敲除Annexin A7基因的小鼠早期胚胎心肌细胞钙稳态正常(英文)

目的 :研究AnnexinA7在早期胚胎发育过程中对钙平衡调节的作用 .方法 :利用钙成像技术和膜片钳技术检测敲除AnnexinA7小鼠的早期胚胎心肌细胞的钙平衡以及相应的离子通道的特性 .结果 :在胚胎心肌细胞发育的早期 ,敲除AnnexinA7小鼠胚胎心肌细胞的静息钙 (340 / 380荧光比例 0 .78± 0 .0 2 )、钙峰值 (340 / 380荧光比例 1.2 8± 0 .0 5 )和正常细胞的值相似 ;动作电位 (APD90 2 4 2 .7± 4 3.7ms、最大去极化电位 5 6 .8± 1.7mV)以及L 型钙电流密度 (14 .1± 2 .5pA/ pF)和正常细胞的相似 ,并且钙电流能被碳酰胆碱减小(5 1.7± 8) % ,也和正常细胞相似 .结论 :敲除AnnexinA7基因的小鼠早期胚胎心肌细胞具有正常的钙稳态以及正常的离子通道 .

Annexin A7在精原干细胞中的表达研究

目的:探讨Annexin A7在睾丸中的表达,尤其是在精原细胞各亚型中的分布。方法:采用原核表达法制备了Annexin A7的重组蛋白,质谱鉴定后用其吸附Annexin A7抗体,并用W estern印迹及免疫组化的方法检测了Annexin A7的表达。结果:研究发现Annexin A7于青春期前的小鼠睾丸中主要在精原细胞中表达,并有一定发育依赖性;在成年睾丸中主要表达于As及Apr精原细胞,且与分化型精原干细胞(SSCs)的分子标志Stra8的共表达也进一步证实上述结果。结论:Annexin A7是As及Apr精原干细胞的内在因子,可参与SSCs的生物学功能。

敲低膜联蛋白A7对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响

目的:观察靶向敲低人乳腺癌MCF-7细胞膜联蛋白A7(AXNA7)的表达对MCF-7细胞凋亡的影响。方法:实验分为3组,以靶向ANXA7的si RNA转染MCF-7细胞为si RNA干扰组,另设阴性对照组、空白对照组,采用RT-PCR法和Western blot法检测转染后MCF-7细胞ANXA7的表达情况,应用流式细胞术检测ANXA7低表达对MCF-7细胞凋亡的影响。结果:转染后,si RNA干扰组细胞ANXA7的表达明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05);敲低ANXA7后,MCF-7细胞凋亡明显增加(P<0.05)。结论:ANXA7低表达可促进乳腺癌细胞MCF-7凋亡。

膜联蛋白A7对肿瘤细胞黏附分子表达及生物学行为的影响

[目的]研究Annexin A7基因对肿瘤细胞黏附分子表达及其生物学行为的影响。[方法]采用sh RNA干扰技术稳定转染小鼠Hca-P细胞,获得Annexin A7下调表达及Hca-P无关序列细胞株,采用Western Blot、q RT-PCR分别检测Annexin A7对黏附相关分子FAK、Src、E-cadherin等基因及蛋白表达水平的影响,应用淋巴结粘附及Transwell侵袭实验检测Annexin A7下调对Hca-P细胞淋巴结粘附及侵袭能力的干扰。[结果]Annexin A7基因表达下调组细胞的FAK和Src基因及蛋白表达水平较A7无关序列组分别上升1.81倍、1.80倍及1.58倍、1.59倍（P〈0.05）,E-cadherin基因及蛋白表达水平则分别下降54.11%和54.27%,而上述分子基因与蛋白表达水平在未处理Hca-P组与A7无关序列组间无统计学差异（P〉0.05）,且在Annexin A7下调后Hca-P细胞的淋巴结粘附及侵袭能力上升,Sh RNA-Annexin A7组淋巴结黏附细胞数（1074±162.8）显著性多于A7无关序列组（234.7±40.08）及Hca-P组（220.3±39.53）（P〈0.05）,Sh RNA-A7细胞组穿过小室的细胞数目（294.8±64.40）明显多于A7无关序列细胞组（79±28.04）及Hca-P细胞组（57.60±25.62）（P〈0.05）,而Hca-P与无关序列细胞组之间则无统计学差异（P〉0.05）。[结论]Annexin A7可通过影响黏附相关分子FAK、Src、E-cadherin等基因与蛋白表达水平从而改变Hca-P细胞生物学行为。