提高农杆菌介导小麦遗传转化效率的几个因素

利用gus基因的瞬时表达研究了农杆菌介导的小麦遗传转化,探讨了影响转化效率的几个因素.结果发现,当转化时菌液浓度的OD600为1.0、侵染时间为1 h、超声波处理30 s、共培养期间使用抗氧化剂以及用胚性愈伤组织作为外植体等,均可使转化效率得到明显提高.综合使用这些优化的转化条件,可使小麦的瞬时转化效率提高3倍多.

农杆菌介导的中国水仙遗传转化体系的建立

利用根癌农杆菌介导法将 GUS基因导入中国水仙 ,组织化学法检测转化后共培养 3d的水仙鳞茎盘组织块 ,GUS基因瞬时表达很好 ,90 %以上的材料呈现大面积的蓝色斑块 ,取筛选培养 2 0d的材料检测 GU S基因的稳定表达 ,约 1%的组织块有蓝色反应 .水仙预培养 10 d后转化 ,转化前在菌液中加入 60 μmol/ L AS活化 2～ 3h,转化率提高了两倍以上 .转化材料在 MS+ BA10 + NAA0 .2+ Cef30 0 + Hyg30 培养基上培养 2 0 d左右分化出小鳞芽 ,频率约为 60 % ,组织块平均出芽 5 .7个 ,最多可达 14个 ,小鳞芽 10 d后长成小鳞茎 .