肠型点状产气单胞菌口服疫苗对草鱼的免疫保护效应研究

采用生物可降解材料聚丙烯酸树脂制备含肠型点状产气单胞菌的微粒疫苗,口服免疫草鱼,测定实验鱼血清抗体及其对活菌攻击的保护率.实验结果显示,用肠型点状产气单胞菌微粒疫苗进行口服免疫或用全菌疫苗、佐剂疫苗进行注射免疫均可诱导草鱼的血清抗体应答,对肠型点状产气单胞菌攻击的草鱼具有一定的保护作用,保护率分别为52.4%、66.7%及71.4%,对照组仅有16.0%的存活率.可见,口服微粒疫苗对草鱼有显著免疫保护效应,可作为预防肠型点状产气单胞菌感染的疫苗.

草鱼三元病原菌融合子的构建及生物学特性

采用细胞融合技术首次将肠型点状产气单胞菌菌株和鱼害粘球菌菌株融合,构建二元融合菌株AM-1,再将AM-1与荧光假单胞菌菌株融合,构建三元融合菌株AM-2。对AM-1和AM-2菌株的形态结构、生理生化特性、致病性、抗原性、抗体效价进行分析。结果表明,AM-1活菌椭圆形,无鞭毛,死菌短杆状,AM-2菌株短杆状,有鞭毛,它们的生理生化性状介于3原始亲本菌株之间;用AM-2菌株对当年健康草鱼种进行人工感染攻毒,被攻毒草鱼种具有烂鳃病、赤皮病及肠炎病的部分症状;AM-2菌株抗原的受免草鱼种对荧光假单胞菌、鱼害粘球菌和肠型点状产气单胞菌菌株的免疫保护率分别达64.90%、68.00%、67.00%,抗体效价最高达1∶256、1∶256、1∶512。测定了AM-1和AM-2菌株及亲本DNA含量并进行了琼脂糖凝胶电泳分析,AM-1和AM-2菌株DNA含量明显高于任一原始亲本。

肠型点状气单胞菌口服疫苗微粒的制备及体外释放研究

采用复乳溶剂挥发法,以聚丙烯酸树脂Ⅲ为材料制备肠型点状产气单胞菌疫苗微球,进行了条件优化。研究结果显示,制备得到的口服疫苗微粒形态良好,平均粒径(6.78±0.07)μm,载药量和包封率分别为(6.04±0.07)%和(63.52±0.06)%,19 d时的累积体外释放百分率为65%。复乳溶剂挥发法置备的肠型点状产气单胞菌疫苗微球工艺可行,重复性良好,有一定的缓释特性。

肠型点状产气单胞菌和鱼害粘球菌的药敏试验报告

笔者使用纸片扩散法测定引起鱼类疾病的肠型点状产气单胞菌和鱼害粘球菌对12种不同抗菌药物的敏感性,以选择出有效药物用于预防和治疗。试验表明,肠型点状产气单胞菌对卡纳霉素、痢特灵、复方新诺明、新霉素、链霉素、氯霉素、庆大霉素、呋喃妥因、诺氟沙星高度敏感;对四环素中度敏感;对红霉素、青霉素耐药。鱼害粘球菌对红霉素、卡纳霉素、痢特灵、复方新诺明、新霉素、链霉素、氯霉素、庆大霉素氯霉素、呋喃妥因、诺氟沙星高度敏感;对四环素中度敏感;对青霉素耐药。