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Contribution of Anti-p63 Antibodies in the Interpretation of Benign Label Prostatic Biopsies
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作者 Ibou Thiam Fabrice Senghor +2 位作者 Frenette Codja Kor Ndiaye Mohamed Moustapha Cherif Dial 《Open Journal of Pathology》 2024年第2期31-44,共14页
Introduction: Prostate cancer is the second most common cancer in men. The diagnosis is most often based on the prostate biopsies’ analysis and on histological criteria recognizable on standard coloring. In some case... Introduction: Prostate cancer is the second most common cancer in men. The diagnosis is most often based on the prostate biopsies’ analysis and on histological criteria recognizable on standard coloring. In some cases, the use of immunohistochemistry is important. Objectives: This paper aims to specify the p63 phenotypic profile of lesions diagnosed benign, with minimal suspect foci, difficult to interpret, HGPIN (high grade intraepithelial neoplasia) and LGPIN (low-grade prostatic intraepithelial neoplasia) and evaluate the manual technique of p63 immunohistochemistry. Patients and Method: This was a retrospective, descriptive study of prostate biopsies recorded in the PAC service of the HALD from January 1st, 2018 to December 31st, 2018. It was completed by a manual immunohistochemical study of the blocks enrolled from November 19th to December 4th, 2020 in the PAC department of the HPD. The studied parameters were: registry number, age, clinical stage, prostate volume, PSA level, microscopic appearance and p63 immunohistochemical profile. Results: Our study included 60 prostate biopsies. The ages of our patients varied from 45 to 77 years, with an average of 64.2 years and a standard deviation of 6.2. The majority of patients were at clinical stage cT2b (33%) with a prostate volume varying between 33.15 and 169.4 cc. The minimum value of PSA in our series is 5 ng/ml, the maximum being 100 ng/ml with an average level of 24.1 ng/ml and a standard deviation of 21.2. Our series included 50 adenomyomatous hyperplasias, 7 adenomyomatous hyperplasias associated with chronic prostatitis, 2 HGPIN and 1 LGPIN. After re-reading we found 5 discordant cases, which corresponded to minimal suspect foci (kappa = 0.5098). The p63 marking was informative in 53 cases, i.e. 88%, and non-informative in 7 cases, i.e. 12%. Among the uninformative markings, 2 were due to lack of tissue adhesion to the slides. Among the informative markings, 11 were negative. p63 immunohistochemistry was useful in all suspected foci and detected 6 other minimal foci of adenocarcinoma. Conclusion: The immunostaining with the anti-p63 antibody in the prostate cancer diagnosis is of considerable benefit. It made it possible to correct 11.3% of benign diagnosis in minimal malignant focus in our context. Despite the difficulties associated with the manual technique, it is possible to have an informative rate, similar to the automatic technique. 展开更多
关键词 Prostate Cancer Diagnosis Anti-p6 antibody
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抗黑色素瘤分化相关蛋白5与抗Ro52阳性/阴性患者的临床特征及KL-6水平变化及意义
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作者 刘轩 王桂蓉 李鸿斌 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第S01期4-7,共4页
目的研究抗黑色素瘤分化相关蛋白5(anti-MDA5)抗体与抗Ro抗体-52KD(anti-Ro52)抗体阳性或anti-Ro52抗体阴性患者的临床特征和血清涎液化糖链抗原-6(KL-6)水平变化。方法选取2018年1月至2021年11月申请肌炎自身抗体检测的患者样本470例,... 目的研究抗黑色素瘤分化相关蛋白5(anti-MDA5)抗体与抗Ro抗体-52KD(anti-Ro52)抗体阳性或anti-Ro52抗体阴性患者的临床特征和血清涎液化糖链抗原-6(KL-6)水平变化。方法选取2018年1月至2021年11月申请肌炎自身抗体检测的患者样本470例,采用线性免疫印迹法(LIA)筛选出anti-MDA5抗体阳性50例,分为anti-Ro52抗体阳性(anti-Ro52+)组与anti-Ro52抗体阴性(anti-Ro52-)组,化学发光酶免疫分析法(CLEIA)测定两组患者的血清KL 6水平并比较两组患者的临床资料。结果anti-MDA5抗体阳性患者的病程越短,死亡率越高;anti-MDA5抗体阳性患者最常见的临床表现为皮肤病变,如皮肤瘙痒、皮疹和皮肤溃疡,anti-Ro52+组发生率为93.75%,anti-Ro52-组发生率为94.44%;anti-MDA5抗体阳性anti-Ro52+组乙肝患病率(12.5%)低于anti-Ro52-组(66.67%);anti-MDA5抗体阳性anti-Ro52+组间质性肺病(ILD)的发生率(84.38%)高于anti-Ro52-组(55.56%);anti-Ro52+组外周血KL-6水平(1211.25±590.13 U/mL)也明显高于anti-Ro52-组(713.63±468.62 U/mL),差异有统计学意义(P<0.05)。结论anti-MDA5抗体和anti-Ro52抗体是ILD患者的危险因素,两种抗体共存的患者更易发生ILD,且外周血KL-6水平明显高于anti-Ro52抗体阴性的患者。 展开更多
关键词 anti-MDA5抗体 anti-Ro52抗体 KL-6 临床特征
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CDFI血流信号分级、抗CCP抗体、G6PI、RF对类风湿性关节炎的诊断价值
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作者 吕蕾 巴燕·艾克海提 +2 位作者 杨丽 杨婷 林雨薇 《临床和实验医学杂志》 2024年第6期634-637,共4页
目的分析彩色多普勒血流显像(CDFI)血流信号分级、抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)、葡萄糖6磷酸异构酶(G6PI)、类风湿因子(RF)对类风湿性关节炎(RA)的诊断价值。方法回顾性选取2022年4月至2023年10月新疆医科大学附属中医医院收治的100例RA患者... 目的分析彩色多普勒血流显像(CDFI)血流信号分级、抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)、葡萄糖6磷酸异构酶(G6PI)、类风湿因子(RF)对类风湿性关节炎(RA)的诊断价值。方法回顾性选取2022年4月至2023年10月新疆医科大学附属中医医院收治的100例RA患者纳入观察组,根据病情分为RA活动期组(n=50)和RA非活动期组(n=50);依据血流信号CDFI分级分为0~1级组(n=20)、2级组(n=17)、3级组(n=13)。选取同期本院收治的100例其他自身免疫性疾病患者纳入对照组。比较观察组、对照组一般临床资料(性别、病程、年龄、RA家族史、体重指数、吸烟史、饮酒史、居住地、职业等),比较不同活动期患者抗CCP抗体、G6PI及RF水平;比较不同血流信号分级组患者抗CCP抗体、G6PI及RF水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估CDFI血流信号分级、抗CCP抗体、G6PI、RF联合检测对RA的诊断价值。结果两组患者性别构成比、病程、年龄、RA家族史、体重指数、吸烟史、饮酒史、居住地、职业比较,差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患者抗CCP抗体、G6PI及RF水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。RA活动期组患者抗CCP抗体、G6PI及RF水平均高于RA非活动期组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。血流信号3级组患者抗CCP抗体、G6PI及RF水平均高于血流信号0-1级组、2级组患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。CDFI血流信号分级、抗CCP抗体、G6PI、RF单独检测RA的敏感度分别为79.57%、86.45%、82.14%、77.89%,特异度分别为83.89%、79.28%、83.67%、84.15%,AUC分别为0.855(0.804~0.907)、0.940(905~0.976)、0.893(0.852~0.935)、0.800(0.736~0.864),CDFI血流信号分级、抗CCP抗体、G6PI、RF联合检测RA的敏感度为89.36%,特异度为77.24%,AUC为0.957(0.933~0.980)。结论RA患者血清CCP抗体、G6PI、RF水平升高,随着CDFI血流信号分级增大,升高愈加明显,CDFI血流信号分级、抗CCP抗体、G6PI、RF联合检测RA诊断价值较高,对判断RA进展具有意义。 展开更多
关键词 风湿性关节炎 彩色多普勒血流显像 抗环瓜氨酸肽抗体 葡萄糖6磷酸异构酶 类风湿因子
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IL-6、IL-10与类风湿关节炎疾病活动度、自身抗体及凝血功能的相关性
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作者 涂华微 谢传美 +3 位作者 赵鑫 唐婕 陈婕 张雷 《川北医学院学报》 CAS 2024年第5期646-650,共5页
目的:探讨血清IL-6、IL-10水平与RA患者疾病活动度、自身抗体、凝血功能的相关性。方法:选取就诊的172例活动性类风湿关节炎(RA)患者作为RA组;另选取172名健康体检者为对照组。收集两组对象血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、自身抗体(RF-IgM... 目的:探讨血清IL-6、IL-10水平与RA患者疾病活动度、自身抗体、凝血功能的相关性。方法:选取就诊的172例活动性类风湿关节炎(RA)患者作为RA组;另选取172名健康体检者为对照组。收集两组对象血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)、自身抗体(RF-IgM、RF-IgG、RF-IgA、Anti-CCP)、凝血功能(PT、APTT、TT、FIB、D-D)等临床指标,所有患者均进行疾病活动度评分(DAS28),并按DAS28评分分为高疾病活动组、中疾病活动组、低疾病活动组三组;通过流式微球捕获芯片技术(CBA)测定患者血清中IL-6、IL-10水平;比较RA组及健康对照组血清IL-6、IL-10水平、自身抗体及凝血功能的差异;比较RA各疾病活动组间IL-6和IL-10水平、自身抗体及凝血功能的差异;分析IL-6、IL-10水平与自身抗体的相关性;分析IL-6、IL-10水平与凝血功能的相关性。结果:上述各指标RA组均高于健康对照组(P<0.05);高疾病活动组IL-6水平高于中低疾病活动组(P<0.05);各组间IL-10水平无统计学差异(P>0.05);高疾病活动组RF-IgM及RF-IgA水平、FIB及D-D水平均高于中低疾病活动组(P<0.05);IL-10水平与RF-IgM、RF-IgA、PT、APTT正相关(P<0.05),与TT负相关(P<0.05);IL-6与纤维蛋白原(FIB)及D-二聚体(D-D)正相关(P<0.05),与RF及Anti-CCP均无相关性(P>0.05);结论:IL-6可作为疾病活动性指标之一;IL-10可作为RA诊断参考指标之一;IL-6和IL-10升高的RA患者更易出现凝血功能异常。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 白细胞介素-6 白细胞介素-10 类风湿因子 抗环瓜氨酸肽抗体 凝血功能
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Autoantibodies related to ataxia and other central nervous system manifestations of gluten enteropathy
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作者 Tsvetelina Velikova Georgi Vasilev +5 位作者 Russka Shumnalieva Lyubomir Chervenkov Dimitrina Georgieva Miteva Milena Gulinac Stamatios Priftis Snezhina Lazova 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2024年第12期2031-2039,共9页
Gluten ataxia and other central nervous system disorders could be linked to gluten enteropathy and related autoantibodies.In this narrative review,we focus on the various neuro-logical manifestations in patients with ... Gluten ataxia and other central nervous system disorders could be linked to gluten enteropathy and related autoantibodies.In this narrative review,we focus on the various neuro-logical manifestations in patients with gluten sensitivity/celiac disease,immunological and autoimmune mechanisms of ataxia in connection to gluten sensitivity and the autoantibodies that could be used as a biomarker for diagnosing and following.We focused on the anti-gliadin antibodies,antibodies to different isoforms of tissue transglutaminase(TG)(anti-TG2,3,and 6 antibodies),anti-glycine receptor antibodies,anti-glutamine acid decarboxylase antibodies,anti-deamidated gliadin peptides antibodies,etc.Most studies found a higher prevalence of these antibodies in patients with gluten sensitivity and neurological dysfunction,presented as different neurological disorders.We also discuss the role of a gluten-free diet on the clinical improvement of patients and also on imaging of these disorders. 展开更多
关键词 Gluten ataxia Celiac disease Gluten enteropathy AUTOANTIBODIES Anti-gliadin antibodies Anti-bodies to tissue transglutaminase Anti-tissue transglutaminase antibodies Anti-transglutaminase 6 antibodies Anti-glycine receptor antibodies Anti-glutamine acid decarboxylase antibodies
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Immunoregulation of Lupus-like NZB/W F_1 Mice by Antimurine IL-1α,IL-6 Antibodies
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作者 刘文励 孙汉英 +2 位作者 邵静芳 徐慧珍 沈关心 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 1996年第4期209-211,共3页
Anti-murine IL-1α, IL-6 antibodies were intra-peritoneally injected to the lupus-like NZB/W F1 mice of 4 months with the dosage of 10μg per day for three days and then per month for three months. The mice were kille... Anti-murine IL-1α, IL-6 antibodies were intra-peritoneally injected to the lupus-like NZB/W F1 mice of 4 months with the dosage of 10μg per day for three days and then per month for three months. The mice were killed at the age of 11 months. The results showed that the treatment of the dosage could not absolutely prevent lupus nephritis; it could alleviate proteinuria, obviously reduce the levels of serum IL-lα and inhibit the secretion of IL-1α by celiac macrophage.As to the level of IL-6 and TNF-α no significant change was observed. 展开更多
关键词 NZB/W F_1 mouse anti-il- antibody anti-il-6 antibody IMMUNOREGULATION
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VCAM-1、MCP-1、IL-17、IL-6在桥本甲状腺炎患者不同甲状腺抗体水平下的作用
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作者 卢亚敏 邢晨皓 +3 位作者 陈芳 刘光霞 侯瞻 张溢文 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS 北大核心 2023年第5期521-527,共7页
目的:研究桥本甲状腺炎(HT)患者不同甲状腺抗体水平与血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、IL-17、IL-6等的变化和关系,探讨其在HT发生发展中的潜在作用。方法:241例HT患者按照TPOAb和TGAb的水平,分为双阳组90例、T... 目的:研究桥本甲状腺炎(HT)患者不同甲状腺抗体水平与血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、IL-17、IL-6等的变化和关系,探讨其在HT发生发展中的潜在作用。方法:241例HT患者按照TPOAb和TGAb的水平,分为双阳组90例、TGAb阳性组79例、TPOAb阳性组72例;选取90例体检健康者为对照组(NC组)。评估所有观察者的VCAM-1、MCP-1、IL-17、IL-6及血脂、血糖等相关生化指标变化。结果:抗体阳性组TSH、血脂、FPG较对照组有显著差异,双阳组升高明显;甲状腺激素水平紊乱,各组比较均存在显著差异(P<0.05)。抗体阳性组VCAM-1、MCP-1、IL-17、IL-6比较对照组有显著差异(P<0.05),双阳组升高明显。VCAM-1、MCP-1、IL-17、IL-6与抗体均存在正相关关系。VCAM-1、MCP-1、IL-17是不同甲状腺功能抗体异常的危险因素。结论:HT患者VCAM-1、MCP-1、IL-17、IL-6等炎症水平升高,可能在甲状腺自身免疫性抗体异常中起重要作用,并促进了患者甲状腺激素水平和机体功能的紊乱。 展开更多
关键词 桥本甲状腺炎 甲状腺抗体 血管细胞黏附分子1 单核细胞趋化蛋白1 白细胞介素17 白细胞介素6
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血清25-(OH)D、IL-6、CD8与NMOSD患者临床特点及治疗效果的关系
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作者 朱健清 蒋小英 +1 位作者 童玲玲 梁霞 《临床和实验医学杂志》 2023年第7期681-685,共5页
目的探讨血清25-羟基维生素D[25-(OH)D]、白细胞介素-6(IL-6)、CD8与视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)患者临床特点及治疗效果的关系。方法选取2019年1月至2021年12月在玉林市第一人民医院接受治疗的NMOSD患者92例作为观察组,同时随机选取... 目的探讨血清25-羟基维生素D[25-(OH)D]、白细胞介素-6(IL-6)、CD8与视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)患者临床特点及治疗效果的关系。方法选取2019年1月至2021年12月在玉林市第一人民医院接受治疗的NMOSD患者92例作为观察组,同时随机选取健康体检者92名作为对照组。比较两组患者血清25-(OH)D、IL-6、CD8差异,同时分析观察组不同性别、年龄、体重指数、脊髓受累节段数、脊髓受累部位、扩展残疾状态量表(EDSS)评分差异。结果观察组血清25-(OH)D为(29.89±7.82)nmol/L,明显低于对照组,而IL-6和CD8分别为(25.05±6.68)pg/mL和(30.32±9.23)%,均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组脊髓受累节段数>5个的患者血清25-(OH)D为(25.28±7.25)nmol/L,明显低于脊髓受累节段数≤5个的患者,而IL-6和CD8分别为(28.65±7.02)pg/mL和(34.54±9.17)%,均明显高于脊髓受累节段数≤5个的患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组EDSS评分≥6.5分的患者血清25-(OH)D为(23.53±8.00)nmol/L,明显低于EDSS评分≤2.5分和3~6分患者,而IL-6和CD8分别为(30.86±5.60)pg/mL和(35.54±8.82)%,均明显高于EDSS评分≤2.5分和3~6分患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组EDSS评分3~6分的患者血清25-(OH)D为(28.65±8.10)nmol/L,明显低于EDSS评分≤2.5分患者,而IL-6和CD8分别为(25.02±5.34)pg/mL和(32.20±9.04)%,均明显高于EDSS评分≤2.5分患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组血清水通道蛋白4-抗体(AQP4-IgG)阳性和阴性表达患者血清25-(OH)D、IL-6、CD8比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。血清25-(OH)D与脊髓受累节段数呈负相关(r s=-0.338,P<0.05),IL-6、CD8与脊髓受累节段数呈正相关(r s=0.336、0.401,P<0.05)。血清25-(OH)D与EDSS评分呈负相关(r s=-0.445,P<0.05),IL-6、CD8与EDSS评分呈正相关(r s=0.404、0.465,P<0.05)。与治疗前比较,观察组治疗后血清25-(OH)D有所升高,而IL-6和CD8有所降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血清25-(OH)D、IL-6、CD8与NMOSD患者脊髓受累节段数、病情严重程度有关。 展开更多
关键词 25-羟基维生素D 白细胞介素-6 CD8 视神经脊髓炎谱系疾病 临床特点 水通道蛋白4-抗体
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猪细小病毒6型ORF 2基因的截短表达及多克隆抗体制备 被引量:1
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作者 欧云文 潘琴 +4 位作者 汪洋 代军飞 任绍科 张洋 张杰 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2487-2495,共9页
【目的】原核截短表达猪细小病毒6型(Porcine parvovirus type 6,PPV6)ORF 2基因,并制备PPV6 VP1(348 aa-675 aa)蛋白多克隆抗体,为后续研究该蛋白的生物学功能提供材料。【方法】以PPV6分离毒株基因组为模板,PCR扩增获得ORF 2截短基因... 【目的】原核截短表达猪细小病毒6型(Porcine parvovirus type 6,PPV6)ORF 2基因,并制备PPV6 VP1(348 aa-675 aa)蛋白多克隆抗体,为后续研究该蛋白的生物学功能提供材料。【方法】以PPV6分离毒株基因组为模板,PCR扩增获得ORF 2截短基因片段,将其克隆至原核表达载体pET30a(+)中构建重组质粒pET30a-PPV6-ORF2。经酶切和测序鉴定后,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂亲和层析纯化,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定纯化后重组蛋白。将纯化后的重组蛋白与弗氏佐剂混匀乳化,免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体,采用Western blotting、间接免疫荧光试验(IFA)和间接ELISA鉴定免疫兔血清特异性。【结果】成功构建了pET30a-PPV6-ORF2重组表达载体,原核截短表达了PPV6 VP1(348 aa-675 aa)蛋白;SDS-PAGE结果显示,重组PPV6 VP1(348 aa-675 aa)蛋白大小约为40 ku,主要以包涵体形式存在;Western blotting结果显示,该蛋白可与PPV6阳性猪血清发生特异性结合,具有良好的反应原性;Western blotting间接与ELISA结果显示,纯化后免疫兔血清与PPV6全病毒蛋白发生特异性反应,抗体效价为1∶25600;IFA鉴定结果表明,PPV6 VP1(348 aa-675 aa)蛋白兔源多克隆抗体具有良好的特异性。【结论】本研究成功原核截短表达了PPV6 ORF 2基因并制备了兔抗PPV6 VP1(348 aa-675 aa)蛋白多克隆抗体,为PPV6血清学检测方法的建立和PPV6 VP1蛋白的进一步研究提供了参考。 展开更多
关键词 猪细小病毒6型(PPV6) ORF 2基因 截短表达 多克隆抗体
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The diagnostic significance of glucose-6-phosphate isomerase (G6PI) antigen and anti-G6PI antibody in rheumatoid arthritis patients
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作者 Daren Yang Huinan Ge +5 位作者 Jing Dong Xiongxiong Zhu Gang Sun Weiguo Ouyang Linhui Wang Guoxing Zhang 《Advances in Bioscience and Biotechnology》 2013年第8期818-822,共5页
Objective: To investigate whether glucose-6-phosphate isomerase (G6PI) antigen and anti-G6PI antibodies could be applied for the clinical diagnostic markers of rheumatoid arthritis (RA) and its associations with RA ac... Objective: To investigate whether glucose-6-phosphate isomerase (G6PI) antigen and anti-G6PI antibodies could be applied for the clinical diagnostic markers of rheumatoid arthritis (RA) and its associations with RA activity states. Methods: The levels of G6PI antigens and anti-G6PI Abs in sera from 176 RA patients in different states, 35 non-RA patients and 100 healthy donors and in synovia fluids from 33 patients and 11 non-RA patients were measured by ELISA. Results: The sensitivity and specificity of G6PI antigens in the RA patients were 75.0% and 93.3%, respectively. The levels of serum G6PI antigens in 176 RA patients were significantly higher than non-RA patients and the health controls. Especially, there was a significant difference between the active phase and the inactive phase in G6PI antigens levels. The levels of G6PI antigens in synovia fluid were also significantly higher in RA groups than in non-RA patients. With the values of the anti-G6PI Abs in sera, there were no marked differences among RA, non-RA patients and health controls. Also, there was no significant difference between the active phase and the inactive phase in RA patients. However, there were no significant differences of G6PI and anti-G6PI between RA patients and health controls in synovial fluid. Conclusions: G6PI is highly correlated with the activity states of RA, and could be applied for a clinical biomarker with high sensitivity and specificity for the diagnosis of RA. 展开更多
关键词 Glucose-6-Phosphate ISOMERASE (G6PI) G6PI antibody RHEUMATOID ARTHRITIS (RA)
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西方蜜蜂m 6A甲基转移酶的基因克隆、多克隆抗体制备及表达模式 被引量:2
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作者 吴鹰 刘治滩 +9 位作者 赵浩东 郭思佳 刘小玉 张艺琼 冯佩林 赵红霞 徐细建 陈大福 付中民 郭睿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期885-895,共11页
【目的】本研究旨在克隆西方蜜蜂Apis mellifera RNA m 6A甲基转移酶14(methyltransferase 14,METTL14)基因AmMETTL14,分析AmMETTL14的理化性质和分子特性以及AmMETTL14在工蜂不同发育阶段和不同组织中的表达模式,并制备AmMETTL14多克... 【目的】本研究旨在克隆西方蜜蜂Apis mellifera RNA m 6A甲基转移酶14(methyltransferase 14,METTL14)基因AmMETTL14,分析AmMETTL14的理化性质和分子特性以及AmMETTL14在工蜂不同发育阶段和不同组织中的表达模式,并制备AmMETTL14多克隆抗体,为持续深入开展AmMETTL14的功能研究提供参考和基础。【方法】通过PCR扩增西方蜜蜂AmMETTL14的CDS并进行Sanger测序验证。使用相关生物信息学软件对AmMETTL14进行生物信息学分析,并构建系统进化树。通过原核表达系统诱导表达AmMETTL14融合蛋白,免疫新西兰白兔以制备多克隆抗体,利用ELISA和Western blot分别检测抗体的效价及特异性。采用RT-qPCR检测AmMETTL14在卵、幼虫、预蛹、蛹及工蜂成虫中以及刚出房工蜂成虫的触角、毒腺、脑、中肠、咽下腺、脂肪体和表皮7种组织中的相对表达量。【结果】成功克隆到西方蜜蜂AmMETTL14的CDS;AmMETTL14的分子式为C 1957 H 3113 N 567 O 589 S 15,分子量约为44.49 kD,脂溶系数为79.97,理论等电点为8.58,平均亲水系数为-0.59,不含典型的跨膜结构域和信号肽,可同时定位于细胞核、线粒体和细胞质;西方蜜蜂、中华蜜蜂A.cerana cerana、黑大蜜蜂A.laboriosa、东方蜜蜂A.cerana、大蜜蜂A.dorsata、小蜜蜂A.florea、欧洲熊蜂Bombus terrestris、金环胡蜂Vespa mandarinia、美洲东部熊蜂B.impatiens和黑腹果蝇Drosophila melanogaster的METTL14均含有MT-A70结构域和3个相同的保守基序;AmMETTL14与黑大蜜蜂的METTL14的氨基酸序列一致性最高(65.60%)且亲缘关系最近。制备的AmMETTL14多克隆抗体效价较高(大于512 K)且特异性较强。AmMETTL14在7和8日龄预蛹与卵中的表达量相近且均显著高于在3日龄幼虫中的表达量,在12日龄蛹中的表达量显著高于卵、幼虫和预蛹中的表达量,在6,12和15日龄工蜂成虫体内的表达量显著高于1日龄工蜂成虫体内的表达量;AmMETTL14在刚出房工蜂成虫脑和咽下腺中的表达量与触角中的表达量相近且均显著高于在毒腺、中肠、脂肪体和表皮中的表达量。【结论】研究结果表明,AmMETTL14可能为亲水性、非跨膜和胞内蛋白,AmMETTL14在幼虫生长发育中发挥潜在的调控作用,制备得到的AmMETTL14的多克隆抗体效价高、灵敏度高和特异性强,为进一步探究AmMETTL14的功能及其参与的表观调控机制打下了基础。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 N 6-甲基腺苷 甲基化转移酶14 时空表达模式 MT-A70 抗体
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HEART评分联合白细胞介素6、D-二聚体、抗心磷脂抗体对急诊胸痛患者30 d内主要不良心血管事件的预测价值 被引量:1
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作者 李庆 方凯 +2 位作者 廖中华 尧鹏 祝衡 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2023年第2期246-250,共5页
目的:研究HEART评分联合白细胞介素6(IL-6)、D-二聚体(D-D)和抗心磷脂抗体(ACA)对急诊胸痛患者30 d内主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法:选取149例急诊胸痛患者进行HEART评分,同时检测血清IL-6、D-D和ACA水平,然后随访30 d内MAC... 目的:研究HEART评分联合白细胞介素6(IL-6)、D-二聚体(D-D)和抗心磷脂抗体(ACA)对急诊胸痛患者30 d内主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法:选取149例急诊胸痛患者进行HEART评分,同时检测血清IL-6、D-D和ACA水平,然后随访30 d内MACE发生情况,分析HEART评分联合IL-6、D-D和ACA对急诊胸痛患者30 d内MACE的预测价值。结果:149例中,30 d内发生MACE 46例(30.87%)。MACE组HEART评分及血清IL-6、D-D和ACA-IgG水平高于未发生MACE组(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示HEART评分预测急诊胸痛患者30 d内MACE的AUC(95%CI)为0.912(0.865~0.959),以HEART评分>5分、IL-6>147.55 ng/L、D-D>226.54μg/L和ACA-IgG>5.23 U/mL为单指标阳性,以HEART评分阳性且IL-6、D-D和ACA中任意一项阳性为阳性进行联合诊断,结果显示敏感度为93.48%,特异度为62.14%,阳性预测值为52.44%,阴性预测值为95.52%。结论:HEART评分联合IL-6、D-D和ACA预测急诊胸痛患者30 d内MACE准确率较高。 展开更多
关键词 急诊胸痛 主要不良心血管事件 HEART评分 白细胞介素6 D-二聚体 抗心磷脂抗体
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兔抗细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抗体的制备及鉴定
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作者 叶晓鲜 董海艳 +4 位作者 王昱 陈争珍 李军伟 韦玉兵 张丽芳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期742-747,共6页
目的 制备兔抗重组细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抗体并进行鉴定。方法 合成并构建pET21a(+)-CDK6重组质粒,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,经SDS-PAGE及Western blot法... 目的 制备兔抗重组细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6)抗体并进行鉴定。方法 合成并构建pET21a(+)-CDK6重组质粒,将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白,经SDS-PAGE及Western blot法检测蛋白表达;用镍氮川三乙酸(Ni-NTA)亲和层析柱纯化,SDS-PAGE分析;纯化后的CDK6蛋白多部位、多次(隔周)免疫日本大耳白兔,分别于免疫的0、 2、 4、 6周取血,分离血清。采用间接ELISA检测效价,Western blot法、免疫荧光细胞化学染色和免疫组织化学染色法检测其特异性。结果 表达并获得高纯度的CDK6蛋白,制备了兔抗CDK6重组蛋白抗体,其效价达1∶30 000,能特异性识别宫颈癌细胞及宫颈癌组织中表达的CDK6蛋白。结论 成功制备了高效价、特异性强的兔抗CDK6抗体。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白依赖激酶6(CDK6) 重组蛋白 基因表达 血清抗体
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结核分枝杆菌6 kD早期分泌靶抗原单克隆抗体的制备及其特异性分析
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作者 宁唤唤 任瑞 +5 位作者 康健 白鹭 路延之 谢燕玲 张芳琳 柏银兰 《中国医药导报》 CAS 2023年第5期20-23,共4页
目的制备结核分枝杆菌(Mtb)6 kD早期分泌靶抗原(ESAT-6)单克隆抗体(mAb)并分析其特异性。方法用亲和层析法纯化目的蛋白ESAT-6,并用该蛋白免疫小鼠。分离免疫小鼠的脾细胞并与骨髓瘤细胞融合,筛选分泌mAb的杂交瘤细胞系。制备腹水并纯化... 目的制备结核分枝杆菌(Mtb)6 kD早期分泌靶抗原(ESAT-6)单克隆抗体(mAb)并分析其特异性。方法用亲和层析法纯化目的蛋白ESAT-6,并用该蛋白免疫小鼠。分离免疫小鼠的脾细胞并与骨髓瘤细胞融合,筛选分泌mAb的杂交瘤细胞系。制备腹水并纯化mAb。酶联免疫吸附试验法分析mAb亚类和相对亲和力,蛋白印迹法检测其特异性。结果制备了可分泌ESAT-6抗体的杂交瘤细胞系,获得了纯化的mAb。mAb亚型为IgG1,相对亲和力为3.9×10^(-5)。该mAb可特异性识别Mtb的ESAT-6。结论制备抗ESAT-6的mAb为ESAT-6用于结核病诊断与防治制剂及其机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 分泌蛋白 6 kD早期分泌靶抗原 单克隆抗体
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抗人白介素6受体单抗的制备和鉴定 被引量:4
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作者 董家新 孔英勋 +2 位作者 于鸣 任蕴芳 沈倍奋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期170-171,173,共3页
利用重组人可溶性IL-6受体免疫小鼠后,制备了两株抗人IL-6R的单克隆抗体176/B6和151/H12。两者分别识别IL-6R胞外肽段的近膜区和远膜区。免疫印迹分析表明,两株单抗均能够特异地结合天然的膜IL-6R蛋... 利用重组人可溶性IL-6受体免疫小鼠后,制备了两株抗人IL-6R的单克隆抗体176/B6和151/H12。两者分别识别IL-6R胞外肽段的近膜区和远膜区。免疫印迹分析表明,两株单抗均能够特异地结合天然的膜IL-6R蛋白,然而都不能阻断IL-6R的生物功能。 展开更多
关键词 白细胞介素6 受体 单克隆抗体 制备 鉴定
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IL-6受体的多抗制备及其在正常大鼠脑内的分布 被引量:4
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作者 李改丽 王百忍 +1 位作者 段晓莉 鞠躬 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期281-286,共6页
IL-6是神经 -免疫通讯的主要信息分子之一 ,获得其受体的抗体并研究该受体在脑内的分布对探讨 IL-6在脑内的功能是重要的基础工作。本研究用原核表达的大鼠 IL-6受体 ( IL-6R)蛋白免疫新西兰大白兔制备了其多克隆抗体 ,经 ELISA、Wester... IL-6是神经 -免疫通讯的主要信息分子之一 ,获得其受体的抗体并研究该受体在脑内的分布对探讨 IL-6在脑内的功能是重要的基础工作。本研究用原核表达的大鼠 IL-6受体 ( IL-6R)蛋白免疫新西兰大白兔制备了其多克隆抗体 ,经 ELISA、Western blot和免疫细胞化学染色等方法进行了鉴定 ,并且将之用于免疫组织化学染色 ,观察了 IL-6R在正常成年大鼠脑内的表达。结果表明 :所获得的 IL-6R多抗具有较高的效价、特异性和亲和力 ;IL-6R在脑内的分布广泛 ,其中大脑皮质的颗粒细胞层和锥体细胞层、外侧隔核、海马、齿状回、下丘脑视上核、弓状核、小脑 Purkinje细胞以及延髓最后区都有浓染的 IL -6R阳性细胞 ;纹状体、下丘脑视前区、丘脑背侧核群、下丘脑室旁核、中脑导水管周围灰质和蓝斑等部位染色较淡 ;另外 ,胼胝体、视束和海马伞等白质内有许多胶质细胞也呈现 IL -6R阳性染色。本文观察到的 IL -6R在脑内的广泛分布表明 ,IL 展开更多
关键词 IL-6 受体 大鼠 免疫 抗体
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结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6融合基因的表达及其多克隆抗体的制备 被引量:10
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作者 唐宇龙 刘湘新 +2 位作者 杨华 丁元生 胡忠义 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期811-814,共4页
以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA为模板,经重叠PCR扩增获得CFP10-ESAT-6融合基因片段,克隆于pET21a表达载体中,获得了重组质粒pET21a-CFP10-ESAT-6,将其转化大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,得到了25 ku的目的蛋白。表达产物经... 以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA为模板,经重叠PCR扩增获得CFP10-ESAT-6融合基因片段,克隆于pET21a表达载体中,获得了重组质粒pET21a-CFP10-ESAT-6,将其转化大肠杆菌BL21细胞,经IPTG诱导表达,得到了25 ku的目的蛋白。表达产物经纯化和定量分析后免疫新西兰大白兔,收集兔血清进行抗体ELISA检测。结果显示,成功构建了CFP10-ESAT-6融合基因的原核表达质粒,获得了CFP10-ESAT-6融合蛋白,以此蛋白免疫动物可产生高效价的抗体。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 融合蛋白CFP10-ESAT-6 表达 多克隆抗体
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鼠抗人sIL-6R单克隆抗体的制备及sIL-6R检测方法的建立 被引量:7
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作者 邱玉华 张学光 +2 位作者 郭玲 刘俊恒 王江方 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期58-60,20,共4页
以重组人sIL-6R蛋白作为抗原,获得3株分泌特异性McAb的杂交瘤株,分别命名为SI10,SI11和SI12。3株McAb均属小鼠IgG1亚类。竞争抑制试验的结果表明,3株McAb识别两个不同的抗原表位。将杂交瘤细... 以重组人sIL-6R蛋白作为抗原,获得3株分泌特异性McAb的杂交瘤株,分别命名为SI10,SI11和SI12。3株McAb均属小鼠IgG1亚类。竞争抑制试验的结果表明,3株McAb识别两个不同的抗原表位。将杂交瘤细胞注入同系小鼠腹腔诱生的McAb腹水,经proteinG纯化后用生物素标记,建立了双McAb夹心ELISA法,该法用于血清sIL-6R的特异性检测,灵敏度为50μg/L。 展开更多
关键词 IL-6 可溶性受体 单克隆抗体 ELISA 制备
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白介素6在2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗中的作用 被引量:23
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作者 陈雨 郑少雄 +1 位作者 郝杰 孟春梅 《中国临床医学》 2011年第1期32-34,共3页
目的:观察白介素6(IL-6)抗原及IL-6抗体对2型糖尿病(T2DM)大鼠的影响,探讨IL-6等炎症因子对糖尿病胰岛素抵抗的作用。方法:36只SD T2DM大鼠,随机分为4组:糖尿病IL-6抗原组(A组),糖尿病IL-6抗体组(B组),糖尿病对照组(C组),健康对照组(N组... 目的:观察白介素6(IL-6)抗原及IL-6抗体对2型糖尿病(T2DM)大鼠的影响,探讨IL-6等炎症因子对糖尿病胰岛素抵抗的作用。方法:36只SD T2DM大鼠,随机分为4组:糖尿病IL-6抗原组(A组),糖尿病IL-6抗体组(B组),糖尿病对照组(C组),健康对照组(N组)。测定血糖、血清胰岛素、血脂、血游离脂肪酸和肝脏胰岛素受体。结果:脂肪乳灌胃(高糖高脂饮食)7周加小剂量1次尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)可以成功诱导SD大鼠的T2DM模型,糖尿病组较正常对照组出现明显的高胰岛素血症、胰岛素抵抗、胰岛素敏感性降低和高脂血症;IL-6抗体干预可以降低T2DM大鼠的胰岛素水平,减轻其胰岛素抵抗。结论:IL-6抗体能够改善T2DM大鼠的胰岛素抵抗状态。 展开更多
关键词 2型糖尿病 白细胞介素6 胰岛素抵抗 胰岛素受体 白介素6抗体
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重症肌无力患者外周血单个核细胞白细胞介素6活性变化 被引量:5
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作者 李作孝 徐文桢 +5 位作者 章崇杰 刘杰 魏大鹏 赵宗蓉 张平 陈平 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期20-22,共3页
探讨白细胞介素 6(IL -6)在重症肌无力 (MG)发病机理中的作用及其临床意义。  方法 采用3H -TdR掺入法检测 40例正常对照及 42例MG患者外周血单个核细胞IL -6分泌活性。  结果 MG患者组IL -6活性显著高于正常对照组 ,且IL -6活性... 探讨白细胞介素 6(IL -6)在重症肌无力 (MG)发病机理中的作用及其临床意义。  方法 采用3H -TdR掺入法检测 40例正常对照及 42例MG患者外周血单个核细胞IL -6分泌活性。  结果 MG患者组IL -6活性显著高于正常对照组 ,且IL -6活性变化与乙酰胆碱受体抗体产生以及与MG临床类型、病情、预后密切相关。  结论 IL -6在MG发病机理中起着重要作用 ,检测IL -6活性对区分MG临床类型、判断病情、推测预后、指导治疗有重要的参考价值。 展开更多
关键词 重症肌无力 白细胞介素 单个核细胞
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