鼻敏康合剂对变应性鼻炎大鼠IgE、AQP5表达的影响

目的探究鼻敏康合剂对变应性鼻炎大鼠血清IgE、OVA-sIgE、AQP5表达的影响。方法60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、氯雷他定组(0.9 mg/kg)以及鼻敏康合剂低、中、高剂量组(2.53、5.06、10.12 g/kg),每组10只。除对照组外,其余各组大鼠均采用卵清蛋白(OVA)致敏法建立变应性鼻炎大鼠模型。造模结束后,各组大鼠灌胃给予相应药物,连续2周。采用叠加量化法记录各组大鼠症状积分,ELISA法检测血清IgE、OVA-sIgE、AQP5水平,免疫组化及RT-qPCR法检测鼻黏膜AQP5蛋白及mRNA表达。结果与对照组比较,模型组大鼠症状积分,血清IgE、OVA-sIgE、AQP5水平,鼻黏膜AQP5蛋白及mRNA表达升高(P<0.05);与模型组比较,氯雷他定组与鼻敏康合剂各剂量组症状积分,血清IgE、OVA-sIgE、AQP5水平,鼻黏膜AQP5蛋白及mRNA表达降低(P<0.05),且鼻敏康合剂各剂量组与氯雷他定组比较,各指标无显著差异(P>0.05)。结论鼻敏康合剂可通过抑制IgE、OVA-sIgE、AQP5表达,改善鼻腔局部水液代谢,减轻鼻腔黏膜炎症,对变应性鼻炎起到治疗作用。

基于NFKB/STAT3信号通路探究防风多糖对过敏性鼻炎大鼠行为学、AQP5及鼻粘膜组织的影响

目的基于NF-κB/STAT3信号通路探究防风多糖对过敏性鼻炎大鼠行为学、AQP5及鼻粘膜组织的影响。方法选取40只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(N)组,模型(M)组,糠酸莫米松(F)组,防风多糖(W)组,每组10只,采用卵清蛋白致敏法建立过敏性鼻炎模型,N组不建立该模型,建模成功后,对F组给予1喷/侧的糠酸莫米松喷鼻治疗,对W组灌胃600㎎/㎏的防风多糖,N组、M组同期给与灌胃同体积生理盐水,观察大鼠一般情况并对其行为学进行评分,HE染色法检测鼻黏膜组织病理形态,免疫组化法检测鼻黏膜组织中AQP5表达,免疫印迹法检测鼻黏膜组织中NF-κB/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果实验开始前各组大鼠均活动饮食正常且精神状态良好,未见流涕、喷嚏、挠鼻等症状,造模完成后,可见大鼠精神状态明显变差,进食及活动明显减少,且可见被毛凌乱无光泽,出现常见抓鼻动作,喷嚏频发,大量鼻分泌物流出鼻前孔,给药后,大鼠纳食摄水都逐渐恢复正常,精神状态良好,喷嚏、流涕、挠鼻等症状都较治疗前有明显缓解,均无脏器损伤,但各组大鼠体重无明显变化(P>0.05);与N组相比,M组行为学评分显著升高(P<0.05),与M组比较,F、W两组行为学评分显著降低(P<0.05),且W组比F组降低显著(P<0.05);N组大鼠鼻黏膜组织结构完整、平滑且排列整齐,腺体大小正常,未见明显上皮坏死脱落、炎性细胞浸润及明显血管扩张或充血现象,M组鼻黏膜上皮结构紊乱且不完整,可见鼻粘膜上皮细胞破坏变性,出现纤毛坏死甚至脱落现象,可见明显腺体增生、肿胀、出血及炎性细胞浸润,与M组相比,F组、W组病理状态明显改善,炎性细胞明显减少;与N组比较,M组鼻黏膜组织中AQP5蛋白表达显著降低(P<0.05),与M组比较,F组、W组鼻黏膜组织中AQP5蛋白表达显著升高(P<0.05),且W组比F组升高显著(P<0.05);与N组比较,M组鼻黏膜组织中NF-κB、P-NF-κB、STAT3、P-STAT3蛋白表达显著升高(P<0.05),与M组比较,F组、W组鼻黏膜组织中NF-κB、P-NF-κB、STAT3、P-STAT3蛋白表达显著降低(P<0.05),且W组比F组变化显著(P<0.05),而B组与W组相比无明显差异(P>0.05),O组比B组降低明显(P<0.05)。结论防风多糖可有效改善过敏性鼻炎大鼠行为学及鼻黏膜病理形态,并可显著促进AQP5表达,其机制可能与抑制NF-κB/STAT3信号通路有关。

AQP5对胃癌干细胞增殖、迁移、侵袭和干性的影响

目的探讨水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)对胃癌干细胞(gastric cancer stem cell,GCSC)生物学行为的影响及机制。方法将胃癌细胞AGS通过无血清悬浮成球培养技术富集胃癌干细胞(AGS-GCSC)。通过流式细胞术检测AGS和无血清培养富集的AGS-GCSC中胃癌干性标志物CD133的阳性率来鉴定所富集的AGS-GCSC是否符合后续实验要求。Western blot和qRT-PCR检测AGS和富集的AGS-GCSC中AQP5及胃癌干性标志物八聚体结合转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)和CD133的表达。运用慢病毒技术将富集的AGS-GCSC分为两组:sh-NC组(阴性对照组)和sh-AQP5组(AQP5低表达组)。通过CCK-8、平板克隆、Transwell、干细胞成球实验检测sh-NC组和sh-AQP5组增殖、迁移、侵袭和成球能力。通过Western blot技术检测sh-NC组和sh-AQP5组中胃癌干性标志物OCT4、CD133的表达。Western blot检测sh-NC组和sh-AQP5组CAMKK2/AMPK通路相关蛋白(磷酸化CAMKK2、磷酸化AMPK)以及自噬相关蛋白(ATG7、P62、LC3Ⅱ)的表达情况。结果流式细胞术结果显示,与胃癌细胞AGS相比,AGS-GCSC中CD133的阳性率明显增加(P<0.05),符合后续实验需求。Western blot和qRT-PCR结果显示,与胃癌细胞AGS相比,无血清培养富集的AGS-GCSC中高表达AQP5和胃癌干性标志物OCT4、CD133(P<0.05)。CCK-8、平板克隆、Transwell及成球实验表明,与sh-NC组相比,sh-AQP5组AGS-GCSC增殖、迁移、侵袭和成球能力下降(P<0.05)。另外,Western blot实验结果显示,与sh-NC组相比,sh-AQP5组AGS-GCSC中干性标志物OCT4、CD133表达下调(P<0.05)。Western blot结果显示,与sh-NC组相比,sh-AQP5组磷酸化CAMKK2、磷酸化AMPK的蛋白水平下调,自噬相关蛋白ATG7、LC3Ⅱ表达降低,P62表达增加(P<0.05)。结论AQP5可能通过调控CAMKK2/AMPK通路抑制自噬影响GCSC的生物学功能。

宣肺止咳合剂对脂多糖致急性肺损伤大鼠肺组织病理变化、AQP5蛋白表达及血清细胞因子的影响

目的:探讨宣肺止咳合剂对脂多糖(LPS)致急性肺损伤大鼠肺组织病理变化及水通道蛋白5(AQP5)表达和血清细胞因子的影响。方法:60只Wistar大鼠,随机分为正常对照组、LPS模型组、宣肺止咳合剂(7.5、15、30 mg/kg)组、阳性对照(地塞米松0.135 mg/kg)组,每组10只,连续灌胃给药14 d,测定肺组织湿干重(W/D)比值;HE染色观察肺组织病理改变;Western blot检测肺组织AQP5蛋白表达;ELISA检测血清IL-1β、IL-8、INF-γ、TGF-β水平。结果:宣肺止咳合剂组大鼠肺水肿程度减轻;宣肺止咳合剂、阳性组组大鼠肺组织炎性细胞减少、纤维化减少、空泡样管腔明显、肺泡壁结构较模型组完整,损伤较模型组明显减轻;模型组肺组织AQP5表达较正常组显著降低(P<0.01),宣肺止咳合剂中、高剂量组和阳性对照组较模型组肺组织AQP5表达显著上调(P<0.05或P<0.01);与正常组比较,模型组大鼠血清IL-1β、IL-8、TGF-β水平显著升高(P<0.01);宣肺止咳合剂中、高剂量组和阳性对照组血清IL-1β、TGF-β水平降低,且呈现浓度依赖性(P<0.05或P<0.01);与正常组比较,模型组INF-γ水平降低,宣肺止咳合剂低、中、高剂量组和阳性对照组较模型组均升高(P<0.05)。结论:宣肺止咳合剂对脂多糖所致大鼠急性肺损伤有一定的保护作用,其机制可能与上调AQP5蛋白表达,抑制IL-1β、IL-8炎症因子和纤维化因子TGF-β的释放,上调INF-γ水平有关。

阳和平喘颗粒对哮喘大鼠肺组织AQP1和AQP5表达的影响

目的通过研究阳和平喘颗粒对哮喘大鼠肺组织水通道蛋白1（AQP1）和水通道蛋白5（AQP5）表达的影响,旨在从水液代谢及气道黏液分泌的角度探讨阳和平喘颗粒治疗支气管哮喘的作用机制。方法 SD大鼠90只随机分为正常组（N）、模型组（M）、阳和平喘颗粒低、中、高剂量治疗组（YHPC-L、YHPC-M和YHPC-H）和地塞米松治疗组（DXM）,每组15只。其中,M、YHPC-L、YHPC-M、YHPC-H和DXM组采用卵蛋白（OVA）腹腔注射致敏及雾化吸入的方法建立哮喘大鼠模型,同时应用氢化可的松腹腔注射复制肾阳虚模型,N组则均使用生理盐水作为对照。采取HE染色检测各组大鼠肺组织形态学改变,应用Real-time PCR和Western blot检测各组大鼠肺组织AQP1和AQP5mRNA及蛋白表达水平的变化,采用免疫组化法检测AQP1和AQP5在肺组织的分布及表达水平变化。结果与N组相比,M组AQP1和AQP5在mRNA及蛋白表达水平均发生显著下降（P〈0.01）;与M组相比,YHPC-L、YHPC-M和YHPC-H组AQP1和AQP5的表达水平均显著上升（P〈0.05～0.01）,且具有一定的剂量依赖效应;与DXM相比,YHPC-L对AQP1和AQP5的作用效果低于DXM（P〈0.05）,而YHPC-M和YHPC-H则与之具有相当的作用效果（P〉0.05）。结论阳和平喘颗粒可通过上调AQP1和AQP5的表达而调控水液代谢平衡及气道黏液分泌,进而发挥其治疗支气管哮喘的作用。

不同强度跑台训练对BALB/c小鼠气道muc5ac和aqp5表达的影响

目的:研究不同强度跑台训练对BALB/c小鼠气道muc5ac和aqp5表达的影响,探讨运动性支气管痉挛(EIB)发生的潜在机理。方法:清洁级雌性BALB/c小鼠48只,随机分为4组:对照组(C组)、小强度运动组(L组)、中等强度运动组(M组)和大强度运动组(H组)。L组、M组和H组小鼠分别给予不同强度的跑台训练:速度分别为4 m/min(58%VO2 max)、12 m/min(76%VO2 max)、17 m/min(84%VO2 max),坡度均为0°,每周运动6天,持续2周,每次训练前均做10min热身运动(速度1m/min,跑台坡度0°)。用实时定量荧光PCR法检测气道内muc5ac mRNA和aqp5 mRNA的表达,分别用免疫组化法和免疫印迹法检测muc5ac蛋白和aqp5蛋白在小鼠气道的表达,对气道muc5ac蛋白含量与aqp5蛋白含量进行Spearman等级相关分析。结果:运动各组小鼠气道内muc5ac mRNA及其蛋白表达均明显高于C组(P﹤0.05),而aqp5 mRNA及其蛋白表达均显著低于C组(P﹤0.05);并且气道muc5ac蛋白含量与aqp5蛋白含量呈负相关(r=-0.826,P﹤0.001)。结论:运动可能通过改变气道内muc5ac和aqp5的表达而使气道反应性升高,从而潜在地增加了EIB的发病风险。

基于NF-κB信号通路探讨小青龙汤合玉屏风散对变应性鼻炎大鼠AQP5和AQP5mRNA表达影响

目的:基于NF-κB信号通路观察小青龙汤合玉屏风散对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜AQP5含量和AQP5 m RNA表达的影响,揭示小青龙汤合玉屏风散治疗AR的作用机制。方法:将清洁级健康雄性Wistar大鼠48只按体重采用随机区组法分为6组,即分成正常组、AR模型组、Forskolin(c AMP激活剂)干预组、H89(PKA抑制剂)干预组、PDTC(NF-κB抑制剂)干预组、小青龙汤合玉屏风散组,每组8只。采用卵蛋白全身致敏与局部攻击方法制作AR大鼠模型,观察小青龙汤合玉屏风散组治疗后鼻黏膜AQP5含量和AQP5 m RNA表达,结果进行统计学分析。结果:模型组AQP5含量和AQP5 m RNA表达下调,c AMP激活剂Forskolin干预组、NF-κB抑制剂PDTC干预组、小青龙汤合玉屏风散治疗组均能使AQP5含量和AQP5 m RNA表达上调,而PKA抑制剂H89能下调AQP5含量和AQP5 m RNA表达。结论:小青龙汤合玉屏风散治疗变应性鼻炎作用机制可能与抑制NF-κB信号通路和兴奋c AMP-PKA信号通路使AQP5含量和AQP5 m RNA表达上调有关。

AQP5在结直肠癌中的表达及其与临床预后的关系

目的探讨水通道蛋白5(AQP5)的表达与结直肠癌临床病理及预后关系。方法收集术前未予任何治疗的临床病例资料齐全的原发性结直肠癌病例45例,采用免疫组化法检测AQP5的表达。比较AQP5表达与年龄、肿瘤大小、临床分期、肿瘤部位、淋巴结、病理类型之间的关系,并结合随访资料分析AQP5表达与否和预后的关系。结果45个肿瘤标本中,14例(31.1%)高表达AQP5,29例(64.4%)中度表达,2例(4.4%)无AQP5染色。癌旁和正常组织中AQP5表达率分别为3例(6.67%)和3例(6.67%)。AQP5的表达还与TNM分期(P=0.002)、淋巴结转移(P=0.016)、远处转移(P=0.000)呈正相关。在年龄、性别、组织学分级和肿瘤大小中其表达没有统计学差异(P>0.05)。结论 AQP5可能被用作预测结直肠癌预后的良好指标。

益气养阴祛瘀方对干燥综合征颌下腺细胞AQP5及M3R表达的影响

目的观察益气养阴祛瘀方含药血清对干燥综合征(SS)患者颌下腺细胞AQP5及M3R表达的影响。方法制备不同剂量SD大鼠益气养阴祛瘀方含药血清,再分别给予以下处理:空白组(仅含RPMI1640培养液),空白血清组(10%空白血清+RPMI1640培养液),分别予含5%、10%、15%、20%不同浓度的含药血清+RPMI1640培养液组,共6组。培养细胞24 h后,分别以倒置相差显微镜、激光共聚焦显微镜观察细胞,Western blot检测细胞中AQP5及M3R蛋白表达水平。结果益气养阴祛瘀方含药血清作用后,激光共聚焦显微镜观察抗体标记细胞的荧光强度明显增强。Western blot检测AQP5与M3R的蛋白表达均有上调。含药血清组中的AQP5及M3R蛋白的表达明显高于空白血清组,且10%、15%含药血清组高于5%含药血清组(P<0.05),但与20%相差不大(P>0.05)。结论益气养阴祛瘀方可以上调颌下腺细胞中AQP5及M3R蛋白的表达,而且与之成一定的剂量依赖关系。

解毒药、通络药及生津药配伍对干燥综合征大鼠AQP5表达的对比分析

目的探讨解毒药、通络药及生津药配伍对干燥综合征大鼠AQP5的影响。方法将70只雌性SD大鼠随机分为7组,即解毒通络生津组(A)、解毒组(B)、通络组(C)、生津组(D)、强的松组(E)、生理盐水组(F)及正常对照组(G)。除正常对照组外,每只大鼠均经过造模,建立SS模型,正常对照组注射相同剂量生理盐水。各组分别给予解毒通络生津中药、清热解毒中药、活血通络中药、养阴生津中药、强的松、生理盐水治疗28 d,正常对照组不做处理。观察大鼠饮水量的变化,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)对颌下腺的AQP5进行半定量分析。结果解毒通络生津组大鼠饮水量明显减少,与其他各中药组及强的松组比较差异有统计学意义(P<0.05),通过RT-PCR半定量分析显示,解毒通络生津组AQP5的表达优于其他各组(P<0.05);生津组及强的松组AQP5的表达优于解毒组和通络组(P<0.05)。结论生津药、解毒药及通络药配伍可改善大鼠口干症状,其机制可能与上调大鼠颌下腺AQP5的表达有关。

乌梅含漱液对尿毒症口干症模型大鼠颌下腺AQP5分布表达变化的研究

目的通过研究"酸甘化阴"治法载体的乌梅含漱液对尿毒症口干模型大鼠颌下腺AQP5分布表达的作用,探究酸甘化阴法治疗尿毒症大鼠口干症的机制。方法研究通过使用5/6肾切除大鼠模型给予M受体阻滞剂4-二苯乙酰氧基-N-甲基-哌啶(4-diphenylacetoxy-N-methylpiperidine,4-DAMP),制作尿毒症口干症模型大鼠。造模成功后,予酸甘化阴的乌梅含漱液灌胃,根据临床常用剂量及SD大鼠体表面积换算,将造模后的实验动物随机分为乌梅含漱液低剂量组、乌梅含漱液高剂量组及模型对照组,并另外设立正常组。给药后干预4周,期间每3天动态测定各组大鼠的5 min唾液分泌量及干预前后的体重,观察乌梅含漱液干预对唾液分泌的作用及对大鼠体重的影响作用;并分离大鼠的颌下腺组织,检测颌下腺组织形态及AQP5分布表达,并通过Western blot分析乌梅含漱液对颌下腺细胞水分子通道蛋白5(AQP5)表达的影响。结果与正常组相比,模型对照组颌下腺组织的纹状体结构紊乱,导管炎症及水肿,实验前后平均唾液分泌量明显减少(P<0.05),AQP5主要表达在基底膜和顶膜中,较正常组染色较弱,体重增加;相比于模型对照组,乌梅含漱液组纹状体结构紊乱及导管炎症减轻,干预前后的平均唾液分泌量增多(P<0.05),并且一定程度上AQP5表达分布染色较模型组增强,体重增加较模型组少。结论乌梅含漱液能增加唾液流量,减少大鼠体重增加,减轻唾液腺的病理损害,增加唾液腺细胞膜AQP5的表达,促进唾液分泌,改善尿毒症大鼠引起的口干症状。

活血解毒方对干燥综合征小鼠颌下腺AQP5表达的影响

目的:探讨活血解毒方对干燥综合征(SS)模型小鼠颌下腺AQP5表达的影响。方法:以BABL/C小鼠为正常组,选取NOD小鼠为SS模型并随机分为模型组、活血解毒方组(HXJD)和白芍总苷胶囊组(TGPC),给药后观察各组小鼠颌下腺形态学和分泌功能的改变,并采用SABC法检测各组小鼠颌下腺AQP5表达水平的变化。结果:药物干预8周后,模型组较正常组表达AQP5明显降低;与模型组比较,TGPC组和HXJD组AQP5表达均显著升高;TGPC组和HXJD组之间AQP5表达无明显差异。结论:活血解毒方可改善SS模型鼠颌下腺腺泡的分泌功能,提高其颌下腺指数,增加SS模型鼠的唾液分泌量;其作用机理与上调AQP5的表达水平有关。

地塞米松对^(125)I内照射裸鼠A549肺癌细胞存AQP5及活素survivin表达的影响

目的:探讨地塞米松对^(125)I放射性粒子内照射A549肺癌细胞AQP5及存活素(survivin)表达的影响。方法:共25只A549肺腺癌皮下种植BALB/c-nu裸鼠模型随机分为实验组(n=12)和对照组(n=13),实验组进行^(125)I放射性粒子植入+地塞米松(鼠尾静脉注射),对照组进行^(125)I放射性粒子植入,7 d后处死裸鼠行AQP5及survivin免疫组化检测。结果:实验组的AQP5阳性表达率高于对照组(分别为91.6%和53.8%,P=0.046),survivin的阳性表达率低于对照组(分别为33.3%和76.9%,P=0.036)。结论:地塞米松可能通过上调AQP5的表达进而增加A549肺癌细胞对^(125)I的辐射敏感性,其机制与survivin表达抑制相关。

增液汤对干燥综合征模型鼠颌下腺AQP5的影响

目的:探讨增液汤对干燥综合征(SS)模型小鼠颌下腺中水通道蛋白5(AQP5)表达的影响。方法:用免疫组化法分析SS小鼠颌下腺AQP5表达特点。结果:空白组AQP5在腺泡的顶膜、侧膜等处均有较强表达;模型组AQP5表达减少或消失。增液汤组大部分细胞膜有AQP5蛋白散在表达,较模型组表达明显增多(P<0.01),且分布均匀。结论:增液汤可明显增强SS模型鼠颌下腺中水通道蛋白AQP5表达。

AQP5在干燥综合征发病机制中作用研究进展

水分子通道蛋白-5(AQP5)是细胞跨膜转运蛋白之一,具有高通透性,通过此通道水可以经过质膜向高渗方向快速移动。干燥综合征(SS)是一种侵犯涎腺、泪腺等外分泌腺为主的自身免疫性疾病。在SS的发病机制中,目前只有AQP5证实与唾液分泌功能密切相关。AQP5在SS涎腺及泪腺组织定位明确,其转运分布的异常,均能导致腺体破坏及M3R的异常,引起口眼干等症状。而中医治疗SS可通过AQP5途径刺激增加腺体分泌,为SS的治疗提供新思路。

基于JNK1/AQP5通路研究杞参方颗粒对高渗诱导的角膜上皮细胞的效应机制

目的:基于JNK1/AQP5通路观察杞参方颗粒对高渗诱导的角膜上皮细胞(HCECs)保护作用,阐明其治疗干眼的作用机制。方法:通过500mOsm/L浓度渗透压作用于HCECs制造干眼细胞模型。空白组:正常条件培养的角膜上皮细胞;模型组:模型细胞加入10%空白血清;西药组:模型细胞加入0.3%玻璃酸钠滴眼液;杞参方高剂量组:模型细胞加入15%杞参方高剂量含药血清;杞参方中剂量组:模型细胞加入15%杞参方中剂量含药血清:杞参方低剂量组:模型细胞加入15%杞参方低剂量含药血清。CCK-8法检测不同药物干预对HCECs存活率的影响;ELISA法检测各组细胞外液炎性因子TNF-α、IL-6的表达;免疫细胞化学法检测各组HCECs凋亡因子caspase-1与AQP5的蛋白表达变化;Western blotting法检测各组HCECs的JNK1、p-JNK1、AQP5表达情况。结果:与空白组相比,各组HCECs存活率均显著减少(均P<0.01),各组细胞外液炎症因子TNF-α、IL-6及HCECs中caspase-1、p-JNK1、AQP5蛋白表达水平均显著增高(均P<0.01);与模型组相比,各用药组HCECs存活率均显著增加(均P<0.01),各用药组的细胞外液中TNF-α、IL-6及HCECs中AQP5、p-JNK1蛋白表达水平及西药组及杞参方高中剂量组caspase-1、AQP5蛋白表达均减少(均P<0.05);与西药组相比,杞参方高剂量组HCECs存活率显著增加(P<0.01),杞参方各剂量组的TNF-α、IL-6表达水平均减少(均P<0.05),杞参方高剂量组caspase-1及杞参方高、中剂量组的AQP5蛋白表达水平减少(均P<0.05)。Western blotting法检测HCECs的JNK1蛋白表达各组比较无差异(P>0.05)。结论:杞参方颗粒可降低高渗诱导HCECs的JNK1的磷酸化和AQP5的蛋白表达,降低细胞外液炎症因子TNF-α、IL-6和HCECs凋亡因子caspase-1的表达,最终有效抑制炎症反应和细胞凋亡。

基于NF-κB信号通路探讨麻黄细辛附子汤对变应性鼻炎大鼠NF-κBp65、p-CREB和AQP5表达的影响

目的:基于NF-κB信号通路观察麻黄细辛附子汤对变应性鼻炎(AR)大鼠鼻黏膜NF-κBp65、p-CREB和AQP5表达的影响,探讨麻黄细辛附子汤对AR的作用机理。方法:按体质量采用随机区组法将清洁级健康雄性Wistar大鼠48只分成6组,每组8只大鼠,即分成空白对照组、模型对照组、Forskolin干预组、H89干预组、PDTC干预组、麻黄细辛附子汤组。AR大鼠模型的制作采用卵蛋白全身致敏和局部攻击方法,观察麻黄细辛附子汤组治疗后鼻黏膜AQP5、NF-κBp65和p-CREB表达,用统计学对实验结果进行分析。结果:模型组p-CREB、AQP5表达下调,Forskolin干预组、PDTC干预组、麻黄细辛附子汤组均能使p-CREB、AQP5表达上调,而H89能下调p-CREB、AQP5表达。模型组NF-κBp65表达上调,Forskolin干预组、PDTC干预组、麻黄细辛附子汤治疗组均能使NF-κBp65表达下调,而H89能上调NF-κBp65表达。结论:麻黄细辛附子汤治疗AR的作用机制可能通过调控NF-κB信号通路和cA MP-PKA信号通路使AQP5表达增加有关。

AQP5和AQP8在人结肠癌中的表达及意义

目的研究水通道蛋白5和水通道蛋白8在人结肠癌组织中的表达,初步探讨其在人结肠癌发生发展中的意义。方法采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,检测人结肠癌组织和癌旁组织中AQP5和AQP8的表达。结果 AQP5主要表达于人结肠癌组织中肿瘤细胞,癌旁正常组织基本没有表达;AQP8主要表达于癌旁正常组织,而在人结肠癌组织肿瘤细胞则基本没有表达。结论 AQP5在人结肠癌组织肿瘤细胞中高表达,AQP8在人结肠癌癌旁正常组织中高表达,二者在结肠癌组织和癌旁组织中的表达与肿瘤的TNM分期和淋巴转移相关,在人结肠癌的发生发展及转移过程中起重要作用。

结直肠癌中AQP5、ERK蛋白表达及其相关性研究

目的研究结直肠癌中AQP5、ERK蛋白的表达及其相互关系,初步探讨它们在结直肠癌发生发展中的生物意义。方法采用组织芯片及免疫组化SP法,检测60例结直肠癌、20例癌旁粘膜中AQP5、ERK蛋白的表达,比较AQP5及ERK蛋白表达与临床病理参数间的关系及二者相关性研究。结果结直肠癌组织中AQP5、ERK蛋白表达的阳性率与癌旁组织比较有显著性差异(53.3%vs0%;55.0%vs20%;P<0.05);AQP5与ERK蛋白表达强度之间呈正相关(C=0.745,P<0.05);AQP5蛋白与结直肠癌的分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期相关;ERK蛋白随肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期的进展而增高。结论AQP5蛋白高表达可能与结直肠癌生物学行为密切相关;在结直肠癌发生、发展过程中,可能与AQP5→Ras→ERK→Rb信号通路的异常激活,使细胞发生恶性转化,并促进恶性转化细胞的浸润、转移。

微波辐射后大鼠肺组织中VEGF和AQP5的表达变化

目的探讨微波辐射后大鼠肺组织中VEGF和AQP5的表达及其意义。方法采用10、30和100 mW/cm2的微波辐射96只二级Wistar雄性大鼠,于辐射后6 h、1 d、3 d、7 d和14 d取肺组织,采用免疫组织化学和图象分析技术探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和水通道蛋白5(aquaporin5,AQP5)在辐射后大鼠血-气屏障(blood-air barrier)改变中的作用。结果(1)大鼠肺组织中VEGF表达变化:假辐射组VEGF见于血管内皮细胞浆,呈弱阳性表达。30、100 mW/cm2组微波辐射后6 h^7 d,VEGF于血管内皮细胞浆呈阳性表达,6 h即见增加,1 d达高峰,3、7 d也呈阳性表达,14 d恢复至正常。图象分析结果显示,6 h^7 d与假辐射组相比有显著性差异(p<0.05或p<0.01),且上述改变与辐射剂量呈正相关;(2)大鼠肺组织中AQP5表达改变:AQP5在假辐射组Ⅰ型肺泡上皮细胞膜呈阳性分布,上述三组在辐射后Ⅰ型肺泡上皮细胞膜AQP5的表达均减弱,其中100 mW/cm2组减弱最明显,1 d呈弱阳性,3 d见恢复,7 d基本恢复至正常。结论10~100 mW/cm2的微波辐射可使VEGF表达增加,AQP5表达减少,并且有时效性和量效性关系,二者可能参与了微波辐射致血-气屏障损伤的病理生理过程。