乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒对转录因子ATF-1的调节

0 引言。乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)的感染，不仅引起急、慢性病毒性肝炎，而且与肝纤维化、肝细胞癌(HCC)的发生密切相关．虽然HBV和HCV感染与HCC之间的关系已经得到确定，但是具体的分子生物学机制还不十分清楚．由于肝炎病毒可以影响肝细胞信号转导，引起细胞的病变及恶性转化，而激活转录因子-1(activating transcription factor-1，ATF-1)是重要的细胞信号转导途经中的转录因子，因此深入研究二者的相互关系对肝炎病毒的发病机制研究有进一步的帮助．

人参皂苷Rg1通过Sestrin2保护心肌细胞的作用

目的研究人参皂苷Rg1(G-Rg1)对抗心肌缺血再灌注损伤中Sestrin2的作用及相关机制。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,按实验要求随机分5组,分别为对照组,缺氧复氧组,G-Rg1组,缺氧诱导因子-1α(Hypoxia Inducible Factor-1,HIF-1,HIF-1α)抑制剂组,Sestrin2 siRNA干扰组。流式细胞术检测各组心肌细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)含量。蛋白质免疫印迹法检测HIF-1α、Sestrin2、蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase,PERK)、活化转录因子6(the activating transcription factor6,ATF-6)和跨膜蛋白激酶1(inositol requiring enzyme 1,IRE-1)蛋白表达。免疫荧光法检测Sestrin2、HIF-1α、IRE-1蛋白表达。结果与对照组相比,缺氧复氧组细胞内ROS水平、HIF-1α、Sestrin2、ATF-6、PERK、IRE-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与缺氧复氧组相比,G-Rg1组细胞内ROS水平明显降低(P<0.05),HIF-1α、Sestrin2、ATF-6、PERK、IRE-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与G-Rg1组比较,HIF-1α抑制剂组心肌细胞内ROS水平升高,Sestrin2蛋白表达明显下调(P<0.05);与G-Rg1组比较,siRNA干扰组心肌细胞内ROS水平升高,IRE-1表达明显升高(P<0.05)。结论G-Rg1通过上调Sestrin2表达,保护缺氧复氧心肌细胞,并维持内质网应激平衡稳态。

AngⅡ通过ATF-1通路诱导NOX1高表达

目的:探讨激活转录因子(ATF1)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)中NOX1基因表达增加的作用。方法:体外培养大鼠主动脉VSMCs,用荧光实时定量逆转录PCR(Real-time RT-PCR)检测NOX1基因表达的量,Western Blot检测ATF-1蛋白在AngⅡ的刺激是否引起NOX1基因的高表达并用RNA干扰(RNAi)技术转染VSMCs使ATF-1基因沉默来观察NOX1的表达。结果:AngⅡ能够诱导NOX1基因的表达增加以及增强ATF-1的磷酸化及活性,ATF1基因沉默反过来可抑制AngⅡ诱导的NOX1基因表达的增加。结论:在大鼠的VSMCs中,ATF-1是介导NOX1基因表达的一个必须的转录因子。

血清BATF、C3AR1在肺炎继发脓毒血症患者的病情严重程度及预后评价中的价值

目的探讨肺炎继发脓毒症患者血清碱性亮氨酸拉链ATF样转录因子(BATF),补体C3A受体1(C3AR1)水平与病情严重程度的关系及预后评估价值。方法选取2019年3月至2021年3月诊治的112例肺炎继发脓毒症患者为脓毒症组,根据28 d预后情况分为生存组(77例)和死亡组(35例),以同期诊治的60例无脓毒症肺炎患者为肺炎对照组,60例健康体检的健康人为健康对照组。应用酶联免疫吸附试验检测血清BATF、C3AR1水平。比较不同预后肺炎继发脓毒症患者临床资料及血清BATF、C3AR1水平。Spearman秩相关分析血清BATF、C3AR1水平与序贯器官衰竭评分(SOFA)的相关性。多因素Logistic回归分析影响肺炎继发脓毒症患者28 d死亡预后的因素。受试者工作特征曲线分析各指标对肺炎继发脓毒症患者28 d死亡预后的预测价值。结果脓毒症组患者血清BATF[(2.26±0.41)μg/L],C3AR1[(40.41±7.08)mg/L,]水平高于肺炎对照组[(1.02±0.29)μg/L,(31.84±6.12)mg/L]和健康对照组[(0.53±0.12)μg/L,(23.79±6.39)mg/L],差异有统计学意义(t=10.199~57.009,均P<0.05)。死亡组患者血清BATF[(2.96±0.48)μg/L vs.(1.94±0.36)μg/L],C3AR1[(44.26±7.35)mg/L vs.(38.66±6.78)mg/L],PCT,SOFA评分高于生存组,差异有统计学意义(t=3.946~35.388,均P<0.05)。PCT、BATF、C3AR1和SOFA评分升高是影响肺炎继发脓毒症患者28 d死亡预后的独立危险因素。血清PCT、BATF、C3AR1和SOFA评分联合对肺炎继发脓毒症患者28日死亡预后预测的曲线下面积为0.945,大于血清PCT、BATF、C3AR1和SOFA单项指标0.836、0.830、0.772、0.896,差异有统计学意义(Z=8.417,8.366,9.050,2.384,均P<0.05)。结论肺炎继发脓毒症患者血清BATF、C3AR1水平升高,两者疾病严重程度有关,血清PCT、BATF、C3AR1和SOFA评分联合对肺炎继发脓毒症患者预后具有较高的预测效能。

秀丽线虫mfn-1 RNAi通过依赖于ATFS-1途径激活线粒体未折叠蛋白反应

目的:研究mfn-1 RNAi对线粒体未折叠蛋白反应的激活作用及其机制。方法:分别对线虫SJ4058和SJ4100(指示线粒体未折叠蛋白反应)、TJ375(指示细胞质未折叠蛋白反应)、SJ4005(指示内质网未折叠蛋白反应)进行mfn-1 RNAi处理,观察后代中能否激活相应分子伴侣表达;将SJ4058线虫分别与haf-1基因功能缺失线虫RB867及atfs-1基因功能缺失线虫VC3201杂交,然后对获得的纯合子线虫进行mfn-1RNAi,观测后代中是否有荧光激活,即验证分子伴侣的激活是否依赖于HAF-1及ATFS-1。结果:Mfn-1 RNAi特异性激活线粒体分子伴侣HSP-6及HSP-60的表达,而没有激活细胞质分子伴侣HSP-16.2及内质网分子伴侣HSP-4;通过杂交获得基因型为hsp-60::gfp/haf-1(ok705)IV和hsp-60::gfp/atfs-1(gk3094)V的线虫并经过PCR验证。进一步对这两种基因型的线虫进行mfn-1 RNAi处理发现,线粒体分子伴侣HSP-60的激活依赖于ATFS-1而不依赖于HAF-1。结论:Mfn-1 RNAi特异性激活线粒体而非细胞质及内质网未折叠蛋白反应,提示MFN-1蛋白的表达降低对线粒体蛋白稳态有影响,而对细胞质及内质网蛋白质稳态影响不大;Mfn-1 RNAi对线粒体未折叠蛋白反应的激活依赖于转录因子ATFS-1而不依赖于线粒体膜蛋白HAF-1。

线粒体未折叠蛋白反应分子机制的研究进展

线粒体未折叠蛋白反应(UPR^(mt))作为新发现的细胞内应激机制,直接影响老化、神经退行性疾病、癌症等疾病的发生发展.UPR^(mt)是线粒体为了维持其内部蛋白质的平衡,启动由核DNA编码的线粒体热休克蛋白和蛋白酶等基因群转录活化程序的应激反应.深入探究UPR^(mt)的作用机制对阐明老化和线粒体相关疾病的发病机理具有指导意义.本文主要阐述了线粒体未折叠蛋白反应的诱导因素、线虫和哺乳动物细胞中最新的未折叠蛋白应激反应的信号传导通路、调控因子、具体作用机制以及线粒体未折叠蛋白反应与衰老、免疫等疾病的联系,旨在为这些疾病提供新的理论基础和治疗靶点.