家族性ATM基因纯合突变共济失调毛细血管扩张症家系及文献复习

报道ATM基因突变共济失调毛细血管扩张症1个家系的临床资料,并进行文献复习。

ATM基因多态性与乳腺癌患病风险及临床病理特征的相关性分析

目的:探讨共济失调毛细血管扩张突变基因(ataxia-telangiectasia mutated gene,ATM)单核苷酸多态性(SNP)rs189037和rs609261两个位点多态性与乳腺癌患病风险及临床病理特征的关系。方法:收集我院未接受放、化疗的乳腺癌根治标本和乳腺良性肿瘤标本。采用多重SNaPshot法检测ATM基因rs189037和rs609261两个位点多态性,分析其与乳腺癌患病风险及临床病理特征的关系。结果:ATM基因rs189037位点多态性与乳腺癌患癌风险及临床病理特征无关(GA基因型,P=0.667);rs609261位点携带TC、CC基因型的淋巴结转移患者患癌风险高于TT基因型携带者(TC+CC显性模型,P=0.015)。ATM基因rs189037和rs609261两个位点等位基因频率和基因型分布与免疫组化指标(ER、PR、HER2、Ki-67)无相关性(rs189037位点GA+AA显性模型和rs609261位点TC+CC显性模型,ER:P=0.676、0.675;PR:P=0.758、0.573;HER2:P=0.203、0.327;Ki-67:P=0.189、0.405)。结论:ATM基因rs189037位点与乳腺癌患癌风险及临床病理特征、免疫组化指标无明显相关性。rs609261位点携带TC、CC基因型的淋巴结转移患者可能增加患病风险。

抑制ATM/PI3K功能区表达对鼻咽癌细胞CNE1辐射增敏的研究

背景与目的:共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasiamutant,ATM)与细胞辐射敏感性密切相关,已有报道,ATM蛋白(ATM基因编码产物)表达抑制可引起多种恶性肿瘤细胞辐射敏感性的改变。本研究观察ATM/PI3K区反义RNA对鼻咽癌细胞系CNE1ATM蛋白的抑制作用及辐射增敏作用。方法:构建含反义ATM/PI3K区序列逆转录病毒重组体pDOR-atm,经阳离子脂质体转染入CNE1细胞,并命名为CNE1/pDOR-atm。应用半定量RT-PCR法分析反义组和对照组细胞中ATMmRNA的水平,应用流式细胞仪检测表达ATM蛋白的阳性细胞百分率及平均荧光强度,应用集落形成实验及线性二次模型(linear-quadraticmodel,L-Q模型)检测细胞辐射敏感性的变化。结果:在反义组细胞CNE1/pDOR-atm中ATMmRNA指数(mRNAindex,RI)平均为0.23±0.02,在对照组细胞CNE1/pDOR中RI平均为0.51±0.03(P<0.05)。在反义组中ATM蛋白阳性细胞百分率平均为70.8%,ATM蛋白平均荧光强度为1.81±0.12;而对照组中分别为99.3%,4.51±0.18(P<0.01),提示反义组细胞中ATMmRNA水平及蛋白表达抑制。反义组细胞α值为0.40Gy-1,对照组为0.36Gy-1,2Gy辐射增敏比达3.0,提示反义组细胞辐射敏感性增加。结论:抑制CNE1细胞的ATM/PI3K区表达可以达到有效的辐射增敏目的。

抑制ATM表达致鼻咽癌细胞CNE1辐射增敏的细胞周期阻滞研究

背景与目的:细胞周期调控是决定细胞辐射敏感性的决定性因素之一。共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasia mutant,ATM)功能与细胞DNA损伤修复、细胞周期检查点调控密切相关。我们前期研究通过反义RNA抑制ATM基因表达可增加鼻咽癌细胞系CNE1辐射敏感性,本研究拟探讨其辐射增敏的细胞周期阻滞调控机制。方法:ATM反义组细胞CNE1/pDOR-atm及对照组细胞CNE1/pDOR经2Gy、5GyX线照射后不同时间点(1h、4h、8h、24h、48h)收获,应用流式细胞仪(flowcytometer,FCM)检测各细胞周期百分比及凋亡率。结果:两组细胞X线照射后均未出现明显G1期阻滞和细胞凋亡,但分别在照射后1h、4h、8h出现明显S期阻滞,24h、48h出现明显G2期阻滞,其中反义组S期细胞百分率总均数水平低于对照组(P<0.05),而G2/M期细胞百分率总均数水平高于对照组(P<0.05)。结论:反义RNA抑制ATM表达致CNE1辐射增敏的细胞周期调控机制可能与减少S期细胞比例,增加G2/M期细胞比例有关,与G1期阻滞和细胞凋亡的调控无关。

ATM蛋白激酶依赖性信号转导通路研究进展

毛细血管扩张共济失调突变基因(ataxia-telangiectasia mutated gene,ATM基因)变异导致遗传性毛细血管扩张共济失调症(ataxia-telangiectasia,A-T)。ATM基因编码产物———ATM蛋白激酶主要分布于增殖细胞核中。根据ATM蛋白激酶在细胞周期中作用底物如检测点激酶2(checkpoint kinase 2,Chk2)、奈梅亨断裂综合症蛋白1(Nijmegen breakage syndrome protein 1,Nbs1)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen activatedprotein kinase,p38MAPK)等不同,形成了不同的ATM蛋白激酶依赖性信号转导通路。最近研究发现,ATM蛋白激酶依赖性信号转导通路参与细胞周期多个检测点的调控,在DNA双链断裂(DNA double-strand break,DSB)损伤修复过程中发挥着至关重要的作用,暗示了ATM蛋白激酶或将成为恶性肿瘤放射治疗增敏新靶点。

ATM基因rs664982位点单核苷酸多态性与食管癌易感性研究

目的研究共济失调毛细血管扩张征突变(ATM)基因rs664982位点单核苷酸多态性与患食管癌易感性之间的关系。方法采用测序技术对183例食管癌患者(食管癌组)及125例体检健康者(对照组)进行ATM基因单核苷酸多态性分型检测;应用非条件Logistic回归统计分析ATMrs664982单核苷酸多态性与食管癌的相关性;利用SHEsis软件分析rs664982和rs664143连锁不平衡性及其单体型与疾病的相关性。结果食管癌组吸烟者及有肿瘤家族史者所占比例高于对照组(P<0.05);ATMrs664982基因型与性别、年龄、饮酒在食管癌组与对照组相比无统计学差异(P>0.05),ATMrs664982基因型与吸烟、肿瘤家族史在食管癌组与对照组相比有统计学差异(P<0.05);与基因型C/C比较,T/T基因型可增加食管癌发病风险,C/T基因型可降低发病风险;rs664982和rs664143没有强的连锁不平衡性。结论不同种族人群存在不同的ATM基因多态性,这可能是导致不同种族人群食管癌发病率和临床表现存在显著不同的因素之一。

ATM与肿瘤的关系研究进展

共济失调毛细血管扩张征突变基因(ataxia-telangiectasia mutated gene,ATM gene)属于一种DNA修复基因,定位于染色体11q22-q23。ATM基因的胚系突变或基因多态性导致个体对多种肿瘤易感,包括淋巴样肿瘤和实体瘤。ATM基因编码产物——ATM蛋白属于一种自动磷酸化蛋白激酶,在DNA损伤修复、细胞周期阻滞和细胞凋亡过程中发挥着关键的调控作用。体外实验发现,许多肿瘤的发生和治疗过程涉及了ATM蛋白表达或活性的改变,提示ATM基因或许能成为肿瘤治疗过程中一个新的潜在作用靶点。

共济失调毛细血管扩张症2家系ATM基因分析

目的探讨致共济失调毛细血管扩张症的ATM基因新突变的致病性。方法分析2个无血缘关系的共济失调毛细血管扩张症家系成员的临床资料及基因检测结果,并应用Sanger测序对新突变位点进行验证。结果家系1先证者为男性,11岁,家系2先证者为女性,8岁。均有共济失调毛细血管扩张症的典型表现,甲胎蛋白升高。头颅磁共振成像示小脑萎缩。家系1先证者发现c.7627delA与c.8385-8394del复合杂合突变,分别遗传自父母;家系2先证者发现c.2638delG与c.2921+1G>C复合杂合突变,c.2638delG来源于母亲,其父ATM基因不详。经HGMD检索,4个变异目前均未见有文献报道,为新突变。4个新突变经蛋白功能分析软件预测等确认为致病突变。结论证实ATM基因新突变为2个无关的共济失调毛细血管扩张症家系的致病原因。

miR-181a靶向抑制ATM表达促进急性髓系白血病细胞增殖

目的:研究microRNA181a(miR-181a)在人急性髓系白血病(AML)中的作用及其调控机制。方法:采用miR-181a小分子类似物转染人AML细胞系HL-60细胞,采用CCK-8计数法检测miR-181a对细胞增殖的影响。利用生物信息学方法结合文献分析预测miR-181a潜在的靶基因,通过双荧光报告实验在HL-60细胞内以及白血病患者体内多方面对靶基因进行验证。结果:miR-181a能显著促进人HL-60细胞恶性增殖(P<0.05);在线软件预测发现,抑癌基因ATM可能是白血病细胞miR-181a潜在的靶基因;双荧光报告实验结果表明,miR-181a能显著地抑制含3'-UTR的ATM报告基因活性,荧光素酶活性下降56.8%(P<0.01),而对含3'-UTR突变位点的ATM报告基因载体没有抑制作用。在HL-60细胞中过表达miR-181a,Western blot检测显示可以显著抑制内源性ATM的表达(P<0.01),而在白血病患者中miR-181a的表达增高,与ATM的表达呈负相关(r=-0.766)。结论:miR-181a通过抑制抑癌基因ATM表达以促进人AML细胞恶性增殖,从而在AML发病中起着类似"癌基因"的作用。

放射治疗增敏的新靶点ATM的研究进展

临床发现患遗传性共济失调-毛细血管扩张(ataxia-telangiectasia,A-T)综合征的患者对电离辐射具有高敏感性。通过研究表明其高放射敏感性可能归因于ATM(ataxia-telangiectasia mutated)基因,其中起关键作用的部分是ATM蛋白激酶。为此,人们开发了ATM激酶的阻滞剂,如咖啡因、己酮可可碱、甲基黄嘌呤和UCN-01(7-hydroxystaurosporine)等,并在基础和临床研究中获得了一些可喜的结果。

ATM基因rs227060位点单核苷酸多态性与肺癌易感性的相关性

目的:探讨共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia telangiectasia mutated,ATM)rs227060位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与肺癌易感性之间的相关性。方法:采用聚合酶链反应–SNP敏感性分子开关方法,检测225例肺癌患者和128例健康体检者ATM基因rs227060多态位点等位基因以及基因型频率分布特点;并应用非条件Logistic回归法统计分析rs227060单核苷酸多态性与肺癌的相关性。结果:rs227060多态位点共检测出CC,CT,TT三种基因型和C,T两种等位基因,其在肺癌组与对照组的基因型分布频率为:CC基因型17.3%与29.7%、CT基因型61.4%与59.3%、TT基因型21.3%与11%,两组间基因型频率和等位基因频率分布差异均有统计学意义(P<0.05)。在对ATM rs227060基因型的多态性分析过程中发现:吸烟史在肺癌组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),而年龄、性别、肿瘤家族史在肺癌组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);且以CC基因型作为对照,携带TT基因型的个体患肺癌的风险是携带CT基因型个体的3.49倍(OR=1.829;95%CI:1.045~3.199)。结论:ATM基因rs227060位点单核苷酸多态性与肺癌易感性存在相关性,且携带TT基因型可增加肺癌的发病风险。

急性白血病ATM基因和BRCA2基因的杂合性缺失

目的 :探讨急性淋巴细胞白血病 (ALL)与急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)ATM基因和BRCA2基因杂合性缺失及其相互关系。方法 :应用PCR 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 银染技术检测ATM基因D11S2 179位点和BRCA2基因D13S2 6 0位点的杂合性缺失 (LOH)。结果 :6 4例ALL患者中两位点LOH发生率为 18.7% ;D11S2 179和D11S2 6 0两位点LOH的发生频率分别为 12 .5 %和 14.0 % ;两位点同时发生LOH的频率为 7.8%。38例ANLL患者中两位点LOH的发生率为 7.9% ,D11S2 179和D13S2 6 0两位点的LOH发生频率分别为 2 .6 %和 5 .2 %。两组总发生率比较差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论 :ATM基因和BRCA2基因的LOH可能参与ALL的病理发生 。

抑制ATM表达对X线照射下肝癌细胞损伤修复的影响

目的探讨抑制毛细血管扩张-共济失调突变基因(ATM)表达对人肝癌细胞株HepG2在X线照射下细胞损伤修复的影响。方法设计3条沉默ATM的小分子干扰RNA(siRNA)的序列,用脂质体法转染HepG2细胞,筛选出有效的浓度及作用时间,分别利用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测ATM mRNA、蛋白表达水平,MTT法检测转染后细胞增殖,流式细胞术检测X线照射后HepG2细胞周期、凋亡等生物学功能方面指标的变化。结果筛选出沉默ATM基因的siRNA有效序列。qRT-PCR结果显示第3条siRNA抑制率最高,可达72%,转染后48 h的ATM蛋白表达抑制78%。转染siRNAATM后HepG2细胞的增殖能力无明显变化,HepG2ATM组在X线照射后G2/M期细胞明显增多,S期细胞明显减少;X线照射后HepG2ATM组早期凋亡百分比是阴性对照组的2倍。结论抑制ATM表达可显著抑制肝癌细胞对辐射损伤的修复,为后期研究ATM在肝癌治疗中的作用机制提供了实验基础。

外源性ATM基因对辐射诱导AT细胞端粒酶逆转录酶mRNA表达的影响

通过观察外源性毛细血管扩张性共济失调症突变基因(Ataxia-telangiectasiamutation,ATM)对毛细血管扩张性共济失调症(Ataxia-telangiectasia,AT)患者皮肤的成纤维细胞系AT5BIVA(AT细胞)端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)mRNA表达的影响,探讨ATM对hTERT的调控作用。采用RT-PCR法,对比ATM基因转染前、后AT细胞hTERTmRNA表达的变化及与源自正常人皮肤的成纤维细胞系GM0639(GM细胞)相比的差异;以及细胞经3Gy60Coγ射线照射后其hTERTmRNA表达的变化。结果显示,未照射时,GM细胞hTERTmRNA表达呈阴性,AT细胞hTERTmRNA表达呈阳性,转染ATM基因后的ATM+-AT细胞其hTERTmRNA的表达明显下降(p<0.05);60Coγ射线照射后,GM细胞hTERTmRNA表达呈阳性,AT细胞、空载体AT细胞(PEBS7-AT细胞)和ATM+-AT细胞hTERTmRNA的表达量比未照射时明显增加(p<0.05),ATM+-AT细胞hTERTmRNA相对表达量的增加低于AT细胞和空载体AT细胞(p<0.05)。提示ATM可下调hTERTmRNA的表达;电离辐射可诱导细胞hTERTmRNA表达;端粒酶参与DNA损伤修复。

ATM基因单核苷酸多态性与食管癌易感性的研究

目的食管癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一;毛细血管扩张性共济失调症突变基因(ATM)是导致毛细血管扩张性共济失调症发生的致病基因,与肿瘤的发生密切相关;本研究旨在探讨ATM基因单核苷酸多态性与食管癌发生的相关性。方法收集2009年9月至2010年12月期间江苏省淮安市楚州医院就诊的135例食管癌患者标本以及135例健康体检者作为健康对照组。ATM基因单核苷酸多态性分型检测采用Taqman技术,应用Logistc回归统计分析ATM单核苷酸多态性与食管癌发生的相关性。结果吸烟者食管癌的发生率明显高于不吸烟者,差异有统计学意义(χ2=10.252,P=0.001,P<0.05);有肿瘤家族史者患食管癌的概率明显高于没有肿瘤家族史者,差异有统计学意义(χ2=12.199,P=0.000,P<0.05);在食管癌患者组中,A/A基因型占31.9%,A/G基因型占38.5%,G/G基因型占29.6%;而健康对照组中相应的数值分别为25.9%、48.9%和25.2%。以A/A基因型相比,A/G基因型的OR值为0.798(95%CI:0.418-1.521,P=0.493);G/G基因型的OR值为0.534(95%CI:0.265-1.079,P=0.080)。结论 ATM单核苷酸多态性可能与淮安地区的食管癌有关,为食管癌的保护性因素。

基因atm与慢性淋巴细胞白血病

共济失调毛细血管扩张突变基因(atm)为肿瘤抑制基因,位于人类染色体的11q22-23,主要参与DNA损伤识别和修复,并在DNA双链断裂诱导的信号级联转导通路中起到枢纽作用。慢性淋巴细胞白血病(CLL)可出现高频率的atm基因杂合性缺失和核苷酸突变,并与其发病及侵袭性病程有关。本文将对atm基因的特点、作用机制及其在慢性淋巴细胞白血病中作用的研究进展作一综述。

ATM基因CpG岛甲基化与食管鳞癌易感性的相关性研究

目的探讨ATM基因CpG岛甲基化与食管鳞癌易感性的相关性。方法应用亚硫酸氢盐测序PCR(BSP)联合TA克隆测序检测240例食管鳞癌患者组与170例体检健康对照组血浆ATM基因CpG岛甲基化情况;选取前述240例食管鳞癌患者组中的40例食管鳞癌患者标本的食管鳞癌癌变组织和癌旁正常组织,采用经典的免疫组化SP法进行ATM蛋白检测。应用相关性分析ATM基因CpG岛甲基化与ATM蛋白表达阴性的关联。结果具有吸烟习惯者患食管鳞癌危险性显著高于不吸烟者(P<0.05);有肿瘤家族史者患食管鳞癌危险性显著高于无肿瘤家族史者(P<0.05);240例食管鳞癌患者组CpG岛甲基化阳性率为88.67%,体检健康组CpG岛甲基化阳性率为73.59%,食管鳞癌患者组CpG岛甲基化阳性率明显高于体检健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。在40例食管鳞癌癌变组织中有25例ATM蛋白表达为阳性,在40例相应的癌旁正常组织中有38例ATM蛋白表达为阳性,两组差异具有统计学意义(P<0.05),并且ATM基因CpG岛甲基化率与癌变组织ATM蛋白表达阴性结果具有很好的相关性(r=0.994)。结论 ATM基因CpG岛高度甲基化状态导致其蛋白表达下调,表明其可能为抑制ATM蛋白表达的重要因素;ATM基因CpG岛高度甲基化可能为食管鳞癌发生、发展的一个重要的分子生物学事件。

抑制ATM表达对^(60)Co照射下宫颈癌细胞损伤修复机制的影响

目的:探讨抑制毛细血管扩张-共济失调突变基因(ataxia-telangiectasia mutated,ATM)表达对人宫颈癌细胞株HeLa在60Co照射下细胞损伤修复机制的影响。方法:电穿孔法将人ATM基因siRNA的重组真核表达质粒pSup-ATM转染宫颈癌HeLa细胞;G418筛选建立稳定转染株;RT-PCR、W estern-b lot、免疫荧光法检测ATM基因表达的抑制情况;W estern-b lot法检测60Co照射前后各组细胞ATM、p53Ser15磷酸化、CHK2Thr 68磷酸化、p53、CHK2蛋白的表达水平;流式细胞术检测60Co照射后各组的细胞周期变化。结果:ATM基因在HeLaATM细胞中表达明显低于在HeLa、HeLans细胞中的表达水平,成功地建立了ATM低表达的宫颈癌细胞模型。HeLaATM细胞在60Co照射后p53Ser15磷酸化、CHK2Thr68磷酸化、p53蛋白表达均显著降低,细胞周期呈现为G2期延长,G1/G2倒置。结论:抑制ATM基因表达可显著抑制宫颈癌细胞对60Co辐射损伤的修复。这一机制可能与HeLaATM细胞中ATM蛋白表达缺失,ATM依赖性的细胞损伤修复通路受阻有关。

肺癌患者射线诱发的淋巴细胞遗传损伤及ATM蛋白表达的研究

目的观察肺癌患者射线(IR)诱发的淋巴细胞遗传损伤及与ATM(ataxia telangiectasia mutated)蛋白表达的关系。方法淋巴细胞采自22例肺癌患者和22例对照。每个样本分为两部分:非辐射样本和辐射样本(3Gy X-ray)。用彗星试验和微核(MN)试验检测肺癌患者和对照组淋巴细胞自发的和IR诱发的遗传损伤。用Western blotting试验测定肺癌患者和对照组淋巴细胞的ATM蛋白表达水平。结果肺癌患者彗星试验的平均尾相(MTM)和微核试验的微核率(MNR)基础值分别为0.86‰和11.41‰,明显高于对照组的0.64‰和6.77‰(P值分别<0.05和<0.01)。IR诱发的平均MTM和MNR肺癌患者分别为1.23‰和77.64‰,明显高于对照组的0.71‰和66.05‰(P值分别<0.05和<0.01)。肺癌患者的ATM蛋白表达为0.64,明显低于对照组的1.71(P<0.01)。结论肺癌患者淋巴细胞对射线的敏感性明显高于对照组,但ATM蛋白的表达明显低于对照组。

TGFβ1和ATM基因单核苷酸多态性与放射性肺损伤关系研究

目的研究TGFβ1基因上TGFβ1-509C/T、TGFβ1+869T/C,及ATM基因上ATM126713G/A位点单核苷酸多态性与放射性肺损伤的关系。方法招募和随访2010年3月至2012年6月期间接受胸部三维适形放疗的肺癌患者170例,抽取患者静脉血,提取基因组DNA,应用实时荧光定量PCR方法进行基因单核苷酸多态性的基因分型(TGFβ1、ATM)。所有患者放疗后放射性肺损伤评价按NCI CTC 3.0急性放射性肺炎标准评价,SPSS13.0软件包进行数据分析。结果实验分为放射性肺损伤组和未发生放射性肺损伤组,TGFβ1-509C/T、TGFβ1+869T/C和ATM126713G/A的基因型分布频率在两组之间差异无统计学意义(P>0.05),TGFβ1基因上的等位基因T与C发生放射性肺损伤的风险相比差异无统计学意义(P>0.05),ATM基因上等位基因G与A发生放射性肺损伤的风险相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究未发现北方汉族人群中TGFβ1和ATM基因单核苷酸多态性与放射性肺损伤发生相关。