Biocatalytic synthesis of (R)-(-)-mandelic acid from racemic mandelonitrile by a newly isolated nitrilase-producer Alcaligenes sp. ECU0401

By using acetonitrile as the sole nitrogen source, a microbial strain with high nitrilase activity, named as Alcaligenes sp. ECU0401, was newly isolated from soil, which could enantioselectively transform racemic mandelonitrile into (R)-(?)-mandelic acid, with an enantiomeric excess of >99.9%.

响应面法优化Alcaligenes sp.产脂肽生物破乳剂培养基的研究

生物破乳剂是应用于石油开采业中的新型破乳剂之一,本研究对筛选得到的一株破乳剂产生菌(鉴定为Alcaligenessp.)产生的脂肽类生物破乳剂进行了发酵培养基的优化,采用SAS软件的响应面回归方法对培养基中主要因素进行了研究,试验结果表明,在碳源石蜡为4.76%、氮源牛肉膏为0.12%、磷源K2HPO4/KH2PO4为0.53/0.8%时,破乳剂的产生量为最大,比优化前提高了近一倍。

Alcaligenes sp.碱性脂肪酶产生条件及酶学性质的研究

对Alcaligenessp .产碱性脂肪酶的工艺条件进行了研究。结果表明 ,适宜产酶培养基为 :3 %黄豆粉 ,1%果糖 ,0 .2 %K3 PO4,1%NaNO3 ,0 .6%柠檬酸钠 ,0 .0 3 %FeSO4,0 .5 %聚乙烯十八烷基醚 ;最佳培养条件为 2 5℃ ,初始pH9.0。脂肪酶活力可高达 12 0IU/mL。该酶在5 5℃以下 ,pH6.0～ 10 .5范围内稳定 ;酶反应适宜温度为 40℃ ,适宜pH9.0。该酶制剂在洗涤和制革工业中有良好的应用前景。

Alcaligenes sp. CGMCC2428产威兰胶的分批发酵动力学模型

利用分批发酵研究Alcaligenes sp. CGMCC2428产微生物多糖威兰胶的合成特性,结果表明威兰胶的合成和菌体生长模型为部分偶联型.菌体和威兰胶质量浓度分别达到3.30和26.50 g/L,威兰胶对细胞干质量得率系数(YP/X)为8.20.根据分批发酵实验结果采用Logistic方程、Luedeking-Piret方程和Luedeking-Piret相似方程,得到了描述Alcaligenes sp. CGMCC2428生长、威兰胶以及葡萄糖底物消耗分批发酵动力学模型.同时改变初始葡萄糖质量浓度,实验数据与模型预测值进行了比较拟合,平均相对误差小于10%,表现出很好的适用性.

生物破乳菌Alcaligenes sp. S-XJ-1氮源利用特性

以六种氨基酸及硝酸铵为氮源培养胞壁结合型生物破乳剂产生菌Alcaligenes sp.S-XJ-1,进而分析菌体对谷氨酸和硝酸铵的利用过程,并建立菌体的生长及氮源利用模型.结果表明:氮源种类和投量是影响菌体产量和性能的重要因素;菌体对氮源的利用顺序依次为有机氮、氨态氮、硝态氮;谷氨酸为氮源时对生物破乳菌产量的促进效果最佳,相比于硝酸铵为氮源时,菌体最大比增长速率和产率系数更高,用于菌体代谢供能的氮源消耗量更低.

产碱杆菌Alcaligenes sp.P156中龙胆酸1,2-双加氧酶GdoP的研究

龙胆酸是芳香族化合物微生物降解的核心代谢产物,龙胆酸降解研究对于芳香族化合物的降解研究具有重要意义。龙胆酸1,2-双加氧酶是催化龙胆酸降解的关键酶。本研究利用双加氧酶催化保守结构域在产碱杆菌P156的基因组上通过多序列比对找到一个龙胆酸双加氧酶基因gdoP;利用分子生物学技术对该基因进行异源表达;并利用重组蛋白对酶学性质和动力学参数进行测定。酶学性质研究表明,GdoP催化反应的最适pH为7.5,最适温度为40℃。GdoP是一个Fe2+依赖型双加氧酶,含有Fe2+离子结合结构域。Fe2+离子能够明显促进GdoP酶活,Cu2+、Cd2+离子对GdoP的酶活有明显抑制。以龙胆酸为底物,GdoP的Km值和Vmax值分别为641μmol/L和23.9U/mg。GdoP具有较强的底物特异性,能够催化龙胆酸开环生成3-马来酰丙酮酸,不能催化5-氨基水杨酸、水杨酸和1-羟基-2-萘酸的转化。本研究系统的研究了龙胆酸1,2-双加氧酶GdoP的酶学性质,有助于更好的研究芳香族化合物的微生物降解过程。

产碱菌Alcaligenes sp. qz-1对铬污染土壤中玉米生长和铬累积的影响研究

通过盆栽试验研究了铬(Cr_2O_7^(2-))污染土壤中接种铬耐受细菌Alcaligenes sp. qz-1对玉米株高、茎粗、叶绿素含量、地上部分和地下部分干重以及铬含量的影响。结果表明,在重金属铬(Cr_2O_7^(2-))胁迫(50 mg·kg^(–1),100 mg·kg^(–1))下,玉米生长显著受到抑制(P<0.05)。与对照相比,株高分别减少9.92%和18.97%,茎粗分别降低了13.36%和14.24%,叶绿素含量分别降低了10.46%和13.25%。接种Alcaligenes sp. qz-1,可以显著缓解重金属胁迫对玉米生长的不利影响(P<0.05)。铬(Cr_2O_7^(2-))胁迫(50 mg·kg^(–1),100 mg·kg^(–1))下,接种Alcaligenes sp. qz-1的植株与未接种的玉米植株相比,株高分别增加了6.36%和10.91%,茎粗分别增加了10.17%和8.01%,叶绿素含量分别提高了9.16%和2.64%。同时,接种Alcaligenes sp. qz-1,可显著提高玉米(尤其是根系部分)对土壤铬的吸收量,吸收总量较未接种的增加13.9%—36.9%。综上所述,接种Alcaligenes sp. qz-1改善了铬(Cr_2O_7^(2-))胁迫下玉米生长特性,增加了玉米根部对铬(Cr_2O_7^(2-))的吸收,降低了铬(Cr_2O_7^(2-))对玉米的毒害,为该菌株进一步应用农田重金属污染进行治理提供一定理论依据和实践指导。

Alcaligenes sp. YBY降解吲哚的特性研究

该研究从近海泥沙样品中,分离纯化得到1株能以吲哚为唯一碳源生长的菌株,经16S rRNA基因序列分析鉴定为产碱杆菌(Alcaligenes),命名为YBY。考察影响菌株生长和降解吲哚的环境因素,并对菌株降解吲哚的机理进行推测。结果表明,菌株YBY生长和降解吲哚的最佳条件为pH 6.77,转速150 r/min。菌株具有较好的底物广谱性,能以柠檬酸钠、2-吲哚酮、苯酚、苯甲酸、邻氨基苯甲酸等物质为唯一碳源生长。利用液相色谱、飞行时间、质谱联用对菌株代谢吲哚的产物进行分析,发现中间产物主要为靛红、靛蓝和龙胆酸,由此推测的代谢途径为:吲哚首先被羟化成吲哚酚,吲哚酚二聚成靛蓝或者氧化成靛红,靛红进一步转化成龙胆酸。

喹啉高效降解菌株Alcaligenes sp. WUST-qu的筛选、鉴定及降解特性

从某焦化厂污水处理系统的活性污泥中筛选到一株喹啉高效降解菌WUST-qu,对其形态、分类地位、降解特征和生长动力学进行表征。结果表明,该菌株为革兰氏阴性菌,有芽孢,长为1.15μm±0.08μm(n=20),宽为0.26μm±0.01μm (n=20);16S rRNA基因核苷酸序列比对结果表明,该菌株属产碱杆菌属微生物(Alcaligenes sp)。菌株WUST-qu能在初始pH为5.0～9.0内有效降解喹啉,最适初始pH为中性到略偏碱性(7.0～8.0)。在该条件下,菌株能在接种后的48 h内将最高初始质量浓度为700 mg·L^(-1)的喹啉完全降解。进一步研究表明,菌株WUST-qu不仅能够有效降解喹啉,还能有效降解苯酚,在MSM初始pH为8.0的条件下,菌株WUST-qu能在32 h内将初始质量浓度为700 mg·L^(-1)的苯酚完全降解。其以喹啉为唯一碳源生长时的动力学参数为μ_(max)=1.657 6 h^(-1),K_s=36.42 mg·L^(-1),K_i=81.418 mg·L^(-1)。

菌株Alcaligenes sp.P156中一个新型烟酸羟化酶的克隆与功能验证

本研究预测naa cluster中的naaB基因负责催化烟酸到6-羟基烟酸的反应。通过对NaaB的蛋白序列进行分析,发现该酶含有三个亚基,分别由naaB_(L1)、naaB_(S)、naaB_(L2)基因编码,其中naaB_(L1)和naaB_(L2)分别编码2个含有钼辅因子结合结构的大亚基,naaB_(S)基因编码一个含有[2Fe-2S]簇的小亚基。本研究对naaB基因进行了克隆,将构建的重组质粒pME6032-naaB_(L1SL2)分别转化到无色杆菌(Achromobacter sp.)和大肠杆菌(Escherichia coli)中,通过HPLC和LC-MS检测验证了NaaB负责催化烟酸到6-羟基烟酸,并且在无色杆菌和大肠杆菌中NaaB均能够转化烟酸,这与之前报道烟酸羟化酶不能在大肠杆菌表达的结果不同,说明NaaB的基因编码和催化功能具有独特性。通过序列分析推测NaaB的这一特性可能跟该酶同时含有两个钼结合结构域的大亚基有关。

反硝化产碱菌Alcaligenes sp.TB氧化亚氮还原酶基因的克隆表达及酶学性质研究

氧化亚氮(N_(2)O)是一种重要的温室气体,对全球温室效应的贡献非常显著,反硝化细菌中存在氧化亚氮还原酶(nitrous oxide reductase,Nos)能将其最终还原成氮气。将生物转鼓反应器中筛选得到的一株高效反硝化产碱菌Alcaligenes denitrificans TB作为供试菌株,构建含有nosZ基因序列的原核重组表达菌株,经IPTG诱导完成在大肠杆菌中的表达,其最佳诱导条件为:诱导剂IPTG终浓度为0.5 mmol·L^(-1),诱导温度为28℃,诱导时间为6 h,菌体初始浓度(OD_(600))为0.67。再利用亲和层析分离纯化得到重组蛋白,通过检测显示重组菌E.coli BL21(DE3)-pET28b-nosZ酶活力是出发菌株Alcaligenes sp.TB的2.09倍,蛋白相对含量是其10.58倍。进而考察了反应体系pH和反应温度对酶催化反应的影响,结果显示,当pH为7.0,温度为40℃时得到最佳酶活。

SP教学法在中医学专业水平技能培训的应用

研究国内外标准化病人(SP)相关文献,发现将其用于医学临床技能培训,更有利于解决理论与实践脱节、规避伦理及缓解师资不足等带来的问题,给学生公平、客观的评价。文章以山西中医药大学2018级实习生和规培生以及医院工作人员为SP招募对象,以2019级中医专业学生为培训对象,研究SP教学法在临床技能培训中的利弊,发现其在招募、筛选、培训及投入培训中存在一些困难,并提出一些意见和建议,以促进SP的长远发展,从而提升中医学专业水平的技能培训,提高实践教学质量。

WTO/SPS通报

根据《实施卫生与植物卫生措施协定》(Agreementon the Application of Sanitary and Phytosanitary Measures,简称《SPS协定》)中的透明度原则,成员应保证迅速公布所有拟采用的但尚没有对应的国际标准、指南或建议或与其在内容实质上不同的,且可能对其他成员贸易产生重大影响的卫生与植物卫生措施,以使利益相关方知晓。

海洋真菌Aspergillus sp.SWMU-WZ04-3的次生代谢产物及抗菌活性研究

目的研究海洋真菌Aspergillus sp.SWMU-WZ04-3的次生代谢产物及抗菌活性。方法利用硅胶、凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱等现代色谱分析手段对菌株的次级代谢产物进行分离纯化,结合核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance,NMR)、质谱(mass spectrom⁃etry,MS)及文献对比鉴定化合物单体结构,利用纸片扩散法测试其抗菌生物活性。结果从Aspergillus sp.SWMU-WZ04-3的发酵产物中分离得到9个化合物:化合物1为3,4-dimethoxyacetophenone;化合物2为ethyl(2E)-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)prop-2-enoate;化合物3为4-methyl-5,6-dihydropyren-2-one;化合物4为3,15-dihydroxyl-(22E,24R)-ergosta-5,8(14),22-trien-7-one;化合物5为9,12-octadecadienoic acid(Z,Z)-2,3-dihydroxypropyl ester;化合物6为1'-Hexadecanoic acid-2',3'-dihydroxy-propyleste;化合物7为2-(4-Hydroxyphenyl)ethyl 2,2-dimethylpropanoate;化合物8为(22E,24R)-麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇;化合物9为β-sitosterol。体外生物活性结果显示,化合物4在1 mg/mL的浓度下对大肠杆菌表现出抑制作用,其余化合物无明显抗菌活性。结论化合物2、5和6为首次从海洋真菌Aspergillus sp.中分离得到,且化合物4具有抗大肠杆菌活性,表明该菌株具有进一步研究的价值。

甲基对硫磷降解菌Alcaligenes.sp.YcX-20的分离鉴定及降解性能研究

采用室内培养方法,对分离到的一株具有降解甲基对硫磷活性的细菌进行了鉴定,并对其降解性能进行了研究。通过形态观察、生理生化特征及16SrDNA同源性分析将其初步鉴定到属,并确定为产碱菌属的一个新种,命名为Alcaligenes.sp.YcX-20,16SrDNA序列在GenBank中注册号为AY628412。其酯酶活性随菌液浓度和培养时间的增加呈上升趋势;在基础培养基中可耐受700mg·L-1的甲基对硫磷,在普通培养基中耐受浓度达2500mg·L-1;X-20可降解甲基对硫磷形成对硝基苯酚;以甲基对硫磷为惟一碳源时,30℃培养30h降解率达60%。

K_(sp)考点在江苏新高考中的全解析

本文全面分析了K_(sp)(难溶电解质溶度积常数)在江苏新高考化学科目中的考查情况.文章首先介绍了K_(sp)的概念及其在化学平衡中的重要性,随后通过例题详细解析了K_(sp)在高考中的不同考查形式,包括表达式书写、离子浓度大小的计算、离子浓度比值的计算、K_(sp)与K_(a)、K_(w)之间的联系以及K_(sp)与Q之间大小关系的应用.这些例题涵盖了K_(sp)在化学平衡定量分析中的应用,并强调了K_(sp)在理解和预测难溶物质溶解行为中的核心地位.文章最后强调了K_(sp)在化学学习中的重要性,并鼓励学生深入理解K_(sp),以提升解决实际化学问题的能力.

Alcaligenes sp．NX-3产威兰胶的补料分批发酵工艺研究

在7.5L发酵罐上考察了Alcaligenes sp.NX-3产威兰胶的发酵工艺。选用葡萄糖为碳源,通过分析比较不同初糖浓度下的细胞比生长速率和产物比合成速率,进一步研究了不同补料方式对产胶的影响。结果表明,采用分批补糖发酵工艺,威兰胶产量较分批发酵提高了13.6%,而且有效地缩短了发酵周期。在50L发酵罐上进行补料分批发酵放大实验,威兰胶产量高达27.0g/L,葡萄糖转化率由初始的44%提高到54%。

溶氧调控策略对Alcaligenes sp．NX-3产威兰胶发酵过程的影响

主要研究了发酵过程中溶氧调控策略对Alcaligenes sp.NX-3产威兰胶的影响。在7.5 L发酵罐中,首先考察了不同通气量对菌体生长、威兰胶浓度、葡萄糖消耗、威兰胶黏度等的影响。结果表明,通气量为1 vvm时,有利于威兰胶浓度的提高。通过研究不同供氧水平对威兰胶发酵的影响,发现较高的溶氧水平有利于威兰胶的合成,但是不利于威兰胶黏度的提高。因此提出了低供氧-中供氧-高供氧、高供氧-中供氧-低供氧2种不同溶氧调控策略。实验结果表明:采用高供氧-中供氧-低供氧策略,能够使威兰胶浓度达到25.4 g/L,葡萄糖对威兰胶的转化率提高到0.51 g/g,威兰胶黏度达到2.700 Pa.s。

一株广谱性农药降解菌(Alcaligenes sp.)的分离与鉴定

从杭州农药厂废水排放口污泥中分离到１株能降解部分拟除虫菊酯和一硫代磷酸酯类杀虫剂的广谱性降解菌ＹＦ１１．该菌球杆状，大小（１．５～１．７）μｍ×（２．５～２．８）μｍ，革兰氏阴性，４根周生鞭毛．菌落圆形，边缘整齐，表面光滑，凸状隆起．生长最适温度３０℃，最适ｐＨ７．０～７．５．好氧，氧化酶阳性．能利用蔗糖、阿拉伯糖、山梨糖、乳糖、七叶灵、果糖等，但不能利用淀粉和核糖、ＤＮＡ中Ｇ＋Ｃ含量为６１．７ｍｏｌ％（Ｔｍ）．根据上述特征，分离株被鉴定为产碱菌属（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）的一个未知种．该分离株可降解氰戊菊酯、溴氰菊酯、三氟氯氰菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯、氯菊酯、对硫磷、甲基对硫磷。

Alcaligenes sp. XJ-T-1利用废弃油脂生产破乳剂研究

生物破乳剂是一种应用于油水乳状液分离的新型破乳剂.本研究对筛选得到的1株高效破乳剂产生菌XJ-T-1(鉴定结果为Alcaligenessp.)代谢产生的生物破乳剂进行了理化性质、破乳能力和废弃油脂利用能力分析.采用废弃油脂Ⅱ为碳源,可提高生物破乳剂产量4.6倍,XJ-T-1在以液体石蜡和废弃油脂培养8 d后该菌能使水的表面张力从72 mN/m下降到32 mN/m,CMC-1分别为10、20;以液体石蜡为碳源培养得到的生物破乳剂在油包水型、水包油型模型乳状液的破乳率分别达到了96%、50%;而以废弃油脂Ⅱ为碳源培养得到的生物破乳剂的破乳率分别为97.8%、65%;采用煤油脱出率、乳状液脱除率和水脱出率3种评价方式对破乳效果评价发现生物破乳剂最先作用于乳状液的连续相;采用TLC和IR对废弃油脂生产破乳剂得到的破乳剂有效成分进行鉴定,结果为脂肽与石蜡培养产物相同.