肿瘤微转移的相关研究及AE1/AE3在其中的价值

在人口老龄化的全球大背景下,恶性肿瘤的发病率和致死率也逐年上升,在恶性肿瘤病灶局限、未发生转移时行医疗干预往往可以取得较好的疗效,因此早期发现恶性肿瘤或发现后进行精准有效的评估及干预显得尤为重要。免疫组化法(Immunohistochemistry, IHC)利用特异性的抗原抗体染色在鉴别肿瘤微转移中发挥着重要作用,有助于识别出常规病理切片HE染色未能识别的转移病灶;AE1/AE3主要表达于上皮细胞,常被用作诊断上皮性肿瘤转移的分子标记物,HE染色可见肿瘤转移的淋巴结经AE1/AE3标记均为阳性,HE染色阴性的淋巴结中也可见AE1/AE3的部分表达,且在常规病理检测为阴性的淋巴结中,AE1/AE3阳性患者往往比阴性患者具有更高的复发率和更低的5年生存率。因此常规病理联合检测AE1/AE3表达有助于评估患者肿瘤分期和判断预后,进而能对高危患者进行早期干预,提高患者生存期。本综述主要从恶性肿瘤淋巴结转移、常用的肿瘤转移检测方法以及分子标记物AE1/AE3在诊断淋巴结微转移中的作用等方面入手,为诊断恶性肿瘤淋巴结微转移可采用的方法和精准识别提供理论依据。

Ki-67、AE1/AE3、p53在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨Ki-67、AE1/AE3、p53在结直肠癌(CRC)患者癌组织中的表达、临床意义及相关性研究。方法收集2021年1月至2022年6月于本院手术治疗的76例CRC患者癌组织标本,选取同病例癌旁组织标本作为对照。免疫组化法检测组织标本中Ki-67、AE1/AE3、p53表达水平,分析三种蛋白表达水平与CRC临床病理学参数之间的关系及CRC患者癌组织中三种蛋白表达之间的相关性。结果CRC患者癌组织中Ki-67、AE1/AE3、p53表达阳性率显著高于癌旁组织,存在统计学差异(P<0.05)。CRC患者癌组织中Ki-67、AE1/AE3、p53阳性表达与淋巴结是否存在转移、病理分化程度、TNM分期及浸润深度之间存在相关性(P<0.05),同时Ki-67和AE1/AE3阳性表达还与肿瘤直径之间存在相关性(P<0.05)。CRC患者癌组织中Ki-67表达与AE1/AE3和p53表达呈正相关(rs=0.591、0.334,P<0.05);AE1/AE3表达和p53表达也呈正相关(rs=0.441,P<0.05)。结论CRC患者Ki-67、AE1/AE3、p53阳性表达水平与淋巴结是否转移、病理分化程度、TNM分期及浸润深度之间有关,且三者之间具有相关性。随CRC患者病情发展,这些指标出现异常表达,为结直肠癌的临床诊断和治疗提供一定的理论参考。

DNA倍体上皮细胞标志物广谱细胞角蛋白AE1/AE3联合检测子宫内膜癌淋巴结微转移的意义

目的在子宫内膜癌转移阴性淋巴结中检测DNA倍体和上皮细胞标志物广谱细胞角蛋白[CK(AE1/AE3)],分析淋巴结微转移与上述指标的关系,探讨上述指标检测子宫内膜癌淋巴结微转移的可行性及临床价值。方法收集2013年1月至2016年12月接受手术治疗的子宫内膜癌患者35例,共收集427枚转移阴性淋巴结,分别用全自动细胞DNA图像分析系统检测DNA倍体及免疫组织化学法检测AE1/AE3。结果 (1)在427枚转移阴性淋巴结中,手术-病理分期、组织学分级、病理类型、肌层浸润深度等组内进行比较,上述指标阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)。(2)通过比较无转移组淋巴结与转移组阴性淋巴结发现,2组阴性淋巴结中DNA异倍体表达率、AE1/AE3阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)。(3)在427枚转移阴性淋巴结中,43枚(10.1%)DNA异倍体表达阳性,39枚(9.1%)AE1/AE3表达阳性,DNA倍体与AE1/AE3在转移阴性淋巴结中的表达差异无统计学意义(P>0.05),两者联合检测较单一指标检测,可显著提高淋巴结的微转移检出率(P<0.05)。结论在转移组阴性淋巴结较无转移组淋巴结中,可能更容易找到早期发生的微转移灶。在转移阴性淋巴结中,DNA异倍体与AE1/AE3的阳性表达差异无统计学意义,两者联合检测有助于检测子宫内膜癌淋巴结微转移。

AE1/AE3免疫组化法在检测胃癌淋巴结微转移中的作用

目的探讨AE1/AE3免疫组化标记检测胃癌根治标本中淋巴结内微小转移癌及其临床意义。方法对64例胃癌病人根治切除后阴性的淋巴结及胃周软组织的石蜡包埋组织用S-P法进行AE1/AE3染色标记。结果64例118枚淋巴结中,根据HE染色阴性再经AE1/AE3标记发现,8例患者13枚淋巴结有微转移灶,病例总阳性率12.50%(8/64),淋巴结总阳性率11.02%(13/118)。微转移与浸润深度有关,深层组织的微转移阳性率高于浅层(P<0.05),弥漫型胃癌微转移率(62.50%)明显高于肠型胃癌(5.36%),两者之间具有显著差异性。结论AE1/AE3染色标记检测微转移淋巴结可能对准确地确定临床分期、诊疗及判断预后有积极临床意义。

AE1／AE3在胃癌组织及淋巴结中的表达及意义

目的探讨AE1／AE3在胃癌根治标本中淋巴结内转移及其临床意义。方法对64例胃癌根治切除后淋巴结及胃周软组织的石蜡包埋组织用S-P法进行AIE1／AE3染色标记。结果AE1／AE3在已转移的病变及淋巴结中强表达，64例经HE染色证明阴性的118枚阴性淋巴结中，8例患者13枚淋巴结发现微转移灶，病例总阳性率为12．5％（8／64），淋巴结总阳性率为11．02％（13／118）。微转移与浸润深度有关，深层组织的微转移阳性率高于浅层（P〈0．05），两者之间具有显著性差异。结论AE1／AE3染色标记检测胃癌转移及微转移淋巴结对准确地确定临床分期及判断预后有积极临床意义。

Detection of lymph nodes micrometastases in Dukes' A and B colorectal cancer using anti-cytokeratin antibodies AE1/AE3

AIM: To detect lymph nodes micrometastases and analyze its correlation with clinicopathological parameters in Dukes' A and B colorectal cancer patients.METHODS: One hundred and fourteen patients with colorectal cancer (Dukes' A 16; Dukes' B 98) undergoing curative operation without histological lymph nodes metastases were studied between 2001 and 2003. A total of 2 481 lymph nodes were analyzed using monoclonal cytokeratin antibody AE1/AE3 (DAKO, Carpinteria, CA) for immunohistochemistry.RESULTS: In total, 33 (29%) patients were positive forcancer cell by immunohistochemistry. In 31 (94%) patientsof them positive nodes showed single tumor cell or small groups of tumor cells; and tumor deposits measuring 0.2and 0.37 mm in diameter in another 2 (6%) patients.Micrometastases were mainly located in the subcapsular sinus or paracortical sinus. There was no correlation between the positive lymph nodes and gender, age, tumor site, tumor size, histological type, histological grade, invasion depth, Dukes' staging and microsatellite instability (P＞0.05).CONCLUSION: Our findings suggest that immunohistochemical technique using monoclonal cytokeratin antibody AE1/AE3 may be a sensitive and reliable method for detecting lymph nodes micrometastases in Dukes' A and B colorectal cancer. The clinical significance of lymph nodes micrometastases is still not confirmed.

角蛋白单克隆抗体AE1/AE3免疫组化法检测胃癌淋巴结微转移的研究

目的探讨AE1/AE3免疫组化标记检测胃癌根治标本中淋巴结内微小转移癌及其临床意义。方法对64例胃癌根治切除后阴性的淋巴结及胃周软组织的石蜡包埋组织用S-P法进行AE1/AE3染色标记。结果64例118枚淋巴结中,根据HE染色阴性再经AE1/AE3标记发现,8例患者13枚淋巴结发现微转移病灶,病例总阳性率12.5%(8/64),淋巴结总阳性率11.02%(13/118)。微转移与浸润深度有关,深层组织的微转移阳性率高于浅层(P<0.05),弥漫型胃癌微转移率(62.50%)明显高于肠型胃癌(5.36%),两者之间具有显著差异性。结论胃癌周围阴性淋巴结中存在微转移灶,AE1/AE3染色标记检测微转移淋巴结可能对准确地确定临床分期、指导治疗、判断预后有积极临床意义。

前哨淋巴结活检在早期胃癌中的应用及微转移检测

目的:探讨前哨淋巴结活检(SLNB)技术在早期胃癌中的应用及前哨淋巴结(SLN)微转移检测的临床意义。方法:34例早期胃癌术中亚甲蓝定位活检前哨淋巴结,术后行常规HE病理和角蛋白单克隆抗体AE1/AE3免疫组化(ELIVISION二步法)检查。结果:34例中33例检出SLN,检出率为97.1%。由SLN状态预测胃周淋巴结转移情况的准确率为93.9%(31/33),敏感性为88.9%(16/18),特异性为100.0%(16/16),假阴性率为11.1%(2/18)。免疫组化法与常规HE法对SLN转移的检出率相比较,差异有统计学意义(P=0.034),免疫组化法共检出12枚/8例SLN存在微转移现象。结论:SLN能较准确反映早期胃癌的淋巴结转移状况,免疫组化法较常规HE病理检查更为敏感,AE1/AE3免疫组化法能提高SLN微转移的检测,对确定临床分期、诊疗及判断预后有积极临床意义。

早期胃癌组织Galectin-3表达与淋巴结微转移关系的探讨

目的:研究早期胃癌组织中半乳凝素3(Galectin-3)表达水平与淋巴结微转移的关系。方法:采用免疫组化技术检测56例早期胃癌患者胃癌组织Galectin-3的表达水平,采用淋巴结组织HE染色和角蛋白AE1/AE3表达检测判断淋巴结微转移情况分析Galectin-3表达水平与淋巴结微转移的关系。结果:56例早期胃癌患者中,7例患者13枚淋巴结发现AE1/AE3阳性细胞,总阳性率12.5%(7/56),淋巴结总转移率11.67%(14/120);Galectin-3免疫反应在不同病理亚型早期胃癌组织中程度不同,随着分化程度降低而增强,有淋巴结转移或微转移的早期胃癌组织中Galectin-3表达比无淋巴结转移或微转移的早期胃癌组织中Galec-tin-3表达明显增强。结论:胃癌组织Galec-tin-3高表达有较高的淋巴结转移风险,这对判断预后和指导治疗有重要意义。

热变形对合金钢A_（e3）影响的热力学计算

以超组元（Ｓｕｐｅｒｅｌｅｍｅｎｔ）模型为基础，开发了计算热变形后Ｆｅ－ΣＸ_ｉ－Ｃ（Ｘ_ｉ＝Ｍｎ，Ｓｉ，Ｍｏ，Ａｌ，Ｃｕ，Ｎｉ，Ｃｏ，Ｃｒ等）多组元合金钢的Ａ（ｅ３）的方法，并着重分析了γ相热变形对Ａ（ｅ３）的影响，未变形合金钢Ａ（ｅ３）的计算值，与前人的实测值基本符合．

人卵巢组织中各种组织成分的免疫组化研究

目的研究人卵巢组织中不同组织成分的分布。方法对人卵巢组织中各种不同组织成分单抗进行免疫组化研究。结果角蛋白抗原AE1/AE3阳性细胞存在于皮质内特别是卵泡周围,平滑肌肌动蛋白(α-actin)和肌球蛋白(Desmin)抗原存在于血管及黄体周围,而代表神经组织的S-100阳性细胞则主要分布髓质及卵泡周围。结论这一结果说明卵泡是卵巢组织中最重要的功能单位。

利用超声造影示踪兔VX2乳腺癌前哨淋巴结的实验研究

目的:通过与亚甲蓝(Methylene blue,MB)示踪法比较,探讨超声造影检测乳腺癌前哨淋巴结(Sentinel lymph node,SLN)的前景。方法:建立兔VX2乳腺癌模型24只,皮下注射SonoVue,超声造影显像SLN,观察其造影增强情况;再经皮下注射MB示踪;行腋窝淋巴结清扫术切除SLN并行AE1/AE3免疫组化染色。结果:24只瘤兔超声造影检出回声均匀性增强的SLN 12个,回声不均匀性增强和部分充盈缺损的SLN 22个;MB示踪法检出SLN 32个;术中腋窝淋巴结清扫SLN 38个。以手术切除为标准,超声造影的检出率(89.47%)与MB示踪法检出率(84.21%)比较无显著差异(P>0.05);以免疫组化结果为标准,超声造影的敏感性(95.24%)与MB示踪法敏感性(91.30%)比较无显著差异(P>0.05),但其特异性(84.62%)和准确性(91.18%)均明显高于MB示踪法特异性(26.67%)和准确性(65.79%)(P<0.05)。结论:经皮下注射超声造影剂显像乳腺癌SLN有较高的检出率、特异性、准确性和敏感性,与MB示踪法比较有一定优势,有望成为检测SLN的常用方法。

心肌梗塞愈后心力衰竭大鼠心肌AE_(3) mRNA表达及其意义

目的 观察心梗愈后心力衰竭大鼠心肌AE3mRNA及其蛋白表达的变化 ,探讨其在心力衰竭中的病理生理意义。方法 结扎大鼠冠状动脉 ,造成心梗愈后心力衰竭模型 ,应用原位杂交及免疫组化技术 ,检测心肌AE3mRNA及其蛋白表达。结果 心衰组心肌AE3mRNA及其蛋白表达显著增加 ,其IOD值明显高于假手术组和正常对照组 (P <0 .0 1)。结论 心力衰竭时心肌AE3mRNA及其蛋白表达显著增加是一种代偿反应 ,但可导致细胞内酸中毒及细胞内Ca2 + 超负荷 ,使心衰加重。

慢性缺氧和二氧化碳潴留大鼠脑阴离子转运蛋白的研究

目的：观测慢性缺氧和二氧化碳潴留大鼠脑桥组织中脑阴离子转运蛋白（ＡＥ３）ｍＲＮＡ的变化。方法：采用密闭舱内灌注混合气体的方法，分别复制慢性缺氧，慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒大鼠模型，以地高辛标记的（ＡＥ３）ｃＤＮＡ探针，应用点杂交技术，对各实验组及对照组大鼠脑桥组织中ＡＥ３ｍＲＮＡ的相对含量进行测定。结果：（１）慢性缺氧组ＡＥ３ｍＲＮＡ的相对含量明显地低于对照组（Ｐ＜００５），慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒组的ＡＥ３ｍＲＮＡ降低更为明显；（２）慢性缺氧伴二氧化碳潴留及慢性呼吸性酸中毒二组之间无显著差异（Ｐ＞００５），但都明显低于慢性缺氧组（Ｐ＜００１）。结论：提示ＡＥ３在呼吸衰竭及其导致的肺性脑病的发生中可能具有一定作用。

3例儿童APC基因突变的多发性肝肿瘤(英)

肝母细胞瘤（HB）作为儿童最常见的肝肿瘤,它与大肠腺瘤性息肉病（APC）基因的胚系突变相关,该抑癌基因突变导致了家族性腺瘤性息肉病综合征。家族性腺瘤性息肉病的个体发病风险为750~7500倍。该研究报道了3例进行过肝切除或肝移植术的APC基因突变的儿童HB,这些病例除了HB外,肝内均有多个独立的腺瘤样结节。该研究对25个结节进行了免疫组化分析,抗体包括磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（GPC-3）、β-连环蛋白、细胞角蛋白AE1/AE3、CD34、Ki-67、

前列腺弥漫性大B细胞淋巴瘤一例

患者男，40岁，间断性血尿、血精1月余，1周前症状加重，伴明显尿痛、尿频、尿线中断、尿不尽感。查体：全身浅表淋巴结未触及肿大。双腰曲线对称存在，双肾区未及叩痛，沿双输尿管走行区未触及条索状肿物及压痛，膀胱区稍隆起，压痛阴性，阴毛呈男性分布，尿道外口未见异常分泌物，肛诊前列腺3度增生，质硬，中央沟消失，肛门括约肌正常。总前列腺特异性抗原（PSA）：1.92 ng/mL，游离PSA 0.30 ng/mL，游离PSA/总PSA 15.63 ng/mL，血细胞分析，肝、肾功能及凝血检查未见明显异常。胸部X线片、心电图未见明显异常。彩色多普勒超声示：左侧精囊腺后方低回声包块，性质待定。前列腺磁共振成像（MRI）示：前列腺肿物，考虑前列腺肉瘤。骨扫描示：未见明显异常。病理结果：前列腺切除标本病理活检及免疫组织化学（图1，2）：前列腺恶性肿瘤，倾向分化差的癌。CD3（部分＋），CD20（弥漫＋），MUM1（＋），Bcl-6（＋），Syn（-）， CgA（-），CD56（-），CD10（-），CD99（-），NSE（-），AE1/AE3（-），Vimentin（＋＋＋），PSA（-），CD34（-），Desmin（-），SMA（-）， P63（部分弱＋），CK7（-），Ki67（〉90%＋），符合弥漫性大B细胞淋巴瘤[1，2]，非生发中心起源[3]。影像结果：前列腺MRI平扫示：前列腺体积明显增大，前列腺正常结构消失，前列腺左侧可见团块状肿物突出于前列腺轮廓外，边缘呈浅分叶状，病灶以长T1、等T2信号为主，其内间以条索状等高T1、低T2信号影， DWI序列病灶呈明显高信号（图3，4），弥散加权成像（DWI）图像示：病灶呈高信号改变，钙化区呈低信号。病变累及前列腺中央带、交界带及外周带，边缘呈分叶状改变。

计算Fe-C-X_i合金系在正平衡和准平衡模式下γ→α相变驱动力的简便方法

根据 Fe-C-Xi 合金系的正平衡和准平衡热力学模型,推导了简便的奥氏体-铁素体相变驱动力计算解析式．根据公式,代入合金原始成分和 A_(e3)温度,即可准确计算正平衡和准平衡模式下的奥氏体一铁素体相变驱动力．采用这一方法计算了 Fe-C-Mn-Si-Ni-Cr-Mo-Cu 八元系的正平衡和准平衡奥氏体-铁素体相变驱动力．

妊娠合并巨大胎盘绒毛膜血管瘤1例

1临床资料 患者王某，住院号：00795986，23岁，1胎0产，末次月经2013年06月12日，预产期2014年03月19日。停经早期自测尿妊娠试验（＋），随后于当地医院行超声诊断为“宫内妊娠”。2014-01-10日孕检时查彩超（如图1和2）：胎位：头位，胎心：142次／分，胎动：可及；BPD：7．3 cm，HC：27．2 cm，AC：25．7 cm，FL：5．5 cm；胎盘：前壁 I 级，下部见低回声，大小约8．7 cm×6．4 cm，界限尚清，CDFI其内可见血流信号；羊水：AFI＝12．3 cm，脐动脉 S／D：3．0。胎儿描述未见明显异常，孕妇情况：双附件区未及明显包块。超声提示：宫内单活胎，胎盘内异常回声，血管瘤可能，胎儿超声孕龄约29周4天，请结合临床。患者未治疗，告知定期孕检。2014-02-11日无明显诱因出现阴道流血症状，急诊入长春某医院，行彩超检查回示：宫内单胎：胎位：头位；胎心：131次／分；双顶径：8．6 cm；HC：29．7 cm，AC：30．0 cm，股骨长：6．0 cm；胎盘：位于子宫前壁 I 级；脐动脉 S／D：1．87；胎盘胎儿面略偏左侧缘可见范围约11．7 cm×9．3 cm低回声区，内见细密点状强回声及粗大的分隔．超声提示：宫内单活胎，胎盘肿物，请结合临床。并给予口服保胎药物对症治疗，具体药物名称及计量不详。于2014-02-11日晚间出现不规律腹痛症状，2014-02-12凌晨急诊入院，体温36．3℃，脉搏86次／分，呼吸20次／分，血压120／70 mmHg。孕妇情况：宫高30 cm，腹围96 cm，胎心142次／分，无明显变异，胎动未及，胎位：LOA。骨盆外侧量：髂棘间径：23 cm，髂嵴间径：26 cm，骶耻外径：18 cm，坐骨结节间径：9 cm，耻骨弓角度：900。内诊：宫颈管未消退，宫口未开，胎头高浮，胎膜未破。02月11日外院超声：宫内单胎：胎位：头位；胎心：131次／分；双顶径：8．6 cm；HC：29．7 cm，AC：30．0 cm，股骨长：6．0 cm；胎盘：位于子宫前壁Ⅰ级；脐动脉S／D：1．87；胎盘胎儿面略偏左侧缘可见范围约11．7＆nbsp；cm×9．3 cm低回声区，内见细密点状强回声及粗大的分隔．超声提示：宫内单活胎，胎盘肿物，请结合临床。胎心监护 NST 评分：3分。血常规：红细胞计数：3．43×10＾12／L，血红蛋白：119g／L，红细胞压积：34％。诊断：1胎0产孕35周纵产式 LOA 先兆早产胎盘肿物。结合患者情况应行剖宫产术终止妊娠，于2014年2月12日行急诊剖宫产，新生儿出生后一分钟Apgar评分3分，出生后五分钟 Ap-gar评分5分。由新生儿科抢救插管后，转入新生儿科治疗。胎儿娩出后宫壁注射催产素20u后，胎盘娩出，检查胎盘，质地糟脆，其内可见一12 cm×8 cm大小肾形髓样肿物，突出于胎盘母面，有完整包膜包膜完整，表面光滑，可见丰富血管，质软，呈分叶状，有沟回样改变（如图3和4）。术中出血约1000 ml，术后给予输入红悬和血浆等对症治疗。术后病理回示：胎盘：绒毛局部有纤维素样坏死，有钙化，局部见绒毛膜血管瘤（直径约1 cm），脐带间质内有粘液变，（胎盘内肿物）绒毛膜血管瘤，局部有粘液变及钙化。免疫组化染色结果：CK （AE1／AE3）（局灶＋）、SMA（＋）、Desmin（-）、Ki（阳性率10％）、CD34（＋）（如图5和6）。于2月18日复查血 HCG 101．96 mIU／ml。血常规：白细胞计数：8．1×10＾9／L，中性粒百分比：71．8％。红细胞计数：3．81×10＾12／L，血红蛋白：121 g／L，红细胞压积：37．84％，现患者无明显不适，监测血 H CG 正常，血常规正常。已痊愈，目前仍在随访中。

染料法术中标记34例大肠癌前哨淋巴结的意义

目的探索前哨淋巴结活检(SLNB)技术在早期大肠癌中的应用及前哨淋巴结(SLN)微转移检测的临床意义。方法应用染料法对34例大肠癌患者,在根治术中于肿瘤周围或基底部浆膜下注射亚甲蓝溶液2mL左右,识别和定位蓝染的淋巴结(即前哨淋巴结),术后行常规HE病理和鼠抗人细胞角蛋白单克隆抗体AE1/AE3免疫组化染色法(ELIVISION二步法)检查。结果34例大肠癌患者中33例检出SLN,检出率为97.1%。由SLN状态预测其周淋巴结转移情况的准确率为93.9%(31/33),敏感性为88.9%(16/18),特异性为100.0%(16/16),假阴性率为11.1%(2/18)。免疫组化与常规HE对SLN转移的检出率相比较,差异有统计学意义(P=0.034),免疫组化法共检出12枚18例SLN存在微转移现象。结论SLN能够较准确反映早期大肠癌的淋巴转移状况,免疫组化法较常规HE病理检查更为敏感,AE1/AE3免疫组化发能提高SLN微转移的检测,对确定临床分期诊疗及判断预后有积极临床意义。