荧光定量PCR与RT-PCR技术检测HCV-RNA的比较观察

目的 比较荧光定量 ＰＣＲ与ＲＴ－ＰＣＲ（定性）检测不同检材中的 ＨＣＶ－ＲＮＡ，评价荧光定量ＰＣＲ技术测定ＨＣＶ－ＲＮＡ水平的价值。方法 采用荧光定量ＰＣＲ及 ＲＴ－ＰＣＲ（定性）技术同时检测了７１例血液透析患者的血清、血浆、淋巴细胞、尿液标本中 ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果 血清、淋巴细胞、尿液标本中 ＨＣＶ－ＲＮＡ的荧光定量 ＰＣＲ检出率（４６．３８％、８５．５１％、８０．００％），分别高于相应标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ（定性）阳性率（２４．６４、２８．９９％、２０．００％），有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。血清、淋巴细胞中同时检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的一致率，荧光定量ＰＣＲ法（３９．１３％）显著高于ＲＴ－ＰＣＲ定性法（８．７０％）（Ｐ＜０．００１）。ＨＣＶ－ＲＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ定性阳性率不随 ＲＮＡ定量水平均高而增高。结论与 ＲＴ－ＰＣＲ（定性）相比，荧光定量ＰＣＲ技术检测

荧光定量PCR技术在检测HCV-RNA中的应用

目的 评价荧光定量ＰＣＲ技术测定ＨＣＶ－ＲＮＡ水平的价值，探讨ＰＢＭＣ中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的意义。方法 采用荧光定量ＫＲ及ＲＴ－ＰＣＲ技术同时检测８７例血液透析患者的血清和淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果血清、淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ的荧光定量ＰＣＲ检出率（４９．４％、６９．０％），分别高于相应标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ阳性率（３３．３％、３５．６％）（Ｐ ＜０．０５）。血清、淋巴细胞中同时检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的一致率，荧光定量ＰＣＲ法（３１．０％）显著高于ＲＴ－ＰＣＲ定性法（６．９％）（Ｐ＜０．００１）． 荧光定量ＰＣＲ法，淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ检出率高于血清（Ｐ＜０．０１）。结论 与 ＲＴ－ＰＣＲ相比，荧光定量ＰＣＲ技术检测 ＨＣＶ－ＲＮＡ敏感性较高，对ＰＢＭＣ内ＨＣＶ－ＲＮＡ检测有利于提高ＨＣＶ检测的阳性率。

HB-VM模式与定量PCR关系

目的 :探讨血清HBVDNA水平与HBV标志物 (HBV M)表现模式的关系。方法 :对 12 0 7例慢性乙型肝炎患者进行血清HBVDNA荧光定量PCR分析 ,HBVM检测采用ELISA法。结果 :血清HBVDNA水平与HBVM表现模式有关 ,HBsAg与HBeAg的存在影响HBVDNA水平变化。结论 :HBeAg和HBVDNA有明显的相关 ,抗 HBe、抗HBc阳性者病毒未完全停止复制 。

荧光定量聚合酶链反应与分支链DNA信号扩增法检测血清HBV DNA的比较

目的 了解荧光定量聚合酶链反应 (PCR)法与分支链DNA信号扩增 (bDNA)法在检测血清中HBVDNA含量上的优缺点。方法 分别用这两种方法平行检测 44份乙型肝炎患者的血清标本 ,并与定性PCR检测结果比较。同时用荧光定量PCR法观察 15例乙肝患者干扰素治疗期间HBVDNA含量变化。结果 ①荧光定量PCR法和bDNA法比较 ,○a前者测出的HBVDNA含量均值为 ( 3 5 0× 10 5± 3 3 6)copies/μl ;后者为 ( 3 0 7× 10 5± 12 9)copies/μl ,两者比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。○b前者的HBVDNA阳性率 79 5 % ;后者及常规PCR定性法均为 5 9 1%。荧光定量PCR法的阳性检出率显著高于bDNA法及常规定性PCR法 (P <0 0 5 )。② 15例中 5例获完全应答的乙型肝炎患者其血清HBVDNA含量在治疗 16周内均逐渐下降至完全转阴。结论 荧光定量PCR法与bDNA法在检测血清HBVDNA含量上 ,结果大多一致 ,且敏感性强 ,检验也较简便、价廉 ,并能较好评价和检测乙肝患者抗病毒疗效 ,宜于临床推广。

不同方法检测血清HBV DNA的比较研究

采用夹心斑点杂交法、PCR—EB定性及Amp -lisensor定量法对HBsAg与抗—HBs 同时阳性、HBsAg阳性、抗—HBs 阳性和HBsAg与抗—HBs 均阴性的乙型肝炎病毒 (HBV)感染者检测血清HBVDNA。结果三种方法的阳性率分别为 2 9 1 %、4 7 7%和 80 2 % ;各组HBVDNA含量分别是 1 0 6.13± 1.86、1 0 6.0 8± 1.82 、1 0 4 .12± 1.4 0 和 1 0 5.0 7± 1.2 1(拷贝 /ml)。结论是Amplisensor法检测HBVDNA具有更高的敏感性 ;抗—HBs 阳性的HBV感染者血清中仍可检出HBVDNA。

定量RCR与EIA法检测血液透析患者HCV比较

目的 探讨血液透析患者丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的检测方法。方法 对７９例尿毒症长期血液透析患者，采用荧光定量ＰＣＲ法测定血清ＨＣＶ－ＲＮＡ水平，及第二代酶免疫试验（ＥＩＡ）检测丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）。结果 血液透析患者抗－ＨＣＶ阳性率２２．８％（１８／７９），荧光定量ＰＣＲ法ＨＣＶ－ＲＮＡ检出率３９．２％（３１／７９）。在抗ＨＣＶ阴性的患者中，ＨＣＶ－ＲＮＡ的检出率为４２．６％（２６／６１）。两种方法检测结果的符合率为５０．６％（４０／７９）。结论 荧光定量 ＰＣＲ技术可弥补ＥＩＡ检测的不足，在抗－ＨＣＶ阴性的血液透析患者中检测 ＨＣＶ ＲＮＡ具有重要意义。

荧光聚合酶链反应定量检测丙型肝炎患者血清中HCV RNA及其意义

目的：为了解丙型肝炎患者血清HCVRNA含量与疾病程度及血清丙氨酸转氨酶（ALT）水平的关系。方法：采用荧光聚合酶健反应（PCR）的方法，对105例不同临床类型丙型肝炎患者的血清HCVRNA进行定量检测。结果：丙型肝炎血清HCVRNA含量在103～109．5拷贝／ml之间。无症状HCV感染者血清HCVRNA含量（105.2±1.8拷贝／ml）显著低于急性丙型肝炎患者（107.5±2.4拷贝／ml）、慢性丙型肝炎患者（107.8±3.1拷贝／ml）及肝硬化（107.6±2.5拷贝／ml）。相关分析显示，慢性丙型肝炎病毒血症水平与血清ALT呈显著正相关。结论：高水平的HCV复制可能在肝损害和肝脏疾病的进展中发挥着重要作用。

维持性血液透析患者HCV检测方法的比较

目的探讨维持性血液透析(HD)患者丙型肝炎病毒(HCV)的检测方法。方法对108例HD患者,采用荧光定量PCR法测定血清HCV RNA,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清HCV抗体(抗-HCV)和HCV核心抗原(HCV-cAg),并同时检测丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST),计算其变动率。结果HD患者荧光定量PCR HCV RNA检出率为33.3%(36/108),抗-HCV阳性率为32.4%(35/108),HCV-cAg阳性率为26.9%(29/108),HCV标志阳性患者中仅4例ALT和AST均升高。在抗-HCV阳性患者中,HCV RNA检出率为82.9%(29/35);在抗-HCV阴性患者中,HCV RNA检出率为9.6%(7/73);在HCV RNA阴性患者中,抗-HCV阳性率为8.3%(6/72),两者符合率为88%[(29+66)/108];在HCV RNA阳性患者中HCV-cAg检出率为80.6%(29/36)。结论ALT不能作为血液透析患者HCV诊断和反映病情的一项敏感指标,荧光定量PCR技术可弥补ELISA检测的不足,在抗-HCV阴性的血液透析患者中检测HCV RNA具有重要意义,对监测无症状的HCV携带者或新发现的感染者,应用ELISA法检测HCV-cAg将是有意义的发展方向。