实时荧光定量PCR检测大鼠组织Angptl3表达的标准曲线构建

目的:采用实时荧光定量PCR(染料法)建立检测SD大鼠组织血管生成素样蛋白3(Angiopoietin-related protein3,Angptl3)表达量的标准曲线。方法:以SD大鼠肝组织总RNA为模板,通过RT-PCR获得目的DNA片段,用T-A克隆方法将其装载到质粒pUCm-T上,经过转化、质粒提取获得标准品,并以此为模板梯度稀释进行Real-time PCR反应,建立该方法的标准曲线。结果:Angptl3标准曲线相关系数为0.9976,相关性较好;斜率为0.8623,扩增效率适中。结论:成功构建了用Real-time PCR方法检测SD大鼠肝组织Angptl3表达量的标准曲线。