抗真菌肽LP-1的分离纯化及特性分析

拮抗菌枯草芽孢杆菌（ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＴＧ２６ 分泌产生的小肽经两次盐酸沉淀、丙酮分级沉淀和Ｈｉｐｏｒｅ 反相柱两次纯化，分离得到一种新的抗真菌的小肽，命名为ＬＰ１ 。经ＭＡＬＤＩＴＯＦ质谱鉴定，分子量为１０５７－３ ，等电聚焦测得其ｐＩ为４－７５ 。ＬＰ１ 对温度有较高的稳定性，１００ ℃保温３０ｍｉｎ ，仍能保持７５ ％ 的活性。抑菌谱表明，该抗菌肽对瓜果腐霉（ Ｐｙｔｈｉｕ ｍ ａｐｈａｎｉｄｅｒｍａｔｕ ｍ） 、玉蜀黍赤霉病菌（ Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ） 、长柄链格孢（ Ａｌｔｅｒｎａｒｉａｌｏｎｇｉｐｅ） 和番茄蔫萎座镰孢霉（ Ｆｕｓａｒｉｕ ｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ ｆ．ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ） 等植物病原真菌有很强的抑制作用。ＬＰ１ 可造成绿色木霉（ Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｖｉｒｉｄｅ） 菌丝生长形态异常：菌丝端部膨大，菌丝扭曲，分支加剧，菌丝内细胞质分布不均匀，发生凝聚。茚三酮反应以及测序结果均证实其为环肽。

内生枯草芽孢杆菌Em7抑菌物质的产生条件及其活性

为研究内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Em7抑菌物质产生条件及其特性,以油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)为指示菌,采用单因素和正交试验测定不同培养基成分及培养条件对菌株Em7抑菌物质产生的影响。结果显示,菌株Em7的最佳培养基配方为:麸皮20g/L,牛肉膏10g/L,MnSO41.5g/L;当培养基初始pH=7.0,接种量φ=1%,250mL摇瓶装液量为50mL时,在28℃,150r/min培养获得的培养液抑菌活性最强。此外,菌株Em7的抑菌物质能够抑制10多种重要植物病原菌的菌丝生长、孢子萌发,并致使病菌菌丝出现细胞质外渗、膨大,致使病菌孢子出现顶端膨大、不能正常形成芽管等畸形发育。