葛根素对成骨细胞增殖能力及靶向Runx2的miRNA的影响

目的研究葛根素作用成骨细胞MC3T3-E1后对细胞的增殖能力和靶向Runx2基因的miRNA的影响。方法 1MTT法检测葛根素作用于MC3T3-E1细胞后对成骨细胞增殖能力的影响。2碱性磷酸酶活性检测葛根素对于成骨细胞活力影响。3葛根素作用于成骨细胞后,采用荧光实时定量PCR(Q-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)法检测Runx2的mRNA表达水平和蛋白表达水平。4采用Target Scan、Pic Tar等靶点预测软件预测靶向Runx2的miRNA,并与表达谱测定的葛根素作用MC3T3-E1前后miRNA变化作比较。5采用Q-PCR法验证葛根素作用MC3T3-E1前后靶向Runx2基因的miRNA表达量。6构建Runx2 3'UTR/突变型Runx2 3'UTR重组质粒、合成miRNA-204mimics、miRNA-204inhibitor、miRNA-204NC共转染MC3T3-E1细胞,用双荧光素酶报告基因系统验证Runx2与miRNA-204的靶向关系。结果葛根素作用后,与空白对照组比较,细胞增殖活性提高,Runx2的mRNA和蛋白表达水平上升,miRNA-204和miRNA-344f-5p表达水平下降,miRNA-2861表达水平上升,miRNA-23a-5p、miRNA-770-5p、miRNA-871-5p表达水平无明显改变。细胞转染48h后,只有Runx2 3'UTR+miRNA-204 mimics组荧光素蛋白的表达水平明显降低,说明只有miRNA-204可抑制Runx2 3'UTR报告基因的表达。结论葛根素可促进成骨细胞增殖,并通过下调靶向Runx2的miRNA的表达来提高Runx2表达水平。

镍铬合金与钴铬合金烤瓷冠对龈沟液量及其成分的影响

目的:评价镍铬合金、钴铬合金烤瓷冠对牙周组织的影响。方法:选择需要制作镍铬合金、钴铬合金烤瓷冠的患者各30例,分别于修复前、戴牙1周、1、3、6个月提取其龈沟液并检测AST、ALP活性及内毒素含量,分析龈沟液的量及AST、ALP活性和内毒素含量变化。结果:2组烤瓷冠组戴牙后1周、1、3、6个月龈沟液量与修复前差异无显著性(P>0.05)。龈沟液中AST、ALP及内毒素含量均有所增高,钴铬组戴牙后1月ALP、内毒素含量与备牙前比较P>0.05,2组其他时间点分别与修复前比较P<0.05。镍铬组戴牙后3月ALP含量较高(P<0.05),6月AST含量较高,其他时间点2组各项指标相比较P>0.05。结论:镍铬合金烤瓷冠对龈沟内的ALP、AST活性及内毒素的量有一定的影响,2种烤瓷冠差异不明显。

三角帆蚌内脏团不同插核部位对机体生理代谢的影响

研究旨在探明内脏团不同插核部位对三角帆蚌机体生理代谢的影响。试验选取2龄三角帆蚌180只,随机分成5个实验组和1个对照组,实验组按内脏团5个部位(Ⅰ.斧足内脏团前端;Ⅱ.斧足内脏团中部;Ⅲ.近生殖腺部;Ⅳ.近胃部;Ⅴ.近肾部)进行插核,并分别在插核后第5、10、20、50天(thd)采集蚌体淋巴血样,检测机体的尿酸及肝、肾生理指标的变化,以及插核对珍珠质沉积相关的钙含量和碱性磷酸酶活力的影响。结果表明:(1)与对照组相比,插核手术处理的蚌体与对照组机体生理指标有显著差异(P<0.05)。(2)5个插核组试验蚌术后5—20thd尿酸含量显著高于50thd时(P<0.05),且Ⅴ组尿酸含量在10—50thd显著高于其余各组。(3)各插核组尿素氮、肌酐含量5thd时均显著高于50thd(P<0.05),其中Ⅰ、Ⅲ组20—50thd无显著变化,Ⅴ组的尿素氮含量除5thd外,其余各个时期均显著高于其他各组(P<0.05)。(4)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组谷丙和谷草转氨酶活性在20thd前均显著低于50thd时(P<0.05),Ⅳ组谷丙和谷草转氨酶活力除了10thd外,均显著高于其余插核组,Ⅴ组的谷丙和谷草转氨酶活力,在20thd之后均仅次于Ⅳ组,并显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。(5)Ⅰ组插核后10thd血液钙含量显著低于5thd时,10—50thd间无显著变化;Ⅱ、Ⅲ组血液钙含量变化呈先增大后降低的趋势,在20thd达到峰值;Ⅳ组血液钙含量随着试验期的延长显著降低,Ⅴ组血液钙含量10、50thd时显著高于其余4组。Ⅱ、Ⅲ组碱性磷酸酶活力无显著变化,Ⅰ、Ⅳ组显著降低(P<0.05),而Ⅴ组在5—20thd显著升高,20—50thd显著降低,20thd时出现峰值。研究结果显示,三角帆蚌内脏团插核后20d内机体各生理指标显著变化,之后趋于稳定,表明其术后20d可能是机体损伤的修复和功能恢复以及钙性磷酸酶含量逐步稳定的关键时期。

林蛙油治疗绝经后骨质疏松症的临床研究

目的:观察林蛙油治疗绝经后骨质疏松症的临床疗效,并探讨其作用机制。方法:将60例绝经后骨质疏松症患者随机分为治疗组和对照组,每组30例,治疗组采用口服林蛙油治疗,对照组采用口服仙灵骨葆胶囊治疗。治疗6个月后,观察2组患者治疗前后临床症状体征评分改变及骨密度、骨代谢指标变化情况。结果:①症状体征评分。治疗前2组患者症状体征评分比较,差异无统计学意义(t=1.781,P=0.113);治疗6个月后,2组患者症状体征评分均较治疗前降低[(17.67±3.67)分,(6.44±2.46)分,t=13.808,P=0.000;(20.22±2.17)分,(11.89±1.90)分,t=15.811,P=0.007],治疗组降低更明显[(11.23±2.44)分,(8.33±1.58)分,t=2.760,P=0.025]。②骨密度。治疗前和治疗6个月后,2组患者骨密度比较,组间差异均无统计学意义(t=0.824,P=0.425;t=0.767,P=0.457);治疗6个月后,2组患者骨密度与治疗前比较,差异均无统计学意义[(-2.37±0.84)g·cm-2,(-2.65±0.91)g·cm-2,t=0.811,P=0.432;(-2.19±0.83)g·cm-2,(-2.41±0.56)g·cm-2,t=0.727,P=0.479]。③骨代谢指标。治疗前2组患者骨碱性磷酸酶、雌二醇、白细胞介素-6、骨钙素血清含量比较,组间差异均无统计学意义(t=1.622,P=0.127;t=1.114,P=0.284;t=1.554,P=0.143;t=1.185,P=0.160)。治疗6个月后,2组患者血清骨碱性磷酸酶含量[(17.13±2.13)单位·L-1,(7.80±1.82)单位·L-1,t=12.594,P=0.000;(16.40±1.80)单位·L-1,(10.73±2.12)单位·L-1,t=8.324,P=0.000]、血清白细胞介素-6含量[(125.20±13.86)μg·L-1,(88.13±10.20)μg·L-1,t=5.795,P=0.000;(131.93±11.07)μg·L-1,(107.40±7.74)μg·L-1,t=9.648,P=0.000]、血清骨钙素含量[(6.19±0.96)ng·L-1,(3.54±1.12)ng·L-1,t=6.504,P=0.000;(5.80±0.56)ng·L-1,(5.15±0.51)ng·L-1,t=6.733,P=0.000]均较治疗前降低,治疗组降低更明显[(9.33±2.87)单位·L-1,(5.67±2.64)单位·L-1,t=7.416,P=0.000;(37.17±19.08)μg·L-1,(24.53±9.85)μg·L-1,t=2.253,P=0.041;(2.65±1.53)ng·L-1,(0.64±0.37)ng·L-1,t=4.820,P=0.000];2组患者血清雌二醇含量均较治疗前升高[(21.73±5.55)pg·mL-1,(43.40±5.65)pg·mL-1,t=8.208,P=0.000;(24.27±7.72)pg·mL-1,(34.13±5.75)pg·mL-1,t=5.006,P=0.000],治疗组升高更明显[(21.67±10.22)pg·mL-1,(9.87±7.63)pg·mL-1,t=4.209,P=0.001]。结论:林蛙油在短期内未能提高绝经后骨质疏松症患者的骨密度,但可以明显提高其血清雌二醇水平,降低其血清骨碱性磷酸酶、白细胞介素-6和骨钙素水平,这可能是林蛙油可以明显改善PMOP患者的临床症状与体征的作用机制之一。

金属烤瓷冠对龈沟液中IL-1β、AST及ALP水平的影响

目的:了解不同金属烤瓷冠对局部牙周组织造成的影响,以及龈沟液中白细胞介素(IL)-1β、天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)水平与牙周组织健康状况的关系。方法:选择28例接受金属烤瓷冠修复患者的上颌切牙(共34颗)为实验对象,其中镍铬合金烤瓷冠19颗,金铂合金烤瓷冠15颗。以患牙的对侧同名健康牙为对照组,在烤瓷冠戴入6～8个月后复诊,并对龈沟液中IL-1β、AST、ALP水平进行分析。结果:镍铬合金烤瓷组IL-1β及ALP水平均高于对照组,差异有统计学意义;金铂合金烤瓷组IL-1β、ALP与对照组差异无统计学意义;两种金属烤瓷冠AST水平均普遍高于对照组,差异有统计学意义。结论:镍铬合金烤瓷冠对牙周组织的不利影响较明显,而金铂合金烤瓷冠修复前后各项指标变化不明显。龈沟液中IL-1β、AST及ALP的浓度水平可以较敏感地反应金属烤瓷冠对牙周组织的影响。

三七总皂甙对大黄鱼肾细胞生长及部分免疫相关基因表达的影响

本试验将三七总皂甙(PNS)体外作用于大黄鱼肾细胞,通过活细胞计数和荧光定量PCR检测,初步了解PNS对大黄鱼肾细胞生长及部分免疫相关因子表达的影响。结果显示,40~200μg/mL浓度的PNS对大黄鱼肾细胞生长无明显影响,但浓度达到1 mg/mL以上时,对细胞生长有负面影响;10~1 000μg/mL浓度的PNS对大黄鱼肾细胞Toll样受体5mRNA的表达有一定的上调作用,但对Toll样受体3的表达有一定的下调作用;PNS浓度为10~100μg/mL时对大黄鱼肾细胞碱性磷酸酶的表达无明显影响,但浓度达到1 000μg/mL时对该因子的表达有下调作用;PNS浓度为10μg/mL时对大黄鱼肾细胞溶菌酶的表达无明显影响,但浓度达到100μg/mL以上时对该因子的表达具有一定的下调作用。

p-[1,2,4]-三氮唑基苯酚磷酸单酯的合成及其化学发光预增强性质研究

利用三氯氧磷法制备了p-[1,2,4]-三氮唑基苯酚磷酸单酯(TAPM)。在碱性磷酸酯酶(ALP)催化水解下,TAPM对鲁米诺-H2O2-辣根过氧化酶(HRP)化学发光体系具有明显的预增强作用。考察了这一预增强发光体系中影响发光强度的各种因素,建立了鲁米诺-H2O2-HRP-TAPM-ALP发光体系测定ALP的化学发光新方法。该方法测定ALP的检出限可达1.0μg.L-1(S/N=3),ALP质量浓度在1.0～100μg.L-1范围内与化学发光强度呈良好的线性相关关系。

单克隆抗体桥联酶标法快速诊断婴幼儿呼吸道合胞病毒肺炎调查研究

１９９１年１１月～１９９２年４月对河南省部分市及地区６９５例婴幼儿肺炎和毛细支气管炎住院患儿，采用单克隆抗体桥联酶标法快速诊断呼吸道合胞病毒肺炎。采集标本时间均在发病７天以内，男４０９例，女２８６例；年龄≤３岁６８８例，＞３岁７例。本调查显示，肺炎患儿呼吸道合胞病毒阳性检出率河南省各地为１４．９％～５６．１％，其总阳性检出率为４２．３％。表明该年度在本省广大地区呼吸道合胞病毒感染呈普遍流行趋势，其冬春季节发病月份以１１～１２月份为最高（５５．６％～５７．４％），其次为１～２月份（３５．２％～４０．０％）。呼吸道合胞病毒是婴幼儿肺炎主要病原体之一，早期快速诊断可及时指导治疗，并为小儿呼吸道感染流行病学监测和预防提供了依据。

25-羟维生素 D3水平与婴幼儿社区获得性肺炎的关系

目的：探讨血清25-羟维生素 D3[25-（OH）D3]水平与婴幼儿社区获得性肺炎（CAP）的关系及临床意义。方法选取98例社区获得性肺炎患儿，其中普通肺炎组68例，重症肺炎30例，分别测定其血清中25-（OH）D3、IgA 和碱性磷酸酶（AKP）水平，选择同期在该院门诊健康体检的33例健康婴幼儿作为对照组。结果重症肺炎组、普通肺炎组、对照组血清25-（OH）D3水平分别为（21．09±7．32）ng／mL、（25．77±8．06）ng／mL、（37．13±6．94）ng／mL，各组间差异有统计学意义（t ＝9．18、3．72、5．34，均 P ＜0．05）；重症肺炎组、普通肺炎组、对照组血清 IgA 水平较各组间差异有统计学意义（t ＝5．42、3．96、8．92，均 P ＜0．05）。AKP水平各组间差异无统计学意义（t ＝0．86、0．58、0．47，均 P ＞0．05）。重症肺炎组维生素 D 缺乏率为40．0％，显著高于普通肺炎组的20．6％及对照组的9．1％（χ^2＝8．43、17．55，均 P ＜0．05）。结论CAP 患儿血清25-（OH）D3、IgA 水平低于健康儿童，在重症肺炎患儿中更明显；重症肺炎患儿维生素 D 缺乏率显著高于健康儿童。25-（OH）D3与 IgA、AKP 的检测无明显相关性。因此，维生素 D 在 CAP 的发生及发展中具有重要作用，婴幼儿低水平血清25（OH）D3可能是 CAP 发生的风险因素之一，而且与病情严重程度相关。

一种超敏增强型酶促化学发光体系

目的建立一套高灵敏度，且可广泛应用于临床检测的化学发光免疫检测平台。方法采用碱性磷酸酶标记和一种增强型发光底物配方，极大地提升化学发光免疫检测的灵敏度，并通过典型的应用实例进行可行性研究。结果增强型[3-（2-螺旋金刚烷）-4-甲氧基-4-（3-磷氧酰）-苯基-1，2-二氧环乙烷]底物液配方可提升检测的信噪比。选择要求高灵敏度的促甲状腺激素（TSH）、前列腺特异性抗原（TPSA）、肌钙蛋白（cTnI）和HIVp24抗原项目进行了免疫试剂开发的可行性研究，所选项目都具备与国际主流厂家可比的检测低限及特异性。结论迈瑞自主研发的增强型酶促化学发光增强技术可以保证整个系统的高灵敏度及临床检测结果的一致性，实现多种临床免疫检测项目的功能需求。