怀牛膝总皂苷对大鼠血管平滑肌细胞内bFGF和ICAM-1表达的影响

目的:探讨怀牛膝总皂苷(ABS)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)内细胞因子的影响,阐明其抗动脉粥样硬化的机制。方法:采用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导平滑肌细胞增殖的方法,以GAPDH作内标,RT-PCR检测相关细胞因子的表达量,评价ABS对细胞内碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和细胞间黏附分子(ICAM-1)mRNA表达量的影响。结果:ox-LDL浓度为30 mg/L促进VSMC增殖最强;ABS(50、100、150mg/L)显著抑制ox-LDL诱导VSMC内bFGF、ICAM-1基因表达,作用呈浓度依赖性。结论:ABS能抑制在ox-LDL作用下VSMC内细胞因子的表达,说明其具有抗动脉粥样硬化的作用。

牛膝多糖对断奶仔猪抗菌肽Protegrin-1 mRNA表达的影响

本文旨在探讨牛膝多糖(ABPS)对断奶仔猪抗菌肽Protegrin-1(PG-1)mRNA表达的影响。试验采用单因子设计,按照日粮处理因素不同,设对照组、抗生素组、0.05%、0.10%和0.15%牛膝多糖组,共5个处理。选用28日龄杜长大仔猪160头,随机分入5个处理,每个处理4个重复,每个重复8头猪(公母各半)。采用半定量RT-PCR法,以18SrRNA为内标,检测PG-1mRNA相对表达量。结果表明:日粮中添加牛膝多糖均不同程度地促进断奶仔猪骨髓抗菌肽PG-1mRNA的表达。与对照组相比,0.05%、0.10%和0.15%牛膝多糖组分别使断奶仔猪PG-1mRNA的相对表达量增加14.9%(P>0.05)、36.4%(P<0.05)和7.3%(P<0.05);与抗生素组相比,其PG-1mRNA的相对表达量分别增加7.8%(P>0.05)、27.9%(P>0.05)和19.4%(P>0.05)。即牛膝多糖能显著促进断奶仔猪骨髓抗菌肽PG-1mRNA表达,且日粮中以0.10%添加量为适宜。

HPLC法同时测定牛膝中β-蜕皮甾酮和竹节参皂苷-1

目的建立同时测定牛膝中β-蜕皮甾酮和竹节参皂苷-1的高效液相色谱法。方法 Waters SunFire C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃,最大吸收波长下检测(β-蜕皮甾酮为250 nm,竹节参皂苷-1为240 nm)。结果β-蜕皮甾酮在0.515～1.545μg,竹节参皂苷-1在4.965～14.895μg范围内,呈良好的线性关系,相关系数分别为0.999 8、0.999 9;β-蜕皮甾酮和竹节参皂苷-1平均回收率分别为99.17%(RSD为1.44%)和98.70%(RSD为1.03%)。结论该方法简便、准确、重复性好,可用于牛膝的质量控制。

当归-川牛膝水煎剂对自发性高血压大鼠血清ET-1、NO表达的影响

目的观察当归-川牛膝水煎剂对自发性高血压大鼠(Spontaneous Hypertension Rat,SHR)血压、血清中内皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)表达的变化。方法 6周龄48只雄性SHR随机分为8组,分别是模型对照组、缬沙坦组、当归-川牛膝组和分离组(水、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇和90%乙醇),每组6只,并将同周龄的WKY大鼠作为正常对照组,各给药组以灌胃方式给药,模型组和正常对照组给生理盐水,连续治疗4周。Elisa法检测血清中内皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)表达水平。结果模型组ET-1水平明显高于正常对照组,NO水平明显低于正常对照组,差异均具有统计学意义(P <0.05);缬沙坦组、当归-川牛膝组、30%醇洗组ET-1水平明显低于模型组,NO水平明显高于模型组,差异均具有统计学意义(P <0.05)。结论当归-川牛膝水煎剂及其提取物能有效降低SHR血清中ET-1水平,增加NO浓度,抑制血压升高。

中药牛膝中的植物甾酮类成分

目的对牛膝(Achyranthes bidentataBl.)中的植物甾酮类成分进行分离、鉴定。方法采用各种色谱分离手段,利用理化性质及NMR、MS等波谱技术对化合物进行结构鉴定。结果得到5个化合物,分别鉴定为漏芦甾酮B(rhapontisterone B,1)、旌节花甾酮D(stachysterone D,2)、红苋甾酮(rubrosterone,3)、β谷甾醇(βsitosterol,4)和胡萝卜苷(daucosterol,5)。结论化合物1、2为首次从牛膝中分离得到。

牛膝多糖抑制沙门氏菌侵染猪小肠上皮细胞的研究

本试验以猪小肠上皮细胞(IPEC-1)为模型,探讨牛膝多糖(ABPS)对IPEC-1增殖、紧密连接相关蛋白mRNA表达和沙门氏菌侵染的影响。在IPEC-1细胞培养基中分别加入相应剂量的ABPS,使培养基中ABPS终浓度分别为0(对照)、50、100、200、400μg/mL。分别采用噻唑蓝(MTT)法、实时荧光定量PCR法和平板细菌计数法检测ABPS对IPEC-1的影响。结果表明:1)与对照组相比,ABPS对IEPC-1增殖无显著影响(P>0.05)。2) ABPS处理能显著抑制沙门氏菌的侵染,随着ABPS浓度的增加,其抑制效果先增加后减少,浓度为50μg/mL时抑制效果达到峰值,其细胞被侵染的沙门氏菌数量极显著低于对照组和200、400μg/mL ABPS组(P<0.01)。3)与对照组相比,50、200μg/mL ABPS均极显著上调IEPC-1紧密连接相关蛋白[Ras相关的C3肉毒素底物1(RAC1)、细胞质密闭小带-1(ZO-1)、闭锁蛋白(occludin)、闭合蛋白-1(claudin-1)]mRNA的相对表达量(P<0.01)。由此可知,适量的ABPS能够通过上调IEPC-1紧密连接相关蛋白mRNA表达,从而增强小肠黏膜的屏障功能,抑制沙门氏菌的侵染。

怀牛膝对未孕大鼠子宫平滑肌峰电活动兴奋机制的研究Ⅰ

目的 探讨怀牛膝兴奋大鼠子宫平滑肌峰电活动的作用途径。方法 在 5 0只Wistar雌性未孕大鼠子宫角浆膜面上沿子宫纵轴埋植一对Ag—AgCl双极电极 ,腹腔注射酚妥拉明、苯海拉明后 ,观察注射怀牛膝 0 .6ml对未孕大鼠子宫平滑肌峰电活动的影响。结果 1 .酚妥拉明阻断肾上腺素能α受体后 ,腹腔注射怀牛膝水煎剂 ,单波的正波最大振幅等三项指标明显增加 (P <0 .0 5 ) ;部分爆发波的持续时间延长 ,动作电位个数增加 (P <0 .0 5 ) ,而爆发波的最大振幅和峰面积无明显变化 (P >0 .0 5 )。 2 .苯海拉明阻断组胺H1 受体后 ,腹腔注射怀牛膝水煎剂 ,爆发波的最大振幅和峰面积显著增加 (P <0 0 5 ) ,爆发波的持续时间和动作电位个数无明显变化 (P >0 .0 5 ) ;单波的正波最大振幅等三项指标均明显增加 (P <0 .0 5 )。结论 怀牛膝的兴奋作用部分通过子宫平滑肌细胞膜上的肾上腺素能α受体、组胺H1