抗IFN-γ自身抗体相关非结核分枝杆菌感染研究进展

抗IFN-γ自身抗体引起成人免疫缺陷,从而导致机会性致病菌感染,是最近出现的医学问题。非结核分枝杆菌(NTM)感染是抗IFN-γ自身抗体阳性患者最常见的感染,近年来抗IFN-γ自身抗体相关的NTM感染不断增多。本文就抗IFN-γ自身抗体相关NTM感染的致病机制、NTM物种、临床表现及免疫调节辅助治疗等方面作一综述,为临床医生进一步了解此病,避免误诊和漏诊,并在合理治疗等方面提供帮助。

模式识别受体DNA依赖的干扰素调节因子激活物(DAI)的免疫学研究进展

DNA感受器是一类广泛表达于固有免疫细胞的模式识别受体(PRR),通过识别病原体或异常宿主细胞DNA激活相关炎症信号通路触发固有免疫应答。DNA依赖的干扰素调节因子激活物(DAI)是首个被发现的细胞质DNA感受器,在调控以干扰素诱导和程序性细胞死亡为特征的固有免疫应答中发挥重要作用。我们总结了DAI的分子特性,下游信号通路及其在抗感染免疫、肿瘤免疫和炎症性疾病中的作用及机制,并初步探讨了DAI与移植免疫的相关性,为临床治疗多种免疫性疾病提供新的靶点。

慢性丙肝患者血清干扰素抗体检测及其临床意义

选择 94例慢性丙型病毒性肝炎 (慢性丙肝 )患者 ,采用 α2 b-干扰素 ( α2 b- IFN)治疗 ,动态检测其血清抗 - HCV、 HCV- RNA及α2 b- IFN- Ig G表达水平。结果显示α2 b- IFN治疗后抗 - HCV、 HCV- RNA阴转率分别为3 2 .98% ( 3 1/ 94)和 3 8.3 0 % ( 3 6/ 94) ,常规治疗组治疗后抗 - HCV、HCV- RNA阴转率分别为 10 .0 0 % ( 4/ 40 )和15 .0 0 % ( 6/ 40 ) ,两者相比差异有显著性 ( P<0 .0 1)。α2 b- IFN治疗后抗 - IFN- Ig G阳检率为 5 .3 2 % ( 5 / 94) ,与常规治疗组相比差异无显著性 ( P >0 .0 5 )。认为α2 b- IFN对抗 - HCV、 HCV- RNA阴转具有肯定疗效 ,且优于常规治疗 ,是治疗慢性丙肝的有效药物之一。α2 b- IFN虽有一定的免疫原性 ,但在治疗过程中仅诱导机体产生低水平的抗α2 b- IFN- Ig G,对 IFN-α2

北京鸭干扰素-α基因的分子克隆与表达

采用 PCR法从北京鸭 (Anas platyrhynchosdoestica L innaeus)基因组中克隆了其干扰素 - α基因 (BJ- Du IFN- α)。克隆片段长 4 86 bp,编码 1 6 1个 Du IFN-α成熟肽。与已报道的北京鸭干扰素 -α基因相比 ,BJ- Du IFN-α在 2 85位发生了同义变异。将 BJ-Du IFN-α插入原核表达载体 p QE3 0 ,在 E.Coli JM1 0 9工程菌中表达了重组蛋白。经 SDS- PAGE、Western Blot和抗病毒活性测定 ,表达产物占菌体总蛋白的 2 3 %,为重组鸭干扰素 -α(r Du IFN-α)。 r Du IFN-α抗滤泡性口炎病毒 (VSV)活性高达 7.9× 1 0 5U /mg。

干扰素抗体与病毒性肝炎疗效的关系

目的:探讨抗-IFN与IFN治疗病毒性肝炎疗效的关系。方法:采用ELISA法检测32例慢性病毒性肝炎患者治疗前后血清抗-IFN。结果:IFN治疗后3个月、6个月,抗-IFN阳性率分别为28.1％、31.1％,其阳性率明显高于治疗前(6.3％),使用不同类型IFN,产生抗-IFN情况也有差别。用IFN治疗3个月、6个月后,抗-IFN阳性者,HBV-DNA或HCV-RNA阴转率分别为22.2％(2/9)、20.0％(2/10);而阴性者,则分别为43.4％(10/23)、54.5％(12/22),后者的阴转率较前者高,治疗前抗-INF已阳性的2例病人HBV-DNA均没有阴转。结论:抗-IFN可能是影响干扰素疗效的因素。

γ干扰素血清浓度对肺结核合并HBV感染患者选择性抗病毒治疗的临床意义

目的探讨采用监测γ干扰素(IFN-γ)血清浓度指导肺结核合并乙型肝炎病毒(HBV)感染患者抗病毒治疗的临床意义。方法对156例肺结核合并HBV感染患者治疗前检测的IFN-γ血清浓度与肝脏炎症活动度半定量积分(SSS)进行相关分析,并依据IFN-γ血清浓度水平及是否接受恩替卡韦抗病毒治疗将受试者分为A组(高IFN-γ血清浓度加用恩替卡韦抗病毒治疗)、B组(高IFN-γ血清浓度)及C组(低IFN-γ血清浓度)。所有肺结核合并HBV感染患者均给予优化抗结核方案(2HTE(S)Lfx/4HT)治疗。结果患者IFN-γ血清浓度与SSS评分呈正相关(r=0.6158,P<0.05),HBV-DNA定量与SSS无相关性(r=0.3265,P>0.05)。A组治疗后,HBV-DNA定量及IFN-γ血清浓度较治疗前明显下降;肝功能损害程度、HBV-DNA定量及IFN-γ血清浓度均明显低于B组(均P<0.01);HBV-DNA定量明显低于C组(P<0.01),但肝功能水平及IFN-γ血清浓度水平与C组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。B组治疗后,肝功能损害程度、HBV-DNA定量及IFN-γ浓度均明显高于C组(P<0.01);乙肝再激活率较C组明显升高(P<0.01)。结论 IFN-γ浓度能反映肝脏炎症活动程度,对于高IFN-γ血清浓度的肺结核合并HBV感染患者进行抗结核治疗同时给予恩替卡韦抗病毒治疗,能有效降低肝功能损害率及损害程度,而对低IFN-γ血清浓度患者不进行抗病毒治疗仍有较高的安全性,在肝脏穿刺病理检查困难的条件下,IFN-γ血清浓度有望为此类患者抗结核治疗过程中是否选择抗病毒治疗提供临床依据。

鸡白细胞介素18研究进展

鸡白细胞介素(IL-18)是一种新发现的细胞因子,其cDNA全长597 bp,编码198个氨基酸的前体多肽,分子量约为23 kDa,IL-18氨基端的29个氨基酸残基起胞内定位作用;鸡IL-18是IFN-γ诱生剂,通过IFN-γ发挥抗感染、促生长等作用,参与对微生物感染诱导产生细胞和体液免疫反应的初次免疫应答;鸡IL-18作为免疫佐剂,具有增强免疫和治疗作用,还具有抗肿瘤免疫作用。

CIK体内外抗宫颈癌HeLa细胞的作用及其荷瘤小鼠体内分布特点

目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)对荧光素酶标记的人宫颈癌HeLa-luc细胞的体内外抗肿瘤作用,了解CIK回输荷瘤小鼠后在不同器官的分布特点。方法:由健康志愿者外周血单个核细胞体外诱导培养CIK,流式细胞术检测CIK表面分子的表达,RT-PCR法检测IFN-γmRNA的表达,MTT法和瑞氏-姬姆萨染色测定CIK对HeLa-luc细胞的杀伤作用。建立荷HeLa-luc瘤BALB/c裸鼠模型,体内成像系统观察荷瘤小鼠肿瘤大小变化及CIK治疗效果,共聚焦显微镜观察不同器官中CIK的分布情况。结果:CIK在体外诱导培养14～21 d,其生长达到高峰,此时CD3+CD56+T细胞的比例增加50倍以上,IFN-γmRNA表达水平也达到高峰。在效靶比为20∶1、40∶1时,CIK对HeLa-luc细胞的杀伤率分别为(51.16±2.64)%、(72.14±4.21)%,明显高于对照组的(16.33±3.09)%、(21.26±2.71)%(P<0.05)。CIK治疗5周和8周后,对荷瘤小鼠的抑瘤率分别为47.18%、64.38%。CIK治疗组荷瘤小鼠外周血中IFN-γ水平为(61.92±6.49)pg/ml,明显高于对照组的(34.30±1.78)pg/ml(P<0.05)。CFSE标记的CIK经腹腔和瘤旁注射入荷瘤小鼠3 h,在肺、肝、脾、外周血、肿瘤中均可观察到绿色荧光;腹腔途径注射24 h时,肿瘤组织中CIK浓度达到高峰(20.56±1.72)%;瘤旁途径注射3 h时,肿瘤组织中CIK达到高峰(25.75±3.45)%。结论:CIK在体内外对宫颈癌HeLa-luc细胞均有较强的杀伤作用,CIK经不同途径注射荷瘤小鼠后可以广泛分布于全身器官,其到达各脏器的浓度与输注途径及时间密切相关。

干扰素口含片的研制

本文主要是干扰素口含片实验性研究 ,通过其工艺制备 ,稳定性试验 ,细菌学检查 ,急性毒性试验 ,病毒抑制实验、NK细胞活性实验、小鼠口腔粘膜SIgA实验 ,以此验证干扰素口含片在剂型改变。

CD_3AK细胞介导细胞因子抗肿瘤作用机制的研究

目的 :探讨 CD3AK细胞介导细胞因子抗肿瘤作用的机制。方法 :将卵巢癌细胞株 (A2 780 )分成两组 ,实验组采用 CD3AK+ A2 780 ,对照组采用 L AK+ A2 780 ,分别共育 2 4h并于作用前和作用后每 4h收集一次上清液以检测 TNF- α和 IFN- γ分泌水平。结果 :实验组和对照组共育前、后上清液中均有 TNF- α和 IFN- γ分泌 ,但共育后 TNF- α和 IFN- γ分泌水平显著高于共育前 (P <0 .0 1) ,且同一效靶比的实验组 TNF- α和 IFN- γ分泌水平明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :CD3AK细胞可通过分泌细胞因子 TNF- α和 IFN- γ杀伤肿瘤细胞。

白芍总甙促干扰素诱生及抗病毒作用的研究

研究白芍总甙的促干扰素诱生及抗病毒作用,结果表明;白芍总甙10 mg·L^(-1)在试管内无直接诱生干扰素(JFN)作用.可促进鸡新城疫互I系弱毒冻干疫苗诱生αIFN,其最适浓度为10 mg·L^(-1)可促进ConA诱生γIFN.当ConA为亚适剂量时,最适浓度为l～10 mg·L^(-1)当ConA为最适剂量时,其最适浓度为0.1 ～1mg·L^(-1),皆可提高IFN效价l～2倍。具有直接抗病毒作用,白芍总甙250 mg·L^(-1)能使水泡性口炎病毒效价下降2.22个对数值。

重组融合蛋白Fab/IFNαA体外抗HBV作用的实验研究

在体外细胞水平上观察重组融合蛋白 (Fab/IFN αA)对乙型肝炎病毒 (HBV)基因表达的抑制作用。方法 :应用HBVDNA转染细胞系 (HepG2 .2 .15细胞 )作模型 ,通过固相放射免疫方法检测Fab/IFN αA作用后细胞上清液的HBsAg、HBeAg水平的变化 ,结合细胞存活率来评价其抗HBV作用 ,并与α 干扰素 (IFN αA)进行比较。结果 :经 12d作用 ,Fab/IFN αA在细胞存活率、对HBsAg、HBeAg抑制率均优于IFN αA ,尤其在 2 5 0 0～5 0 0 0IU/ml浓度下 ,其细胞存活率为 82 .41%～ 83.19% ,HBsAg抑制率 5 5 .5 5 %～ 6 8.18% ,HBeAg抑制率 45 .0 7%～ 48.5 5 % ,而相应浓度IFN αA的HBsAg、HBeAg抑制率均低于Fab/IFN αA (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。结论 :具有抗体的导向作用和IFN的抗病毒作用的Fab/IFN αA体外抗HBV作用优于IFN αA ,为进一步研制抗乙型病毒性肝炎的生物导向治疗的基因工程多肽类药物提供了依据。

氧化苦参碱-黄芪多糖复方对新城疫Ⅳ系疫苗免疫雏鸡血清IL-2和IFN-γ水平的影响

为了探讨氧化苦参碱-黄芪多糖中草药复方对抗新城疫病毒（NDV）感染效果，旨在为筛选确实有效的防治鸡新城疫的中药组方，将14日龄非免疫健康罗曼公雏鸡150羽随机均分为5组，1组-3组分别为氧化苦参碱-黄芪多糖复方高、中、低剂量组，4组为免疫对照组，5组为空白对照组。除空白对照组外均用新城疫Ⅳ系疫苗滴鼻、点眼免疫，28日龄重复免疫。在首次免疫的同时，1组-3组分别口服高、中、低剂量氧化苦参碱-黄芪多糖复方药物，疫苗对照组和空白对照组口服等量生理盐水，每天1次，连续3 d。分别于14、28和42日龄采血，用双抗夹心 ELISA 法检测血清中 IL-2和 IFN-γ的浓度。结果显示，复方的高、中、低剂量在各时间点血清 IL-2浓度显著高于免疫对照组（P ＜0．05）；血清 IFN-γ浓度均显著高于免疫对照组（P＜0．05）。说明中药成分复方能显著增强雏鸡对新城疫疫苗的免疫应答，高、中剂量的效果较好，可用于促进细胞免疫，提高机体抗病能力。

钩薄过敏颗粒对咳嗽变异性哮喘大鼠Th1/Th2类细胞因子的影响

目的:探讨钩薄过敏颗粒对咳嗽变异性哮喘(cough variant asthma,CVA)大鼠Th1/Th2类细胞因子水平的影响及其可能的作用机制。方法:利用卵蛋白和氢氧化铝共同激发致敏建立CVA大鼠模型;分为正常对照组、模型组、钩薄过敏颗粒组和地塞米松组,记录诱咳时2min内大鼠咳嗽次数及血清中白介素-4(IL-4)、干扰素(IFN-γ)和嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)的含量。结果:与正常对照组比较,模型组咳嗽次数明显增多(P<0.01),血清中IL-4、ECP含量显著升高(P<0.01),IFN-γ含量显著降低(P<0.01),钩薄过敏颗粒组经治疗后咳嗽次数明显减少(P<0.01),血清中IL-4、ECP含量明显降低、IFN-γ含量明显升高(P<0.01)。结论:钩薄过敏颗粒对咳嗽变异性哮喘大鼠有治疗作用,其机制可能与调控Th1/Th2平衡有关。

汉防己甲素等5种抗纤维化药物对离体兔角膜基质细胞的抑制作用

目的比较汉防己甲素等5种抗纤维化药物对离体兔角膜基质细胞的抑制作用,为减轻角膜创伤愈合反应提供一种新药。方法选用原代及传代兔角膜基质细胞,实验组分别加入含不同浓度汉防己甲素、TGF-β抗体、α-2b干扰素、维拉帕米、氟美童的培养液,对照组加入含等量PBS的培养液,分别培养24h、48h、72h后,采用MTT法检测其对细胞增殖的抑制作用,计算出抑制率和IC50,并对其进行比较。结果汉防己甲素在各时间段各浓度组,均能明显抑制角膜基质细胞的增殖,其24h、48h、72h的IC50分别为4·407mg·L-1、3.758mg·L-1和3.524mg·L-1,并具有明显的时间剂量-效应依赖关系。TGF-β抗体在各时间段各浓度组均有较强抑制作用,其IC50分别为6.550mg·L-1、4.060mg·L-1和3.860mg·L-1。α-2b干扰素在各时间段各浓度组均有抑制作用,但作用都较弱。维拉帕米的抑制作用不确切。氟美童在各时间段各浓度组均有确切的抑制作用,其IC50分别为36.190mg·L-1、43.742mg·L-1和47.052mg·L-1。结论在5种药物中,汉防己甲素对离体兔角膜基质细胞增殖的抑制作用最强,且明显强于激素类药物氟美童,因此在减轻角膜创伤愈合方面具有潜在的运用前景。

Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制由IL-23诱导PBMCIFN-γ的产生

目的:探讨重组人白介素23(IL-23)诱导正常人PBMC IFN-γ的产生,细胞亚群和调节因素。方法:正常人PBMC在不同条件下与IL-23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFN-γ的水平。同时采用流式细胞仪,分析IL-23诱导PBMC IFN-γ表达的细胞亚群。结果:IL-23呈剂量依赖性诱导PBMC IFN-γ产生,并可与IL-2协同诱导IFN-γ的产生。细胞亚群分析的结果表明,IL-23诱导高表达CD56+NK细胞产生IFN-γ,对CD4+和CD8+T细胞无明显作用。Th2细胞因子和抗IL-12受体β1mAb(IL-12Rβ1)抑制IL-23诱导IFN-γ产生。结论:IL-23可直接作用于CD3-CD56+NK细胞,诱导产生IFN-γ。Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制IL-23诱导IFN-γ产生,提示可以用于由IL-23引起自身免疫病的治疗。

聚乙二醇修饰干扰素α2b的稳定性研究

目的研究聚乙二醇修饰干扰素α 2b的稳定性。方法以抗病毒活性为指标 ,考察单修饰干扰素α 2b、多修饰干扰素α 2b和干扰素α 2b的稳定性 (4℃、2 5℃、37℃ )、抗胰蛋白酶水解能力和 37℃人血清稳定性。结果在4℃、2 5℃和 37℃条件下 ,稳定性依次为多修饰干扰素α 2b >单修饰干扰素α 2b >干扰素α 2b。抗胰蛋白酶水解试验表明 :干扰素α 2b在 30min时抗病毒活性迅速降到原来的 7.1% ,单修饰干扰素α 2b剩余 5 0 % ,多修饰干扰素α 2b仍保留 71%。体外稳定性试验表明 ,在 37℃人血清放置 10h ,干扰素α 2b只保留 35 % ,单修饰干扰素α 2b保留 71% ,而多修饰干扰素α 2b仍保留 95 %的抗病毒活性。结论聚乙二醇修饰可以增加干扰素α 2b的稳定性 ,抗胰蛋白酶水解能力和 37℃人血清稳定性。除了抗胰蛋白酶水解能力 。

乙型肝炎导向干扰素抗乙型肝炎病毒作用的体外实验研究

为提高ＩＦＮ抗ＨＢＶ疗效，实现感染细胞水平上的抗病毒性肝炎导向治疗，我们将抗ＨＢｓＡｇ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的Ｆ（ａｂ＇）２片段与ＩＦＮ文联，所得交联体称为乙型肝炎导向干扰素（Ｔ－ＩＦＮ）。应用ＨＢＶＤＮＡ转染细胞系（２，２，１５细胞）作模型，对Ｔ－ＩＦＮ进行了体外抗ＨＢＶ实验：通过检测细胞上清液ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢＶＤＮＡ水平的变化，结合细胞存活率来评价其抗ＨＢＶ活性，并与游离ＩＦＮ和ＭｃＡｂ以及二者的混合法（Ｍｉｘ）进行比较。结果显示，经１２天作用，Ｔ－ＩＦＮ在细胞存活率。

血清IFN-α、aCL和抗β2-GPⅠ抗体与系统性红斑狼疮患者血小板减少的相关性

目的探讨血清干扰素α(IFN-α)、抗心磷脂抗体(aCL)和抗β2糖蛋白Ⅰ(β2-GPI)抗体与系统性红斑狼疮(SLE)患者血小板减少的相关性。方法选取2018年1月~2019年6月在我院门诊及住院就诊的系统性红斑狼疮患者65例,其中血小板减少SLE患者20例(PLT<100×109/L,A组),无血小板减少组45例(101×109/L~370×109/L,B组),选取同期16例脾功能亢进(HS)患者为疾病对照组(C组),选取同期我院体检中心的健康体检者60人(D组)。酶联免疫吸附(ELISA)法检测四组血清IFN-α水平、抗aCL抗体、抗β2-GPI抗体和抗双链DNA抗体滴度,免疫比浊法检测CRP、补体C3和C4。结果A组SLE患者血清IFN-α水平、aCL和抗β2-GPI总抗体滴度均显著高于其余三组(均P<0.01),B组显著高于C和D组(P<0.05);A组抗dsDNA抗体滴度、CRP浓度和SLEDAI显著高于B组(均P<0.01),补体C3和C4显著低于B组(均P<0.01);血清IFN-α水平与aCL和抗β2-GP1总抗体滴度呈显著正相关(r=0.754,0.814,均P<0.01),IFN-α水平、aCL和抗β2-GPI总抗体滴度均与血小板呈显著负相关(r=0.651,0.717,0.688,均P<0.01)。结论SLE患者体内IFN-α水平、aCL和抗β2-GPⅠ总抗体滴度均与血小板呈负相关,提示IFN-α、aCL和抗β2-GPⅠ抗体与血小板减少有关。

干扰素病毒唑联合治疗慢性丙型肝炎疗效及干扰素抗体的影响

目的 :研究干扰素与病毒唑联合治疗慢性丙型肝炎疗效及干扰素抗体的影响。方法 :观察组 2 0例采用干扰素 α2b 3MvTiwIH +病毒唑 10 0 0mgQdpo连用 2 4周 ;对照组 3 2例采用干扰素 α2b 3MvTiwiH连用 2 4周。停药后观察 2 4周比较疗效并检测干扰抗体。结果 :观察组完全应答率为 5 0 % ,明显高于对照组 18.7% ;复发率为 2 5 .0 %低于对照组 5 6.3 % (P <0 .0 1)。无反应率均为 2 5 .0 %。且复发与干扰素抗体尤其是中和抗体有关。结论 :观察组疗效优于对照组 ,复发与干扰素抗体尤其是中和抗体有关。