表达。结果模型组小鼠出现气虚体征。与对照组比较,模型组小鼠心LDH活性增高、Na+-K+-ATP酶活性降低(P<0.05,P<0.01);肺功能指标检测结果显示,模型组小鼠吸气时间、呼气时间、持续时间、潮气量、呼气末端停顿均降低和频率升高(P<0.05,P<0.01);心、肺HIF-1α蛋白、基因表达均增高,肺AQP-5基因表达增高(P<0.05,P<0.01)。结论较长时间的高原低氧暴露,可导致小鼠表现气虚体征并出现肺通气效率降低。心肌受损可能与心Na+-K+-ATP酶活性变化有关,而心、肺HIF-1α表达及肺AQP-5基因表达升高,可能有利于提高心、肺的适应性代偿反应。

二陈汤对慢性支气管炎气道黏液高分泌的影响

目的观察二陈汤对慢性支气管炎大鼠气道黏液高分泌的影响及其机制。方法采用香烟烟熏加内毒素脂多糖制备慢性支气管炎大鼠模型,大鼠随机分为正常组,模型组,二陈汤低、中、高剂量组,急支糖浆组。正常组和模型组灌胃生理盐水6 ml/d,急支糖浆组灌胃给予太极急支糖浆12 g/kg,二陈汤低、中、高剂量组分别灌胃2.45、4.90、9.80 g/kg,连续14 d。免疫组化检测黏蛋白(MUC)5AC和水通道蛋白(AQP)5在支气管组织中的表达。结果与正常组相比,模型组MUC5AC蛋白表达显著增强,AQP5蛋白表达显著减弱(均P<0.01),MUC5AC与AQP5蛋白表达呈负相关(r=-0.55,P<0.01);与模型组相比,二陈汤中剂量组MUC5AC蛋白表达显著减弱,AQP5蛋白表达增强(均P<0.01),MUC5AC与AQP5蛋白表达呈负相关(r=-0.75,P<0.01)。结论二陈汤对慢性支气管炎气道黏液高分泌有调节作用,其机制可能与抑制MUC5AC、上调AQP5蛋白表达有关。

甘草酸二胺通过上调水通道蛋白5减轻小鼠急性肺损伤肺水肿的实验研究

目的探讨甘草酸二胺对于急性肺损伤状态下水通道蛋白5(AQP-5)的调节作用及相关机制。方法30只SPF级雄性BALB/c小鼠被随机分为3组,即Control组(对照组)、LPS组(模型组)和LPS+DG组(治疗组),每组10只。通过HE染色观察肺组织病理学改变,并进行肺损伤评分;使用湿/干比(W/D)分析肺水肿程度;RT-PCR和Western blot对AQP-5的表达进行测量;Western blot测定总核因子-κB p65(total NF-κB p65)和磷酸化-NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白表达。结果小鼠气道内注射LPS 72h后,肺损伤评分和肺组织W/D比值增加,AQP-5表达水平下降,p-NF-κB p65水平增加,差异有统计学意义(P均<0.05)。同时发现,LPS+DG组小鼠肺损伤评分、W/D比值和p-NF-κB p65水平较LPS组降低,LPS+DG组AQP-5表达量较LPS组升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论甘草酸二胺可以有效的减轻LPS诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)导致的肺水肿,其机制可能与甘草酸二胺抑制NF-κB p65的活化,上调AQP-5的表达有关。