三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2与痛风病关联的病理机制研究进展

痛风病是指与高尿酸血症、尿酸盐沉积(关节、肾脏)等尿酸代谢紊乱密切相关的进展性代谢疾病,根据其病理进展特点和临床表现,其病程可分为高尿酸血症阶段、尿酸盐沉积阶段、痛风性炎症阶段。三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)是高通量的尿酸转运体,既参与了机体尿酸外排的肠-肾途径,又与痛风性炎症密切相关。通过切入ABCG2,对痛风病病理机制研究进展进行综述,以期为临床痛风病的深入研究及防治提供新的见解。

miR-144-3p通过调控ABCG2信号通路对膀胱癌细胞的影响

目的探究miR-144-3p通过调控ATP结合转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)信号通路对膀胱癌细胞影响。方法选取2023年5月黑龙江省医院泌尿科实验室1株人膀胱癌T24细胞株为研究对象,细胞培养后接种6孔板中,将其随机分为A组、B组、C组,每组细胞均设置3个平行样本,每个样本细胞检测均设置3个复孔(每组共计12个样本量)。A组转染miR-144-3p模拟物,B组转染miR-144-3p抑制剂,C组转染无意义序列,另选正常膀胱上皮SV-HUC-1细胞株为D组,以实时定量联合酶链式反应(quantification real-time polymerase chian reaction,qRT-PCR)法检测4组细胞中miR-144-3p表达情况,以CCK-8法检测4组细胞增殖活力,以Transwell检测细胞迁移数量,检测ABCG2通路蛋白表达情况;以双荧光素酶报告基因实验预测miR-144-3p与ABCG2靶向结合关系。结果转染前,T24细胞中miR-144-3p表达水平较SV-HUC-1细胞低,ABCG2水平较SV-HUC-1细胞高,差异有统计学意义(t=8.145、13.928,P<0.05);转染48 h时,miR-144-3p水平由低至高依次为B组、C组、A组,差异有统计学意义(P<0.05),ABCG2表达水平由低至高依次为A组、C组、B组,差异有统计学意义(P<0.05);转染48 h后,细胞增殖能力(A值)由低至高依次为A组、C组、B组,细胞凋亡率由低至高依次为B组、C组、A组,细胞迁移能力(个数)由低至高依次为A组、C组、B组,ABCG2表达水平由低至高依次为A组、C组、B组,差异有统计学意义(P<0.05);经在线数据库TargetScan预测,测得ABCG23’UTR与miR-144-3p存在结合靶点;共转染48 h时检测,3’-UTR-WT miR-144-3p组荧光素酶活性较3’-UTR-Wut miR-144-3p组低,差异有统计学意义(P<0.05);3’-UTA-WT NC组、3’-UTR-Mut NC组荧光素酶活性相近,差异无统计学意义(P>0.05)。结论ABCG23’UTR与miR-144-3p存在结合靶点,miR-144-3p表达上调可抑制ABCG2表达,并抑制细胞迁移、增殖,促进细胞凋亡。

CD133、CD34、ABCG2蛋白表达对肺癌患者术后复发转移的预测价值

目的 探讨CD133、CD34、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)蛋白表达对肺癌患者术后复发转移的预测价值。方法 选取行肺癌根治术患者90例,根据术后随访期间是否发生复发转移分为复发组(n=34例)和未复发组(n=56例),收集各NSCLC患者的年龄、性别、病理分级等临床资料。实验室检测患者肺癌组织中CD133、CD34、ABCG2蛋白表达,比较不同组肺癌组织中CD133、CD34、ABCG2蛋白表达,并分析其对肺癌术后复发转移的预测价值。结果 复发组患者CD133、CD34、ABCG2蛋白阳性表达率均高于未复发组(P<0.05)。CD133、CD34、ABCG2蛋白表达与患者年龄、性别、吸烟史、病理类型、TNM分期、肿瘤直径无显著相关性(P>0.05),与细胞分化存在显著相关性(P<0.05)。根据受试者工作特征(ROC)曲线分析可知,CD133、CD34、ABCG2蛋白表达预测NSCLC患者术后复发转移的AUC分别为0.619、0.645、0.628(P<0.05),联合检测的AUC为0.733(P<0.05),高于CD133、CD34、ABCG2蛋白单独检测(P<0.05)。结论 CD133、CD34、ABCG2蛋白表达对肺癌患者术后复发转移均有一定的预测价值,且联合检测的预测价值更高。

ABCG2及microRNA基因多态性与鼻咽癌易感性的关系

目的:探讨ABCG2及microRNA基因多态性与鼻咽癌易感性的关系。方法:2019年01月至2023年01月间我院肿瘤科住院的102例鼻咽癌患者作为研究对象,通过收集相关临床资料、采集鼻咽癌患者及健康人外周血并进行ABCG2基因、hsa-miR-499及hsa-miR-608基因多态性分析。结果:miR499:rs3746444(T→C)和miR608:rs4919510(C→G)在研究组和对照组之间存在差异(P<0.05)。通过风险因素分析,证实以rs3746444TT对照,rs3746444C变异基因型(TC+CC)个体发生鼻咽癌的危险增加45%(OR=1.45,95%CI=1.05~1.78),携带miR608:rs4919510(C→G)GC+GG的基因发生鼻咽癌是携带CC基因的1.53倍,(OR=1.53,95%CI=1.02~2.26);总和分析ABCG2 G34A基因GA+AA在鼻咽癌组的分布频率为57.84%,与对照组相比(32.00%)明显增高(OR=1.20,95%CI:1.02~1.42)。如果等位基因由G突变为A,发病风险亦明显提高(OR=1.18,95%CI:1.03~1.35);ABCG2 C421A等位基因由C突变为A,鼻咽癌发病风险亦明显增高(OR=1.12,95%CI:1.02~1.29)。ABCG2 G34A、ABCG2 C421A使鼻咽癌发病风险明显增高;2年患者生存率91.18%(93/102),患者性别、年龄、分化程度、吸烟、饮酒、EBV病毒感染及家族遗传史无差异(P>0.05),与TNM分期、淋巴结转移、ABCG2 G34A、ABCG2 C421A、miR499:rs3746444(T→C)及miR608:rs4919510(C→G)存在差异(P<0.05);miR499+G34A+C421A+miR608对鼻咽癌诊断价值最高。结论:ABCG2、miR499及miR608多态性与鼻咽癌易感性相关,影响患者预后,对鼻咽癌有一定的诊断价值。

三磷酸腺苷结合盒家族G2基因多态性与创伤性脑损伤患者预后的相关性

【目的】探讨三磷酸腺苷结合盒家族G2(ABCG2)基因多态性与创伤性脑损伤(TBI)患者预后的相关性。【方法】选取2018年1月至2020年5月西安医学高等专科学校附属医院收治的123例TBI患者,根据预后情况将患者分为预后良好组(预后良好,n=99)和预后不良组(预后不良,n=24)。分析ABCG2基因多态性位点不同的等位基因与TBI患者预后的关系,分析影响TBI患者预后的因素。【结果】123例TBI患者中24例(19.51%)发生预后不良,其余99例(80.49%)预后良好。单因素分析显示,两组患者在年龄、入院时格拉斯哥昏迷评分(GCS评分)、合并脑挫伤、合并蛛网膜下腔出血、合并胸腹部损伤方面比较,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组中rs2032582基因G位点所占比例高于预后良好组(P<0.05)。Logistic回归分析显示,入院时GCS评分、rs2032582等位基因、年龄、合并脑挫伤、合并胸腹部损伤、合并蛛网膜下腔出血是影响TBI患者预后的独立影响因素(P<0.05)。【结论】ABCG2基因多态性与TBI患者预后相关,入院时GCS评分、rs2032582等位基因、年龄、合并脑挫伤、合并胸腹部损伤、合并蛛网膜下腔出血是影响TBI患者预后的独立影响因素。

苦参碱通过诱导NKG2D配体高表达增强NK细胞对ABCG2high耐药鼻咽癌细胞杀伤活性

目的探讨苦参碱提高ABCG2High[三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2]耐药鼻咽癌细胞对Allo-NK细胞杀伤敏感性的机制。方法利用免疫磁珠技术分离ABCG2HighCNE2/DDP细胞及Allo-NK细胞,流式细胞技术检测分离后细胞纯度及经苦参碱处理前后靶细胞NKG2D配体表达率,LDH释放测定法检测经苦参碱处理前后ABCG2HighCNE2/DDP细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性。结果ABCG2HighCNE2/DDP细胞分离后ABCG2表达率为(91.40±2.32)%,分选后NK细胞CD3-CD16+CD56+细胞的纯度达90%以上,经苦参碱处理之后靶细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3表达率,由药物处理之前的(2.92±0.33)%、(4.27±0.33)%、(5.80±0.62)%、(11.10±3.15)%、(7.75±1.14)%分别上升到(11.30±0.89)%、(14.29±2.61)%、(12.56±1.06)%、(43.24±4.43)%、(12.77±1.06)%。在效靶比为10:1、20:1,Allo-NK细胞对苦参碱处理前后ABCG2HighCNE2/DDP细胞的杀伤率分别为(15.32±1.34)%、(27.26±6.81)%及(28.53±1.37)%、(42.72±2.80)%。处理前后杀伤率有显著性差异(F=29.05,P=0.000)。结论苦参碱通过诱导肿瘤细胞高表达NKG2D配体(MICA/B、ULBP1-3),使肿瘤细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性增强。

苦参碱对高表达ABCG2人耐药鼻咽癌细胞NKG2D配体表达的诱导作用

目的：探讨苦参碱对高表达三磷酸腺苷（ATP）结合转运蛋白G超家族成员2（ABCG2）人耐药鼻咽癌细胞CNE2／DDP（简写作ABCG_2H^High CNE2／DDP）NKG2D配体表达的诱导作用及其对NK细胞杀伤敏感性的机制。方法：利用免疫磁珠技术分离ABCG_2^High CNE2／DDP细胞及NK细胞，流式细胞技术检测分离后细胞纯度及经苦参碱处理前后靶细胞NKG2D配体表达率，LDH释放测定法检测经苦参碱处理前后ABCG_2^High CNE2／DDP细胞对NK细胞的杀伤敏感性。结果：ABCG_2^High CNE2／DDP细胞分离后ABCG2表达率为（91．40±2．32）％，分选后NK细胞CD3^-CD16^＋CD56^＋细胞的纯度达90％以上，经苦参碱处理之后靶细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3表达率，由药物处理之前的（2．92±0．33）％、（4．27±0．33）％、（5．80±0．62）％、（11．10±3．15）％、（7．75±1．14）％分别上升到（11．30±0．89）％、（14．29±2．61）％、（12．56±1．06）％、（43．24±4．43）％、（12．77±1．06）％。在效靶比为10：1、20：1时，NK细胞对苦参碱处理前后ABCG^2^High CNE2／DDP细胞的杀伤率分别为（15.32±1．34）％、（27．26±6．81）％及（28．53±1．37）％、（42．72±2．80）％。处理前后杀伤率有显著性差异（F=29．05，P=0．000）。结论：苦参碱通过诱导肿瘤细胞高表达NKG2D配体（MICA/B、ULBP1-3），使肿瘤细胞对NK细胞的杀伤敏感性增强。

葛根素对人肾近曲小管上皮细胞ABCG2表达影响

目的探讨葛根素(Pur)对人肾近曲小管上皮细胞(HK2)内三磷酸腺苷结合盒转运体G2(ABCG2)基因与蛋白表达的影响,阐明葛根素治疗痛风的可能机制。方法体外培养HK2细胞,分为对照组与25、50、100、200 mg/L葛根素给药组。CCK-8法检测葛根素对HK2细胞的影响;检测ALP活性,观察HK2细胞内酶促反应状态;荧光定量PCR法、Western blotting法检测对照组与给药组HK2细胞内ABCG2基因蛋白表达。结果葛根素对HK2细胞有促进增殖作用(P<0.05);100 mg/L葛根素组ALP活性最佳(P<0.01)。荧光定量PCR和Western blotting法检测结果显示,葛根素组HK2细胞内ABCG2基因及蛋白表达明显高于对照组,其中100 mg/L葛根素组HK2细胞内ABCG2最为明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论葛根素能够增加HK2细胞内ABCG2基因蛋白的表达,这可能是葛根素调节痛风患者血尿酸水平的重要分子机制之一。

人大肠癌组织中ABCG2 mRNA的表达

目的:检测人大肠癌组织中耐药基因ABCG2mRNA的表达并探讨其与临床病理特征的关系。方法:采用RT-PCR方法检测102例大肠癌组织(男60例,女42例;≥60岁63例,<60岁39例;乳头状腺癌21例,管状腺癌48例,黏液腺癌13例,腺鳞癌20例;肿瘤直径≥5cm者58例,<5cm者44例;高分化23例,中分化49例,低分化30例;有淋巴结转移72例,无淋巴转移30例;Duke's分期:A期14例,B期20例,C期42例,D期26例)及15例正常大肠黏膜组织中ABCG2mRNA的表达。结果:大肠癌和正常黏膜组织中ABCG2mRNA的阳性表达率分别为58.8%和0(P<0.05)。大肠癌组织中ABCG2mRNA的阳性表达率与患者的性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移情况、Duke's分期等均无关(P均>0.05),与分化程度有关(P<0.05)。结论:ABCG2的表达可以作为判断大肠癌分化程度及预测化疗效果的指标之一。

苹果酸舒尼替尼诱导高表达三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2的耐药鼻咽癌细胞高表达NKG2D配体

目的:探讨苹果酸舒尼替尼(sunitinib malate,SU11248)对高表达三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member2,ABCG2)耐药鼻咽癌细胞CNE2/DDP(ABCG2highCNE2/DDP)表达NKG2D配体的诱导作用。方法:利用免疫磁珠技术分离ABCG2highCNE2/DDP细胞及同种异体反应性自然杀伤细胞(allo-reactive natural kill cell,Allo-NK),流式细胞技术检测分离后细胞的纯度及苹果酸舒尼替尼处理前后ABCG2highCNE2/DDP细胞NKG2D配体表达率,LDH释放测定法检测苹果酸舒尼替尼处理前后ABCG2highCNE2/DDP细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性。结果:ABCG2highCNE2/DDP细胞分离后ABCG2的表达率为(91.40±2.32)%,Allo-NK细胞分选后CD3-CD16+CD56+细胞的纯度达90%以上。经苹果酸舒尼替尼处理后,ABCG2highCNE2/DDP细胞的NKG2D配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3的表达率由药物处理之前的(2.92±0.33)%、(4.27±0.33)%、(5.80±0.62)%、(11.10±3.15)%、(7.75±1.14)%分别上升到(89.12±4.56)%、(66.10±2.22)%、(67.56±4.19)%、(69.37±8.83)%、(63.28±3.31)%。在效靶比为10∶1、20∶1时,苹果酸舒尼替尼处理前后Allo-NK细胞对ABCG2highCNE2/DDP细胞的杀伤率分别为(15.32±13.86)%、(27.26±6.81)%及(41.12±4.12)%、(57.25±2.37)%,处理后的杀伤率有明显的提高(F=15.58,P=0.000)。结论:苹果酸舒尼替尼通过诱导高表达NKG2D配体(MICA/B、ULBP1-3),使ABCG2highCNE2/DDP细胞对Allo-NK细胞的杀伤敏感性明显增强。

分子靶向药物诱导耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达

目的:探讨不同分子靶向药物对高表达与低表达ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette super-family Gmember 2,ABCG2)的人耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞(分别简写为ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP)表面NKG2D配体(natural killer group 2 member Dligands,NKG2DLs)表达的诱导作用及其对NK细胞杀伤敏感性的影响。方法:免疫磁珠法分选ABCG2highCNE2/DDP、ABCG2lowCNE2/DDP细胞及NK细胞。流式细胞术检测分选细胞的纯度和不同分子靶向药物(硼替佐米、索拉非尼、舒尼替尼)处理前后ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达率。LDH释放法检测不同药物处理前后ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性。结果:ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞表面ABCG2的表达率分别为(91.40±2.32)%和(1.70±0.24)%。分选后NK细胞中CD3-CD16+CD56+细胞的比例达90%以上。药物处理前,ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2和ULBP3呈弱表达;经不同分子靶向药物处理后,5种NKG2DLs的表达率均明显上升(P<0.01),以舒尼替尼处理后NKG2DLs的表达率升高最明显。随着NKG2DLs表达的上调,ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性也随之升高。结论:不同分子靶向药物可诱导耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达,以舒尼替尼的诱导作用最强,且肿瘤细胞NKG2DLs的表达与其对NK细胞杀伤敏感性之间存在线性关系。

上皮性卵巢癌中ALDH1和ABCG2的表达及其与微血管形成的关系

目的:本文旨在探讨上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)中乙醛脱氢酶1(ALDH1)、腺苷三磷酸结合盒转运体G2(ABCG2)蛋白表达及微血管密度(microvessel density,MVD)之间的关系。方法:收集198例EOC术后标本和60例卵巢良性上皮性肿瘤标本,应用免疫组织化学法检测EOC和卵巢良性上皮性肿瘤组织中ALDH1、ABCG2及CD105蛋白(微血管标志物)的表达情况。结果:在EOC和卵巢良性上皮性肿瘤组织中,ALDH1和ABCG2的阳性表达率分别为64.1%、61.6%和8.3%、6.7%;MVD分别为22.6±9.7和5.03±3.35,差异均有统计学显著性(P<0.05);ALDH1和ABCG2的表达与EOC的组织学分化、FIGO分期、腹腔器官及淋巴结转移有关(P<0.05),MVD与EOC的组织学分化、FIGO分期、腹腔器官及淋巴结转移和腹水形成有关(P<0.05);MVD分别与ALDH1和ABCG2的表达呈正相关(P<0.01),同时,ALDH1和ABCG2的表达亦呈正相关(P<0.01)。Kaplan-Meier生存分析表明,ALDH1和ABCG2的过表达以及MVD的增加均与患者的生存率有关,ALDH1和ABCG2表达阳性及MVD≥23的患者生存率明显低于ALDH1和ABCG2表达阴性及MVD<23的患者(P<0.05)。多因素分析显示FIGO分期、ALDH1表达、ABCG2表达和MVD是影响EOC根治术后患者预后的独立因素(P<0.05)。结论:EOC组织中ALDH1和ABCG2过表达以及MVD与肿瘤的分化程度、转移和预后等因素相关,这些指标的联合检测可能作为对EOC的进展及患者预后判断的重要指标。

ABCG2在人绒毛膜癌耐药细胞株中的表达研究

目的:研究多药耐药基因ABCG2在人绒毛膜癌亲本细胞株(JEG-3)及耐药细胞株(JEG-3/VP16)中的表达情况,探讨ABCG2在绒毛膜癌耐药性中所起的作用。方法:用逆转录聚合酶链式扩增反应(RT-PCR)检测ABCG2的mRNA表达,用蛋白质印迹法(Western blot)检测ABCG2的蛋白质水平的表达,并采用流式细胞技术测试出两种细胞株中ABCG2阳性细胞的比例。结果:RT-PCR和Western blot结果显示:在JEG-3细胞及JEG-3/VP16细胞中均可检测到ABCG2 mRNA和蛋白的表达,但JEG-3/VP16细胞中ABCG2 mRNA的表达(1.74±0.07)和蛋白的表达(1.13±0.09)水平要明显高于JEG-3细胞(0.86±0.06和0.64±0.05),差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞检测结果示:ABCG2在JEG-3/VP16细胞中的阳性表达率(50.66±3.82)%要明显高于在JEG-3细胞中的阳性表达率(14.78±1.02)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:ABCG2在耐药性人绒毛膜癌细胞株JEG-3/VP16中高表达,提示ABCG2可能参与了绒毛膜癌的耐药机制。

低强度超声逆转胶质瘤ABCG2表达的实验研究

目的探讨低强度超声对胶质瘤多药耐药蛋白三磷酸腺苷结合盒超家族G家族第2个成员(ABCG2)表达的影响。方法应用不同强度超声体外辐照胶质瘤(C6)细胞,MTT法检测C6细胞增殖活性,HE染色观察C6细胞形态。大鼠胶质瘤中,TUNEL法观察胶质瘤细胞的凋亡,免疫组化及Western blot法检测ABCG2蛋白在胶质瘤细胞内表达的变化。结果低强度超声辐照后,C6细胞的增殖活性显著降低(P<0.05)。大鼠胶质瘤内脑肿瘤组织小血管内红细胞渗出增加,胶质瘤细胞凋亡数显著增加(P<0.05),ABCG2蛋白在胶质瘤细胞内表达显著下调(P<0.05)。结论低强度超声通过降低C6细胞活性,诱导细胞凋亡和下调ABCG2表达,实现逆转多药耐药蛋白的表达。

P-gp和ABCG2在食管鳞状细胞癌中的表达及临床病理意义

目的:研究肿瘤耐药相关基因P-gp和ABCG2在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床病理特征和预后的关系.方法:应用免疫组织化学SP法检测食管鳞状细胞癌患者76例及正常食管黏膜30例,观察肿瘤耐药相关基因P-gp和ABCG2的表达,同时回顾性研究了这些表达与食管鳞状细胞癌发生、浸润及转移等临床病理学参数的关系.结果:(1)食管鳞状细胞癌组织中,P-gp和ABCG2的表达阳性率分别为88.16%和80.26%.30例食管正常黏膜中两者的表达率分别为60%和50%.差异均有统计学意义(P<0.05);(2)食管鳞状细胞癌组织中,P-gp在不同临床分期、不同浸润深度组之间阳性表达率的差异有统计学意义(P=0.002,0.035);(3)食管鳞状细胞癌组织中,ABCG2在不同临床分期、有或无淋巴结转移组之间阳性表达率的差异有统计学意义(P=0.006,0.034);(4)P-gp与ABCG2的表达呈正相关(r=0.228,P<0.05);(5)本组病例的5年总生存率为34.21%,单因素生存分析表明,P-gp阳性表达组的生存率显著低于阴性表达组,两组间生存率的差异有统计学意义(P<0.05).结论:P-gp和ABCG2在食管鳞癌的发生发展中可能起一定的作用.P-gp与食管鳞癌的预后密切相关.

IL-4对肺腺癌细胞株ABCG2表达调节的研究

目的:探讨IL-4是否影响肺腺癌细胞株ABCG2(ATP-binding cassette superfamily G member2)的表达。方法:应用半定量RT-PCR检测不同浓度IL-4刺激对肺腺癌细胞株A549和SPC-A-1中ABCG2基因表达的影响。以Western blot检测不同浓度IL-4对A549和SPC-A-1肺腺癌细胞株中AB-CG2蛋白表达的影响。结果:在不同浓度IL-4刺激下肺腺癌细胞株A549和SPC-A-1中ABCG2基因与蛋白的表达无统计学意义(P>0.05)。结论:ABCG2在腺癌细胞株A549和SPC-A-1中表达,但IL-4对细胞株中ABCG2的表达不具有调节作用。

水牛ABCG2基因第9外显子群体遗传特征分析

三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)对普通奶牛泌乳性状有直接影响。水牛中该基因的遗传特征与产奶性状间是否有遗传关联目前还不十分清楚。本文采用PCR-SSCP和PCR产物直接测序相结合的技术,对4个河流型水牛群体和9个沼泽型水牛群体共计466个个体的ABCG2基因第9外显子进行了变异检测。结果表明,水牛ABCG2基因第9外显子由251个核苷酸组成,所有的河流型和沼泽型水牛序列相同,未发现SNP位点,但在第9内含子内检测到1个T>C替换(g.SNP44769 T>C)。与GenBank数据库中已发表的牛科物种同源序列比对后发现,数据库中一条河流型水牛序列该外显子第66位核苷酸处有1个G>A替换(c.SNP1018 G>A),导致所编码的氨基酸发生p.V340I的改变;与普通牛、山羊和绵羊该基因第9外显子序列的核苷酸差异位点个数分别为5,8和11个,表明水牛与其他牛科物种间具有较大的遗传差异。本文结果提示ABCG2基因第9外显子在水牛中已纯化固定,且与水牛产奶量性状间无直接关联性。

胶质瘤与恶性脑膜瘤患者肿瘤组织ABCG2、IGFBP-2表达及预后的关系分析

目的探讨胶质瘤与恶性脑膜瘤患者肿瘤组织三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)、胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)表达及预后的关系。方法选取资阳市第一人民医院确诊胶质瘤患者96例和恶性脑膜瘤患者38例,采用免疫组化法检测患者肿瘤组织中ABCG2、IGFBP-2阳性细胞的表达,计算其阳性细胞百分率并划分阳性等级,并对比两组ABCG2、IGFBP-2表达差异及与预后死亡和复发的关系。结果胶质瘤组肿瘤组织ABCG2、IGFBP-2总阳性率与恶性脑膜瘤组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。胶质瘤组随访中复发率和病死率与恶性脑膜瘤组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。生存分析曲线结果显示,ABCG2、IGFBP-2高表达组出现不良事件(死亡、神经功能中度缺损)时间提前于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论随着胶质瘤、恶性脑膜瘤患者肿瘤组织ABCG2、IGFBP-2阳性细胞百分率等级的升高,其预后的复发率与病死率也逐级升高。

三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2特异性人源肺癌噬菌体单链抗体的筛选和鉴定

目的通过噬菌体展示库技术构建人肺癌单链抗体库,并筛选出抗多药耐药蛋白ABCG2的特异性单链抗体。方法取肺腺癌患者癌旁阳性淋巴结提RNA,PCR扩增重链和轻链可变区基因VH、VL,SOE-PCR扩增单链抗体可变区基因sc Fv,克隆入噬菌体表达载体p CANTAB5E,制备初级抗体库。以A549细胞及ABCG2蛋白对抗体库进行6轮淘选。Western blot检测单链抗体的可溶性表达和对ABCG2蛋白表达的影响,ELISA和ICC鉴定其特异性,CCK-8检测其顺铂增敏作用。结果成功筛选出抗ABCG2人源肺腺癌噬菌体单链抗体。Western blot证实其可溶性表达,大小约为34×103且可明显下调ABCG2蛋白的表达。ELISA和ICC检测到该抗体对ABCG2抗原的识别率高达75%,并与A549细胞具有结合特异性。CCK8结果则显示该sc Fv可增加A549细胞对顺铂的敏感性,明显减小其IC50值。结论成功构建了人源肺腺癌噬菌体单链抗体库,并筛选出了能与ABCG2蛋白特异性结合的单链抗体,为后续体内可视化研究和靶向ABCG2+的肺癌干样细胞奠定基础。

利多卡因下调ABCG2抑制人乳腺癌细胞的活性和耐药性

目的探究利多卡因体外下调ATP结合转运蛋白G家族成员2(ATP binding cassette transporter G family member 2,ABCG2)抑制人乳腺癌细胞的活性及顺铂耐药性的可能机制。方法选取MDA-MB-231、MCF-7细胞,使用CCK-8、EdU、TUNEL法染色验证利多卡因对细胞增殖活性、顺铂干预增敏作用,RT-PCR和Western印迹法检测利多卡因对ABCG2以及凋亡蛋白、耐药蛋白表达及PI3K/Akt蛋白磷酸化的影响;CCK-8法、TUNEL法验证过表达ABCG2对利多卡因联合顺铂干预乳腺癌细胞系增殖活性、凋亡率。结果0.5 mmol/L干预时乳细胞存活率及EdU阳性细胞数显著降低(P<0.05);与对照组相比,利多卡因组和顺铂组细胞存活率、Bcl-2表达显著降低,细胞凋亡率、Cleaved-PARP、Cleaved-caspase-3、Bax表达量显著升高,联合处理后变化更显著(P<0.05);利多卡因处理后,癌细胞系中ABCG2 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05);与对照组比较,顺铂+利多卡因组ABCG2、P-gp、MRP1、MRP2蛋白表达显著降低(P<0.05);与顺铂组比较,利多卡因组细胞存活率、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT表达显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05);与空质粒组比较,ABCG2过表达组细胞存活率、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT表达显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。结论利多卡因可能通过抑制ABCG2表达及PI3K/AKT信号通路的激活抑制乳腺癌细胞增殖活性及提高对顺铂敏感性。