AS203滚刀刃磨床分度原理及维修

滚刀刃磨床用于磨削滚刀前刃面,国内外的型式虽多,但此类机床的运动关系并不很复杂,最关键是分度机构的分度精度。不少滚刀刃磨床,由于机床本身达不到分度精度的要求,使用者不得不在机床旁边挂一小黑板,在加工过程中逐齿测量其分度误差,逐齿描点,然后对超差的齿进行修磨,工效较低。我厂使用的德国 KAAP 公司生产的 AS203和 AS305型滚刀刃磨床,分度精度较高,没有发生过类似现象。现将其分度原理及特点简单分析于下。一。

三氧化二砷对大鼠生精细胞端粒酶逆转录酶活性的影响

目的观察不同剂量三氧化二砷(As2O3)对成年大鼠生精细胞端粒酶活性的影响。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分成4组,分别为0.375、0.75、1.5mg/kg3个染毒组和对照组,采取灌胃法连续给药16周后对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数,并计算每日精子生成量(DSP)。采用免疫组化法检测大鼠生精细胞端粒酶逆转录酶(TERT)活性的表达。结果(1)中剂量组(0.75mg/kg)和高剂量组(1.5mg/kg)睾丸精子头计数和DSP均明显低于对照组(P<0.05或<0.01);(2)与对照组相比,中、高剂量组大鼠生精细胞TERT阳性表达率显著降低(P<0.01);(3)生精细胞TERT活性与每日精子生成量成正相关(r=0.521,P<0.01)。结论一定剂量的As2O3可通过抑制生精细胞TERT的活性而导致精子生成量减少,产生生殖毒性。

全反式维甲酸联合AS2O3治疗复发急性早幼粒细胞白血病临床观察

目的:观察AS2O3与ATRA联合治疗复发早幼粒细胞白血病(APL)的临床疗效。方法:依据外周血白细胞数,每天予静滴AS2O310mg及ATRA口服的联合治疗方案。结果:通过平均33d治疗,18例患者中14例CR,2例PR,1例NR,1例早期死亡。结论:AS2O3和ATRA的协同作用提高了复发APL的缓解率,降低并发症和死亡率,患者的耐受性好。

三氧化二砷对CO_2气腹下小鼠肿瘤细胞CD44、VEGF表达影响的实验研究

目的:研究腹腔内注射三氧化二砷(As2O3)对小鼠CO2气腹下肝癌H22转移的影响。方法:昆明鼠40只(清洁级),中腹部穿刺置入1mm套管针,自套管针注入1×106肿瘤细胞后,建立CO2气腹,压力8mmHg,时间30min。术后随机分4组,每组10只,分别腹腔内注入:生理盐水,1ml;As2O3(2mg/kg),1ml;As2O3(4mg/kg),1ml;As2O3(4mg/kg)+肝素(10U/ml),共1ml。气腹后第3、7天测量CD44、VEGF的变化;比较各组生存状态、腹围、体重变化及转移瘤直径。结果:与对照组相比,As2O3组CD44、VEGF表达,转移瘤直径均明显降低。高剂量组比低剂量组效果稍好。As2O3肝素组戳口种植率最低。结论:As2O3对CO2气腹腹腔镜肿瘤生长转移有抑制作用。

台盼蓝拒染法、MTT法、CCK-8法在研究As_2O_3细胞毒性作用中的意义

目的筛选三氧化二砷（As203）对HL一60细胞毒性的有效剂量及作用时间的检测方法，并对其结果进行分析。方法采用台盼蓝拒染法、M1Tr法、CCK～8法测定不同浓度的As203，体外作用HL一60细胞株的细胞存活率．采用单因素方差分析其与剂量一时间依赖反应的关系。结果4．0、8．0μmol／L作用48、72h及8．0μmol／L作用24h被染细胞小于5％，其余均未观察到蓝染细胞。MTY法检测在1．0～8．0μmol／LAs20，剂量范围内培养24、48、72h（P〈0．05），各组均能够抑制HL-60细胞活性。CCK-8法检测在0．5～8．0μmol／LAs203剂量范嗣内培养24、48、72h（P〈0．05），各组均能够抑制HL-60细胞活性。HL-60细胞在不同时间、不同浓度均能出现细胞存活率明显降低，As20，的毒副作用呈现明显的剂量-时间依赖反应。结论在研究As203的细胞毒性时，用CCK-8法优于M11’法，均比台盼蓝法更为灵敏。

Bortezomib增强三氧化二砷抑制KM3细胞生长和促凋亡机制的研究

目的:新的治疗药物及方法的出现大大提高了多发性骨髓瘤(MM)的疗效,但仍然无法使其治愈。为了寻求治疗药物及方法,提高单药或联合用药对MM的治疗效果。我们观察了三氧化二砷(ATO,As2O3)单药及联合硼替佐米(Velcade,PS-341)有无增强诱导MM细胞凋亡的作用,并初步探讨其机制。方法:检测ATO单药及联合硼替佐米对KM3细胞的影响。应用台盼蓝拒染法检测细胞活力,MTT(四甲基偶氮唑盐比色法)检测细胞生长抑制率。流式细胞术检测细胞的凋亡比例。应用RT-PCR方法检测p65mRNA的表达变化。应用Western blotting检测p65、p-p65、PARP、caspase-3、-8、-9蛋白表达的变化。结果:ATO抑制细胞生长,对KM3细胞p65mRNA及其蛋白没有显著影响,主要是通过激活caspase-3,-8,-9,诱导细胞凋亡。当与bortezomib联合用药时有协同促凋亡作用。结论:ATO单独作用于KM3细胞可以抑制其生长并诱导细胞凋亡,与bortezomib联用时有协同效应。

全反式维甲酸和三氧化二砷联合诱导分化治疗急性早幼粒细胞白血病

目的对比研究急性早幼粒细胞白血病(APL)首次诱导治疗使用全反式维甲酸(ATRA)和三氧化二砷(AS2O3)联合方案与单用ATRA诱导方案的缓解率、缓解时间及生存率(OS),探讨两种方案的安全性和有效性。方法初治APL患者53例,按照不同的诱导缓解治疗方案随机分为双诱导组(研究组)、单诱导组(对照组),比较两组的完全缓解(CR)率和达到CR的时间。双诱导组26例,给予ATRA 25 mg.m-2.d-1口服和AS2O3 0.16 mg.kg-1.d-1治疗直至完全缓解(CR);单诱导组27例,给予ATRA 25 mg.m-2.d-1口服诱导治疗直至CR。达到CR的病例继续应用化疗→ATRA→AS2O3序贯维持治疗。结果①在诱导治疗阶段:双诱导组23/26获完全缓解(CR),CR率88.46%,获得CR的平均时间(24.35±3.97)d;单诱导21/27例获得CR,CR率77.7%,CR的平均时间为(38.05±4.67)d,两组之间相比差异有统计学意义(P<0.05)。②两组CR患者继续序贯治疗3年总生存率(OS):双诱导组和单诱导组分别为(95.65±4.35)%和(71.45±3.55)%,差异有统计学意义(P<0.05)。③分析初诊时WBC≥10×109L-1和WBC<10×109L-1的患者的CR率,两组分别为4/9(44%)和40/44(90.9%),差异有统计学意义(P<0.05);复发率,两组分别为1/9(11.11%)和6/44(13.63%),差异有统计学意义(P<0.05);3年总生存率(OS)分别为(33.35±2.55)%和(77.25±3.55)%,差异有统计学意义(P=0.016)。结论 ATRA联合AS2O3诱导治疗初治APL,较单用ATRA诱导治疗的缓解率高,CR的时间明显缩短,毒副作用无明显增加,复发率低,生存率提高,将两者结合进行规范化治疗有助于进一步提高疗效、减少复发。

三氧化二砷联合5-氟尿嘧啶对人大肠癌SW480细胞的抑制作用

目的:比较5-氟尿嘧啶(5-FU)单独以及联合三氧化二砷(As2O3)对人大肠癌SW480的细胞毒作用,为临床联合用药提供实验依据。方法:以MTT法观察不同浓度的As2O3、5-FU以及两者合用对大肠癌SW480细胞的细胞毒作用,比较药物对细胞增值的抑制效应。结果:与单用5-FU相比,As2O3与5-FU联用能显著抑制人大肠癌SW480细胞的增值作用。结论:As2O3与5-FU联合应用具有显著抑制人大肠癌SW480细胞的作用。

三氧化二砷辅助治疗难治或复发急髓白血病的疗效观察

目的:研究三氧化二砷(As2O3)联合小剂量高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)、阿糖胞苷(Ara-c)治疗难治或复发性急性髓细胞白血病(relapsed acute myeloid leukemia,RAML)的疗效及不良反应。方法:难治或复发性急性髓细胞白血病患者180例随机分成两组:研究组94例,方案:三氧化二砷10mg/日,d1-5、d8-12静脉滴注,高三尖杉酯碱1mg/日,d1-14静脉滴注,阿糖胞苷25mg,皮下注射2次/日,d1-14。对照组86例,给予标准剂量HA方案:用药剂量疗程同前,不加As2O3。结果:研究组68例获得完全缓解(CR),CR率72.3%(68/94),13例获得部分缓解(PR),总有效率(ORR)86.2%(81/94)。对照组CR率54.7%(47/86),9例PR,总有效率65.1%。两组比较研究组完全缓解率、部分缓解率以及总有效率均优于对照组(P<0.05),不良反应发生率研究组与对照组无显著差异(P>0.05)。结论:小剂量阿糖胞苷方案治疗难治复发性AML的疗效比标准剂量HA方案疗效优越,化疗相关不良反应无显著差异。

p27^(Kip1)在As_2O_3诱导白血病细胞凋亡中的作用机制

目的:研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As_2O_3)及转录生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对人HL-60细胞增殖的影响,并探讨相关信号通路。方法:流式细胞术检测细胞周期及凋亡,RTPCR检测p27^(Kip1)、TGF-β1、Cyclin E和Bcl-2表达,免疫组织化学方法和Western blot方法检测p27^(Kip1)、TGF-β1、Cyclin E和Bcl-2蛋白水平。结果:As_2O_3、TGF-β1单药或联合处理均可诱导细胞凋亡,以联合处理组凋亡最明显,并且As_2O_3单药组及联合处理组细胞周期阻滞于G1期。As_2O_3单药及联合处理组可见p27^(Kip1)、内源性TGF-β1表达上调,Cyclin E和Bcl-2表达下调,外源性TGF-β1处理组可见p27^(Kip1)mRNA及蛋白表达上调,内源性TGF-β1 mRNA表达上调,内源性TGF-β1蛋白水平与对照组比较无明显变化,Cyclin E和Bcl-2表达下调,联合处理组p27^(Kip1)及内源性TGF-β1表达上调及Cyclin E和Bcl-2表达下调程度强于单药处理组。结论:As_2O_3诱导细胞凋亡的机制可能是通过上调TGF-β1,从而上调p27^(Kip1),拮抗Cyclin E和Bcl-2的作用,抑制细胞增殖,使细胞周期阻滞于G_1期,从而诱导细胞发生凋亡,外源性TGF-β1通过上调内源性TGF-β1,从而上调p27^(Kip1),增强As_2O_3诱导细胞凋亡的作用。

三氧化二砷通过自噬作用抑制A549肺癌细胞的生长

目的探讨三氧化二砷对肺癌细胞生长的影响,揭示三氧化二砷抗癌作用的机制。方法培养人肺癌细胞A549,给予不同药物浓度三氧化二砷药物处理;利用CCK8检测三氧化二砷对A549细胞活力的影响;以自噬试剂盒观测细胞的自噬情况。结果 10、25、50和100μmol/L三氧化二砷明显抑制A549的细胞活力(P<0.05)。三氧化二砷处理后镜下见阳性自噬细胞增多,自噬率增加。结论 AS2O3可抑制A549肺癌细胞生长,这种效应可能通过诱导细胞自噬来发挥作用。

三氧化二砷在实体性肿瘤治疗中的临床研究及应用进展

三氧化二砷（arsenic trioxide,As203,AT）为中药砒霜的主要成分,20世纪70年代我国学者发现其治疗急性早幼粒细胞白血病（APL）有特效,1999年As203正式通过国家药品监督管理局的审批临床治疗APL,并于2000作为治疗复发性及耐药性APL的新药通过美国食品及药物管理局（FDA）的审批。

As_2O_3联用华蟾素对K562细胞Bcr-Abl磷酸化的影响

目的研究As2O3联用华蟾素对K562细胞Bcr-Abl蛋白酪氨酸磷酸化的影响,探讨其抗白血病的分子机制,为As2O3和华蟾素联合应用治疗CML提供理论依据。方法采用细胞增殖实验检测细胞生长;采用Annexin-V/PI双染实验、DNAPI染色及DNA电泳等方法测定细胞凋亡;运用Westernblot检测K562细胞Bcr-Abl蛋白酪氨酸磷酸化水平。结果在As2O3和华蟾素作用下K562细胞生长受抑伴随活力下降,1.0μmol/LAs2O3、0.125μg/mL华蟾素、0.25μg/mL华蟾素、1.0μmol/LAs2O3+0.125μg/mL华蟾素、1.0μmol/LAs2O3+0.25μg/mL华蟾素作用K562细胞24h和48h后,增殖抑制率分别为(24±1.3)%、(21±1.5)%、(38±3.1)%、(57±2.7)%、(66±3.3)%及(49±2.9)%、(48±2.7)%、(61±2.1)%、(77±3.8)%、(82±4.2)%,细胞凋亡率分别为(4.8±0.5)%、(5.6±0.7)%、(9.8±0.6)%、(11.9±1.2)%和(15.2±1.5)%及(11.0±0.9)%、(12.9±1.1)%、(18.4±1.5)%、(21.0±2.0)%、(28.0±1.9)%,凋亡细胞百分率呈时间剂量依赖关系;DNA电泳出现"梯"状条带;Bcr-Abl蛋白酪氨酸磷酸化水平出现时间剂量依赖性下调。结论 As2O3和华蟾素能诱导K562细胞凋亡和抑制其增殖,两药联用具有协同作用,机制与下调K562细胞Bcr-Abl蛋白酪氨酸磷酸化有关。

砷剂可诱导脑胶质瘤细胞凋亡

据报道，哈尔滨医科大学附属一院神经外科研究人员在“砷剂对脑胶质瘤细胞影响的基因芯片研究及颅内缓释剂型的研发”课题研究中，首次从动物实验角度证实三氧化二砷（As203）能诱导脑胶质瘤细胞凋亡；同时自主研制了As203脂质体缓释剂，在胶质瘤切除术后直接植入手术区域，实现了脑胶质瘤术后局部缓释化疗。

三氧化二砷对肝癌HepG2细胞侵袭转移及USP22蛋白表达的影响

目的:探究不同浓度三氧化二砷(As_2O_3)对肝癌HepG2细胞侵袭转移能力的影响以及对HepG2细胞中USP22蛋白表达的影响,进一步完善其分子机制。方法:CCK8细胞增殖实验检测不同浓度As_2O_3在不同时间点对Hep G2细胞增殖的影响;细胞划痕和Transwell方法检测HepG2细胞在不同浓度As_2O_3作用下侵袭转移能力的变化;Western blot检测As_2O_3作用下HepG2细胞中USP22蛋白的表达水平。结果:随着As_2O_3浓度和作用时间的增加,HepG2细胞增殖明显受到抑制。与对照组相比,24 h时分别用2、4、8μmol/L的As_2O_3处理的HepG2细胞侵袭转移能力降低,细胞中USP22蛋白表达水平明显下降。结论:As_2O_3可抑制人肝癌HepG2细胞侵袭转移能力,其分子机制可能与下调的USP22蛋白水平相关。

纳米As_2O_3磁性脂质体磁感应加热治疗裸鼠人宫颈癌移植瘤

目的研究纳米As_2O_3磁性脂质体联合磁感应加热治疗异种移植性宫颈癌的作用及机制。方法建立裸鼠人宫颈癌移植瘤模型,将纳米As_2O_3脂质体、纳米磁性脂质体和纳米As_2O_3磁性脂质体等分别局部注射到裸鼠人宫颈癌移植瘤中,交变磁场(AMF)作用30d后检测抑瘤率、裸鼠移植瘤凋亡、增殖指数、Bcl-2和Bax蛋白表达及其对肝、肾功能的影响等。结果在AMF作用下,各组移植瘤的质量抑制率分别为57.06%(P<0.05)、49.44%(P<0.05)和80.84%(P<0.01)。凋亡相关指标(AI、PI、Bcl-2、Bax)与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);各组血清AST、ALT、BUN及Cr的均值之间相比,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组肿瘤组织有明显坏死,而瘤旁和内脏组织均未见明显损伤。结论纳米As_2O_3磁性脂质体是一种较理想的靶向治疗肿瘤的复合载体,可以同时发挥药物和磁感应加热的联合定向治疗作用,且对肝、肾功能没有明显的毒性,极可能成为一种宫颈癌治疗新途径。

三氧化二砷对白血病细胞EVI-1基因作用的研究

目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对白血病细胞中EVI-1基因的作用。方法:采用1μmol/L的As2O3处理1例高表达EVI-1基因的急性单核细胞白血病患者的原代细胞,并用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测细胞的EVI-1 mRNA表达率;同时采用RT-PCR检测人白血病细胞株K562、HL-60、U937和THP-1中EVI-1 mRNA基因的相对表达量。选取EVI-1 mRNA表达量最高的THP-1细胞株作为研究对象,经多位点PCR测序确认其包含EVI-1基因全长片段后,分别以1、3、5μmol/L的As2O3处理THP-1细胞株,观察细胞形态变化,CCK8检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR检测EVI-1 mRNA表达率,蛋白质印迹法检测细胞内EVI-1蛋白的表达情况。结果:As2O3能下调原代细胞中EVI-1 mRNA,抑制THP-1细胞株增殖、诱导其凋亡,且呈剂量、时间依赖性;As2O3能下调THP-1细胞株EVI-1 mRNA、EVI-1蛋白的表达。结论:As2O3通过抑制白血病细胞EVI-1 mRNA、EVI-1蛋白的表达,从而促进其凋亡。

多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1抑制剂对三氧化二砷在肾癌细胞损伤中的增敏作用

目的探讨多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1(PARP-1)抑制剂AG14361对三氧化二砷(As2O3)杀伤肾癌细胞的增敏作用及机制.方法应用噻唑蓝(MTT)法、克隆形成实验、单细胞凝胶电泳、微核试验、流式细胞术检测As2O3联合AG14361对肾癌细胞的细胞毒作用、遗传毒性作用、凋亡作用.结果克隆形成率[联用组比As2O3组:OS-RC-2,(43.23±3.12)%比(62.35±2.69)%;786-O,(36.23±3.12)%比(58.31±2.42)%;HK-2,(56.32±3.46)%比(68.92±3.12)%],差异有统计学意义(P<0.05);单细胞凝胶电泳、微核试验显示,联用组与As2O3组比较,DNA与染色体损伤增加,差异有统计学意义(P<0.05).流式细胞术显示:联用组与As2O3组比较,显著增强肾癌细胞的凋亡率[(OS-RC-2,(59.90±86.75)%比(17.00±3.61)%;786-O,(41.47±4.11)%比(15.17±1.99)%;HK-2,(30.43±4.92)%比(13.17±3.26)%].结论AG14361对As2O3诱导的肾癌细胞的杀伤作用具有增敏作用,拟通过抑制单、双链DNA损伤修复,继而引起染色体损伤.