基于ACE/AngⅡ/AT1R通路探讨补肾降压方对盐敏感性高血压大鼠肾纤维化的作用机制

目的:探讨补肾降压方对盐敏感性高血压DS大鼠肾纤维化及肾素血管紧张素转换酶-血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体(ACE-AngⅡ-AT1R)信号通路的调节作用,探讨其防治高血压肾损害的作用机制。方法:选用盐敏感性高血压大鼠(Dahl salt-sensitve,DS)48只,随机数字表法分为低盐组、高盐组、缬沙坦组和补肾降压组,喂食以不同浓度钠盐饲料造模后,予药物干预8周。于干预前后测量血压。干预后酶联免疫吸附测定(ELISA)血清中血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))的含量。苏木精-伊红(HE)染色观察肾组织病理学改变情况,Masson染色观察肾纤维化程度。反转录PCR(RT-PCR)及蛋白质印迹法分别检测肾脏血管紧张素转化酶(ACE)及血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)mRNA及蛋白表达水平。结果:喂食3周不同浓度盐后,喂食高盐各组收缩压均较低盐组升高(P<0.01)。干预后,与低盐组比较,高盐组收缩压升高,Cr、BUN升高,血清AngⅡ及TGF-β_(1)水平升高,HE及Masson染色显示肾脏纤维化程度加重,肾脏ACE及AT1R蛋白及mRNA表达升高(P<0.01)。与高盐组比较,缬沙坦组及补肾降压组收缩压降低,Cr、BUN降低,血清AngⅡ及TGF-β_(1)水平降低,肾脏纤维化程度减轻,肾脏ACE及AT1R蛋白及mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾降压方有平稳降压,改善肾功能的作用,其作用机制可能与调节ACE/AngⅡ/AT1R轴进而抑制TGF-β_(1)达到延缓肾纤维化相关。

LncRNA FOXD3-AS1靶向miR-127-3p对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)叉头盒转录基因D3反义RNA1(FOXD3-AS1)对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法采用0.001 mol/L的AngⅡ处理人主动脉VSMCs。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测FOXD3-AS1和miR-127-3p的表达水平。CCK-8、流式细胞术、Transwell、Western印迹检测细胞活力、凋亡、迁移、侵袭及磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平。双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证FOXD3-AS1和miR-127-3p的靶向调控关系。结果AngⅡ诱导后VSMCs细胞存活率、迁移和侵袭细胞数、FOXD3-AS1、p-PI3K和p-AKT表达显著升高,凋亡率、miR-127-3p表达显著降低(P<0.05)。抑制FOXD3-AS1表达或过表达miR-127-3p后,AngⅡ处理的VSMCs细胞存活率、迁移和侵袭细胞数、p-PI3K和p-AKT表达显著降低,凋亡率显著升高(P<0.05)。FOXD3-AS1靶向负性调控miR-127-3p表达。抑制FOXD3-AS1能够逆转抑制miR-127-3p对AngⅡ处理的VSMCs细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及p-PI3K和p-AKT表达的影响(P<0.05)。结论抑制FOXD3-AS1能够降低AngⅡ诱导的VSMCs细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其机制可能与上调miR-127-3p和抑制PI3K/AKT信号通路有关。

过表达miR-144-3p减轻AngⅡ诱导的HUVEC损伤

目的探讨miR-144-3p对AngⅡ诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、侵袭、凋亡和ROS水平的影响。方法将细胞分为对照组(control)、模型组(AngⅡ)、阴性对照组(AngⅡ+转染miR-144-3p NC)和实验组(AngⅡ+转染miR-144-3p mimic)。PCR验证转染效率;MTT法检测细胞增殖;Transwell小室法检测细胞侵袭;凋亡试剂盒和流式细胞测量术检测细胞凋亡;流式细胞测量术检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果与对照组相比,模型组细胞的增殖和侵袭能力显著下降,而凋亡率和细胞内ROS水平显著上升(P<0.05);而实验组细胞上述指标均可得到一定程度的缓解(P<0.05)。结论过表达miR-144-3p能够有效减轻由AngⅡ诱导的HUVEC增殖、侵袭能力,以及降低AngⅡ诱导的HUVEC细胞凋亡率和ROS水平。

金莲花总黄酮下调miR-215-5p抑制PI3K/AKT信号通路影响AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖和迁移

目的 探讨金莲花总黄酮对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖、迁移的影响和潜在机制。方法 不同浓度(0.2、0.4、0.8 mmol/L)的金莲花总黄酮作用于AngⅡ诱导CFs。细胞计数试剂盒检测细胞活力确定金莲花总黄酮使用浓度。Transwell实验、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞迁移、miR-215-5p表达水平。Western印迹检测磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)和蛋白激酶B(AKT)的磷酸化水平。将miR-215-5p模拟物、抑制物分别转染CFs,检测上调或下调miR-215-5p对AngⅡ诱导的CFs增殖和迁移的影响。结果 金莲花总黄酮作用于AngⅡ诱导的CFs后,细胞活力、迁移能力、miR-215-5p、磷酸化(p)-PI3K和p-AKT蛋白表达显著降低(P<0.05)。上调miR-215-5p表达后,AngⅡ诱导的CFs活力、迁移能力显著升高(P<0.05)。下调miR-215-5p表达后,AngⅡ诱导的CFs活力、迁移能力显著降低(P<0.05)。上调miR-215-5p表达能够显著降低金莲花总黄酮对AngⅡ诱导的CFs活力、迁移能力及PI3K/AKT信号通路的影响(P<0.05)。结论 金莲花总黄酮能够降低AngⅡ诱导的CFs增殖和迁移,其机制可能与下调miR-215-5p表达和抑制PI3K/AKT信号通路有关。

NRG-1通过SIRT1-NOX2通路减轻血管紧张素Ⅱ诱导的心肌肥大

目的探究神经调节蛋白1(neuregulin-1,NRG-1)对血管紧张素Ⅱ(angiotensin-Ⅱ,Ang-Ⅱ)诱导的心肌肥大的保护作用及其潜在机制。方法体外培养大鼠心肌细胞系(H9C2),使用Ang-Ⅱ处理H9C2细胞,构建Ang-Ⅱ诱导的心肌肥大细胞模型。给予NRG-1干预H9C2细胞,通过测量心肌细胞表面积和活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,检测线粒体膜电位,通过Western blot法检测心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)、沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)及NADPH氧化酶2(NADPH oxidase isoform 2,NOX2)蛋白表达,观察NRG-1的保护作用。结果与模型组比较,NRG-1能够明显降低心肌细胞表面积(P<0.05),减少肥大标志物ANP、BNP表达(P<0.05),降低ROS水平(P<0.05),升高线粒体膜电位(P<0.05),增加SOD1、SIRT1表达(P<0.05),降低NOX2蛋白水平(P<0.05)。SIRT1抑制剂EX527可以阻断NRG-1的保护作用。结论NRG-1可改善Ang-Ⅱ诱导的心肌细胞肥大,其潜在机制可能与SIRT1-NOX2氧化应激通路有关。

阿德福韦酯联合鳖甲煎丸治疗慢性乙型肝炎合并肝硬化临床疗效及对患者血清炎症因子MMP-2 Ang-Ⅱ水平的影响

目的探讨阿德福韦酯联合鳖甲煎丸治疗慢性乙型肝炎合并肝硬化的临床疗效及对患者血清炎症因子、基质金属蛋白酶-2、血管紧张素-Ⅱ水平的影响。方法将72例慢性乙型肝炎合并肝硬化患者按照治疗方法不同分为研究组与对照组,各36例。两组均接受常规治疗,在此基础上对照组给予阿德福韦酯治疗,研究组给予阿德福韦酯联合鳖甲煎丸治疗,观察2个月。比较治疗前后两组肝功能(丙氨酸转移酶、白蛋白、总胆红素、凝血酶原活动度)、炎症因子(白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α)、基质金属蛋白酶-2及血管紧张素-Ⅱ水平。结果(1)临床疗效:研究组总有效率为97.22%,对照组为77.78%,研究组显著高于对照组(P<0.05)。(2)肝功能:治疗后两组丙氨酸转移酶、总胆红素水平均较治疗前显著降低(P<0.01),研究组显著低于对照组(P<0.01);治疗后两组血白蛋白、凝血酶原活动度水平均较治疗前显著升高(P<0.05或0.01),研究组显著高于对照组(P<0.01)。(3)炎症因子:治疗后两组白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α水平均较治疗前显著降低(P<0.01),研究组显著低于对照组(P<0.01)。(4)基质金属蛋白酶-2、血管紧张素-Ⅱ:治疗后两组基质金属蛋白酶-2、血管紧张素-Ⅱ水平均较治疗前显著降低(P<0.01),研究组显著低于对照组(P<0.01)。结论阿德福韦酯联合鳖甲煎丸治疗慢性乙型肝炎合并肝硬化临床疗效较好,优于单用阿德福韦酯治疗,其作用机制可能与降低炎症因子、基质金属蛋白酶-2、血管紧张素-Ⅱ水平有关,有利于缓解肝纤维化进程,促进患者肝功能恢复。

二脒那秦通过内源性激活ACE2抑制AngⅡ-TGF-β1通路缓解小鼠肺纤维化

本试验通过博来霉素诱导建立小鼠肺纤维化损伤模型,探究二脒那秦(diminazene aceturate,DIZE)内源性激活血管紧张素转化酶2(angiotensin-converting enzyme 2,ACE2)对小鼠肺纤维化发生发展的缓解作用。将24只雄性ICR小鼠随机均分为对照组(CON组)、模型组(MOD组)和二脒那秦处理组(DIZE组)。除CON组外,其余2组小鼠一次性气管内注射博来霉素(5 mg·kg^(-1))建立肺纤维化损伤模型。造模1 d后,DIZE组小鼠给予DIZE[15 mg·(kg·d)^(-1)]灌胃处理,CON组和MOD组小鼠同等剂量灌胃生理盐水。连续灌胃28 d,采血后,处死所有小鼠,取肺组织,进行如下试验:(1)肺组织称重,计算小鼠肺系数;HE和Masson染色观察肺病理组织学变化;碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸的含量;(2)间接ELISA法检测血清中AngⅡ和Ang 1-7含量;(3)RT-qPCR及Western blot法检测肺组织中纤维化相关因子基因和蛋白等的表达水平。结果表明:(1)与CON组相比,MOD组小鼠肺系数及羟脯氨酸含量极显著或显著升高(P<0.01&P<0.05);肺组织出现明显病理变化,主要表现肺泡塌陷,炎性细胞浸润,肺泡间隔充血、增厚,有大量胶原纤维沉积。经DIZE处理后肺系数及羟脯氨酸含量显著或极显著降低(P<0.05&P<0.01);肺纤维化程度明显减轻;(2)与CON组相比,MOD组小鼠肺组织中ACE2蛋白表达下调,血清中AngⅡ含量极显著升高(P<0.01),Ang 1-7含量极显著降低(P<0.01);DIZE处理逆转了以上变化;(3)与CON组相比,MOD组小鼠肺组织中Col1a1和Col3a1基因表达极显著上调(P<0.01),α-SMA及TGF-β1基因和蛋白表达均极显著上调(P<0.01),上皮细胞的特征蛋白E-cadherin蛋白表达极显著下调(P<0.01);与MOD组相比,DIZE组缓解了以上变化。一次性气管内注射博来霉素,28 d后可成功诱导小鼠肺纤维化损伤,高水平的AngⅡ可能协同TGF-β1参与了小鼠的肺纤维化;DIZE可能通过内源性激活ACE2,降低AngⅡ的高水平,对小鼠的肺纤维化具有一定的缓解作用。

心电图Tp-Te/QT值联合血清Ang Ⅱ水平对急性冠脉综合征患者诊断和预后评估价值

目的:探讨心电图Tp-Te/QT值联合血清AngⅡ水平对急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者诊断及MACE事件评估价值。方法:选取因胸痛入院行冠脉造影患者243例,根据造影结果分为阴性对照组(CON组)、不稳定型心绞痛组(UAP组)和心肌梗死组(AMI组),获得患者临床资料和Tp-Te/QT值,通过酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清AngⅡ水平,分析Tp-Te/QT值和AngⅡ水平在ACS诊断及预后评估中的意义。结果:相较于CON组,UAP组的年龄、TC水平及Tp-Te值较高(P<0.05);与CON及UAP组相比,AMI组SCr、TC及D-dimer、Tp-Te、Tp-Te/QT值及AngⅡ水平明显升高(P<0.05);二元Logistic回归分析结果显示Tp-Te/QT和AngⅡ水平为AMI诊断的预测因素;在AMI诊断预测中受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线结果显示Tp-Te/QT值最佳截断值为0.29(敏感度55.6%,特异度80.7%),AngⅡ最佳截断值为49.50 mg/L(敏感度83.3%,特异度49.8%),两指标联合预测能提升诊断特异度(敏感度63.9%,特异度85.5%);二元Logistic回归分析提示Tp-Te/QT值和血清AngⅡ水平是ACS患者MACE事件危险因素(P<0.05),Tp-Te/QT评估MACE事件最佳截断值为0.30(敏感度66.70%,特异度89.20%),AngⅡ最佳截断值为66.50 mg/L(敏感度75%,特异度93.2%),两指标联合预测能提升诊断敏感度(敏感度87.50%,特异度89.80%)。结论:Tp-Te/QT和血清AngⅡ对AMI诊断及主要心血管不良事件(major adverse cardiovascular events,MACE)评估具有一定的预测价值,且两者联合预测时能提升AMI诊断的特异性及敏感性。

SGLT2抑制剂卡格列净通过调控AngⅡ/TRPC6通路保护肾病综合征大鼠肾功能

目的探究SGLT2i通过调控AngⅡ/TRPC6通路对肾病综合征大鼠肾功能的保护机制。方法将大鼠随机分为对照组(Control组)、肾病综合征大鼠模型组(NS组)、NS组+卡格列净片干预组(SGLT2i组)、SGLT2i组+AngⅡ干预组(SGLT2i+AngⅡ/TRPC6通路激活剂AngⅡ组)、SGLT2i+AngⅡ组+SAR7334干预组(SGLT2i+AngⅡ+AngⅡ/TRPC6通路抑制剂SAR7334组),每组10只。检测24 h尿蛋白定量;检测生化指标(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、总蛋白(TP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平;HE染色检测肾组织病理学变化;透射电镜检测足细胞超微结构;ELISA检测血浆中AngⅡ和CaN含量;蛋白质印迹法检测肾组织中AngⅡ、TRPC6、cleaved-caspase 3蛋白表达。结果与Control组相比,NS组大鼠ALB、TP含量明显降低,24 h尿蛋白定量、BUN、SCr、TC、TG含量、足突融合率、AngⅡ和CaN含量及AngⅡ、TRPC6、cleaved-caspase 3蛋白表达明显升高(P<0.05);与NS组相比,SGLT2i组大鼠ALB、TP含量升高,24 h尿蛋白定量、BUN、SCr、TC、TG含量、足突融合率、AngⅡ和CaN含量及AngⅡ、TRPC6、cleaved-caspase 3蛋白表达明显降低(P<0.05);与SGLT2i组相比,SGLT2i+AngⅡ组大鼠ALB、TP含量明显降低,24 h尿蛋白定量、BUN、SCr、TC、TG含量、足突融合率、AngⅡ和CaN含量及AngⅡ、TRPC6、cleaved-caspase 3蛋白表达明显升高(P<0.05);与SGLT2i+AngⅡ组相比,SGLT2i+AngⅡ+SAR7334组大鼠ALB、TP含量升高,24 h尿蛋白定量、BUN、SCr、TC、TG含量、足突融合率、AngⅡ和CaN含量及AngⅡ、TRPC6、cleaved-caspase 3蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论SGLT2i对肾病综合征大鼠肾功能发挥保护作用,其机制和抑制AngⅡ/TRPC6通路有关。

AngⅡ受体拮抗剂联合甲泼尼龙治疗慢性肾小球肾炎效果及对相关指标的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂联合甲泼尼龙治疗慢性肾小球肾炎的临床效果及对相关指标的影响。方法:选择2021年1—12月我院收治的慢性肾小球肾炎82例,按照简单随机化法分为两组,各41例。对照组给予AngⅡ受体拮抗剂(厄贝沙坦)治疗,观察组在此基础上联合甲泼尼龙进行治疗。观察两组治疗效果、不良反应,对比两组治疗前及治疗后炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(CRP)及白细胞介素-6(IL-6)]、肾功能指标[血尿素(BUN)、肾小球滤过率(GFR)及血肌酐(Scr)]、血清诱导蛋白8样分子2(TIPE2)的mRNA、β2-微球蛋白(β2-MG)表达水平。结果:观察组治疗总有效率为95.12%,较对照组的73.17%高(P<0.05);观察组治疗后TNF-α、IL-6、hs-CRP、BUN、Scr水平较对照组低,GFR较对照组高(P<0.05);观察组治疗后血清TIPE2的mRNA表达、β2-MG水平较对照组低(P<0.05);两组不良反应总发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:AngⅡ受体拮抗剂联合甲泼尼龙应用于慢性肾小球肾炎患者的治疗中疗效较佳,可有效降低炎症因子水平,改善肾功能,降低血清TIPE2的mRNA表达、β2-MG表达。

心复宁V号颗粒剂对痰阻血瘀型稳定型心绞痛患者血浆AngⅡ及左室功能的影响

目的观察心复宁V号颗粒剂对稳定型心绞痛患者血浆AngⅡ及左室功能的影响。方法采用随机数字表法将100例痰阻血瘀型稳定型心绞痛患者分为对照组和观察组各50例。对照组给予西医常规治疗,观察组在对照组治疗基础上联合心复宁V号颗粒剂治疗,均连续治疗4周。观察2组治疗前后超声左心功能指标[舒张早期血流峰值速度(E峰)、舒张早期二尖瓣血流速度/舒张末期二尖瓣血流速度(E/A)、左室射血分数(EF)、左室短缩分数(FS)]、血脂指标[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、血浆AngⅡ和中医证候评分,并比较其疗效。结果与治疗前比较,观察组治疗后AngⅡ、TC、TG、LDL-C和中医证侯评分均明显降低(P<0.05),E峰、E/A、EF、FS均明显提高(P<0.05);与对照组比较,观察组治疗后AngⅡ、TC、LDL-C和中医证侯评分均明显降低(P<0.05),E/A明显提高(P<0.05)。观察组(48/50,96.00%)疗效优于对照组(40/50,80.00)(P<0.05)。结论心复宁V号颗粒剂可改善痰阻血瘀型稳定型心绞痛患者左室舒张功能,降低血浆AngⅡ和血脂水平,改善临床症状。

益气养阴、祛瘀化浊中药复方对糖尿病肾病大鼠β2-MG、ET、AngⅡ的影响

目的：观察益气养阴、祛瘀化浊中药复方对糖尿病肾病大鼠的治疗效果,探讨其对糖尿病肾病的相关作用机制。方法：采用高脂高糖饲料加腹腔注射链脲佐菌素（STZ）法建立糖尿病肾病的动物模型,实验分成正常组、中药组、阳性药组、模型组,观察各组大鼠血糖、HbA1c、β2-MG、BUN、Scr、ET、AngⅡ表达的变化,显微镜下观察肾脏的病理变化。结果：模型组大鼠血糖、HbA1c、β2-MG、BUN、ET、AngⅡ表达明显高于正常组（P〈0.01）;中药组和阳性药组大鼠血β2-MG明显低于模型组（P〈0.05）,血糖、HbA1c、BUN、ET、AngⅡ明显低于模型组（P〈0.01）;各组大鼠血Scr的含量变化不明显,无统计学意义;光镜下模型组肾脏系膜区基质增多、基底膜增厚而中药组、阳性药组上述病变有所减轻。结论：益气养阴、祛瘀化浊中药复方能有效防治糖尿病肾病,其作用机制是通过改善肾小球基底膜损伤、降低血β2-MG、肾ET、AngⅡ的含量来实现的。

丹参酮Ⅱ_A对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响

目的:通过观察丹参酮ⅡA(TSN)对AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖及Ⅰ型胶原合成的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用机制。方法:差速贴壁法提取原代CFs,采用四氮唑盐(MTT)比色法测定细胞数目,ELISA法检测Ⅰ型胶原合成,RT-PCR法半定量检测Ⅰ胶原mRNA表达。结果:①AngⅡ组OD值高于空白对照组,两者比较有显著性差异(P<0.01);AngⅡ+TSN组OD值低于AngⅡ组,两者比较有显著性差异(P<0.01)。②AngⅡ组有促进心肌成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原的作用,与空白对照组比较,有显著性差异(P<0.01);AngⅡ+TSN组Ⅰ型胶原含量低于AngⅡ组,两者比较,有显著性差异(P<0.01)。③AngⅡ组Ⅰ型胶原mRNA表达高于空白对照组,两者比较有显著性差异(P<0.05);AngⅡ+TSN组Ⅰ型胶原mRNA表达低于AngⅡ组,两者比较有显著性差异(P<0.05)。结论:AngⅡ可直接诱导CFs的增殖,促进其分泌Ⅰ型胶原,并能显著增加Ⅰ型胶原mRNA的表达;TSN对AngⅡ诱导的CFs增殖及Ⅰ型胶原分泌增加,及Ⅰ型胶原mRNA表达增强均有抑制作用。提示:TSN抗心肌纤维化作用的产生可能与丹参酮ⅡA抑制心脏局部的RAS系统有关。

活血潜阳方对SHR心肌间质重构及AngⅡ、AT1、AT2的影响

目的探讨活血潜阳方对自发性高血压大鼠(SHR)心肌间质重构的影响及其可能机制。方法10周龄雄性SHR随机分为4组:SHR对照组、中药组、西药组、中西合用组(活血潜阳方+缬沙坦),同龄WKY大鼠为正常对照组。于治疗7周及14周后酶免法及放免法测血清及心肌组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量,FQ-PCR法测心肌AT1、AT2mRNA表达,光镜观察心肌细胞及间质胶原变化和胶原容积分数(CVF),并进行各项指标间的相关分析。结果与WKY大鼠比较,SHR血清及心肌AngⅡ含量显著增高、心肌AT1、AT2mRNA表达显著上调、CVF显著增加(P<0.01)。活血潜阳方治疗7周即可显著降低组织AngⅡ含量、下调AT1mRNA表达、减少CVF(P<0.01);治疗14周可使血清AngⅡ含量降低(P<0.05)。结论活血潜阳方可改善SHR心肌间质重构,其机理可能与降低循环及心肌组织AngⅡ含量、下调心肌组织AT1mRNA表达有关。

丹参酮ⅡA对大鼠肝纤维化的干预作用及其调控Ang Ⅱ的分子机制

[目的]观察丹参酮ⅡA(tanshinone ⅡA,TSN)对四氯化碳(carbontetrachloride,CCl4)致大鼠肝纤维化的干预作用,并以血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)受体为靶点探讨相关的作用机制。[方法]SD大鼠随机分为5组,每组6只。除空白对照组外,其余各组大鼠用CCl4诱导肝纤维化模型。治疗组分别给予剂量为21.3mg/(kg·d)、14.2mg/(kg·d)、7.1 mg/(kg·d)的TSN与5%的黄蓍树胶混悬液,模型组和空白对照组给予等容积的5%黄蓍树胶溶液,灌胃1次/d。用药10周后,测定各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate transferase,AST)、Ang Ⅱ的含量,并对各组大鼠肝组织进行HE染色和羟脯氨酸(hydroxyl proline,Hyp)测定,实时荧光定量逆转录PCR(RT-PCR)和免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)分别检测I型胶原蛋白(collagen type I,Col I)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible Factor-1α,HIF-1α)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth Factor,VEGF)及血管紧张素Ⅱ 1型受体(angiotensin Ⅱ type 1 receptor,AT1R)的m RNA和蛋白表达。[结果]TSN能明显降低肝纤维化大鼠血清中ALT、AST、Ang Ⅱ的水平,降低肝组织中Hyp的含量,抑制胶原纤维的表达,降低Col I、HIF-1α、VEGF及AT1R各m RNA和蛋白表达。[结论]TSN有明显的抗肝纤维化作用,其机制与改善肝脏微循环、减少细胞外基质合成、抑制胶原纤维密切相关。

AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞建立高血压损伤模型

目的:采用高血压发病因子血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)建立高血压损伤模型。方法:使用不同浓度(0.01、0.10、1.00μmol/L和10.00μmol/L)AngⅡ诱导HUVECs不同时间(3、6、9、12 h和24 h),通过考察HUVECs形态、活性、功能、微观结构及凋亡程度来评价HUVECs损伤程度,同时采用交叉设计方差分析和多重比较方法得到AngⅡ最适诱导浓度和最佳诱导时间。结果:AngⅡ呈浓度依赖式诱导HUVECs损伤,最佳诱导条件为1.00μmol/L AngⅡ诱导12 h,此时HUVECs活性为44.85%、NO含量为43.57μmol/L、总一氧化氮合酶活力为6.99 U/mg pro、内皮型一氧化氮合酶活力为1.89 U/mg pro、丙二醛含量为7.46 nmol/mL、超氧化物歧化酶活力为27.29 U/mg pro、细胞凋亡率为41.5%,微观结构显示核膜皱缩,核仁消失,胞浆内出现大量空泡状结构,线粒体或细小或肿胀,粗面内质网扩张数目较少,部分核糖体丢失,平面内质网扩张,但细胞未解体,仍然保持细胞结构。结论:1.00μmol/L AngⅡ诱导12 h可以成功诱导HUVECs建立高血压损伤模型。

抵当汤及其拆方对糖尿病大鼠心肌AngⅡ含量和TGF-β/Smads信号通路的影响

目的:观察抵当汤及其拆方对糖尿病大鼠心肌AngⅡ含量和TGF-β/Smads信号通路的影响。方法:SD雄性大鼠复制糖尿病模型,成模大鼠分为模型组、抵当汤组、水蛭虻虫组、桃仁大黄组、缬沙坦组,另设正常对照组,灌胃生理盐水。给药8周末,放射免疫法测定心肌AngⅡ含量;实时荧光定量PCR法检测心肌TGF-β1mRNA表达;Western blot法检测心肌TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达。结果:与模型组比较,抵当汤能显著降低心肌AngⅡ含量,下调心肌组织TGF-β1mRNA及TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白表达,水蛭虻虫、桃仁大黄的作用均不如全方显著。结论:抵当汤可缓解实验性糖尿病大鼠心肌纤维化病变,其机制可能与降低心肌组织AngⅡ的含量,抑制TGF-β/Smads信号通路有关。

基于AngⅡ、ApoE表达探讨补肾中药复方首参颗粒对颈动脉粥样硬化患者的影响

目的基于Ang Ⅱ、ApoE的表达观察补肾中药复方首参颗粒对颈动脉粥样硬化患者的影响。方法选取2011年6月~2012年1月上海中医药大学附属市中医医院老年病科颈动脉粥样硬化患者80例为研究对象,采用区组随机化方法将其分为观察组(40例)和对照组(40例)。两组分别予以首参颗粒、普伐他汀口服治疗,疗程6个月。于治疗前、治疗后分别采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测患者血清AngⅡ、ApoE表达。结果治疗后6个月,观察组AngⅡ表达较治疗前显著降低(P<0.01),与对照组同期比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组ApoE表达较治疗前明显上升(P<0.01),与对照组同期比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论首参颗粒可能通过调控AngⅡ、ApoE的表达进而实现对动脉粥样硬化的多靶点干预。

苯那普利与厄贝沙坦对心衰大鼠心室重构过程中AngⅡ受体及ACE2的影响

目的探讨苯那普利、厄贝沙坦及两者联合用药对心衰大鼠心室重构过程中心肌血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)、2型受体(AT2R)及ACE2蛋白表达的影响。方法采用大鼠腹主动脉缩窄法造成压力负荷性心肌肥厚致心力衰竭模型。苯那普利或(和)厄贝沙坦连续给药8wk,检测血流动力学参数、心脏指数、心肌和血浆AngⅡ含量、心肌中AT1R、AT2R和ACE2蛋白的表达情况。结果模型组心脏指数、LVEDP、血浆和心肌AngⅡ的含量及心肌AT1R、AT2R和ACE2蛋白的表达明显升高;各治疗组心脏指数、LVEDP明显下降;苯那普利组血浆和心肌AngⅡ的含量降低,厄贝沙坦组心肌AT1R蛋白的表达明显下降而AT2R和ACE2蛋白的表达明显升高,联合应用具有协同作用。结论联合应用苯那普利和厄贝沙坦对改善心衰大鼠心室重构具有协同作用,可能与AngⅡ和AT1R的下调而AT2R和ACE2的上调有关。

黄芩苷对糖尿病肾病大鼠血浆及肾组织AngⅡ的影响

目的研究黄芩苷对糖尿病肾病(DN)大鼠AngⅡ的影响,并从AngⅡ的非血流动力学机制探讨黄芩苷防治DN的作用。方法取SPF级雄性SD大鼠19只,随机分为3组,正常组5只,模型组7只,黄芩苷组7只。模型组和黄芩苷组大鼠单次大剂量腹腔注射链脲佐菌素(STZ)7周后造成DN大鼠模型。成模后,黄芩苷组大鼠每天腹腔注射黄芩苷水溶液40mg/kg;模型组大鼠每天腹腔注射注射用水1mL/只;正常组大鼠不进行腹腔注射。治疗6周后,所有大鼠眼眶取血,用放射免疫法检测血浆AngⅡ的含量;取一侧肾置于4%多聚甲醛固定液中,采用免疫组化法检测肾小管TGF-β含量;另一侧肾取肾皮质匀浆后,-20℃保存,用放射免疫法检测肾组织AngⅡ的含量。结果黄芩苷组TGF-β的表达数量减少、强度减弱,与模型组比较,具有显著性差异(P<0.05),与正常组比较,差异无统计学意义。黄芩苷组血浆AngⅡ降低,与模型组相比较,具有显著性差异(P<0.05),与正常组比较,差异无统计学意义。肾组织AngⅡ与模型组比较及与正常组比较,差异均无统计学意义。结论黄芩苷具有保护肾脏的作用,其作用机制可能是通过降低血浆AngⅡ的含量来抑制肾小管TGF-β的表达,从而延缓DN的发展。