KATP通道开放剂对脑梗死后突触可塑性的影响

目的观察KATP通道开放剂尼可地尔对脑梗死后突触形成相关因子SYP和GAP43的影响,探讨其对脑梗死后突触可塑性的影响及机制。方法将大鼠随机分为三组:假手术+溶剂组、脑梗死+溶剂组、脑梗死+尼可地尔组,每组34只。线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。尼氏染色评估梗死体积;术后1、3、7、14 d进行神经功能缺损评估;水迷宫测试检测学习记忆功能;PCR以及Western blot检测SYP和GAP43的mRNA和蛋白水平。结果与脑梗死+溶剂组相比,脑梗死+尼可地尔组脑梗死体积明显减少,神经功能缺损明显改善,学习记忆功能明显改善,SYP和GAP43的mRNA及蛋白水平增加。差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论尼可地尔促进了MCAO大鼠的神经缺损功能的恢复,可能与增加了SYP和GAP43的表达,从而促进脑梗死后的突触可塑性有关。

ATP敏感的钾通道开放剂对离体肺保护的实验研究

目的研究ATP敏感的钾离子通道开放剂(PCOs)吡那地尔(pinacidil)在离体兔肺保护中的作用。方法将18只杂种灰色家兔随机分成3组,建立离体肺缺血再灌注模型。对照组(n=6)以自体温血直接再灌注2 h;缺血组(n=6)用低钾右旋糖酐保存液(LPD)+二甲基亚砜(DMSO)灌洗,4℃保存8 h后自体温血再灌注2 h;实验组(n=6)用LPD+100μmol.L-1吡那地尔(溶于DMSO中)灌洗,4℃保存8 h后自体温血再灌注2 h。每隔30 min分别经肺动脉和左房插管取血行血气分析,评估离体肺功能;测量湿/干重比,估计肺水含量;光镜下行肺组织形态学检查;制作肺组织匀浆测定超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)含量。结果实验组氧分压差(ΔPO2)和SOD与缺血组比较明显升高(P<0.05);组织形态学检查显示,实验组损伤较缺血组轻;实验组的TNF-α和IL-8含量明显低于缺血组(P<0.05)。结论在保存时间不超过8 h的情况下,用加入吡那地尔的LPD灌洗和保存肺能更好地保护肺功能。

ATP敏感钾通道负向调节海马长时程增强的维持

目的·探讨_(ATP)敏感钾通道(_(ATP)-sensitive potassium channel,K_(_(ATP)))在突触可塑性实验模型长时程增强(long-term potentiation,LTP)的诱导和维持阶段的不同作用。方法·采用5~6周龄雄性C57BL/6小鼠,制备急性脑海马切片。在海马谢弗侧枝CA3-CA1投射通路以场电位的电生理记录方式检测K_(ATP)的开放激活对基础水平突触传递的影响;通过高频刺激诱导LTP并分别检测在诱导和维持阶段开放K_(ATP)对突触传递强度的影响;采用氧糖剥夺模型抑制脑片代谢水平以病理性激活K_(ATP),并检测K_(ATP)阻断剂甲苯磺丁脲(tolbutamide,TOL)预处理对氧糖剥夺模型造成的海马LTP损伤的预防作用。结果·K_(ATP)的开放状态不影响基础水平的突触传递,也不影响LTP的诱导过程,但显著降低LTP维持阶段的幅度。TOL预处理可显著改善糖氧剥夺造成的LTP损伤。结论·K_(ATP)在生理和病理条件下均对海马LTP的维持起负向调节作用。

钾通道开放剂预处理对兔离体基底动脉缺氧-复氧损伤的保护作用

目的:观察ATP敏感性钾通道开放剂吡那地尔(pinacidil)和钙激活钾通道开放剂NS1619对基底动脉缺氧复氧(H/R)损伤的保护能力。方法:采用离体血管环灌流的方法,比较对照组、缺氧复氧组、吡那地尔预处理组和NS1619预处理组4组血管环对缩血管物质U46619(前列腺素A_2模拟物)及内皮依赖性扩血管物质乙酰胆碱(ACh)以及非内皮依赖性扩血管物质硝普钠(SNP)的反应。结果:①H/R组与对照组比较,兔基底动脉对U46619的反应明显增强,对SNP的反应未见差异,而对ACh的反应明显减弱;②经吡那地尔和NS1619分别预处理后,可以预防离休兔基底动脉在缺氧复氧后对ACh舒张作用的减弱和对U46619收缩反应的增强。结论:吡那地尔和NS1619分别预处理后可以保护基底动脉内皮细胞免受后继H/R的损伤。

ABCC9基因与神经精神疾病相关性的研究进展

多种神经精神疾病与钾离子通道改变相关。三磷酸腺苷结合盒C亚家族9成员(ABCC9)基因编码的磺酰脲2受体(SUR2)是三磷酸腺苷敏感的钾离子通道(KATP)通道的重要组分,调节KATP通道的活性,参与KATP通道将细胞代谢状态与膜兴奋性耦合,从而调节神经细胞兴奋性、神经发育、神经递质的释放、神经保护,影响神经精神疾病的发生和发展过程。

氢离子和磷酸肌醇混合物对心肌ATP敏感性钾通道的调节作用

目的心肌缺血早期,细胞内ATP浓度未明显降低的情况下KATP通道即可开放,机制不明。本实验采用豚鼠和克隆的心肌KATP通道(Kir6.2/SUR2a),探讨细胞内环境因素对KATP通道活性的影响。方法采用inside-out膜片钳记录法,细胞外、内钾离子浓度为4.0/140m M,钳压=0m V。结果在细胞内液PH值由7.25降至6.0后,克隆型KATP通道的电流强度由40.7流强度由胞外降至22.0流强度由胞外;大鼠KATP通道的电流强度由20.2流强度由胞外降至10.6流强度由胞外(P<0.01),单通道电流幅度由2.55p A降至1.97p A,Po从0.84降到0.38。在PH分别为7.25和6.0时,ATP 0.1m M对KATP通道的抑制率分别为48.2制率度)胞和10.8制率度)胞(P<0.05)。磷酸肌醇混合物(PPIs)(0.5mg/ml)使ATP对KATP通道的抑制率降低50%以上,使氢离子对KATP通道电流的抑制率从57%降至20%(P<0.01),PPIs可使开放几率显著增加,但对通道电流幅值影响不明显。结论氢离子通过直接抑制或降低KATP通道对ATP的敏感性对KATP通道起双重调节作用。PPIs降低KATP通道对ATP的敏感性,同时校正氢离子对KATP通道Po的抑制作用,对KATP通道起兴奋作用并部分拮抗氢离子抑制KATP通道的作用。本研究结论可能为缺氧早期时心肌KATP通道开放的调节机制之一。

无创肢体缺血预处理对兔缺血性心肌的影响

目的:通过观察不同组兔心肌中热休克蛋白(HSP70),环氧合酶(COX-2),一氧化氮合酶(iNOS),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),转录因子-κB(NF-κB)mRNA的表达以及超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的变化,探讨无创肢体缺血预处理对兔缺血性心肌的影响和可能机制。方法:实验分单纯缺血对照(Ctr),无创肢体缺血预处理(LIP)和LIP+K ATP抑制剂(LG)组。Ctr组不作特殊处理,先静脉注射垂体后叶素后,再静脉注射肾上腺素诱发心律失常;LIP组兔双后肢缺血5 min,再灌注5 min,重复4次建立无创肢体缺血预处理模型,余同Ctr组;LG组先静脉注射K ATP抑制剂(格列本脲),余处理同LIP组;实验结束后取心肌组织标本,生化法检测心肌组织中SOD活力,MDA,NO含量;RT-PCR法检测心肌组织中HSP70,COX-2,iNOS,TNF-α及NF-κB mRNA的表达。结果:与Ctr组相比,LIP组COX-2和iNOS表达增高,TNF-α与NF-κB表达明显降低,LG组HSP70表达明显降低;与LIP组相比,LG组HSP70和iNOS表达均明显降低,TNF-α和NF-κB表达明显增高。心肌组织中SOD活力LIP组较高,LG组与Ctr和LIP组无差异;MDA含量Ctr组高于LIP组和LG组;NO含量LIP组较高,LG组NO含量与Ctr组相比无差异。结论:LIP具有减轻缺血性心肌损伤的作用,K ATP是其发挥保护作用的重要途径。