IQGAP1在血管紧张素Ⅱ诱导足细胞凋亡中的作用及其机制探讨

目的研究IQ结构域GTP酶活化蛋白1（IQdomainGTPase-activatingprotein1，IQGAPl）在血管紧张素Ⅱ（Angll）诱导足细胞凋亡中的作用以及可能的分子机制。方法体外培养条件永生性小鼠足细胞（MPC），以不同浓度（0、10-12、10-10、10-8、10-6mol／L）AngⅡ处理MPC或10-8mol／LAngII刺激不同时间（0、1、3、6、12、24h），采用流式细胞术检测细胞凋亡率，免疫荧光、Western印迹法检测IQGAPl的表达及分布。IQGAPlsiRNA转染以及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路（包含p38、JNK和ERK1／23条主要通路）抑制剂SB202190（10μmol／L）、SP600125（25μmol／L）或U0126（10μmol／L）预处理MPC后，分别检测MAPK信号蛋白磷酸化水平及细胞凋亡率，并采用免疫共沉淀法研究IQGAPl与ERKl／2结合水平的变化。结果（1）AngⅡ可以诱导足细胞凋亡，且凋亡率随着刺激时间和刺激浓度的增加而进一步增加。（2）正常足细胞IQGAPl主要分布于细胞膜和胞质，随AngⅡ刺激浓度和刺激时间的增加，胞膜和胞质IQGAPl表达逐渐增高，且随剂量和时间增高。（3）SB202190、SP600125或U0126分别预处理足细胞，可显著降低Ang11诱导的足细胞凋亡（P〈0．05），但不影响IQGAPl蛋白表达。（4）IQGAPlsiRNA转染足细胞显著下调ERKl／2磷酸化水平（P〈0．05），降低IQGAPl与ERKl／2结合量（P〈0．05），并抑制AnglI诱导的细胞凋亡（P〈0．05），但对于p38以及JNK通路无显著影响。结论IQGAPl通过ERKl／2MAPK信号通路介导AngⅡ诱导的足细胞凋亡。