Chemical composition and larvicidal effects of essential oil of Blumea martiniana against Anopheles anthropophagus

Objective:To determine chemical composition of the hydrodistilled essential oil of Blumea martiniana,and to evaluate its larvicidal activity against Anopheles anthropophagus,the natural vector of malaria.Methods:Chemical composition of essential oils extracted by steam distillation was investigated by gas chromatography and mass spectroscopy（GC-MS）.Larvicidal activity of essential oil and its four main compounds was carried out by WHO method.Twenty larvae of early fourth-instar stage were used in the larvicidal assay and five replicates were maintained for each concentration.The 24 h LC50 and LC90 values were determined following probit analysis.Results:Totally 68 compounds corresponding to 98.55%of the total oil were identified and the major constituents of essential oil were:linalool（10.36%）,germacrene D（9.09%）, borneol（6.24%）,γ-terpinene（5.38%）.The oil and linalool,germacrene D,bomeol,γ-terpinene exerted significant larvicidal activity with LC50 values of 46.86,35.87,44.61,35.89,and 29.21 mg/L, respectively.It also showed a dose dependent effect on mortality.Conclusions:The essential oil of Blumea martiniana and its four major compounds may have potential for use in control of Anopheles anthropophagus larvae and could be useful in search of newer,safer and more effective natural compounds as larvicides.

福建省嗜人按蚊Anopheles anthropophagus地理布分及生态习性调查

嗜人接蚊是我国南方疟疾和马来丝虫病的主要传播媒介。1980我们在崇安五夫和建阳周墩开展疟疾和马来丝虫流行病学调查,发现它的子孢子和感染蚴自然感染率分别为0.4%和5.2%。为采取相应防制措施,降低该蚊种群密度,以期控制疟疾和马来丝虫病在我省的流行,我们从1980年开始,开展嗜人按蚊在省内的地理分布及其生态习性调查。现将结果报告如下:

Sequence differences of rDNA-ITS2 and species-diagnostic PCR assay of Anopheles sinensis and Anopheles anthropophagus from China

Anopheles sinensis and An. anihropophagus are two morphologically indistinguishable yet genetically and behaviorally distinct mosquito species that vary dramatically in their importance as vectors of malaria inChina. The sequence of the ribosomal DNA internal transcribed spacer 2 (ITS2) was determined for bothspecies to assess the species differentiation. The lengths of ITS2 was 468 hp for An. sinensis and 452 hp forAn. anthropophagus. Interspecies difference in sequence was 28. 8%. Intraspecies sequence divergence wasnegligible. A PCR method was developed for distinguishing the two species based on the species-specific variations of the ITS2 sequences. The method would amplify a diagnostic fragment in length of 425 hp for An.sinensis and 253 hp for An. anthropophagus. Field collections from 12 localities in 10 provinces of China weretested. In 440 mosquitoes identified by adult morphological characteristics as An. sinensis, 291 (66. 2 % ) wereidentified later as An. sinensis and 56 (12. 7 % ) as An. anthropophagus, the remaining 93 (22. 1 % ) were notamplified by PCR. The results showed that the morphological characteritics of adult was not reliable for fieldidentification. The PCR assay was a simple, fast and reliable method for species identification.

我国雷氏按蚊和嗜人按蚊的分子鉴别和分类地位的探讨

[目的 ]论证我国雷氏按蚊与嗜人按蚊的分类地位。 [方法 ]采用分子鉴别法 (鉴别PCR和rDNA ITS2序列 )检测辽宁及山东两省现场按蚊标本 ,并依据ITS2区序列建立分子系统树。 [结果 ]分子鉴别显示 ,辽宁和山东两省均存在雷氏按蚊和嗜人按蚊。我国雷氏按蚊 (辽宁和山东省 ,n =6 )和嗜人按蚊 (辽宁、云南、河南和四川省 ,n =10 )ITS2序列长度和GC含量分别为 45 1bp、 46 2 % ,44 8bp、 46 0 % ;各地雷氏按蚊和嗜人按蚊序列均无差异 ,但各地嗜人按蚊与对照组江苏的嗜人按蚊相比 ,种内序列差异为 0 88% ;雷氏按蚊与嗜人按蚊种间序列差异为 2 5 7%。分子系统树显示雷氏按蚊与中华按蚊、嗜人按蚊与凉山按蚊亲缘关系较近。 [结论 ]根据分子鉴别 ,确认我国雷氏按蚊与嗜人按蚊为同域分布的

湖北省嗜人按蚊分布、生态与传疟作用研究

目的 :查明湖北省嗜人按蚊分布范围、生态习性与传疟作用。方法 :全省定点和扩大范围调查嗜人按蚊分布 ,以卵块和成蚊形态鉴定蚊种 ,观察嗜人按蚊成蚊的生态及传疟能量。结果 :全省调查 4 2个县 (市区场 ) 2 87个乡镇 1151个村 ,捕获按蚊 574 4 8只 ,鉴定 4 6 130只 ,其中嗜人按蚊 396 7只 ,中华按蚊 4 2 0 14只 ,八代按蚊 149只 ,在 19个县 (市区场 ) 10 4个乡镇 6 96个村发现有嗜人按蚊分布。范围人口约 1456万 ,面积 4 .6万km2 。嗜人按蚊夜间活动高峰在 0～ 2时 ,白天主要栖息在人房 ,其次为牛房及猪栏 ,构成比依次为 84 .4 0 %、10 .30 %、9.2 5% ,少数栖息于室外。该蚊吸人血指数为 0 .86 8。传疟能量 5～ 11月平均为 0 .0 6 6 7,比同域中华按蚊 (0 .0 0 15)高 4 4 .4 7倍。结论 :嗜人按蚊分布在大洪山麓与桐柏山之间的低山、丘陵、岗地及江汉平原结合部 。

辽宁法库县、广东横琴岛可疑嗜人按蚊与四川嗜人按蚊杂交及唾腺染色体观察

目的 了解中国嗜人按蚊的分布 ,判定辽宁法库县、广东横琴岛可疑嗜人按蚊和四川嗜人按蚊是否存在生殖隔离 ,有无种间差异 ,是否为同一蚊种。方法 采用遗传学方法进行人工杂交 /自然交配 ,并对杂交后的子代进行多腺染色体制片观察。结果 辽宁法库县、广东横琴岛可疑嗜人按蚊与四川嗜人按蚊亲代杂交、回交、子代自交均能产生正常子代 ,并能大量繁殖。子代唾腺染色体制片观察未发现不联会现象。结论 辽宁法库县、广东横琴岛可疑嗜人按蚊与四川嗜人按蚊不存在生殖隔离 ,也无种间差异 ,系不同地域分布的同一种嗜人按蚊。

嗜人按蚊对溴氰菊酯抗性发生发展规律的初步研究

目的 研究嗜人按蚊对溴氰菊酯抗性的发生发展规律。方法 在实验室条件下 ,以嗜人按蚊 (Anophelesanthropophagus)幼虫为试虫 ,用溴氰菊酯乙醇液选育 ,至子 35代后分别采用 3种不同方法继续选育至子 40代。结果 嗜人按蚊经溴氰菊酯选育至子 2 7代时 ,L C50 由 0 .0 0 47m g/L上升至 0 .2 82 2 mg/L ,抗性系数高达 6 0 ,其后逐代下降 ,至子 40代时 ,L C50 为 0 .0 16 5 m g/L ,抗性系数降至 3.5 ;从子 35代起分别用 L C50 逐代、L C50 隔代、L C90 逐代选育方法继续选育至子 40代 ,抗性系数分别为敏感品系的 9.96、18.85倍。结论 嗜人按蚊对溴氰菊酯抗性呈缓慢上升 -稳定 -趋于下降的态势 ;L C50 隔代、L C90 逐代选育方法可延缓抗性下降速度。

广东省嗜人按蚊分布、生态习性、传疟作用及防制对策的研究和应用

目的 :调查广东省疟疾流行区嗜人按蚊分布、生态习性及其传疟作用 ,研究该蚊分布区防制蚊媒和控制疟疾并能替代室内滞留喷洒的有效措施。方法 :蚊媒调查方法。结果 :我省 12个市县发现嗜人按蚊 ,高峰季节为 7～ 9月 ,与疟疾发病高峰相一致 ;子孢子自然感染率为 0 .35 %～ 0 .5 4% ;用 3种方法计算的昆虫学接种率平均为 0 .0 84、0 .665、0 .2 15 ,亦即在工棚平均居住 1.5～ 11.9d ,短者 1.1d ,长者 2 1.3d就可能感染疟疾。采用溴氰菊酯浸泡蚊帐防制蚊媒 ,可降低疟疾发病率 64 .7%～ 92 .7%。目前全国有 12个省采用此方法防制媒介及控制疟疾传播 ,与室内滞留喷洒比较 ,每年可节约 10 0 0多万元 ,受保护人口近千万人。结论 :嗜人按蚊是一种偏吸人血的偏家栖蚊种 ,在本省分布广泛 ,传疟作用比其它蚊媒尤甚。溴氰菊酯等杀虫剂浸泡蚊帐对媒介按蚊具有高毒效、长持效、兴奋驱避、减少吸血率和降低疟疾发病率的作用 ,是替代室内滞留喷洒的有效抗疟措施。

广东省嗜人按蚊与中华按蚊疟疾传播强度的比较

目的比较广东省嗜人按蚊与中华按蚊疟疾传播强度,为控制疟疾爆发流行提供科学依据。方法采用按蚊密度调查等方法在广东省珠海市和惠州市进行媒介能量的调查和研究。结果广东省珠海市嗜人按蚊的媒介能量为5.863,中华按蚊为0.663;广东省惠州市嗜人按蚊的媒介能量为2.770,中华按蚊为0.249。结论嗜人按蚊的媒介能量是中华按蚊的8～11倍,说明嗜人按蚊在广东的传疟作用较中华按蚊更为重要,占主要地位。

辽宁与四川两省嗜人按蚊细胞遗传学研究

目的 确定辽宁省可疑按蚊与嗜人按蚊的遗传关系。方法 以人工诱导法和自然交配法对辽宁省可疑嗜人按蚊与四川省嗜人按蚊进行杂交实验 ,观察杂交卵的孵化率、幼虫生长情况、化蛹率、羽化率 ,判定辽宁省可疑嗜人按蚊与四川省嗜人按蚊是否存在生殖隔离 ;按Kanda法制作幼虫唾腺染色体 ,观察杂交F1代幼虫唾腺染色体联会情况。结果 两地按蚊人工诱导杂交卵的孵化率为 72 36 % ,化蛹率 70 13% ,羽化率 92 5 4 % ;自然交配孵化率、化蛹率和羽化率分别为 87 72 %、70 99%和 95 0 9%。杂交F1代与亲本回交和自交 ,杂交F2 代均能正常发育。杂交F1代幼虫唾腺染色体完全联会。结论 两地嗜人按蚊不存在生殖隔离 ,辽宁省可疑按蚊确系嗜人按蚊无疑。

湖北省嗜人按蚊分布区的环境调查

目的 了解湖北省嗜人按蚊分布区的自然环境和社会经济环境。方法 在嗜人按蚊分布区按不同地形随机抽查 5 %的村组进行调查。结果 嗜人按蚊分布区植被为树林、灌木、草皮、农作物等 ,河流、沟渠、池塘密布 ,水 pH为 6 .1～ 7.7。土质为黄、黄棕、灰、黑土 4种 ,土壤有机物 2 .72 %。农业种植单、双季稻。 5种杀虫剂用量0 .82 8kg/亩。年均气温 16 .9℃、年均湿度 76 .9%。嗜人按蚊繁殖期为 6～ 9月份 ,其高峰在单季稻区 1个 ,双季稻区 2个。它栖息人房、牛栏、猪栏内各占场所构成比依次为 80 .9%、12 .2 %和 6 .0 %。结论 嗜人按蚊在低山、丘陵岗地、浅丘平畈区呈点、片、带状分布 ,分布区植被及水源丰富 ,农作水稻以单季稻为主 ,土质为黄土和黄棕壤土。

四川省嗜人按蚊地理分布与环境的关系

本文综合分析了四川省嗜人按蚊地理分布与水系、人口密度、耕地类型、土壤以及海拔高度的关系：①该蚊主要分布在岷江流域、盆地南部长江干流区以及沱江水系。各水系该蚊在人房按蚊中所占比例存在差异，岷江、长江干流在50％以上，分别为53．86％、61．90％。②人口密度在100～600人以上／km2地带，该蚊分布最广泛；1971～1980年期间，人口密度在600人以上／km2，该蚊分布的比例高达45．71％。③该蚊多数分布在新冲积土、成都粘土、黄壤和紫色土，少数分布在棕壤、灰棕壤、沼泽土、山地草甸土、灰化棕色森林土，看来土壤类型与该蚊地理分布有一定的关系，但不是决定性条件。④四川省该蚊主要分布在海拔1000m以下，存在冬水田的平坝、丘陵或低山地区。最低海拔1000m以上及全旱地地区没有该按蚊分布，说明海拔高度和冬水田的有无，是决定其地理分布非常重要的因素。但海拔1000m以下、存在冬水田的一些县（市），仍然无该蚊分布。因此，决定其地理分布除以上因素外，还有其他条件（如气象因素）在起作用。⑤该蚊分布区疟疾的发病率与人房中该蚊所占比例密切相关。岷江流域、长江干流区人房中该蚊所占比例高，疟疾的发病率也高；相反，沱江、嘉陵江、乌江等水系人房中该蚊所占比例低，疟疾发病率亦低。另外?

海南省嗜人按蚊地理分布调查

1992和1993年的6～9月，在海南省19个市、县，22个乡（镇）、农（林）场选89个居民点开展嗜人按蚊地理分布调查。结果除了在1990年8月曾发现嗜人按蚊的文昌县铺前镇南北沟一个点捕获嗜人按蚊30只（人房5只，牛诱25只）外，其余88个点，均未发现嗜人按蚊，表明该种蚊在海南省的分布很局限。

中华按蚊和嗜人按蚊rDNA内转录间隔2区序列差异

目的：比较中华按蚊和嗜人按蚊核糖体ＤＮＡ（ｒＤＮＡ）内转录间隔２区（ＩＴＳ２）序列差异。方法：通过对ＰＣＲ扩增的ｒＤＮＡＩＴＳ２片段进行克隆测序，每种蚊测定３个克隆片段序列，比较其差异。结果：中华按蚊和嗜人按蚊的ｒＤＮＡＩＴＳ２序列长度分别为４６８和４５２ｂｐ，ＧＣ含量分别为４４．８７％和４９．１２％，两者序列差异为２８．８％。

福建省嗜人按蚊防制效果的评价与监测

目的评价灭蚊效果,监测和清除残存嗜人按蚊,巩固抗疟成果,防止疟疾重新暴发流行。方法对嗜人按蚊分布区实施以2g/m2DDT滞留喷洒和20mg/m2溴氰菊酯浸泡蚊帐灭蚊,开展复查评价防制效果。停止灭蚊后,继续开展媒介和疟疾的监测。以叮人率和人房捕获蚊数计算密度。结果闽北14个嗜人按蚊分布县(市、区)258个分布点已全部完成灭蚊后效果考核,平均每个分布点复查3.18次,浦城县部分点监测30年复查20余次。第一次复查发现,80.01%的分布点嗜人按蚊已被清除,残存嗜人按蚊从灭蚊前人房按蚊的34.1%降至4.02%。经继续实施灭蚊措施,1995年后未再捕及嗜人按蚊。1996停止灭蚊措施后,1996-2007年监测期间复查276村(次),捕获人房按蚊13408只,经鉴定全部为中华按蚊,证明福建省嗜人按蚊已被清除。嗜人按蚊媒介区灭蚊前1980年疟疾发病12921例,发病率44.90/万,发热病人血检疟原虫阳性率为23.00%。实施灭蚊措施后,疟疾流行得到有效控制,1992年发病率降至0.43/万,1990-2007年嗜人按蚊媒介区未再出现疟疾暴发流行,1998年以后未再发现当地感染病人。结论DDT滞留喷洒和溴氢菊酯浸泡蚊帐可有效防制嗜人按蚊,反复查灭清除嗜人按蚊是阻断疟疾流行,巩固抗疟成果,防止疟疾死灰复燃的根本措施。

用PCR-RFLP技术鉴别嗜人按蚊和中华按蚊的研究

目的 依据嗜人按蚊和中华按蚊rDNA的ITS2区段基因特征 ,建立一种新的嗜人按蚊和中华按蚊基因鉴别技术。方法 对不同地区的嗜人按蚊、可疑嗜人按蚊和中华按蚊样本通过采用特异性ITS2 引物PCR扩增 ,限制性内切酶RsaI和HinfI消化 ,以及琼脂糖凝胶电泳分析进行PCR -RFLP基因鉴别。 结果 不同地区嗜人按蚊rDNA的ITS2 基因PCR扩增产物能被限制性内切酶HinfI酶切 ,并显示一条 4 5 0bp的酶切DNA条带 ;中华按蚊的ITS2 基因PCR扩增产物则能被限制性内切酶RsaI酶切 ,并显示 4 0 0bp和 2 0 0bp两条酶切DNA条带 ;辽宁可疑嗜人按蚊的PCR -RFLP结果与嗜人按蚊相同而广东珠海可疑嗜人按蚊的PCR -RFLP结果与中华按蚊相同。结论 依据rDNA的ITS2 区段基因特征建立的PCR -RFLP技术可用于嗜人按蚊和中华按蚊的基因鉴别。采用该PCR -RFLP基因鉴别技术发现辽宁可疑嗜人按蚊的基因与中国大陆的嗜人按蚊属同种 ,而广东可疑嗜人按蚊的基因与中华按蚊属同种。

广东省嗜人按蚊分布及其规律研究

目的 :研究广东省嗜人按蚊的分布范围及其分布区的自然地理因素和社会经济因素。方法 :人、牛饵诱捕及现场调查。结果 :该蚊在广东分布局限 ,呈点、片状 ,以低山丘陵区为主 ,并喜分布于酸性土质 ;水体丰富 ,遮阴良好的沟溪、甘蔗地和香蕉地是其主要滋生地 ;气候以温暖湿润、阳光充沛为特点。流行区居民人均收入低 ,经济状况不佳 ;主要耕种双季稻、甘蔗、香蕉等农作物 ,农药使用量大。结论

1989～2003年江苏省疟疾流行态势分析

目的 了解江苏省疟疾控制后的流行特点 ,为制定防治对策提供依据。方法 收集全省各县 1989～ 2 0 0 3年疟疾疫情资料 ,对不同年份、不同地区的发病率或阳性率进行相关分析或显著性检验。结果 全省疟疾疫情呈下降趋势 ,疫情出现波动与局部疟疾暴发有密切关系。 2 0 0 3年复媒介地区发病率为 0 .32 /万 ,单一中华按蚊区发病率为 0 .0 6 /万 ,前者发病率明显高于后者 (P<0 .0 1)。本地居民发热病例血检阳性率为 0 .0 6 % ,流动人口发热病人血检阳性率为 0 .5 5 % ,后者明显高于前者。间接荧光抗体 (IFA)阳性率与发病率呈正相关。结论 江苏省复媒介地区疟疾潜在流行的危险性仍较高 ,控制局部暴发点是当前的主要任务 ;必须加强对流动人口和媒介的监测力度。

江苏省嗜人按蚊分布区环境特征的现场调查

目的 了解江苏省嗜人按蚊分布范围和分布区环境特征。方法 在原有嗜人按蚊分布及近年来以乡为单位疟疾发病率超过 0 .1%的县市 ,进行嗜人按蚊分布调查 ;在盱眙、六合 2县每县选5个乡、每乡 3个村进行嗜人按蚊分布区环境特征调查。结果 2 0世纪 90年代以来嗜人按蚊分布于江浦、六合、仪征、盱眙、洪泽 5县。嗜人按蚊分布区植被为树林、灌木和农作物等 ;河流、湖泊、池塘、沟渠密布 ;土壤为黄沙 (粘 )土、黄棕壤土、黑土、灰土、潮土 5种 ,其中黄沙 (粘 )土占 66.7% ,有机物含量 1.8% -2 .5 % ;水田面积占可耕地总面积的 69.5 % ,10 0 %种植单季稻 ,稻田农药年使用量平均为 18.9kg/ hm2。结论 江苏省嗜人按蚊分布区范围正在逐渐减小 ,该蚊的种群比例也正在下降 ,但这些地区自然环境仍较适宜嗜人按蚊孳生 ,因此在疟疾发病率较高和局部出现暴发点的地区 。

中国不同地域嗜人按蚊的杂交及多腺染色体观察

目的 了解我国不同省、区的嗜人按蚊是否存在生殖隔离和种间差异。方法 采用遗传学杂交技术及多腺染色体制片技术 ,对我国四川、江苏、广西的嗜人按蚊进行杂交 ,对杂交子 1代的唾液腺染色体进行制片观察。结果 四川、江苏、广西的嗜人按蚊可以在蚊笼内自然交配 ,并可连续传代 ,不存在生殖隔离。唾液腺染色体制片观察 ,各种杂交组合产生的子 1代 ,其唾液腺染色体均呈完全联会状态。结论 此次实验表明 ,我国四川、江苏、广西的嗜人按蚊不存在生殖隔离 ,也无种间差异。