小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株中Annexin A7蛋白的表达及意义

目的观察Annexin A7(ANXA7)蛋白在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株(Hca-F、Hca-P)中的表达水平,分析其在两种细胞株中的表达及意义。方法采用免疫细胞化学、Western blot和流式细胞仪检测ANXA7在细胞株Hca-F和Hca-P中的表达。结果免疫细胞化学结果显示,ANXA7表达于Hca-F细胞胞核和胞质,以胞核为主,在Hca-P中表达位于胞质;Western blot结果显示,ANXA7在Hca-F、Hca-P中的表达相对值分别为0.09±0.01和0.23±0.02,ANXA7在Hca-F细胞中的表达明显低于Hca-P,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞仪结果显示,ANXA7在Hca-F细胞中的相对荧光强度值(57.71±9.85)显著高于Hca-P(17.61±1.00),差异有统计学意义(P<0.001)。结论 ANXA7在Hca-F、Hca-P中的差异性表达可能与肿瘤淋巴道转移能力相关。

Annexin A7及其共相关蛋白研究进展

膜联蛋白(annexin A7)是一种能促进膜融合的钙依赖性磷脂结合蛋白,近来研究表明其在多种肿瘤的发生、发展、转归中起重要作用。Annexin A7可与多种蛋白(如半乳糖凝集素3,抗药蛋白,凋亡相关基因2,死亡结构域沉默子等)相互作用。Annexin A7及其共相关蛋白的研究有助于阐明Annexin A7在肿瘤细胞发生、发展机制中的作用,有利于发现新的肿瘤治疗靶点。

膜联蛋白A7与IGFBP2结合抑制肝癌细胞增殖

目的分析膜联蛋白A7(ANXA7)与肝癌发生的相关性及筛选、鉴定ANXA7的相互作用分子,探讨ANXA7在肝癌发生中的机制。方法通过实时定量PCR法检测48对肝癌与癌旁组织以及多种肝和肝癌细胞株中ANXA7表达量的差异,并通过肝癌细胞ANXA7过表达及特异性干扰抑制分析其对肝癌细胞增殖的影响。采用免疫共沉淀法筛选与ANXA7发生结合的蛋白,并以点突变法分析蛋白质相互作用的关键位点;用蛋白免疫印迹法分析了ANXA7对肝癌相关的重要信号通路中ERK1/2磷酸化水平的影响。结果 ANXA7在肝癌组织与肝癌细胞中均呈下调表达。胰岛素样生长因子结合蛋白2(insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP2)能与ANXA7蛋白发生特异性结合,且IGFBP2上的RGD序列是两者结合的关键位点。肝癌细胞中ANXA7表达上调能抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05),并能使IGFBP2介导的ERK1/2的磷酸化水平降低。下调ANXA7的表达可促进肝癌细胞增殖(P<0.01),磷酸化ERK1/2的水平升高。结论 ANXA7可能作为一种抑癌基因,通过介导IGFBP2对ERK1/2磷酸化水平的影响参与对肝癌增殖的调控。

ANXA7和HE4在子宫内膜癌中表达的实验研究

目的探讨膜联蛋白A7(annexin A7,ANXA7)和人附睾蛋白4(human epididymis protein4,HE4)在子宫内膜癌中的表达及相关性。方法采用免疫组织化学方法检测石蜡包埋的子宫内膜组织中84例子宫内膜癌,30例子宫内膜不典型增生和18例正常子宫内膜组织中ANXA7和HE4蛋白的表达。采用Western Blot方法检测ANXA7和HE4的表达情况;通过免疫共沉淀技术和双重免疫荧光染色研究ANXA7和HE4之间的结构关系。结果免疫细胞化学检测的结果证实了ANXA7和HE4在子宫内膜癌细胞系中均有表达。免疫荧光显示通过红色荧光标记的ANXA7和通过绿色荧光标记的HE4在子宫内膜癌细胞系和不同子宫内膜组织的细胞膜和细胞质中的共表达,并且观察到重叠的橙色荧光。蛋白质印迹法结果证实ANXA7和HE4在子宫内膜癌细胞系中均有表达。免疫共沉淀测试检测到两种细胞系中ANXA7和HE4之间的相互作用。ANXA7在子宫内膜癌,恶性和非典型增生组织中的阳性表达率显著高于正常组织中的阳性表达率(P<0.05)。子宫内膜癌组HE4阳性表达率明显高于非典型增生组和正常对照组(P<0.05)。结论ANXA7和HE4在子宫内膜癌中均有表达。ANXA7和HE4的表达水平与子宫内膜癌的恶性生物学行为密切相关。