蛇葡萄素钠联合卡铂对人肺腺癌GLC-82细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨蛇葡萄素钠(AMP-Na)单用及其与卡铂(CBP)合用对人肺腺癌GLC-82细胞增殖的抑制作用及可能的机制。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定两药单用及合用对GLC-82细胞的体外杀伤活性;透射电子显微镜(TEM)观察GLC-82细胞超微结构的变化;流式细胞仪(FCM)检测GLC-82细胞凋亡和caspase-3的表达。结果对于GLC-82细胞,AMP-Na与CBP合用,CBP的IC50由(17.10±4.78)mg·L-1降低到<3.12 mg·L-1(P<0.01),表明Amp-Na对卡铂抑制GLC-82细胞增殖的作用具有协同效应(CDI<1)。TEM及FCM检测结果表明,单用AMP-Na及与卡铂合用均可诱导GLC-82细胞凋亡、坏死,两药合用后坏死率由(2.56±0.41)%升高到(71.83±5.43)%(P<0.01)。AMP-Na单用及与卡铂合用作用于GLC-82细胞48 h后,caspase-3的表达均明显增高。结论AMP-Na和CBP具有协同诱导GLC-82细胞凋亡的作用,机制可能与激活细胞内caspase-3介导的信号转导通路相关。

蛇葡萄素钠协同卡铂体外诱导肺癌Lewis细胞凋亡研究

目的：考察蛇葡萄素钠（AMP-Na）单用及与卡铂合用对肺癌Lewis细胞增殖的抑制作用,初步探讨AMP-Na抑瘤作用机制。方法：应用MTT法考察AMP-Na单用及与卡铂合用对肺癌Lewis细胞的细胞毒作用;使用流式细胞仪检测凋亡相关基因Bax以及Bcl-2表达。结果：体外细胞毒实验结果表明,AMP-Na在12.5～200.0μg/m L的浓度范围内对肺癌Lewis细胞的增殖具有浓度依赖性的抑制作用,其IC_（50）为63.1μg/m L;6.3、12.5、25.0、50.0μg/m L的AMP-Na与卡铂3.1～25.0μg/m L联合用药对卡铂抑制Lewis细胞的增殖作用具有协同效应;流式细胞仪检测结果显示,AMP-Na 12.5、25.0、50.0、100.0μg/m L单用及与卡铂25.0μg/m L联合应用处理细胞48h后,Bax的表达升高,Bcl-2的表达降低（P〈0.01）,Bcl-2/Bax比率降低。结论：蛇葡萄素钠单用对Lewis细胞的增殖具有一定的抑制作用,与卡铂合用,对Lewis细胞增殖具有协同抑制效应;蛇葡萄素钠可能是通过下调Bcl-2并上调Bax从而促进肿瘤细胞凋亡。

蛇葡萄素钠协同卡铂抑制人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖

目的:探讨蛇葡萄素钠(AMP-Na)单用及其与卡铂(CBP)合用对SPC-A-1人肺腺癌细胞增殖的抑制作用及可能的机制。方法:采用MTT比色法测定AMP-Na单用及其与CBP合用对SPC-A-1细胞的体外细胞毒活性;用流式细胞仪分析AMP-Na单用及与卡铂合用后对SPC-A-1细胞凋亡的影响。结果:体外细胞毒实验和流式细胞仪结果表明,AMP-Na对人肺腺癌SPC-A-1细胞增殖的抑制作用具有明显的量效关系,与CBP联用后凋亡率较卡铂单用明显上升,有协同抑制作用。结论:AMP-Na单用能够显著抑制人肺腺癌SPC-A-1细胞的增殖,与卡铂合用可以增强卡铂的活性,协同抑制SPC-A-1细胞的增殖;AMP-Na可能是通过诱导凋亡而发挥其抗肿瘤作用。

蛇葡萄素钠的一般药理学研究

目的观察蛇葡萄素钠(sodiuum ampelopsin,AMP-Na)在不同剂量下对实验动物神经系统、呼吸系统、心血管系统的影响。方法小鼠iv AMP-Na 200,260和320 mg.kg-1,观察其对神经系统的影响;麻醉犬iv AMP-Na 45,82.2和150 mg.kg-1,观察其对呼吸系统、心血管系统的影响。结果 3个剂量组的AMP-Na分别对小鼠神经系统及犬呼吸系统无明显影响;45 mg.kg-1组对犬心血管系统亦无明显影响;但82.2和150 mg.kg-1(相当于临床患者用量15倍以上)可短暂性降低犬血压,尤其是舒张压,且减慢心率;150 mg.kg-1给药时可短暂缩短犬QRS群间期。结论 AMP-Na在药效剂量应用时比较安全,在大剂量应用时应注意对血压、心率的影响。

蛇葡萄素钠协同卡铂对人肺腺癌GLC-82细胞增殖的抑制作用

目的：研究蛇葡萄素钠（AMP-Na）协同卡铂对人肺腺癌GLC-82细胞增殖的抑制作用。方法：以25、50、100μg/ml AMP-Na,3.12、6.25、12.5、25、50μg/ml卡铂,25、50、100μg/ml AMP-Na＋3.12、6.25、12.5、25、50μg/ml卡铂作用于GLC-82细胞48h,采用MTT法测定细胞增殖抑制率。以25μg/ml卡铂,12.5、25、50、100μg/ml AMP-Na,12.5、25、50、100μg/ml AMP-Na＋25μg/ml卡铂作用干细胞48 h,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：25~100μg/ml AMP-Na对GLC-82细胞的增殖具有抑制作用,且呈浓度依赖性。25μg/ml卡铂与AMP-Na（12.5、25、50、100μg/ml）对GLC-82细胞增殖的抑制作用较单用卡铂增强。结论：AMP-Na单用对GLC-82细胞的增殖具有一定的抑制作用;与卡铂合用,对GLC-82细胞增殖具有协同抑制效应。

蛇葡萄素钠协同卡铂对肺癌Lewis细胞增殖的抑制作用

目的：研究蛇葡萄素钠（AMP-Na）协同卡铂对肺癌Lewis细胞增殖的抑制作用。方法：以6.25、12.5、25、50、100μg/ml AMP-Na＋3.125、6.25、12.5、25、50μg/ml卡铂培养细胞4 h,测定细胞活力并计算抑制率与半数抑制浓度（IC50）。以12.5、25、50、100μg/ml AMP-Na＋12.5μg/ml卡铂培养细胞12 h,流式细胞仪检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）表达。结果：系列质量浓度AMP-Na与系列质量浓度卡铂联用后对细胞生长有明显抑制作用,随质量浓度的升高,卡铂对Lewis细胞的IC50逐渐降低;AMP-Na质量浓度范围在6.25~50μg/ml时,与3.125~25μg/ml卡铂联用后,对Lewis细胞增殖的协同抑制作用最强。AMP-Na与卡铂联合培养细胞12 h后,细胞Caspase-3表达明显增强。结论：AMP-Na与卡铂合用对Lewis细胞增殖具有协同抑制效应,其机制可能与AMP-Na激活细胞Caspase-3,从而诱导细胞凋亡有关。

蛇葡萄素钠协同卡铂体外抑制人肺腺癌GLC-82细胞增值的作用

目的：考察蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用对人肺腺癌GLC-82细胞增值的抑制作用,初步探讨蛇葡萄素钠抑瘤作用机制。方法：应用MTT法考察蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用对人肺腺癌GLC-82细胞的细胞毒作用;使用流式细胞仪检测凋亡相关基因Caspase-3的表达。结果：MTT实验结果表明,蛇葡萄素钠在浓度为12.5~200μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增殖有浓度依赖性的抑制作用;卡铂在浓度为3.13~100μg/ml的剂量范围内对GLC-82细胞的增值有浓度依赖性的抑制作用;25、50μg/ml的蛇葡萄素钠对卡铂25μg/ml抑制GLC-82细胞增殖的作用具有协同效应;流式细胞仪检测结果表明,12.5~50μg/ml的蛇葡萄素钠与卡铂25μg/ml联合用药组作用于GLC-82细胞12 h后,Caspase-3表达上调,且有浓度依赖性。结论：蛇葡萄素钠单用对GLC-82细胞的增殖具有一定的抑制作用,与卡铂合用,对GLC-82细胞增殖具有协同抑制效应;蛇葡萄素钠诱导细胞凋亡的机制之一可能是通过激活细胞内的Caspase-3,从而促进凋亡的发生。

蛇葡萄素钠协同卡铂体外诱导人肺腺癌GLC-82细胞凋亡研究

目的:考察蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用对人肺腺癌GLC-82细胞增值的抑制作用,初步探讨蛇葡萄素钠抑瘤作用机制。方法:应用MTT法考察蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用对人肺腺癌GLC-82细胞的细胞毒作用;使用流式细胞仪检测凋亡相关基因Bax以及Bcl-2表达。结果:MTT实验结果表明,蛇葡萄素钠单独应用及与卡铂联合应用对GLC-82细胞的增殖均具有浓度依赖性的抑制作用;流式细胞仪检测结果表明,蛇葡萄素钠(100、50、25μg/ml)单用组及与卡铂25μg/ml联合用药组作用于GLC-82细胞48 h后,Bax表达上调,且有浓度依赖性;AMP-Na 50μg/ml单独用药组、卡铂25μg/ml单独用药组以及AMP-Na(50、25、12.5μg/ml)与卡铂25μg/ml联合用药组作用于GLC-82细胞48 h后,Bcl-2蛋白的表达下调,但无浓度依赖性。AMP-Na各剂量组(100、50、25、12.5μg/ml)单用组及AMP-Na各剂量组与卡铂25μg/ml联合用药Bax/Bcl-2的比率增高,且有浓度依赖性。结论:蛇葡萄素钠单用对GLC-82细胞的增殖具有一定的抑制作用,与卡铂合用,对GLC-82细胞增殖具有协同抑制效应;蛇葡萄素钠可能是通过下调Bcl-2并上调Bax从而促进肿瘤细胞凋亡。

蛇葡萄素钠对肿瘤细胞及正常细胞毒性作用的比较

目的：研究蛇葡萄素钠对人肺腺癌SPC-A-1细胞、人正常胚肺MRC-5细胞的毒性作用。方法：应用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;透射电子显微镜（TEM）观察细胞超微结构的变化。结果：MTT法实验表明,蛇葡萄素钠、卡铂显著抑制SPC-A-1细胞的增殖,呈现浓度依赖性,IC50分别为57.18±9.42 ug/ml、33.56±11.2 ug/ml,但对MRC-5细胞增殖的抑制作用不明显,IC50分别大于5000 ug/ml及500ug/ml;流式细胞检测分析表明,25~100ug/ml的蛇葡萄素钠可使SPC-A-1细胞增殖阻滞于S期,G0/G1期细胞明显减少,且呈浓度依赖性,50、100 ug/ml的蛇葡萄素钠可使SPC-A-1细胞发生明显凋亡,而蛇葡萄素钠对MRC-5细胞周期及凋亡的影响不明显。蛇葡萄素钠浓度为50、100ug/ml时,透射电镜下可见SPC-A-1细胞表现出典型的凋亡特征,而MRC-5细胞变化不明显。结论：蛇葡萄素钠对肿瘤细胞具有较强的毒作用,对正常细胞毒性较小。

蛇葡萄素钠体外协同卡铂抗小鼠肺癌Lewis细胞的作用

目的:研究蛇葡萄素钠单用及与卡铂联合用药对小鼠肺癌Lewis细胞的体外抗肿瘤作用,初步探讨蛇葡萄素钠抑瘤作用机制。方法:应用MTT比色法测定蛇葡萄素钠单用及与卡铂联合用药对小鼠肺癌Lewis细胞增殖的抑制作用;使用流式细胞仪检测蛇葡萄素钠单用及与卡铂合用诱导细胞凋亡作用。结果:MTT实验结果表明,蛇葡萄素钠单用在12.5、25、50、100μg/ml浓度范围内对小鼠肺癌Lewis细胞的增殖具有浓度依赖性的抑制作用;6.25~50μg/ml的蛇葡萄素钠与卡铂3.12~25μg/ml联合用药对卡铂抑制Lewis细胞的增殖作用具有协同效应;流式细胞仪结果表明,蛇葡萄素钠25、50、100μg/ml与卡铂25μg/ml联合应用时,凋亡率显著增高。结论:蛇葡萄素钠单用在一定的浓度范围内对Lewis细胞增殖具有浓度依赖性抑制作用,蛇葡萄素钠与卡铂合用可以增强卡铂的活性,有协同抑制作用,蛇葡萄素钠可能是通过诱导凋亡而发挥其抗肿瘤作用。

蛇葡萄素钠对人膀胱癌EJ细胞增殖的抑制作用

目的:研究蛇葡萄素钠(AMP-Na)对人膀胱癌EJ细胞增殖的抑制作用。方法:体外传代培养EJ细胞。以25、33、43.5、57.4、75.8、100μg/ml AMP-Na培养细胞24、48、72 h后,采用MTT法测定细胞活力并计算抑制率。以0、43.5、57.4、75.8μg/ml AMP-Na与2μg/ml顺铂培养细胞24 h后,采用流式细胞仪检测细胞数并计算细胞凋亡率与细胞周期分布。以0、43.5、57.4、75.8μg/ml AMP-Na与2μg/ml顺铂培养细胞24、48 h后,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法测定细胞中Cyclin D1 m RNA的表达。结果:以25、33、43.5、57.4、75.8、100μg/ml AMP-Na培养细胞24、48、72 h后对细胞具有明显抑制作用,且呈明显的时间依赖关系。以57.4、75.8μg/ml AMP-Na培养细胞24、48 h后在G0/G1峰之前出现凋亡峰;以75.8μg/ml AMP-Na培养细胞24 h与43.5、75.8μg/ml培养细胞48 h后,Cyclin D1 m RNA的表达减弱(P<0.05)。结论:AMP-Na能高效抑制EJ细胞的增殖并促进其凋亡,其机制可能与诱导细胞凋亡、下调Cyclin D1 m RNA表达以及使细胞周期阻滞于G0/G1期有关。