携带鼠白细胞介素-12基因重组腺病毒载体的构建及其对致瘤性的影响

目的 :构建携带鼠白细胞介素 - 1 2基因腺病毒载体 ( Ad CMVIL- 1 2 )并观察其影响 B1 6黑色素瘤致瘤性的效果。方法 :将鼠 IL- 1 2基因构建进含有 CMV启动子的双顺反子重组腺病毒载体内 ,分离纯化后 ,转染 2 93细胞 ,48h后提取细胞总 RNA,进行 RT- PCR、琼脂糖凝胶电泳 ,选取特异性片段 TA克隆、测序 ;将 B1 6黑色素瘤细胞与 Ad CMVIL- 1 2在 37℃、5 %CO2 培养箱中孵育2 h后注射到 C57/ BL6小鼠右侧腹股沟皮下 ( MOI=1 0 0 ) ,观察 Ad CMVIL- 1 2对 B1 6黑色素瘤致瘤性的抑制作用。结果 :测序结果证明 Ad CMVIL- 1 2构建成功 ,实验组未见肿瘤生长 ,抑瘤率达1 0 0 %。结论 :成功地构建 Ad CMVIL- 1 2 ,并具有明显的抑制肿瘤生长的作用。

电离辐射与腺病毒介导的IL-12基因联合治疗Lewis肺癌的实验研究

目的:研究AdCMVIL-12基因与电离辐射联合治疗Lewis肺癌的疗效及其副作用。方法:应用腺病毒为载体,采取瘤内注射的方法将IL-12基因导入Lewis肺癌细胞中,结合肿瘤的局部放疗,并同时设计了不同的治疗方案,观察联合治疗是否能增加疗效。结果:联合治疗组明显好于单独AdCMVIL-12组及单独照射组。结论:电离辐射与AdCMVIL-12基因联合治疗Lewis肺癌能提高疗效,两种疗法之间有协同增效的作用。

含鼠白细胞介素12基因腺病毒载体对小鼠支气管哮喘模型肺组织GATA-3表达的影响

目的:探讨含鼠白细胞介素12(IL-12)基因的腺病毒载体(AdCMVIL-12)对小鼠支气管哮喘模型GATA-3表达的影响。方法:BALB/c小鼠30只,随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)和AdCMVIL-12实验组(C组),B和C组建立哮喘模型,并于第20天分别鼻内吸入50μL生理盐水和5×108PFU AdCMVIL-12。第28天收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF),比较细胞总数及细胞分类的变化,HE染色观察小鼠支气管及肺组织的病理变化,免疫组化及RT-PCR方法检测各实验组肺组织中GATA-3的表达情况。结果:哮喘模型组与对照组及AdCMVIL-12实验组比较,小鼠肺组织有大量炎症细胞浸润,以嗜酸性粒细胞为主。免疫组织化学及RT-PCR结果显示,哮喘模型组小鼠肺组织GATA-3表达(0.48±0.06)明显高于实验组(0.16±0.07)及对照组(0.18±0.04)(P<0.01)。结论:AdCMVIL-12对小鼠支气管哮喘的气道及肺组织炎症有明显的抑制作用,其机制可能与AdCMVIL-12阻断GATA-3的表达,调节Th1/Th2细胞因子的平衡有关。