刺五加及其复方防治帕金森病研究进展

帕金森病是中老年人常见的中枢神经系统慢性进展性疾病,发病机制复杂,致残率高,西医临床主要采用左旋多巴与卡比多巴复合使用,但长期用药会引起多种不良反应,患者无法被完全治愈。中医认为肝肾不足是引起帕金森病(parkinson’s disease,PD)的主要病机所在,刺五加作为传统中药,具有补肝肾、坚筋骨、强志意的作用,近年来,越来越多研究发现中药刺五加在帕金森病的治疗方面具有显著的临床价值。刺五加中所含的皂苷类、香豆素类、黄酮类等成分可通过保护多巴胺能神经元、抗氧化应激、保护线粒体、抗炎症反应、抑制神经元免疫、抑制富亮氨酸重复激酶2(leucine-rich repeat kinase 2,LRRK2)蛋白表达等多通路、多途径来防治帕金森病。该文通过检索国内外相关文献,对刺五加及其复方防治帕金森病的药理作用及作用机制进行归纳梳理,旨在为刺五加治疗帕金森病的进一步开发利用提供参考。

超声法与闪式提取法提取刺五加中刺五加苷B的工艺对比研究

本试验采用正交试验优化超声法和闪式提取法提取刺五加中刺五加苷B的提取工艺,并对两种提取方法的最佳工艺进行对比研究。以刺五加苷B的提取率为评价指标,设计L_(9)(3^(4))超声法和闪式提取法的正交试验,以高效液相色谱法测定刺五加苷B的含量。结果显示:超声法提取率高于闪式提取法,最佳提取工艺为提取溶剂30%乙醇,超声功率200 W,提取时间0.75 h,料液比1:5(g/mL)。本研究可为刺五加在饲料领域的开发和利用提供参考。

超快速液相色谱法同时测定刺五加中刺五加苷B和刺五加苷E的含量

目的建立一种同时测定刺五加中刺五加苷B和刺五加苷E含量的超快速液相色谱法。方法采用Shim-Pack XR-ODS柱(75 mm×3.0 mm,2.2μm);H_(2)O(A)-CH3OH(B)为流动相,梯度洗脱(0~1 min,10%B→35%B;1~5 min,35%B→50%B;5~8 min,50%B→60%B);流速:0.4 mL·min^(-1);柱温:30°C;进样量:5μL;平衡时间:5 min;检测波长:215 nm。结果刺五加苷B和刺五加苷E分别在10~400μg·mL^(-1)(r=0.9990)和5~200μg·mL^(-1)(r=0.9991)质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=9)分别为98.9%和98.2%;6批样品中刺五加苷B与刺五加苷E的含量范围分别为0.130%~0.145%和0.0708%~0.0776%。结论与《中国药典》方法比较,该方法稳定性和专属性好,分析时间短,可用于刺五加药材的质量控制研究。

超声法与闪式提取法提取刺五加中绿原酸的工艺对比研究

刺五加中绿原酸含量较高,具有潜在利用价值。本研究采用正交试验的方式比较两种方法(超声法和闪式提取法)提取绿原酸的提取效率。采用L_(9)(3^(4))分别设计超声法和闪式提取法的正交试验,建立高效液相色谱法测定刺五加中绿原酸的含量,以绿原酸的提取率作为评价指标。结果显示:超声法提取优于闪式提取法,最佳提取工艺为提取溶剂50%乙醇,提取时间1 h,料液比1∶5(g/mL),超声功率250 W。该研究确定的提取方法和提取工艺可为刺五加在饲料领域的开发和利用提供参考。

一种新型微波辅助萃取法用于中药刺五加中总黄酮萃取的研究

In this study a novel microwave-assisted extraction(MAE) device was presented. In this newly developed system, a 3/4 wavelength microwave resonance cavity was used as the microwave coupling device for replacing a traditional microwave oven. This device is used to extract flavonoids from Radix et caulis acanthopanacis senticosi. The effects of solvent concentration, microwave forward power and solvent uptake rate on the extraction yield of flavonoids were investigated by using orthogonal experimental design. The results show that the effects of the solvent(ethanol) concentration and solvent uptake rate on the extraction yield of flavonoids are very significant, the effect of the interaction of solvent concentration and solvent uptake rate is significant and the effects of the other factors are general. Under the optimal conditions of MAE the extraction yield of flavonoids by this system is 46% higher than that by Soxhlet method. The RSD of the method was lower than 6%.

壳聚糖絮凝法处理刺五加提取液的研究

目的 :采用絮凝剂壳聚糖用于刺五加浸提液的澄清。方法 :对絮凝条件进行了优化 ,并同醇沉的效果做了比较 ,做了经济核算。结果 :最佳的絮凝条件 :壳聚糖加入量为 2 8.6mL/L ,温度为 3 0°C ,pH为 5 .3 6。结论 :壳聚糖絮凝法不仅澄清效果很好 ,而且经济实用 ,可代替醇沉法用于刺五加提取液的澄清。

刺五加注射液对氧自由基损伤猪离体冠状血管舒张功能的保护作用

目的 :研究刺五加注射液对外源性氧自由基 (OFR)所致猪冠状动脉内皮损伤的保护作用。方法 :以内皮依赖性舒血管物质———P物质 (SP)为诱导剂 ,观察猪冠状动脉环暴露于OFR发生系统 (H2 O2 /FeSO4 和Xan/XO)后动脉环对SP诱导的舒张反应 ,以及刺五加注射液对上述舒张反应的影响 ,并以OFR清除剂过氧化氢酶 (CAT)作对照。结果 :冠状动脉环暴露于H2 O2 (0 .8mmol/L) /FeSO4 (0 .2mmol/L)系统 30min后 ,SP诱导的内皮依赖性舒张反应显著减弱 ,刺五加能浓度依赖性地改善冠状血管舒张功能 ;刺五加 10mg/ml时与CAT组比较差异无显著性 ;刺五加 (10mg/ml)和CAT(2 5mg/L)均能对抗Xan(4 .2× 10 -4 mmol/L) /XO(0 .0 2 5u/ml)系统对冠状血管的损伤。结论 :刺五加注射液能使冠状血管内皮免受氧自由基损伤 ,保护冠状血管的舒张功能。

HPLC法测定刺五加、五加皮与红毛五加皮中3种成分的含量

目的建立刺五加、五加皮、红毛五加皮中原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸的质量分数测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Kromasil C18色谱柱;流动相为乙腈-0.1%（体积分数）H3PO4溶液,梯度洗脱;检测波长为270 nm;流速为1.0 m L/min;柱温为30℃。结果刺五加中原儿茶酸、紫丁香苷、绿原酸达到基线分离,线性关系良好（r≥0.999 9）,平均加样回收率分别为98.7%、99.7%、101.0%,RSD均小于3.0%（n=6）。刺五加、五加皮、红毛五加皮中原儿茶酸质量分数分别为0.022 5~0.028 7、0.076 3~0.132、0.013 8~0.071 2 mg/g;紫丁香苷质量分数分别为0.445~0.616、0.023 8~0.025 9、0.037 3~0.069 3 mg/g;绿原酸质量分数分别为1.834~2.169、0.659~0.713、0.372~0.709 mg/g。刺五加中紫丁香苷、绿原酸质量分数最高,其中紫丁香苷约为五加皮、红毛五加皮中质量分数的7~25倍,绿原酸约为五加皮、红毛五加皮中质量分数的3~5倍;而原儿茶酸在五加皮中质量分数最高,其次为红毛五加皮、刺五加。结论该方法灵敏、可靠,可用于刺五加、五加皮和红毛五加皮类药材质量控制的参考。

刺五加调控p38MAPK信号通路对顺铂所致小鼠耳毒性的防护作用

目的:探讨刺五加对顺铂所致小鼠耳毒性的防护作用及对p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路的调控作用。方法:将BALB/c小鼠根据随机数字表法随机分为空白组、模型组和实验组,每组15只。除空白组小鼠外,其余3组小鼠均腹腔注射顺铂4 mg/kg,同时实验组预先给予腹腔注射刺五加4 mL/kg,空白组给予等量生理盐水干预,3组小鼠干预5 d后进行指标的检测及评价。检测3组小鼠听性脑干反应(ABR)阈值及耳蜗组织细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法检测3组小鼠耳蜗组织细胞p38MAPK信号通路相关蛋白表达情况。结果:与空白组比较,模型组8 Hz、12 Hz、24 Hz小鼠ABR阈移升高,差异有统计学意义(P<0.05),与模型组比较,实验组ABR阈移降低,差异有统计学意义(P<0.05)。空白组、模型组和实验组小鼠螺旋神经节细胞凋亡指数(AI)分别为(2.33±0.54),(19.76±0.84),(6.97±0.77),蛋白免疫印迹法检测显示,空白组、模型组及实验组螺旋神经节p-p38MAPK蛋白相对表达分别为(0.22±0.03)、(0.93±0.02)、(0.64±0.04);磷酸化环磷腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)相对表达分别为(0.19±0.04)、(0.84±0.05)、(0.43±0.02),与模型组比较,空白组和实验组AI及螺旋神经节p-p38MAPK、p-CREB蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:刺五加可对顺铂所致小鼠耳毒性起到保护作用,其机制与调控p38MAPK信号通路蛋白表达抑制耳蜗细胞凋亡程序的发生有关。

刺五加不同药用部位中槲皮素鼠李糖苷的含量比较

[目的]测定刺五加不同药用部位中槲皮素鼠李糖苷含量,并对结果进行比较,为刺五加合理利用及质量评价提供科学依据。[方法]采用高效液相色谱法测定刺五加的根、茎、叶、花和果中槲皮素鼠李糖苷含量。色谱条件为:大连江申Nucleosil C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为无水甲醇-水(40∶60,V/V),流速为1.1 ml/min,检测波长为370 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。[结果]刺五加各药用部位中槲皮素鼠李糖苷的含量大小顺序为花蕾>叶>果>茎>根。其中,花蕾中槲皮素鼠李糖苷含量最高,为4.43%;其次为叶(0.61%);根中的最低,为0.01%。[结论]该方法操作简便、快速、准确,可用于刺五加不同部位中的槲皮素鼠李糖苷的含量比较。

刺五加HPLC数字化指纹图谱研究

目的:建立刺五加HPLC数字化指纹图谱。方法:采用反相高效液相色谱法,使用Century SIL BDS(20 cm×4.6mm,5μm)柱,以1%醋酸水-1%醋酸乙腈为流动相,线性梯度洗脱,流速1.0 mL/mL,检测波长265 nm,柱温(30.0±0.15)℃,进样量10μL。以定性、定量相似度和色谱指纹图谱指数等数字化指标评价药材质量。结果:以绿原酸峰为参照物峰,确定31个共有指纹峰,建立了刺五加HPLC数字化指纹图谱。应用色谱指纹图谱指数F和相对指数Fr参数对不同产地刺五加HPLC指纹图谱的超信息特征进行了数字化评价。结论:所建立的HPLC指纹图谱具有较好的精密度和重现性,适用于刺五加药材的质量控制。

藿香正气口服液合用刺五加片缓解海洛因成瘾戒断症状的疗效观察

目的 :观察藿香正气口服液 (藿香、白芷、苍术、生半夏、陈皮、大腹皮 )合用刺五加片对海洛因依赖脱毒后稽延性戒断症状的治疗作用。方法 :将 14 3例吸毒者随机分成 3组 (对照组 4 4例 ,治疗组A4 8例 ,治疗组B5 1例 )。三组均采用盐酸洛啡西定 (LFX)脱毒治疗 12d ,脱毒后对照组服模拟制剂 ,治疗组A脱毒后服用藿香正气口服液和刺五加片 6 0d ,治疗组B从服用LFX脱毒开始即服用藿香正气口服液和刺五加片。两治疗组停用藿香正气口服液和刺五加片 10d后 ,分别观察 1周内 3组相关稽延性戒断症状并评分 ,1年后尿检调查复吸情况。结果 :3组戒断症状评分 ,治疗组B低于治疗组A(P <0 .0 1) ,治疗组A低于对照组 (P <0 .0 1)。 1年后复吸率治疗组B明显低于对照组 (P <0 .0 5 )。治疗组B低于治疗组A(P <0 .0 5 )。结论 :提示藿香正气口服液合用刺五加片能缓解早期戒断症状和中期稽延性戒断症状 ,有降低 1年复吸率的趋势。

野生与栽培刺五加叶的质量评价

目的:对野生与栽培刺五加叶的质量进行评价。方法:以总皂苷为指标,用比色法对野生和栽培刺五加叶中皂苷的含量进行测定。结果:野生刺五加叶中皂苷的含量显著高于栽培刺五加叶。结论:说明刺五加叶的质量与其生态环境有密切关系,为刺五加的开发利用提供了科学依据。

郑邦本常用对药举隅

郑邦本老师常用黄芪60 g配伍益母草15～30 g治疗肾病综合征、肾炎综合征、慢性肾炎、糖尿病肾病;灵芝30 g配刺五加15 g对脾肾阳虚,体虚乏力,食欲不振,腰膝酸痛,失眠多梦等证尤为有效,常用于疲劳综合征、神经衰弱的治疗;苏子10 g配地龙10 g降气止咳平喘,常用于支气管哮喘、喘息性支气管炎的治疗;木香10 g配伍槟榔10 g行气宽肠,治疗腹胀、肛门坠胀疗效显著;益母草15～30 g配生山楂30 g活血通经,治疗月经量少、痛经、不孕症等;半枝莲30 g与垂盆草30 g清热利湿退黄,退黄与降酶并举,常用于治疗肝功能异常湿热证;血肉有情之品鹿角胶10 g配伍骨碎补15 g补肾强筋骨,用于骨质疏松、骨折术后愈合不佳、脑萎缩等病;穿山甲5～10 g配鹿角片5～10 g治疗乳腺增生、输卵管不通疗效显著;怀牛膝15 g配刘寄奴30 g治疗血瘀阻络引起的关节疼痛,用于风湿性关节炎、膝骨性关节炎、骨关节损伤疾病。上述对药为郑老师经过长期临床验证,效如桴鼓,具有可重复性,如能在辨证基础上正确运用,常能收到良好效果。

微波辅助萃取葛根和刺五加微观机制的研究

目的 研究微波辅助萃取葛根和刺五加的微观机制。方法 通过透射电子显微镜对葛根和刺五加药材细胞内液泡膜的变化进行观察。结果 微波辅助萃取与传统提取对液泡膜的影响是不同的。结论 微波辅助萃取工艺较传统提取工艺更易使细胞内的有效物质溶出。

刺五加多糖镇痛抗炎作用及其免疫调节机制的研究

目的探讨刺五加多糖的镇痛抗炎作用及其免疫调节机制。方法①将60只SPF级昆明种小鼠随机分为正常组、对照组、阳性对照组、刺五加多糖高剂量组(ASPS200)、刺五加多糖中剂量组(ASPS100)、刺五加多糖低剂量组(ASPS50)。除正常组(10只)外,其余50只小鼠采用热板法或醋酸扭体法建立镇痛模型,各组进行相应干预,测定各组小鼠镇痛率、扭体反应抑制率、脾脏指数、胸腺指数及血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的水平。②将60只SPF级昆明种小鼠随机分为正常组、对照组、阳性对照组、刺五加多糖高剂量组(ASPS200)、刺五加多糖中剂量组(ASPS100)、刺五加多糖低剂量组(ASPS50)。除正常组(10只)外,其余50只小鼠采用鸡蛋清致小鼠足趾肿胀或醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加建立炎症模型,各组进行相应干预,测定足趾肿胀抑制率、腹腔毛细血管通透性提高抑制率、脾脏指数、胸腺指数及血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的水平。结果①与对照组比较,阳性对照组和刺五加多糖高剂量组小鼠痛阈值延长(P<0.05),扭体抑制率提高(P<0.05),小鼠血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的水平不同程度下降(P<0.05);刺五加多糖各剂量组小鼠脾脏指数和胸腺指数不同程度高于对照组(P<0.05);刺五加多糖各剂量组小鼠脾脏指数、胸腺指数、血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的水平不同程度高于阳性对照组(P<0.05)。②与对照组比较,阳性对照组和刺五加多糖高剂量组小鼠足趾肿胀抑制率和腹腔毛细血管通透性提高的抑制率升高(P<0.05),小鼠血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的水平不同程度下降(P<0.05);刺五加多糖各剂量组小鼠脾脏指数和胸腺指数不同程度高于对照组(P<0.05)。刺五加多糖各剂量组小鼠脾脏指数、胸腺指数、血清中细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的水平不同程度高于阳性对照组(P<0.05)。结论刺五加多糖可改善小鼠镇痛抗炎模型状况,其作用机制可能是改善免疫器官指数,调节相关免疫细胞因子水平。

反相高效液相色谱法测定恩施不同产地刺五加中紫丁香苷和异嗪皮啶含量

目的考察恩施不同产地刺五加中紫丁香苷和异嗪皮啶的含量,为恩施地区刺五加的开发和利用提供依据。方法采用InertsustainC18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水(25∶75),流速1.0mL/min,柱温30℃,进样量10μL,检测波长分别为266、344nm。结果紫丁香苷和异嗪皮啶分别在2.5~100μg/mL、5~500μg/mL范围内呈良好的线性关系,精密度、稳定性、重复性试验RSD<2.30%,紫丁香苷、异嗪皮啶的加样回收率分别为100.60%、97.77%,RSD分别为1.82%、2.50%。宣恩县椿木营、利川市南坪镇、建始县官店镇、建始县高坪镇、恩施市红土乡、鹤峰县燕子乡所产的刺五加中紫丁香苷平均含量分别为0.191%、0.225%、0.224%、0.278%、0.289%、0.239%,异嗪皮啶平均含量分别为0.018%、0.016%、0.016%、0.020%、0.009%、0.013%。结论恩施地区所产刺五加中紫丁香苷含量较高,可作为紫丁香苷的重要来源。

解郁颗粒质量标准的研究

目的:提高解郁颗粒的质量标准。方法:采用薄层色谱法对解郁颗粒中的刺五加、丹参、当归、白芍进行定性鉴别。结果:薄层色谱图斑点清晰,阴性对照无干扰。结论:方法简便可行,结果准确可靠,重现性好,可作为本制剂的质量控制方法。

HPLC法测定短柄五加根和茎中刺五加苷E含量

[目的]建立测定不同产地短柄五加根、茎中刺五加苷E含量的HPLC方法。[方法]采用Agilent TC-C_(18)(2)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸(16∶84)为流动相;流速1 mL/min;检测波长220 nm,进样体积为10μL,柱温30℃。[结果]刺五加苷E在8.0~160.6μg/mL与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9996),平均加样回收率为98.62%,RSD为0.50%。[结论]该方法操作简便、稳定可靠,适用于短柄五加根、茎中刺五加苷E含量的测定,可作为倒卵叶五加药材的质量控制指标。

三黄颗粒质量标准的研究

目的:提高三黄颗粒的质量标准。方法:采用薄层色谱法对三黄颗粒中的黄芪、黄芩、黄连进行定性鉴别。结果:薄层色谱图斑点清晰,阴性对照无干扰。结论:方法简便可行,结果准确可靠,重现性好,可作为该制剂的质量控制方法。