血清TNF-α、FS、Sp17Ab对子宫内膜异位症合并不孕症患者腹腔镜术后IVF-ET助孕妊娠结局的预测价值

目的探讨血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、卵泡抑素(FS)、抗精子蛋白17抗体(Sp17Ab)对子宫内膜异位症(EMT)合并不孕症患者腹腔镜术后体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕妊娠结局的预测价值。方法选择2020年1月至2022年2月在空军军医大学第二附属医院接受腹腔镜手术后IVF-ET助孕的EMT合并不孕症患者157例为研究对象,根据临床妊娠结果分为妊娠组和未妊娠组。比较两组IVF-ET助孕前血清TNF-α、FS和Sp17Ab水平,采用多因素Logistic回归分析IVF-ET助孕妊娠结局的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清TNF-α、FS、Sp17Ab对IVF-ET助孕失败的预测价值。结果妊娠组IVF-ET助孕前血清TNF-α、FS、Sp17Ab水平均低于未妊娠组(P<0.05)。妊娠组美国生殖医学学会(ASRM)分期Ⅲ~Ⅳ期患者占比低于未妊娠组,EMT生育指数(EFI)、基础促黄体生成素(LH)、基础促卵泡激素(FSH)高于未妊娠组,而获卵数、可移植胚胎数多于未妊娠组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,ASRM分期为Ⅲ~Ⅳ期及TNF-α、FS、Sp17Ab水平升高是IVF-ET助孕的独立危险因素(P<0.05),EFI升高、获卵数增多、可移植胚胎数增多是IVF-ET助孕的保护因素(P<0.05)。血清TNF-α、FS、Sp17Ab单项及联合检测预测IVF-ET助孕失败的曲线下面积(AUC)分别为0.691、0.775、0.688和0.862,联合检测的预测效能优于各指标单独检测。结论血清TNF-α、FS、Sp17Ab与EMT合并不孕症患者腹腔镜术后IVF-ET助孕妊娠结局具有密切的关系,联合检测TNF-α、FS、Sp17Ab对EMT合并不孕症患者腹腔镜术后IVF-ET助孕失败具有较高的预测价值。

血清抗精子抗体阳性对青春期雄性大鼠睾丸组织及睾丸生殖细胞中Fas/Fas-L凋亡途径的影响

目的:通过人工免疫雄性大鼠获得抗精子抗体(AsAb)介导的血清AsAb阳性的免疫性不育大鼠动物模型,观察AsAb对青春期大鼠睾丸组织及睾丸生殖细胞中Fas/Fas-L凋亡途径的影响。方法:5周龄(青春期)雄性Wistar大鼠30只,其中10只处死,取精子制备精子悬液免疫大鼠,余20只动物随机分为实验组(10只)和对照组(10只),4周后摘取睾丸。光镜观察睾丸组织改变,免疫组化法检测Fas、Fas-L和Caspase-3蛋白的表达。结果:实验组睾丸组织切片呈凋亡样改变,实验组Fas、Fas-L及Caspase-3蛋白的OD值(176.97±4.58,187.52±7.76,157.65±7.38)较对照组(161.87±5.37,150.27±8.65,120.37±6.76)显著增高(P<0.01)。结论:同种精子免疫大鼠,可成功制作AsAb介导的免疫性不育模型;AsAb影响雄性大鼠的生育力,其机制可能与Fas/Fas-L凋亡途径中Fas、Fas-L和Caspase-3蛋白的表达升高有关。

Ouabain及其受体Na^+/K^+-ATPase α_1、α_4抗体对人精子运动功能的影响

目的研究Ouabain及其受体Na+/K+-ATPase α1、α4抗体对正常人精子运动功能的影响。方法将60例正常人的精液上游法进行优化,其中30例与不同浓度Ouabain共孵育,在1,2,3,4h采用CASA检测精子运动参数;另外30例分别与Na+/K+-ATPase α1和α4抗体共同孵育,1h后同样方法检测。结果①与阴性对照组比较,优化后的精子与较高剂量Ouabain(1×10-5～1×10-2mol.L-1)共孵育后,活动率显著下降(P<0.05),a+b级精子所占比例显著下降(P<0.01);但各浓度组两参数差异无显著性;②与阴性对照组比较,较低剂量Ouabain(1×10-6和1×10-7mol·L-1)作用后,精子活动率和a+b级精子所占比例下降均不明显,两浓度组之间差异无显著性;③Ouabain作用后,精子其他运动参数如直线速度、鞭打频率、直线性、前向性、摆动性均未见显著变化。④Anti-α1和Anti-α4作用后的精子活动率均显著下降(均P<0.01);但两者之间差异无显著性;⑤Anti-α1和Anti-α4作用后的a+b级精子所占比例均显著下降(均P<0.01);且Anti-α4作用后降低的幅度明显大于Anti-α1(P<0.05);⑥Na+/K+-ATPase α1和α4抗体作用后,精子其他运动参数如直线速度、鞭打频率、直线性、前向性、摆动性均未见显著变化。结论Ouabain在体外能够降低正常人精子运动功能;Na+/K+-ATPase α1、α4抗体也能够降低精子运动功能,但α4抗体的作用更明显。

用小鼠附睾管壁对Ig通透限制的实验研究血-附睾屏障

用琼脂糖双扩散法测得抗人精子单克隆抗体HS11、HS63和抗小鼠精子单抗MS204,MS207属IgG_1,抗小鼠精子单抗MS79、MS212属IgM。将上述单抗通过腹腔注射被动免疫正常CD-1雄性小鼠,然后收集受鼠血清及其睾丸、附睾各段的精子作免疫荧光染色。发现所有抗精子单抗均能进入血循环,但被血-睾屏障所阻挡。HS11、HS63、MS204和MS207能进入附睾管腔,与相应的精子抗原发生免疫反应,但染色百分率较低。MS79、MS212与附睾各段精子均无染色反应。提示血-附睾屏障能阻止IgM,但不排斥IgG_1。

中医药辨治免疫性不育研究概述

免疫性不育以肾虚为本、湿瘀为标,基本病机在于禀赋不足、戕害肾精、饮食不节等导致肾肝脾虚,感染、环境污染及接触化学毒物导致湿、瘀、热、毒等邪气蕴结精室,日久损伤机体免疫屏障,导致精子被机体免疫系统识别而形成抗精子抗体,引起精子活动率下降,造成不育。总结近20年本病论治概况,认为诸医家辨证运用中药、中西结合、针刺、穴位埋线等手段,整体上重视补肾治本、兼顾肝脾,活血祛湿治标、兼顾热浊,发挥了抗炎、调节免疫、提高精子活动率的作用,凸显了中医优势。

中药配合耳穴疗法治疗抗精子抗体阳性不孕症肿瘤坏死因子-α的作用研究

目的:观察中药抑抗促孕方配合耳穴压豆法对抗精子抗体(Antisperm Antibody, AsAb)阳性不孕症的治疗效果及对肿瘤坏死因子-α(Tumour Necrosis Factor-α,TNF-α)指标的影响。方法:将70例AsAb阳性不孕患者随机分为治疗组和对照组各35例,治疗组应用抑抗促孕方配合耳穴压豆治疗,对照组给予西药泼尼松治疗,比较两组血清AsAb转阴率、TNF-α水平变化、妊娠率。结果:治疗组妊娠率、总有效率均明显高于对照组(P均<0.05)。两组治疗后TNF-α水平均明显下降(P均<0.05),且治疗组上述指标变化比对照组更显著(P <0.05)。结论:中药抑抗促孕方配合耳穴压豆法对治疗AsAb阳性不孕症可明显降低TNF-α水平,促使AsAb转阴,提高受孕率。

MAR-ASAb计数板计数法与玻片法的对照研究

目的通过比较自拟的计数板计数法和厂商提供的玻片法两种MAR方法,验证计数板计数法的可靠性和实用性。方法借助computer-assisted sperm analysis(CASA)技术定量分析MAR法抗精子抗体,收集男性不育症450例,采用配对试验,分析两种方法抗精子抗体检出的情况。结果玻片法和计数板计数法,阳性率分别为10%和10.44%,灵敏度和特异性分别为93.3%和98.8%,阳性标本结合率分别为头部42.22%和42.55%、中段20%和21.28%、尾部37.78%和36.17%,以头部结合多见。结论MAR-ASAb计数板计数法和玻片法检测抗精子抗体配对比较差异无显著性(P>0.05),计数板计数法能更清晰的显示操作界面,并可量化分析抗精子抗体阳性精子的运动参数、精子密度和结合于精子头部、中段、尾部的阳性精子所占的百分率和密度。

男性不育患者AsAb及精液中No水平与Na^+-K^+-ATP酶检测的临床评价

目的探讨抗精子抗体(AsAb)及精液中一氧化氮(NO)水平Na+-K+-ATP酶活性与男性不育的关系。方法分别采用ELISA法、硝酸还原酶法、钼蓝分光光度法测定132名男性不育患者及56名正常生育男性血清AsAb(IgGI、gM、IgA),精液中NO水平及Na+-K+-ATP酶活性。结果男性不育组AsAb阳性率37.12%,显著高于正常生育组3.57%(P<0.0 1);男性不育组精液中N0水平151.6±29.7μmol/L,显著高于正常生育组78.9±23.5μmol/L(P<0.01);男性不育组精液中Na+-K+-ATP酶活性为24.42±8.47μmol Pi/mg(Prot).h-1,显著低于正常生育组46.63±9.41μmolPi/mg(Prot).h-1(P<0.05)。结论血清AsAb是男性不育的确诊指标之一,精液中高水平NO与低Na+-K+-ATP酶活性可能是导致男性不育的原因之一。

不孕患者血清AsAb与TNF-α水平的变化

[目的]检测不孕患者血清AsAb与TNF-α的水平,探讨AsAb、TNF-α在不孕发病中的作用。[方法]用酶联免疫吸附法(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测了46例不孕患者及40例正常对照组血清AsAb与TNF-α水平。[结果]不孕患者血清AsAb阳性率30.43%明显高于正常对照组的5%(P﹤0.01);不孕患者血清TNF-α水平(168±15)ng/L明显高于正常对照组的(145±14)ng/L(P﹤0.01);AsAb(+)组的TNF-α水平(177±16)ng/L明显高于AsAb(-)组的(160±15)ng/L(P﹤0.01);血清AsAb与TNF-α水平呈正相关(r=0.778,P﹤0.01)。[结论]AsAb、TNF-α是不孕的重要免疫因素,不孕患者高水平的TNF-α与AsAb的产生有密切的关系。

内障丸对抗精子抗体阳性小鼠TNF-α表达的影响

目的:探讨内障丸对抗精子抗体阳性小鼠TNF-α表达的影响。方法:将成年雌性小鼠随机分为4组,用主动免疫法进行造膜,造膜后1周开始给药,连续3周。用放射免疫法检测肿瘤坏死因子。结果:内障丸组与模型组相比肿瘤坏死因子明显降低。结论:内障丸可以抑制精子抗体的产生,内障丸可以降低血清和蜕膜中异常升高的肿瘤坏死因子,全面改善外周血和子宫局部内环境,调节机体失衡的免疫状态,内障丸可以明显提高抗精子抗体阳性小鼠的窝产仔数,恢复其生殖能力,且疗效优于醋酸泼尼松组。

从“脾虚湿瘀”论免疫性不育病机及治疗

[目的]运用中虚精变理论的“脾虚湿瘀”观点,对男性免疫性不育的病机和治疗进行阐发。[方法]从中虚精变理论“脾虚湿瘀”观点及免疫性不育病因病机出发,探讨二者的理论契合性,并基于“脾虚湿瘀”观点,确立免疫性不育的论治原则及代表方药。[结果]“脾虚湿瘀”观点植根于中虚精变理论,以脾虚为本、湿瘀为标,重视阐发理论的中虚致实部分。免疫性不育病机特点在于本虚标实,本虚主要是脾虚、肝肾亏虚,在虚的基础上化生或合并湿、热、瘀等实邪。从“脾虚湿瘀”分析免疫性不育病机,虚证论治不仅要重视脾虚,亦当兼顾肝肾,实证论治不仅要重视湿瘀,亦须重视热、痰、浊、毒之衍变,这些因素均与免疫性不育的产生密切相关。以“脾虚湿瘀”指导免疫性不育的治疗,要以健脾活血祛湿为要,以当归芍药散为代表方,并注重化裁,其运用的合理性已获得临床研究的支持。[结论]“脾虚湿瘀”观点与免疫性不育病机具有契合性,为本病的临床治疗开辟了新思路。

《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》与我国男科实验室现状

2010年出版的《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》第5版是最为全面的一次修订。本文结合我国男科实验室精液分析的现状,从包括精子计数、精子活力、精子形态学、精子功能、抗精子抗体和精浆生化、以及精液分析的质量保证与质量控制等7个方面,对新出版的WHO手册进行了评论。笔者认为,该手册对精子浓度分析方法和参考值下调的推荐缺乏循证医学依据;精子活力分级标准的修订和精子形态学的严格标准和较低的4%的正常参考值与我国男科实验室目前使用的标准差距较大;精子功能指标尚未完善;抗精子抗体和精浆生化指标的检测方法显然不适合我国男科实验室现状;但精液分析的质量保证和质量控制对我国男科实验室有重要指导作用。需要指出的是,WHO手册中并没有涉及来自占世界人口1/5的中国人的任何临床数据和资料。因此,尽管WHO手册非常重要,它能否适应中国人精液分析实验室参考,仍需要评估。

补肾健脾调和气血法中药对复发性流产抗生殖抗体及妊娠结局的影响

目的:探讨补肾健脾调和气血法中药对复发性流产(Recurrent Spontaneous Abortion,RSA)患者抗精子抗体(AS-Ab)、抗心磷脂抗体(AC-Ab)、抗子宫内膜抗体(AEM-Ab)、抗卵巢抗体(AO-Ab)、抗人绒毛膜促性腺激素抗体(AhCG-Ab)、抗透明带抗体(AZP-Ab)和抗滋养细胞抗体(AT-Ab)等7种抗生殖抗体的作用,以及改善抗生殖抗体阳性RSA患者妊娠结局的效果。方法:选取2013年5月至2018年12月湖北省妇幼保健院收治的符合研究标准的复发性流产患者505例作为研究对象,随机分为对照组(n=249)和观察组(n=256)。对照组采用口服醋酸泼尼松(AC-Ab阳性者联合阿司匹林)治疗,观察组采用补肾健脾调和气血法中药辨证治疗,比较治疗2个疗程时2组各抗生殖抗体转阴率,以及试孕1年内的妊娠率和妊娠成功率。结果:抗体转阴病例率和抗体转阴总体率,观察组分别为90.23%、93.99%,对照组分别为82.33%、82.96%,差异有统计学意义(P<0.05);AhCG-Ab和AT-Ab的抗体转阴率,2组比较差异无统计学意义(P>0.05),其余抗体比较,观察组优于对照组(P<0.05)。妊娠率和妊娠成功率,观察组分别为93.36%、95.82%,对照组分别为87.95%、91.46%,观察组均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补肾健脾调和气血法中药可有效抑制多种抗生殖抗体,促进抗体转阴,并可显著提高RSA患者妊娠率和妊娠成功率。

血清顶体蛋白酶抗体与精子蛋白17抗体对不孕不育症的临床价值探讨

目的探讨血清顶体蛋白酶抗体(AcrAb)与精子蛋白17抗体(Sp17Ab)对不孕不育的影响及意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测60例不明原因不孕不育症患者及48名正常生育者(对照组)血清AcrAb、SP17Ab,采用t检验和直线相关分析进行统计。结果不明原因不孕不育症组男性及女性血清AcrAb分别为(22.39±3.15)、(21.02±3.56)U/L,均明显高于对照组男、女性[(11.29±2.15)、(10.23±2.12)U/L,P<0.01];不明原因不孕不育症组男性及女性血清Sp17Ab分别为(10.47±2.10)、(9.63±2.04)U/L,均高于对照组男、女性[(3.63±1.05)、(3.58±1.03)U/L,P<0.01];男性及女性血清AcrAb和Sp17Ab之间均无相关性[相关系数(r)分别为0.17、-0.20,P均>0.05]。结论不明原因不孕不育症患者血清AcrAb及Sp17Ab含量明显高于正常人,且相互独立,可单独或联合检测作为不孕不育症的辅助诊断指标。

抗精子抗体介导的免疫性不育动物模型的建立

目的 :探讨抗精子抗体 (AsAb)对生育的影响。 方法 :用雄性新西兰兔精子分别对雌、雄新西兰兔进行人工主动免疫 ,观察雄性兔精子密度、质量的改变及超微结构的变化。达到实验要求后 ,雌、雄兔交配 ,观察其不育率、流产率。 结果 :经 10 0d免疫后 ,雌、雄兔血清AsAb的阳性 ( + )率均为 10 0 %。并随着血清AsAb( + )的出现 ,受检的 2 7只雄性兔精浆中AsAb亦均呈 ( + ) ,同时精子活率、运动速度、运动方式均有明显改变 ,精子出现较多头头、头尾凝集 ,电镜显示精子顶体双层膜性结构肿胀、顶体不完整、核染色质电子密度不均匀等。免疫状态为雄性 ( + )雌性阴性 ( - )的不育率为 4 8% ,流产率为 4 % ;雄性 ( - )雌性 ( + )交配的不育率为 4 4 % ;雄性 ( + )雌性 ( + )的不育率为 5 6% ,流产率为 4 % ;雄性 ( - )雌性 ( - )对照的不育率为 2 0 %。流产胚胎组织液中可检测到AsAb。 结论 :AsAb对正常生殖功能有干扰作用 ,其机理可能为影响精子质量 ,干扰受精 ,干扰受精卵的发育。

47例习惯性流产妇女抗心磷脂、抗精子及抗子宫内膜抗体的分析

目的 :探讨抗心磷脂抗体 (ACA )、抗精子抗体 (As Ab)及抗子宫内膜抗体 (EMAb)在习惯性流产中的作用。方法 :采用 EL ISA法对 4 7例习惯性流产少数民族妇女和 4 0例正常生育妇女血清中 ACA、As Ab及 EMAb进行检测。 结果:ACA阳性 2 0例 (42 .6 % ) ,As Ab阳性 2 4例 (5 1.1% ) ,EMAb阳性 17例 (36 .2 % ) ,ACA、As Ab、EMAb阳性率明显高于对照组 (P均 <0 .0 1)。结论:检测血清中 ACA、As Ab和

女性不孕患者血清、宫颈黏液中免疫性抗体及内膜组织中CD4^+ CD25^+ FoxP3调节性T淋巴细胞含量的检测

目的:研究女性不孕患者血清、宫颈黏液中免疫性抗体及内膜组织中CD4+CD25+FoxP3调节性T淋巴细胞含量。方法:选取在本院就诊的80例不孕女性患者纳入研究的观察组,将同期体检的80例健康女性纳入研究的对照组,检测血清、宫颈黏液中免疫性抗体的含量以及外周血、内膜组织中CD4+ CD25+ FoxP3调节性T淋巴细胞的含量。结果:(1)免疫性抗体:观察组血清及宫颈黏液中抗精子抗体(AsAb)、抗子宫内膜抗体(EmAb)、抗心磷脂抗体(ACAb)、抗绒毛膜促性腺激素抗体(hCGAb)、抗卵巢抗体(AoAb)的含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);(2)CD4+ CD25+ FoxP3调节性T淋巴细胞:观察组外周血中CD4+ CD25+FoxP3Treg细胞数目及比例、子宫内膜组织中CD4+ CD25+ FoxP3的mRNA含量和蛋白含量均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血清、宫颈粘液中AsAb、EmAb、ACAb、hCGAb、AoAb异常表达以及内膜组织中CD4+ CD25+ Treg细胞功能降低与女性不孕的发生密切相关。

精液中支原体衣原体及抗精子抗体的检测及评价

目的评价人型支原体(Mh)、解脲支原体(Uu)、衣原体(CT)感染和抗精子抗体(AsAb)对精液质量的影响。方法对85例不育男性和33例生育男性的精液进行Mh、CT及AsAb检测和精液质量分析,Mh用培养法,CT用乳胶法,AsAb用酶联免疫吸附试验(ELISA),精液质量用计算机扫描法,对其精子密度、活动力、活力、畸形率、液化时间进行测量。结果不育组Mh、CT、AsAb阳性率明显高于生育组,差异有统计学意义(P<0.01);Mh或/和CT和AsAb阳性组的精子密度、活动力、活力明显低于阴性组,差异有统计学意义(P<0.01);畸形率、液化时间明显高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论Mh体和CT感染及AsAb阳性对精液多项参数有明显影响,是导致男性不育的原因之一。

中药抑抗灵治疗抗精子抗体介导的免疫性不育的实验研究Ⅱ

目的 :观察中药抑抗灵对抗精子抗体 (AsAb)介导的免疫性不育的疗效。 方法 :在建立AsAb介导的免疫性不育动物模型的基础上 ,用抑抗灵对新西兰兔进行治疗 ,治疗完成即AsAb阴转率达到预期疗效时 ,雌雄兔交配 ,观察孕育结果。 结果 :原免疫状态雄 (+)雌 (- )抑抗灵治疗的低、高剂量组不育率为 2 0 % ,中剂量组为 0 ,强地松对照组为 0 ,未治疗组为 6 0 % ;雄 (- )雌 (+)低剂量组不育率为 0 ,中剂量组不育率为 2 0 % ,高剂量组不育率为2 5 % ,强地松对照组为 2 5 % ,未治疗组不育率为 4 0 % ;雄 (+)雌 (+) 3个剂量组的不育率均为 2 0 % ,强地松对照组为 2 0 % ,未治疗组不育率为 6 0 % ;阴性对照组不育率为 2 0 %。原免疫状态为雄 (+)雌 (- )抑抗灵低剂量组、中剂量组、高剂量组新生兔体重分别为 (5 1.7± 8.8) g ,(5 0 .5± 6 .4 ) g ,(5 3.5± 7.2 ) g ;强地松对照组和未治疗组新生兔体重分别为 (5 0 .5± 6 .1) g ,(5 1.6± 4 .3) g ;原免疫状态为雄 (- )雌 (+)抑抗灵低剂量组 ,中剂量组 ,高剂量组新生兔体重分别为 (49.7± 5 .9)g ,(5 1.1± 5 .5 )g ,(5 0 .8± 4 .1)g ;强地松对照组和未治疗组新生兔体重分别 (5 1.6±6 .2 ) g ,(5 1.6± 4 .2 ) g。原免疫状态为雄 (+)雌 (+)抑抗灵低剂量组 。

支原体、衣原体及抗精子抗体检测在男性不育症中的应用价值

目的探讨支原体、衣原体和抗精子抗体的检测对男性不育症的应用价值。方法采用培养法、免疫层析法、ELISA法,对102例不育男性和42例已育男性进行支原体、衣原体和抗精子抗体的检测及精液常规的分析。根据结果分为单纯支原体或(和)衣原体阳性组71例,单纯抗精子抗体阳性组21例,支原体或(和)衣原体和抗精子抗体阳性组8例,支原体、衣原体和抗精子抗体阴性组44例,对4组的精液常规主要指标进行比较。结果不育男性支原体、衣原体、抗精子抗体阳性率明显高于已育男性(P<0.05);单纯支原体或(和)衣原体阳性组,单纯抗精子抗体阳性组及支原体或(和)衣原体和抗精子抗体阳性组的精子密度、活动率、活力明显低于阴性组,精子的畸形率、液化时间、白细胞数明显高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论支原体、衣原体的感染及抗精子抗体的产生对精液多项指标有明显影响,精液质量下降,从而引起男性不育症的发生。