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慢病毒介导磷酸二酯酶7A基因沉默细胞株的构建及三磷酸腺苷结合盒转运体A1的表达变化
被引量:
1
1
作者
向乐
唐菀泽
+1 位作者
张志珍
马卫列
《中国现代医学杂志》
CAS
北大核心
2016年第3期1-8,共8页
目的利用慢病毒介导构建磷酸二酯酶7A(PDE7A)基因沉默人单核巨噬细胞(THP-1)株,并分析沉默细胞株的三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达变化。方法以PDE7A基因为靶点,设计合成3段sh RNA片段,与慢病毒载体Pmi Rzip连接,构建重组质粒...
目的利用慢病毒介导构建磷酸二酯酶7A(PDE7A)基因沉默人单核巨噬细胞(THP-1)株,并分析沉默细胞株的三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达变化。方法以PDE7A基因为靶点,设计合成3段sh RNA片段,与慢病毒载体Pmi Rzip连接,构建重组质粒。测序鉴定后进行病毒包装,感染THP-1细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)进行分析,确定最佳干扰片段。嘌呤霉素筛选得到PDE7A基因沉默稳转细胞株。q PCR和Western blot检测鉴定所构建的细胞株,将其诱导成为泡沫细胞后鉴定ABCA1基因的表达。结果转染sh RNA1、sh RNA2、sh RNA3细胞的PDE7A相对表达量分别为(0.480±0.028)、(0.561±0.016)和(0.377±0.013),故选择sh RNA3作为干扰PDE7A基因的最佳片段。采用1.4 g/L嘌呤霉素成功筛选出PDE7A沉默细胞株,q PCR和Western blot检测PDE7A基因的干扰效率,其抑制效率>70%。将其诱导成巨噬泡沫细胞后,Western blot检测显示,ABCA1的表达量增加40%。结论成功构建PDE7A sh RNA慢病毒干扰载体,并筛选出PDE7A基因沉默的THP-1细胞株,且ABCA1的表达量增加。
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关键词
磷酸二酯酶
7a
RNA干扰
慢病毒
三磷酸腺苷结合盒转运体A1
下载PDF
职称材料
小麦SLC25A4-7A基因克隆及其生物信息学分析
被引量:
1
2
作者
李鲁华
熊富敏
+1 位作者
洪鼎立
徐如宏
《分子植物育种》
CAS
北大核心
2022年第14期4539-4545,共7页
为了研究小麦腺嘌呤转移酶基因SLC25A4在小麦生长发育中的生物学功能,本研究借助RT-PCR从‘贵紫麦1号’中获取SLC25A4-7A基因的cDNA序列全长,并对其编码的蛋白进行生物信息学分析。结果表明,SLC25A4-7A基因的开放阅读框为1137 bp,编码37...
为了研究小麦腺嘌呤转移酶基因SLC25A4在小麦生长发育中的生物学功能,本研究借助RT-PCR从‘贵紫麦1号’中获取SLC25A4-7A基因的cDNA序列全长,并对其编码的蛋白进行生物信息学分析。结果表明,SLC25A4-7A基因的开放阅读框为1137 bp,编码378个氨基酸,其编码的蛋白是一个亲水的稳定蛋白。SLC25A4-7A定位于线粒体膜,该蛋白的保守结构域与在ADP/ATP转运中起重要作用的PTZ00169序列相似。蛋白三级预测结果进一步表明该蛋白具有线粒体ADP/ATP转运载体的功能。多重序列比对和系统进化树分析的结果表明,SLC25A4-7A与拟南芥AAC3在生物学功能上更为接近。本研究为进一步探究该基因的生物学功能提供了理论依据。
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关键词
小麦(Triticum
aestivum
L.)
SLC25A4
-
7a
生物信息学分析
ADP/
atp
转运载体
原文传递
机体内铜转运系统的研究进展
被引量:
2
3
作者
赵春雨
张天芮
+2 位作者
刘博
杨连玉
杨文艳
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2016年第6期66-69,共4页
微量元素铜是一种营养元素,它在动物机体内具有多种生物学功能,它是金属酶的组成成分,作为电子受体或供体参与机体内多种重要的生理、生化反应。因此,保持机体内铜代谢平衡,维持机体内环境铜含量的稳定非常重要。机体对铜的摄取、吸收...
微量元素铜是一种营养元素,它在动物机体内具有多种生物学功能,它是金属酶的组成成分,作为电子受体或供体参与机体内多种重要的生理、生化反应。因此,保持机体内铜代谢平衡,维持机体内环境铜含量的稳定非常重要。机体对铜的摄取、吸收、转运和排泄是一个非常复杂的系统,近年来国内外研究学者对动物体内铜转运系统的研究越来越重视,文章对铜在动物体内转运过程进行了综述,这对了解高铜的促生长机制有重要意义。
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关键词
铜
转运
atp
-
7a
atp
-
7
B
铜伴侣蛋白
铜转运蛋白
原文传递
题名
慢病毒介导磷酸二酯酶7A基因沉默细胞株的构建及三磷酸腺苷结合盒转运体A1的表达变化
被引量:
1
1
作者
向乐
唐菀泽
张志珍
马卫列
机构
广东医学院生物化学与分子生物学教研室
出处
《中国现代医学杂志》
CAS
北大核心
2016年第3期1-8,共8页
基金
国家自然科学基金(No:81170267)
广东省高等学校人才引进专项[No:粤财教(2013)246号]
文摘
目的利用慢病毒介导构建磷酸二酯酶7A(PDE7A)基因沉默人单核巨噬细胞(THP-1)株,并分析沉默细胞株的三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的表达变化。方法以PDE7A基因为靶点,设计合成3段sh RNA片段,与慢病毒载体Pmi Rzip连接,构建重组质粒。测序鉴定后进行病毒包装,感染THP-1细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(q PCR)进行分析,确定最佳干扰片段。嘌呤霉素筛选得到PDE7A基因沉默稳转细胞株。q PCR和Western blot检测鉴定所构建的细胞株,将其诱导成为泡沫细胞后鉴定ABCA1基因的表达。结果转染sh RNA1、sh RNA2、sh RNA3细胞的PDE7A相对表达量分别为(0.480±0.028)、(0.561±0.016)和(0.377±0.013),故选择sh RNA3作为干扰PDE7A基因的最佳片段。采用1.4 g/L嘌呤霉素成功筛选出PDE7A沉默细胞株,q PCR和Western blot检测PDE7A基因的干扰效率,其抑制效率>70%。将其诱导成巨噬泡沫细胞后,Western blot检测显示,ABCA1的表达量增加40%。结论成功构建PDE7A sh RNA慢病毒干扰载体,并筛选出PDE7A基因沉默的THP-1细胞株,且ABCA1的表达量增加。
关键词
磷酸二酯酶
7a
RNA干扰
慢病毒
三磷酸腺苷结合盒转运体A1
Keywords
phosphodiesterase
7a
RNA interference
lentivirus
atp
-
binding cassette transporter A1
分类号
R341 [医药卫生—基础医学]
下载PDF
职称材料
题名
小麦SLC25A4-7A基因克隆及其生物信息学分析
被引量:
1
2
作者
李鲁华
熊富敏
洪鼎立
徐如宏
机构
贵州大学农学院
贵州大学
出处
《分子植物育种》
CAS
北大核心
2022年第14期4539-4545,共7页
基金
贵州省科技计划项目([2019]1073)
贵州省科技支撑项目([2021]一般272)
国家自然科学基金项目(3216-150357)共同资助。
文摘
为了研究小麦腺嘌呤转移酶基因SLC25A4在小麦生长发育中的生物学功能,本研究借助RT-PCR从‘贵紫麦1号’中获取SLC25A4-7A基因的cDNA序列全长,并对其编码的蛋白进行生物信息学分析。结果表明,SLC25A4-7A基因的开放阅读框为1137 bp,编码378个氨基酸,其编码的蛋白是一个亲水的稳定蛋白。SLC25A4-7A定位于线粒体膜,该蛋白的保守结构域与在ADP/ATP转运中起重要作用的PTZ00169序列相似。蛋白三级预测结果进一步表明该蛋白具有线粒体ADP/ATP转运载体的功能。多重序列比对和系统进化树分析的结果表明,SLC25A4-7A与拟南芥AAC3在生物学功能上更为接近。本研究为进一步探究该基因的生物学功能提供了理论依据。
关键词
小麦(Triticum
aestivum
L.)
SLC25A4
-
7a
生物信息学分析
ADP/
atp
转运载体
Keywords
Wheat(Triticum aestivum L.)
SLC25A4
-
7a
Bioinformatics analysis
ADP/
atp
transport vector
分类号
S512.1 [农业科学—作物学]
原文传递
题名
机体内铜转运系统的研究进展
被引量:
2
3
作者
赵春雨
张天芮
刘博
杨连玉
杨文艳
机构
吉林农业大学
吉林省动物营养与饲料科学重点实验室
出处
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2016年第6期66-69,共4页
基金
国家自然科学基金青年科学基金项目(31302002)
"十二五"国家科技支撑计划项目(2012BAD39B03)
+1 种基金
吉林省教育厅项目(201252)
吉林省自然科学基金项目(2015010175JC)
文摘
微量元素铜是一种营养元素,它在动物机体内具有多种生物学功能,它是金属酶的组成成分,作为电子受体或供体参与机体内多种重要的生理、生化反应。因此,保持机体内铜代谢平衡,维持机体内环境铜含量的稳定非常重要。机体对铜的摄取、吸收、转运和排泄是一个非常复杂的系统,近年来国内外研究学者对动物体内铜转运系统的研究越来越重视,文章对铜在动物体内转运过程进行了综述,这对了解高铜的促生长机制有重要意义。
关键词
铜
转运
atp
-
7a
atp
-
7
B
铜伴侣蛋白
铜转运蛋白
Keywords
copper
transporter
atp - 7a
atp
-
7
B
copper chaperone protein
copper transporter protein
分类号
Q581 [生物学—生物化学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
慢病毒介导磷酸二酯酶7A基因沉默细胞株的构建及三磷酸腺苷结合盒转运体A1的表达变化
向乐
唐菀泽
张志珍
马卫列
《中国现代医学杂志》
CAS
北大核心
2016
1
下载PDF
职称材料
2
小麦SLC25A4-7A基因克隆及其生物信息学分析
李鲁华
熊富敏
洪鼎立
徐如宏
《分子植物育种》
CAS
北大核心
2022
1
原文传递
3
机体内铜转运系统的研究进展
赵春雨
张天芮
刘博
杨连玉
杨文艳
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2016
2
原文传递
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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