加味消脂利肝方治疗非酒精性脂肪肝的网络药理学研究及实验验证

目的 基于网络药理学预测加味消脂利肝方治疗非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)的作用机制,并通过实验验证加味消脂利肝方治疗NAFLD的作用。方法 通过TCMSP收集加味消脂利肝方的主要化学成分及靶点信息;使用GeneCards和OMIM数据库获取NAFLD相关靶点;通过STRING平台对药物疾病靶蛋白进行蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction, PPI)网络构建,运用Cytoscape 3.9.0对PPI图进行关键靶点分析;利用Metascape数据库对共有靶点进行基因本体(gene ontology, GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)数据库通路富集分析。实验验证利用高脂饮食诱导法(high-fat feed, HFD)构建NAFLD大鼠模型,分为空白组,模型组,加味消脂利肝方低、中、高剂量组,阳性药组。灌胃2周后,HE染色观察各组血清、肝组织的形态学。结果 通过网络药理学预测得到加味消脂利肝方通过IL-6、TNF、JUN、IL-1β、CXCL8等核心靶点发挥抗炎消脂作用,KEGG富集到基因通路198条,其中包括PI3K/Akt信号通路、TNF信号通路等。验证实验表明,与空白组相比,模型组ALT、AST、TG、TC、LDL-C血清浓度明显升高(P<0.05或P<0.01),HDL-C血清浓度明显降低(P<0.01),脂滴区域增加。与模型组相比,加味消脂利肝方组NAFLD大鼠血清ALT、AST、TG、TC、LDL-C水平降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05),脂滴区域减少。结论 加味消脂利肝方具有多通路、多靶点的优势,能改善血清脂质水平及肝功能,减少肝脏内脂质沉积,最终发挥治疗NAFLD的作用。

健脾活血方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脂代谢及炎症因子的影响

目的:观察健脾活血方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝功能、血脂、血清炎症因子的影响。方法:以高脂饲料制备非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型,成功造模后将大鼠分为正常组、模型组、健脾活血方组(高、中、低3个剂量组)。健脾活血方组高、中、低剂量组分别予健脾活血方26.6、13.3、6.65 g/(kg·d)灌胃,模型组和正常组以0.9%NaCl溶液灌胃,8周后检测大鼠肝功能、血脂及血清中炎症因子的水平。结果:高脂饮食后,大鼠ALT、AST、TBIL、TC、TG、LDL-C、IL-1β、IL-18、INF-α含量均显著升高(P﹤0.01),HDL-C显著下降(P﹤0.01)。与模型组比较,健脾活血方高、中、低剂量组血清AST、TG、IL-1β、IL-18、INF-α含量均显著下降,HDL-C显著升高(P﹤0.05或P﹤0.01),健脾活血方高、中剂量组血清ALT、TC、LDL-C含量均显著性下降(P﹤0.05或P﹤0.01);健脾活血方高剂量组TBIL显著下降(P﹤0.05)。结论:健脾活血方可改善非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝功能、血脂,降低炎症因子水平。

胶乳对油井水泥浆作用机理的实验研究

利用实验方法系统研究了聚乙烯醇胶乳对油井水泥浆的失水、稠化性能、游离水和水泥石抗压强度等参数的影响。结果表明 ,胶乳加量增大时 ,油井水泥浆的失水量迅速变小 ,稠化时间延长 ,初始稠度减小 ,游离水得到有效的控制 ,水泥石的抗压强度减小而柔性增大。试验证明 ,聚乙烯醇胶乳通过成膜、吸附、水化等作用能有效地控制油井水泥浆的液相运移情况 ,调节其稠化性能 ,改善水泥石的物理力学性能。自行设计了一套测定水泥石胶结强度的装置 ,实验证明所提出的测定方法是可行的。

乙酸化学灭活动物实验研究

目的 了解乙酸注射对正常兔肝肾组织破坏作用的大小 ,比较乙酸和无水乙醇的灭活效果。材料与方法 健康家兔 2 0只 ,实验动物分 4组 :经肝实质注射乙酸组 6只 ,经肝实质注射无水乙醇组 6只 ,经股动脉插管肾动脉灌注乙酸组 4只 ,经股动脉插管肾动脉灌注无水乙醇组 4只 ,血管内组观察肾动脉及其分支动态造影表现 ,标本作病理检查 ,采用t检验进行数据处理。结果 肝实质注射乙酸及无水乙醇两组坏死区的平均直径无显著性差异 ,乙酸灌注组坏死范围和程度比相同剂量无水乙醇组广泛且严重。结论 肝实质注射乙酸和肾动脉灌注乙酸均可导致凝固性坏死改变 ,相同剂量的 5 0

中药脂肝宁预防酒精性脂肪肝的实验研究

目的探讨中药脂肝宁预防酒精性脂肪肝的作用机理。方法应用酒精灌胃方法建立大鼠酒精性脂肪肝模型,造模同时给予中药脂肝宁(ZGN)药物干预,以硫普罗宁(TPN)为对照,检测血清肝功能和肝匀浆甘油三酯(TG)、氧自由基(ORF)、抗超氧阴离子(ASOA)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量,并对大鼠肝脏行病理学检查。结果酒精灌胃12周后大鼠形成酒精性脂肪肝,中药脂肝宁高浓度组血清门冬氨酸氨基转移酶(AST)和肝匀浆TG、ORF及MDA含量显著降低,而ASOA和SOD含量升高(P<0.05),肝脏脂肪变明显改善。结论中药脂肝宁通过抑制氧化应激、稳定肝细胞膜、抑制脂质过氧化来改善酒精所致肝细胞脂肪变性。

加味四逆散防治大鼠酒精性肝病实验研究

目的观察加味四逆散对酒精性肝病大鼠的防护作用。方法采用乙醇灌胃法制备酒精性肝病大鼠模型,以小柴胡颗粒作对照,检测肝功能及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量,并观察肝组织病理变化。结果加味四逆散可明显减轻肝组织损伤,显著降低MDA含量,使SOD、GSH-PX、CAT含量明显升高。结论加味四逆散具有抗脂质过氧化、保护肝细胞、防治酒精性肝病的作用。

钻井液添加剂JLX-B抑制天然气水合物形成的实验研究

利用模拟深水井筒条件的实验设备,对纯水-甲烷体系中的天然气水合物进行了实验,建立了基础对比体系,并对钻井泥浆添加剂JLX-B抑制天然气水合物形成的作用进行了室内实验,得到了聚合醇JLX-B在不同浓度和相同浓度不同初始压力下的温压曲线。实验结果表明,在深水钻井用的钻井液中加入一定质量分数的聚合醇类处理剂JLX-B,可以延迟天然气水合物的形成。在添加剂量允许的条件下,加入质量越多,抑制效果越明显。

清脂颗粒干预酒精性脂肪肝形成的实验研究及对大鼠血清TNF-α、Leptin水平的影响

目的:探讨中药清脂颗粒对酒精性脂肪肝大鼠的疗效和作用机制。方法:采用复合造模方法诱导大鼠酒精性脂肪肝模型,给予中药清脂颗粒干预,观察肝组织病理形态和血脂、肝功能、细胞因子瘦素Leptin和肿瘤坏死因子TNF-α等的变化。结果:试验组大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C及肝功ALT、AST、GGT明显改善,并且具降低血清瘦素Leptin及肿瘤坏死因子TNF-α含量的作用。结论:中药清脂颗粒可通过改善血脂、肝功指标、降低血清TNF-α,Leptin水平,达到防治酒精性脂肪肝的目的。

金钱白花蛇药酒对小鼠镇痛作用的实验研究

目的:研究金钱白花蛇药酒的镇痛作用。方法:用小鼠热板致病法、小鼠酒石酸锑钾致扭体反应法,观察颈舒康颗粒的镇痛作用。结果:颈舒康颗粒能对抗用热板法、酒石酸锑钾所致的疼痛。结论:颈舒康颗粒有较好的镇痛作用。

左卡尼汀对乙醇诱导的小鼠急性实验性肝损伤的保护作用

目的探讨左卡尼汀(L-carnitine,L-C)对乙醇(alcohol)诱导的小鼠急性肝损伤的影响。方法取雄性小鼠60只,按体重随机分为阴性对照组,模型对照组,阳性对照组,左卡尼汀大、中、小三个剂量组共6个实验组。按实验设计给药、造模、测定部分生化指标(ALT、AST)和酶(SOD、GSH-px、CAT)的活力。结果左卡尼汀1.0g/kg连续给药7天,能够明显降低由乙醇所致的血清ALT、AST和肝指数的升高,中、小剂量(0.5 g/kg、0.25 g/kg)亦显示降低趋势。大、中剂量(1.0 g/kg、0.5 g/kg)提高肝组织细胞内抗氧化酶GSH-px、SOD和CAT活性,增强T-AOC(P<0.01),减少MDA的产生(P<0.05)。结论左卡尼汀在本试验大、中剂量范围内对小鼠乙醇所致急性肝损伤具有明显的保护作用。

有机化学设计性实验教学与实践

在有机化学实验教学中开设设计性实验是提高实验教学质量、培养学生综合能力的有效途径。主要介绍了设计性实验中教学内容的选择和实施办法,指出"苄醇的实验室制备"是一个适宜的有机化学设计性实验。

N-乙酰半胱氨酸联合家蚕丝素蛋白解酒效果的动物试验

为了开发解酒效果更好的蚕丝功能性食品,将具有氧自由基清除作用,易进入肝细胞的N-乙酰半胱氨酸添加入家蚕丝蛋白粉中,调查其对ICR种小鼠血液中乙醇的分解效果。N-乙酰半胱氨酸联合家蚕丝素蛋白灌胃处理较家蚕丝素蛋白灌胃处理对小鼠血液中的乙醇具有更好的分解效果:前者使小鼠血液中的乙醇浓度在灌胃乙醇30 min后就快速下降,至4 h时,小鼠血液中的乙醇浓度仅为对照组的8.1%;后者使小鼠血液中的乙醇浓度在灌胃乙醇120 min后开始下降,至4 h时,小鼠血液中的乙醇浓度为对照组的65.6%。N-乙酰半胱氨酸联合丝素蛋白对雌、雄ICR种小鼠和SD种大鼠的急性毒性试验结果显示,其LD50均大于10 g/kg,且在试验剂量范围(2.5、5.0、10.0 g/kg)内,对小鼠骨髓多染红细胞微核率及精子畸形发生率均未见有明显影响。在丝素蛋白粉中添加适量N-乙酰半胱氨酸后,能增强对供试动物血液中乙醇的分解作用,且无明显的毒副作用。

饮食调整治疗大鼠非酒精性脂肪性肝炎

目的:观察单纯饮食改变治疗大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的作用。方法:30只SD大鼠随机分为3组(每组n=10):正常组喂普通饲料;模型组喂高脂饲料;饮食治疗组在高脂饮食12周后恢复正常饲料喂养。16周后处死动物。结果:正常饮食能显著降低造模大鼠的体重、肝指数、转氨酶,还能改善肝脏脂肪变性和炎症坏死的程度。结论:单纯恢复正常饮食即可治疗大鼠NASH。

正交试验法优化五味子总木脂素的提取工艺

目的:优化五味子总木脂素提取工艺。方法:采用正交试验法,以五味子醇甲、甲素及乙素的含量为五味子总木脂素的含量,与浸膏含量综合加权评分,考察乙醇浓度、提取时间、乙醇倍数、提取次数对五味子总木脂素的影响;采用HPLC法:华普Unitary C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-水(B),梯度洗脱(0~10 min,A为70%;10~13 min,A为70%~85%;13~30 min,A为85%);检测波长:217 nm;柱温:30℃;流速:1.0 ml·min^(-1),进样量:10μl。结果:五味子总木脂素提取的最佳工艺条件为:14倍量的85%乙醇提取3次,每次2.5 h,五味子总木脂素提取率为1.10%,浸膏量为22.99%。结论:五味子总木脂素提取工艺稳定可靠,为生脉分散片新剂型改革提供了科学基础。

冬虫夏草提取液治疗实验性病毒性心肌炎研究

目的:旨在探讨冬虫夏草提取液早期治疗病毒性心肌炎小鼠模型的疗效。方法:10 0只成年雄性BALB/c鼠随机分为正常对照组(CG)、感染组(IG)和CSAE灌胃治疗组(CIG)。IG组、CIG组小鼠腹腔接种CVB3建立病毒性心肌炎小鼠模型,并于接种病毒后第7天、第14天分批处死。光镜下观察心肌组织学变化、心重/体重及小鼠存活率。结果:接种病毒后第7天及第14天CIG组心肌炎症坏死半定量分析较IG组显著减轻(P <0 .0 1) ,心重/体重降低(P <0 .0 1) ;CIG组14d存活率85 %显著高于IG组5 5 % (P <0 .0 5 )。结论:CSAE对VMC小鼠有保护作用。

枳椇子对大鼠酒精性脂肪肝的预防作用及机制

目的:研究枳椇子对大鼠酒精性脂肪肝的预防及作用机制。方法:用高脂饮食和酒精灌胃法诱发大鼠酒精性脂肪肝模型,并用单味中药枳椇子进行早期及中期干预,90天后处死、取血及肝组织,检测肝功能、血清超氧化物岐化酶(SOD)及肝纤维化四项(HA、LN、PⅢP、ⅣC),并对大鼠肝脏行病理学检查。结果:灌胃90天后大鼠形成酒精性脂肪肝甚至肝炎模型,早期干预组的血清AST、ALT显著降低,肝脏脂肪变及炎症显著改善。结论:枳椇子早期干预可预防大鼠酒精性脂肪肝,而抗炎、抗氧化、抗纤维化发生可能是其作用机制之一。

苯甲醇和苯甲酸制备实验改革

讨论了苯甲醇与苯甲酸制备教学实验项目的改进。通过对歧化反应条件的改变,使得实验的连续性和效率得以提高;通过选取环保性、安全性好的溶剂作为萃取剂替代危险性大的乙醚,使实验的安全性得以提高。此项实验改进具有一定的教学应用价值。

虎杖膏预防高渗药液致兔耳缘静脉炎的实验研究

目的探讨虎杖膏对高渗药液所致静脉炎的防护作用。方法将24只新西兰成年大耳白兔随机分为三组各8只,均于耳缘静脉留置静脉留置针,采用20%甘露醇2.5mL/kg静脉输注制作动物模型。输注20%甘露醇前,虎杖膏组采用虎杖膏局部外敷、乙醇组采用75%乙醇外敷、空白对照组无干预。连续给药3d后通过肉眼观察及光镜下分析评价各组耳缘静脉及周围组织病理损伤程度。结果第1～3天三组发生静脉炎的严重程度比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),虎杖膏组、乙醇组静脉炎严重程度轻于空白对照组;3d时三组的病理损伤程度比较,差异有统计学意义(均P<0.01),虎杖膏组、乙醇组在血管内皮细胞肿胀、血管周围水肿、炎细胞浸润、血栓形成4个方面轻于空白组,虎杖膏组与乙醇组比较,在炎细胞浸润、血栓形成方面差异有统计学意义(均P<0.05)。结论虎杖膏、乙醇外敷可有效防治甘露醇所致静脉炎,虎杖膏外敷防护效果优于乙醇。

丹参对急性酒精性肝损伤肝组织保护作用的研究

目的观察丹参对酒精所致大鼠急性肝损伤肝组织的保护作用。方法大鼠分为正常组(以正常饮食、饮水喂养)、模型组(连续6天高浓度白酒灌胃)、丹参低、中、高剂量组(白酒灌胃造模后,给予丹参腹腔注射)。9天后处死大鼠,观察大鼠肝脏的组织病理学改变及肝细胞的超微病理学改变。结果模型组大鼠的肝组织呈现明显的水样变性和脂肪变性,并可见少量片状肝细胞坏死。而丹参组肝细胞未见坏死改变,水样变性和脂肪变性程度也较轻,以高剂量丹参组最为显著。结论丹参对急性酒精性肝损伤肝组织有一定的保护作用。

肝硬化大鼠模型的建立及其稳定性

目的:探讨肝硬化动物模型(CM)的建立及其稳定性。方法:80只Wistar大鼠,雌雄各半。分别采用复合因素法、四氯化碳(CCl4)加乙醇法及玉米面、胆固醇加乙醇法建立大鼠肝硬化的模型(假小叶形成为判定CM成功的唯一标准)。复合因素法:40只大鼠,饲料为80%的玉米面、20%的动物油、0.5%胆固醇,饮料仅为15%的酒精,首次皮下注射40%CCl4-橄榄油溶液5 mL.kg-1(以下浓度相同),以后每3 d皮下注射CCl43 mL.kg-1。第6周末随机处死6只大鼠做肝脏病理,均符合肝硬化诊断标准。将余下存活的26只(逃逸2只、死亡6只)随机分为两组,每组13只均正常饲养,其中一组每7 d皮下注射3 mL.kg-1CCl4,观察第7、8周末的病理变化。CCl4加乙醇法:20只大鼠,以正常饲料喂养,余条件同复合因素法前6周。玉米面、胆固醇加乙醇法:20只大鼠,不用CCl4,余条件同复合因素法前6周。结果:复合因素法6周末处死6只大鼠均形成CM,成模后正常饲养,2周后假小叶均消失,而继续应用CCl42周后,大鼠假小叶基本存在。其余2种方法大鼠均未见典型肝硬化改变。结论:采用复合因素法建立的CM形成率高,成模后CCl4的应用能够保持CM的相对稳定。