Ad LacZ对肿瘤感染效率的实验研究

基于腺病毒的靶向基因治疗是肿瘤生物治疗方式之一.为了更好的了解腺病毒靶向药物在裸鼠实体瘤中的运作效果,本研究中利用重组腺病毒报告载体Ad LacZ分别转染人肿瘤细胞系和裸鼠实体瘤,结合X-gal染色和组织切片的方法观察腺病毒载体在实体瘤原位转染后的运作模式,为实体瘤实验提供更多的经验借鉴和实验基础.

重组反义c-myc腺病毒诱导HL-60细胞分化的作用

目的 研究重组反义c myc腺病毒 (Ad AS c myc)对人急性早幼粒HL 60细胞系的诱导分化作用及分子机制 ,探讨Ad AS c myc用于急性早幼粒白血病基因治疗的可能性。方法 采用重组腺病毒Lac Z(Ad LacZ)及Ad AS c myc联合多聚阳离子转染HL 60细胞 ,X gal染色判断转染效率。采用形态学、MTT试验、RT PCR、流式细胞仪及免疫细胞化学等方法进行研究。结果 多聚阳离子可提高腺病毒对HL 60细胞的转染 ,Ad LacZ +protaminesulfate转染率达 79 8%。Ad AS c myc能抑制HL 60细胞c myc基因在转录及蛋白水平的表达。Ad AS c myc抑制HL 60细胞生长及活力 (抑制率5 1%) ,降低其核浆比例 ,增加其过氧化酶活性 ,引起其G0 G1 阻滞及分化相关基因c fos基因表达增强。结论 Ad AS c myc对HL 60细胞具有抑制生长及诱导分化作用。其生物学作用与HL 60细胞过氧化酶活性及c fos的表达有关。Ad AS c

多聚阳离子对重组腺病毒载体体外转染血液肿瘤细胞效率的影响

目的:检测多聚阳离子复合物(Polycation)对腺病毒载体转染血液肿瘤细胞效率的影响。方法:重组LacZ腺病毒(Ad-LacZ)联合Polycation分别转染HL-60、K562、Jurkat及Raji细胞,观察阳性细胞百分率。结果:Ad-LacZ单独转染肿瘤细胞时转染率较低。联合Polycation共同转染可明显提高腺病毒载体的转染率。结论:多聚阳离子复合物可做为提高Ad-LacZ转染HL-60、K562、Jurkat及Raji细胞的辅助工具。

腺病毒载体介导的人类α1-抗胰蛋白酶过表达可促进伤口愈合

目的α1-抗胰蛋白酶(ATT)是一种存在于血浆与伤口处的丝氨酸蛋白酶抑制剂,本实验目的是研究ATT在伤口愈合过程中的重要作用。方法构建α1-抗胰蛋白酶转基因腺病毒(Ad-ATT)表达模型,并阐述其生物学功能。结果(1)在正常鼠实验中,与对照组LacZ(β-半乳糖苷酶)相比,过表达的ATT能够促进肉芽组织形成、胶原蛋白沉积和细胞增生;(2)正常鼠与(链脲霉素诱发的)糖尿病鼠对比实验中,Ad-ATT能明显增强伤口的弹性强度;(3)经药物诱发老鼠出现慢性伤口的实验模型中,组织学分析显示,伤口处注射Ad-ATT后炎性细胞浸润比注射Ad-LacZ明显减少。结论数据显示过表达的Ad-ATT通过降低炎症反应程度的方式促进伤口愈合。