抗VLA-4单克隆抗体动员的外周血干细胞重建辐射损伤小鼠造血的初步研究

目的 观察抗VLA-4单克隆抗体动员的外周血干细胞对辐射损伤小鼠造血重建的效果。方法 8.5 Gy^(60)Co γ射线照射的BALB/c小鼠,分别接受经生理盐水(实验1组)及抗VLA-4单克隆抗体(实验2组)动员的外周血干细胞移植,观察受体小鼠的4周存活率、外周血白细胞(WBC)、骨髓有核细胞(BMN),粒细胞巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)及脾集落形成单位(CFU-S)等指标。结果 实验2组小鼠的4周存活率、WBC、BMNC,CFU-GM、CFU-S数均明显高于对照组、实验1组,差异具有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论 抗VLA-4单克隆抗体能有效动员小鼠外周血干细胞,并能成功重建辐射损伤小鼠的造血功能。

CTLA-4在肺癌中的研究进展

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4,CTLA-4)是一种白细胞分化抗原,也是T细胞上的一种跨膜受体,目前针对CTLA-4在抑制T细胞免疫应答中所起作用的研究取得了一定的突破和成绩,与程序性死亡受体1(programmed death receptor-1,PD-1)共同打开了肿瘤治疗的新局面。通过对上述两个靶点的抑制,可以激活免疫系统,增强T细胞介导的免疫反应,从而增强患者的抗肿瘤能力,并且相应的免疫检查点抑制剂(例如抗CTLA-4单克隆抗体Ipilimumab)已用于黑色素瘤、肺癌等癌种的临床治疗。现就CTLA-4、抗CTLA-4单克隆抗体在肺癌中的作用机制及研究进展作一综述。

日本血吸虫抗独特型单克隆抗体NP30免疫后小鼠血清IFN-γ、IL-4水平的变化

目的观察日本血吸虫抗独特型单克隆抗体NP30免疫后机体血清有关细胞因子水平的变化,初步探讨NP30保护性免疫的机制。方法雌性BALB/c小鼠经腹腔注射免疫NP30 10μg/次,共免疫3次,每次间隔2w。同时设PBS对照组。末次免疫1w后开始尾静脉采血,连续采血6次,每次间隔1w。夹心ELISA法测血清中细胞因子IFN-γ、IL-4的水平。结果与PBS对照组相比,10μgNP30免疫组血清IFN-γ水平增高,且以第2w(P=0. 035)、第3w(P=0. 019)最明显; NP30免疫组血清IL-4水平也增高,且以第3w(P=0. 028)最明显。结论从结果可以看出INF-γ水平升高出现较早,但维持时间较短,而IL-4水平升高出现较晚,但维持时间较长。说明NP30的保护性免疫早期以细胞免疫为主要类型,而在后期则转为体液免疫为主要类型。

ELISA法定量测定食蟹猴血清中的抗CTLA-4单克隆抗体

目的:建立酶联免疫吸附法(ELISA法)用于测定食蟹猴血清中的抗CTLA-4单克隆抗体(伊匹单抗,YERVOY^(■))的浓度。方法:建立间接ELISA方法对待测抗体药进行浓度测定,将Human CTLA-4蛋白包被于酶标板中,封闭后加入稀释后样品,采用HRP标记的羊抗人Ig G作为酶标抗体,用TMB底物进行显色并用2 mol·L^(-1)硫酸终止,在酶标仪上用双波长读取D_(450/630 nm)值。最后以标准曲线样品D_(450/630 nm)为纵坐标(Y),以样品浓度为横坐标(X),进行非线性五参回归运算,得到标准曲线方程,将待测样品D_(450/630 nm)带入方程即可得到待测样品浓度。结果:在优化的条件下,本方法的定量范围为0.625-30.000μg·mL^(-1),定量下限为0.625μg·mL^(-1)。精密度(批内和批间)均在±15%之内,准确度介于75%-125%。方法特异性、选择性、稀释线性均满足可接受标准,准确度介于80%-120%。同时抗CTLA-4单克隆抗体在食蟹猴血清中经验证具有良好的室温稳定性、反复冻融稳定性及长期稳定性,样品准确度均介于80%-120%。结论:本研究建立的方法满足《中华人民共和国药典》2020年版中生物样品定量分析方法验证指导原则的要求,可用于定量分析食蟹猴血清中抗CTLA-4单克隆抗体(YERVOY^(■))的浓度。