针对未获我国农业部批准的转基因匍匐翦股颖ASR368,建立特异性实时荧光PCR(real-time PCR)检测方法。通过分析ASR368特异性边界序列,建立ASR368品系特异性检测方法,并测定本方法的灵敏度、特异性及可重复性。结果显示,建立的检测方法特...针对未获我国农业部批准的转基因匍匐翦股颖ASR368,建立特异性实时荧光PCR(real-time PCR)检测方法。通过分析ASR368特异性边界序列,建立ASR368品系特异性检测方法,并测定本方法的灵敏度、特异性及可重复性。结果显示,建立的检测方法特异于ASR368成分的检测,灵敏度测试表明其定量下限为20拷贝;重复性试验显示其相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于25%。因此,建立的转基因匍匐翦股颖ASR368品系特异性实时荧光PCR检测方法具有良好的特异性和高灵敏度,适合对匍匐翦股颖ASR368品系进行鉴别检测。展开更多
通过对厚藤(Ipomoea pes-caprae(Linn.)Sweet.)cDNA文库的筛选,获得了一个编码厚藤ASR(ABA-stress-ripening)基因的全长cDNA,命名为IpASR。研究结果显示,IpASR编码区全长648 bp,共编码215个氨基酸;蛋白质等电点为5.42,分子量为24.57 k ...通过对厚藤(Ipomoea pes-caprae(Linn.)Sweet.)cDNA文库的筛选,获得了一个编码厚藤ASR(ABA-stress-ripening)基因的全长cDNA,命名为IpASR。研究结果显示,IpASR编码区全长648 bp,共编码215个氨基酸;蛋白质等电点为5.42,分子量为24.57 k D。通过在酵母中表达,发现IpASR能够提高转基因酵母的耐盐性及抗氧化能力。进一步以厚藤成年植株及幼苗为材料进行实时荧光定量PCR分析,结果表明,IpASR基因在厚藤成年植株各组织中广泛表达;高盐、甘露醇胁迫和ABA处理可诱导该基因在厚藤幼苗中的表达。结合GFP融合蛋白的亚细胞定位和生物信息学分析,发现IpASR蛋白为核蛋白,推测IpASR基因参与了厚藤生长发育的调控,并可响应ABA和非生物胁迫的诱导。展开更多
文摘针对未获我国农业部批准的转基因匍匐翦股颖ASR368,建立特异性实时荧光PCR(real-time PCR)检测方法。通过分析ASR368特异性边界序列,建立ASR368品系特异性检测方法,并测定本方法的灵敏度、特异性及可重复性。结果显示,建立的检测方法特异于ASR368成分的检测,灵敏度测试表明其定量下限为20拷贝;重复性试验显示其相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于25%。因此,建立的转基因匍匐翦股颖ASR368品系特异性实时荧光PCR检测方法具有良好的特异性和高灵敏度,适合对匍匐翦股颖ASR368品系进行鉴别检测。
文摘通过对厚藤(Ipomoea pes-caprae(Linn.)Sweet.)cDNA文库的筛选,获得了一个编码厚藤ASR(ABA-stress-ripening)基因的全长cDNA,命名为IpASR。研究结果显示,IpASR编码区全长648 bp,共编码215个氨基酸;蛋白质等电点为5.42,分子量为24.57 k D。通过在酵母中表达,发现IpASR能够提高转基因酵母的耐盐性及抗氧化能力。进一步以厚藤成年植株及幼苗为材料进行实时荧光定量PCR分析,结果表明,IpASR基因在厚藤成年植株各组织中广泛表达;高盐、甘露醇胁迫和ABA处理可诱导该基因在厚藤幼苗中的表达。结合GFP融合蛋白的亚细胞定位和生物信息学分析,发现IpASR蛋白为核蛋白,推测IpASR基因参与了厚藤生长发育的调控,并可响应ABA和非生物胁迫的诱导。