多底物协同-拮抗法同时检测超广谱β-内酰胺酶和AmpC β-内酰胺酶

目的 建立一种能同时检测超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)和AmpCβ 内酰胺酶 (AmpCs)的简便、实用的方法。方法 应用“多底物协同 拮抗法”(MSSAT)检测 30株阴沟杆菌 (E .cl)和 4 2株不动杆菌 (Aci)的ESBLs和AmpCs。结果 MSSAT法检出各种ESBLs产酶株 5 3株 (E .cl2 5株 ,Aci 2 8株 ) ;各种AmpCs产酶株 5 2株 (E .cl 1 9株 ,Aci 33株 ) ,其中高诱导型 1 0株 (E .cl8株 ,Aci2株 ) ,部分去阻遏型 1 2株 (E .cl5株 ,Aci 7株 ) ,完全去阻遏型 30株 (E .cl 6株 ,Aci 2 4株 ) ;同时产ESBLs+AmpCs产酶株 37株 (E .cl 1 5株 ,Aci 2 2株 ) ,其中ESBLs +高诱导型 4株(均为E .cl) ,ESBLs+部分去阻遏型 6株 (E .cl 5株 ,Aci 1株 ) ,ESBLs+完全去阻遏型 2 7株 (E .cl 6株 ,Aci 2 1株 )。结论 MSSAT法能同时检测ESBLs+AmpCs及其不同型 ,且准确、简便、实用。在同时产ESBLs +AmpCs的细菌中 ,E .cl以产诱导型AmpCs为主 ,Aci则以产非诱导型AmpCs为主。同时产ESBLs+AmpCs的细菌大部分取自痰标本。

北京发现同时产DHA-1质粒AmpC型及CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌

目的 研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时产超广谱β- 内酰胺酶(ESBL)及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型。方法 收集北京两家教学医院2 0 0 1—2 0 0 2年产ESBL且对头孢西叮耐药的5 9株大肠埃希菌和2 1株肺炎克雷伯菌,采用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点;接合试验证实酶基因有无可转移性,并用碱裂解法提取质粒;采用多重聚合酶链式反应(multiplexpolymerasechainreaction ,MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。脉冲场凝胶电泳(pulsedfieldgelelectro phoresis,PFGE)确定耐药菌株的亲缘关系。结果 北京两家医院ESBL中质粒型AmpC酶的发生率,大肠埃希菌分别为0和2 % ,肺炎克雷伯菌则分别为9.7%和17.1%。1株大肠埃希菌及9株肺炎克雷伯菌产生DHA -1型质粒AmpC酶,同时也产CTX -3型(6株)或CTX- M- 14 (1株)或SHV -12 (3株)型ESBL。10株中,3株肺炎克雷伯菌可将头孢西叮耐药性传给受体菌。这10株菌均至少携带1个约33～36kb的大质粒,未发现质粒的传播。PFGE发现这10株菌来自不同的克隆株。结论 北京地区发现同时产DHA -1质粒AmpC型及CTX- M型ESBL的肺炎克雷伯菌,它们来自不同的克隆。