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携带人血管抑制因子K1-5基因的腺相关病毒载体的构建及其对血管内皮细胞的抑制作用 被引量:1
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作者 高雪军 伍志坚 +2 位作者 封多佳 吴小兵 侯云德 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期205-208,共4页
目的构建含人血管抑制因子K15基因的重组腺相关病毒载体rAAVK5,研究其在体外表达及对血管内皮细胞的抑制作用。方法将K15基因插入通用型AAV载体质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAVK5。用pSNAVK5转染BHK21细胞,经G418选择培养基培养载体细胞... 目的构建含人血管抑制因子K15基因的重组腺相关病毒载体rAAVK5,研究其在体外表达及对血管内皮细胞的抑制作用。方法将K15基因插入通用型AAV载体质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAVK5。用pSNAVK5转染BHK21细胞,经G418选择培养基培养载体细胞株BHKK5。用辅助病毒感染BHKK5细胞包装出重组病毒rAAVK5。研究rAAVK5感染BHK细胞获得的培养上清对血管内皮细胞的抑制作用。结果已获得了重组病毒rAAVK5,滴度达0.5×1012v.g.ml。免疫斑点印迹实验表明,rAAVK5可介导人血管抑制因子K15的体外表达,表达产物对血管内皮细胞增殖具有抑制作用。结论重组病毒rAAVK5在体外对血管内皮细胞的增殖具有抑制作用。为进一步用rAAV病毒载体进行抗血管生成基因治疗的动物实验及临床应用打下了基础。 展开更多
关键词 血管内皮细胞 腺相关病毒载体 抑制作用 抑制因子 构建 BHK-21细胞 重组病毒 内皮细胞增殖 体外表达 选择培养基 BHK细胞 抗血管生成 基因插入 重组质粒 病毒感染 表达产物 临床应用 动物实验 基因治疗 通用型 细胞株 转染
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腺相关病毒载体介导的Endostatin及K1-5蛋白抗肿瘤血管生成协同作用 被引量:1
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作者 高雪军 李启明 +1 位作者 朱莉萍 吴小兵 《微生物学免疫学进展》 2006年第1期6-11,共6页
为研究腺相关病毒载体介导的内皮抑素(Endostatin)及K1-5蛋白抗肿瘤血管生成协同作用,实验中用含有Endostatin及K1-5基因的重组病毒rAAV-hE和rAAV-K5分别感染BHK-21细胞,并表达分泌出内皮抑素和K1-5蛋白,EIA法测定培养液上清中内皮抑素... 为研究腺相关病毒载体介导的内皮抑素(Endostatin)及K1-5蛋白抗肿瘤血管生成协同作用,实验中用含有Endostatin及K1-5基因的重组病毒rAAV-hE和rAAV-K5分别感染BHK-21细胞,并表达分泌出内皮抑素和K1-5蛋白,EIA法测定培养液上清中内皮抑素浓度达36.42ng/m l,免疫斑点印迹实验表明rAAV-K5可介导K1-5的体外表达。重组腺相关病毒(rAAV)介导所表达的内皮抑素和K1-5蛋白对血管内皮细胞增殖具有抑制作用。二者对人脐静脉内皮细胞(ECV-304)的抑制率分别为68.1%和63.1%,对牛毛细血管内皮细胞(BCE)的抑制率分别为41.6%和34.0%。同时二者还有协同效应,用rAAV-hE和rAAV-K5同时感染BHK-21细胞,表达产物对人脐静脉内皮细胞和牛毛细血管内皮细胞的抑制率分别为70.8%和43.8%。动物实验表明,重组病毒rAAV-hE和rAAV-K5转入荷有人肺肿瘤细胞的裸鼠,对肿瘤细胞生长具有抑制作用,同时二者具有协同抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 腺相关病毒载体 抗血管生成 内皮抑素(Endostatin) K1—5蛋白 肿瘤 基因治疗
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抑制细胞周期依赖性蛋白激酶-5表达对C型尼曼-皮克病小鼠的神经保护作用
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作者 郝又国 张旻 +3 位作者 徐金枝 李俐娟 魏佳军 王雪贞 《脑与神经疾病杂志》 2008年第6期655-658,共4页
目的:观察抑制细胞周期依赖性蛋白激酶-5(cdk5)的表达对C型尼曼-皮克病(NPC)小鼠(npc-/-)的治疗作用。方法:采用携带cdk5特异性小干扰RNA(cdk5-siRNA)的重组腺相关病毒rAAV-cdk5-siRNA-GFP,对出生三天内的npc-/-小鼠进行双侧侧脑室注射,... 目的:观察抑制细胞周期依赖性蛋白激酶-5(cdk5)的表达对C型尼曼-皮克病(NPC)小鼠(npc-/-)的治疗作用。方法:采用携带cdk5特异性小干扰RNA(cdk5-siRNA)的重组腺相关病毒rAAV-cdk5-siRNA-GFP,对出生三天内的npc-/-小鼠进行双侧侧脑室注射,以rAAV-GFP注射组及非手术的同龄npc小鼠为对照(n=6~10/组);采用免疫组织化学染色、HE染色和小鼠衣架悬挂试验来评价小鼠脑内的神经病理改变和运动功能。结果:rAAV2-cdk5-siR-NA-GFP能显著减少轴突球状体的数量,延缓浦肯野细胞的死亡并改善npc-/-小鼠的运动功能。结论:降低cdk5的活性对npc-/-小鼠的神经元有一定的保护作用。 展开更多
关键词 C型尼曼-皮克病 细胞周期依赖性蛋白激酶-5 细胞骨架蛋白过度磷酸化 小分子干扰RNA 重组腺相关病毒
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The Neuroprotective Effects of Cyclin-dependent Kinase-5 Inhibition in Mice with Niemann-Pick Disease Type C
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作者 郝又国 潘邓记 +4 位作者 张旻 徐金枝 李琳娟 魏佳军 王雪真 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2009年第3期324-329,共6页
In order to investigate the neuroprotective effects of cyclin-dependent kinase-5 (cdk-5) inhibition in mice with Niemarm-Pick disease type C (NPC) (npc^-/-), recombinant adeno-associated virus (rAAV) carrying ... In order to investigate the neuroprotective effects of cyclin-dependent kinase-5 (cdk-5) inhibition in mice with Niemarm-Pick disease type C (NPC) (npc^-/-), recombinant adeno-associated virus (rAAV) carrying the small interfering RNA (siRNA) specific for cdk-5 gene was injected into 3-day-old npc^-/- mice intracerebroventricularly. The rAAV-GFP-injected age-matched npc^-/- mice and non-surgery age-matched npc^-/- mice were employed as controls (n=6-10/group). From the 4th to 8th week after the treatment, mice were weighed, and evaluated for limb motor activity by using the coat hanger test once a week. Eight-week-old npc^-/- mice were sacrificed by decapitation, and brains were quickly dissected and halved sagittally. Immunohistochemistry, Western blotting, and HE staining were used to evaluate the neuropathology in npc^-/- mice. The results showed that rAAV-cdk-5-siRNA-GFP significantly reduced the number of axonal spheroids, delayed the death of Purkinje neurons, ameliorated motor defects in npc^-/- mice, and significantly attenuated the hyperphosphorylation oftau proteins. These data suggested that inhibition of cdk-5 activity has neuroprotective effect on neurons in NPC mice. 展开更多
关键词 Niemann-Pick disease type C cyclin dependent kinase-5 cytoskeleton hyperphosphorylation small interfering RNA recombinant adeno-associated virus
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hIL-2与ZsGreen双基因共表达腺相关病毒的包装及鉴定
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作者 陈如意 岳静 +3 位作者 章旭君 黄春琦 张婷 许健 《浙江中医药大学学报》 CAS 2014年第7期875-880,共6页
[目的]包装并鉴定带有人白介素2(hIL-2)及ZsGreen的双基因共表达的重组5型腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus 5,rAAV5),为今后利用5型重组腺相关病毒载体进行胰腺癌基因治疗提供研究基础。[方法]以5型腺相关病毒包装系统(h... [目的]包装并鉴定带有人白介素2(hIL-2)及ZsGreen的双基因共表达的重组5型腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus 5,rAAV5),为今后利用5型重组腺相关病毒载体进行胰腺癌基因治疗提供研究基础。[方法]以5型腺相关病毒包装系统(helper-free system)为模版,PCR法扩增pLVX-IRES-ZsGreen和PES-IL-2模板上的IRES-ZsGreen和IL-2基因,利用酶切位点插入重组腺相关病毒骨架质粒,获得重组质粒pAAVhIL-2-IRES-ZsGreen。经三质粒共转染AAV293细胞包装重组腺相关病毒rAAV5-hIL-2-IRES-ZsGreen。荧光显微镜下检测病毒包装效率,超速离心纯化、浓缩重组病毒,qPCR测定病毒的滴度。重组病毒转导细胞经荧光显微镜检测、外源基因经PCR检测证实病毒包装结果。[结果]5型重组腺相关病毒骨架质粒pAAV-IL-2-IRES-ZsGreen经双酶切和测序鉴定,确定其序列正确。荧光显微镜下观察三质粒共转染AAV293细胞72h后,病毒包装效率达90%以上。5型重组病毒感染HEK 293细胞48h有荧光出现,重组病毒基因组成功扩增出外源基因IL-2,证明有感染力的重组病毒包装成功。[结论]成功包装带有hIL-2及ZsGreen标记的双基因共表达重组腺相关病毒,滴度达到2.62×1012。 展开更多
关键词 5型腺相关病毒 人白介素-2 绿色荧光蛋白 胰腺癌
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病毒与非病毒载体转染新生大鼠血管纹边缘细胞的比较研究
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作者 杨阳 孔维佳 +5 位作者 李隽 胡钰娟 钟毅 郝亚楠 赵学艳 彭炜 《中华耳科学杂志》 CSCD 2008年第2期221-227,共7页
目的通过病毒与非病毒载体对原代培养的新生大鼠内耳血管纹边缘细胞转染情况的比较,选择出适合边缘细胞的基因治疗载体。方法用质粒(pEGFP-N1)、血清5型重组腺病毒(rAd5)以及血清2型重组腺相关病毒(rAAV2)三种载体转染新生大鼠(≤72小时... 目的通过病毒与非病毒载体对原代培养的新生大鼠内耳血管纹边缘细胞转染情况的比较,选择出适合边缘细胞的基因治疗载体。方法用质粒(pEGFP-N1)、血清5型重组腺病毒(rAd5)以及血清2型重组腺相关病毒(rAAV2)三种载体转染新生大鼠(≤72小时)耳边缘细胞,通过对转染效率、细胞凋亡以及细胞活性的检测将三种载体加以比较。结果对边缘细胞的转导效率依次为rAd5>rAAV2>pEGFP-N1,AnnexinⅤ-APC/7-AAD双染法检测转染阳性细胞的损伤情况依次为rAAV2<rAd5<pEGFP-N1,CCK-8法检测转染后的细胞活性依次为rAAV2>rAd5>pEGFP-N1。结论病毒载体相对于非病毒载体以其高转导效率、低细胞毒性在对原代培养的新生大鼠耳边缘细胞的转染中表现出明显优势。与血清2型重组腺相关病毒比较,相对高效、低毒性的血清5型重组腺病毒更适用于原代培养的新生大鼠血管纹边缘细胞的基因转染研究。 展开更多
关键词 质粒pEGFP—N1 血清5型腺病毒 血清2型腺相关病毒 转染 边缘细胞 大鼠
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Effect of Loss-of-function of the Herpes Simplex Virus-1 microRNA H6-5p on Virus Replication 被引量:1
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作者 Rongquan Huang Xusha Zhou +3 位作者 Shuqi Ren Xianjie Liu Zhiyuan Han Grace Guoying Zhou 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2019年第4期386-396,共11页
To date, 29 distinct microRNAs(miRNAs) have been reported to be expressed during herpes simplex virus infections.Sequence analysis of mature herpes simplex virus-1(HSV-1) miRNAs revealed five sets of miRNAs that are c... To date, 29 distinct microRNAs(miRNAs) have been reported to be expressed during herpes simplex virus infections.Sequence analysis of mature herpes simplex virus-1(HSV-1) miRNAs revealed five sets of miRNAs that are complementary to each other: miR-H6-5p/H1-3p, miR-H6-3p/H1-5p, H2-5p/H14-3p, miR-H2-3p/H14-5p, and miR-H7/H27.However, the roles of individual miRNAs and consequences of this complementarity remain unclear. Here, we focus on two of these complementary miRNAs, miR-H6-5p and miR-H1-3p, using loss-of-function experiments in vitro and in a mouse model of infection using an miRNA sponge approach, including tandem multiplex artificial miRNA-binding sequences that do not match perfectly to the target miRNA inserted downstream of a green fluorescent protein reporter gene. Infection with recombinant virus expressing the miR-H6-5p sponge reduced viral protein levels and virus yield.Decreased accumulation of viral proteins was also observed at early stages of infection in the presence of both an miR-H6-5p inhibitor and plasmid-expressed miR-H1-3p. Moreover, establishment of latency and reactivation did not differ between the recombinant virus expressing the miR-H6-5p sponge and wild-type HSV-1. Taken together, these data suggest that miR-H6-5p has an as-yet-unidentified role in the early stages of viral infection, and its complement miR-H1-3p suppresses this role in later stages of infection. This report extends understanding of the roles of miRNAs in infection by herpes simplex viruses, supporting a model of infection in which the production of virus and its virulent effects are tightly controlled to maximize persistence in the host and population. 展开更多
关键词 miR-H6-5p miR-H1-3p SPONGE Replication HERPES SIMPLEX virus-1(HSV-1)
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聚丙烯酰胺凝胶碎块吸收法浓缩感染性病毒的效果观察
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作者 尚大庄 王玉坤 +1 位作者 金世香 顾葆良 《河北医学院学报》 1990年第3期129-131,共3页
用聚丙烯酰胺凝胶(PAG)碎块吸收洗脱法,分别将腺病毒5型(AdV-5)感染的HeLa细胞培养液、疱疹病毒2型(HSV-Ⅱ)感染的原代乳兔肾(BRK)细胞和Vero细胞培养液浓缩100倍左右,其感染性病毒的回收率依次分别为78.5%、7%和1.6%。表明该法在浓... 用聚丙烯酰胺凝胶(PAG)碎块吸收洗脱法,分别将腺病毒5型(AdV-5)感染的HeLa细胞培养液、疱疹病毒2型(HSV-Ⅱ)感染的原代乳兔肾(BRK)细胞和Vero细胞培养液浓缩100倍左右,其感染性病毒的回收率依次分别为78.5%、7%和1.6%。表明该法在浓缩腺病毒中影响病毒感染性较小,有实用价值;而对HSV-Ⅱ的感染性影响较大,其原因不清。 展开更多
关键词 病毒 PAG浓缩法 细胞
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新型重组AAV5/5载体及包装系统 被引量:3
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作者 董小岩 田文洪 +2 位作者 袁振华 谭淑萍 吴小兵 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期679-686,共8页
本研究组建了一种可用于规模化生产的以重组单纯疱疹病毒为辅助病毒的AAV5/5载体包装系统。首先,将5型腺相关病毒(AAV5)的rep和cap基因插入I型单纯疱疹病毒(HSV-1)基因组非必需基因UL2中,获得重组病毒rHSV1-rep5cap5。其次,构建一种携带... 本研究组建了一种可用于规模化生产的以重组单纯疱疹病毒为辅助病毒的AAV5/5载体包装系统。首先,将5型腺相关病毒(AAV5)的rep和cap基因插入I型单纯疱疹病毒(HSV-1)基因组非必需基因UL2中,获得重组病毒rHSV1-rep5cap5。其次,构建一种携带AAV5ITR的通用型载体质粒pAAV5neo,将报告基因EGFP插入pAAV5neo中,得到pAAV5neo-EGFP质粒。将pAAV5neo-EGFP质粒导入BHK-21细胞,用G418选择培养,挑选出表达EGFP并在重组病毒rHSV1-rep5cap5感染下能高效产生rAAV5/5-EGFP的单克隆载体细胞株C020。用rHSV1-rep5cap5感染C020细胞制备rAAV5/5-EGFP,用"氯仿处理-聚乙二醇/氯化钠-氯仿抽提"方法粗纯化rAAV5/5-EGFP。用100kDa分子量截流超滤方法进一步纯化和浓缩,获得高纯度的rAAV5-EGFP。SDS-PAGE电泳分析可见3条特征性外壳蛋白带。电镜分析显示病毒颗粒以实心颗粒为主。用rAAV5/5-EGFP病毒按1×105vg/cell感染体外培养的HEK293细胞,可见30%细胞呈现绿色荧光。本研究提出了一种高效AAV5/5载体生产系统和纯化方法,为重组AAV5载体的进一步应用提供了基础。 展开更多
关键词 5型腺相关病毒(AAV5) I型单纯疱疹病毒(HSV1) 病毒载体 包装系统
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反义IL-5载体构建及其对IL-5 mRNA和蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 高宝安 熊维宁 +5 位作者 徐永健 张珍祥 曹勇 唐以军 叶涛 杜春玲 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期298-301,共4页
目的构建含反义IL-5的重组腺相关病毒(rAAV)asIL-5,观察rAAV asIL-5对哮喘大鼠CD+4T淋巴细胞IL-5mRNA和蛋白表达的影响。方法用基因重组方法构建反义IL5rAAV真核表达载体质粒pasIL-5/rAAV,磷酸钙沉淀法将真核表达载体质粒pasIL-5/rAAV... 目的构建含反义IL-5的重组腺相关病毒(rAAV)asIL-5,观察rAAV asIL-5对哮喘大鼠CD+4T淋巴细胞IL-5mRNA和蛋白表达的影响。方法用基因重组方法构建反义IL5rAAV真核表达载体质粒pasIL-5/rAAV,磷酸钙沉淀法将真核表达载体质粒pasIL-5/rAAV、包装质粒pXX2、辅助质粒pXX6共转染入病毒包装细胞293细胞中,合成rAAV asIL5,Southernblot测重组病毒的滴度;将rAAV asIL5转染经密度梯度法和免疫磁珠法分离的哮喘大鼠CD+4T淋巴细胞,用半定量RT PCR、ELISA分别检测转染后细胞内IL5mRNA及细胞培养上清液中IL-5蛋白的表达水平。结果(1)成功构建并鉴定了rAAV asIL-5,滴度为1.3×1011病毒颗粒/ml;(2)病毒转染孔的相对吸光度值为1.0515±0.1477,低于对照孔(1.4271±0.1655,P<0.01);(3)细胞培养上清液中IL-5的含量病毒转染孔为(12.0840±1.4769)ng/L,低于对照组[(15.3590±1.2685)ng/L,P<0.01]。结论rAAV asIL-5能够抑制哮喘大鼠CD+4T淋巴细胞IL5mRNA和蛋白表达,为研究哮喘的基因治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 腺相关病毒 哮喘 白细胞介素5 基因治疗
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重组5型腺相关病毒基因组滴度测定用国家标准品的研制 被引量:1
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作者 郑红梅 于雷 +6 位作者 李永红 史新昌 安怡方 郭莹 韩春梅 饶春明 周勇 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期429-433,共5页
目的研制重组5型腺相关病毒(recombinant type 5 adeno-associated virus,rAAV5)基因组滴度测定用国家标准品。方法对三质粒系统制备的rAAV5-GFP原液,按《中国药典》三部(2020版)相关要求进行鉴别、外观、pH、无菌、基因组滴度、纯度、... 目的研制重组5型腺相关病毒(recombinant type 5 adeno-associated virus,rAAV5)基因组滴度测定用国家标准品。方法对三质粒系统制备的rAAV5-GFP原液,按《中国药典》三部(2020版)相关要求进行鉴别、外观、pH、无菌、基因组滴度、纯度、感染滴度等检定,根据结果稀释、分装,制备成候选标准品;采用热加速试验对候选标准品进行稳定性考察;组织3家实验室,采用微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)法对候选标准品进行协作标定。结果候选标准品原液及候选标准品的各项检测指标均符合相关要求;在25、4、-20、-40、-80℃条件下,1、3、4、6个月基因组滴度均无明显下降;经3家实验室协作标定,候选标准品赋值为2.56×10^(12)copies/mL,95%置信区间为2.48×1012~2.64×10^(12)copies/mL。结论研制的rAAV5基因组滴度测定用国家标准品具有良好的稳定性,可用于rAAV5相关产品的质量评价。 展开更多
关键词 重组5型腺相关病毒 微滴式数字PCR 基因组滴度 协作标定 国家标准品
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rAAV5基因组滴度测定的数字PCR方法研究
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作者 郑红梅 秦玺 +7 位作者 李永红 于雷 毕华 饶春明 朱留强 杨靖清 史新昌 周勇 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1826-1832,共7页
目的:建立并验证重组5型腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus type 5,rAAV5)基因组滴度测定的数字PCR方法,并对微滴数字PCR方法和芯片数字PCR方法进行比较。方法:分别用不同浓度的SDS和EDTA前处理r AAV5样品,用微滴数字PCR... 目的:建立并验证重组5型腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus type 5,rAAV5)基因组滴度测定的数字PCR方法,并对微滴数字PCR方法和芯片数字PCR方法进行比较。方法:分别用不同浓度的SDS和EDTA前处理r AAV5样品,用微滴数字PCR测其基因组滴度,对病毒样品前处理试剂进行优化;在其他试验条件不变的情况下,分别设置微滴数字PCR的退火温度为60、58、54、52℃,以WPRE引物扩增,比较扩增效果,对数字PCR的退火温度进行优化;分别采用微滴数字PCR和芯片数字PCR测定rAAV5的基因组滴度并比较。结果:终浓度为1%SDS和62.5 mmol·L^(-1)EDTA按1∶1(v/v)的比例混合后前处理rAAV5,测定的基因组拷贝数较高,前处理液裂解效果较好;当退火温度为54℃时,微滴数字PCR中阳性微滴和阴性微滴分离效果最好,扩增特异性最强;2种测定结果的试验室内精密度和回收率接近,测定同一裂解样本的结果较为接近(在1个数量级)。结论:初步建立了数字PCR方法并验证,为后续的进一步验证奠定基础。 展开更多
关键词 重组5型腺相关病毒 基因组滴度 微滴数字PCR 芯片数字PCR 基因治疗
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携带CAR启动子的重组AAV9病毒在小鼠体内表达分布特性研究 被引量:1
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作者 马文豪 章嫣 +2 位作者 董哲岳 吴小兵 盛望 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期423-430,共8页
基因治疗正日益成为罕见病乃至单基因遗传病的首选治疗策略,提升基因药物的体内表达是重要研究领域。本文选择4种短内含子构建了4种嵌合型启动子CAR、CAS、CAP、CAT,通过Gluc报告基因表达活性比较发现,CAR强度明显高于CA,仅次于CAG。选... 基因治疗正日益成为罕见病乃至单基因遗传病的首选治疗策略,提升基因药物的体内表达是重要研究领域。本文选择4种短内含子构建了4种嵌合型启动子CAR、CAS、CAP、CAT,通过Gluc报告基因表达活性比较发现,CAR强度明显高于CA,仅次于CAG。选择CAR启动子构建和制备了携带EGFP报告基因的重组病毒rAAV9-CAR-EGFP,经SDS-PAGE分析可见病毒外壳蛋白条带清晰,表明纯度良好;Southern杂交检测可见基因组以自身互补的双链DNA为主。在新生小鼠和成年小鼠中用静脉注射(IV)和侧脑室注射(ICV)两种途径给药,研究了rAAV9-CAR-EGFP的体内表达分布特性。结果表明,新生鼠ICV注射rAAV9-CAR-EGFP在其脑部和脊髓可以观察到EGFP高转导效率和高强度表达,新生鼠IV注射rAAV9-CAR-EGFP可在脑组织观察到明确的EGFP绿色荧光,表明该病毒可有效穿越血脑屏障,但IV注射对于中枢神经系统的转导效率和表达强度明显低于ICV注射。无论是IV注射还是ICV注射,神经和肌肉系统中都可观察到EGFP的持续表达;同时还可以观察EGFP蛋白在外周组织中广泛分布,其中以肝脏、骨骼肌和心肌最为显著。另外,成年鼠IV注射rAAV9-CAR-EGFP可在肝脏观察到EGFP持续表达,而新生鼠IV或ICV注射则肝脏中EGFP的表达会随动物生长而明显衰减。这些研究结果为我们下一步用AAV9携带CAR启动子介导目的基因表达治疗中枢神经系统疾病如脊髓性肌萎缩症的基因药物设计奠定了基础。 展开更多
关键词 9型腺病毒相关病毒(AAV9) 5′UTR 嵌合型启动子 生物分布 基因治疗
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