大鼠腰椎间盘针刺退变模型的建立

[目的]建立大鼠腰椎间盘针刺退变模型并进行MRI和组织学观察。[方法]Sprague-Dawley大鼠32只,20只进行腰椎间盘纤维环厚度测量,确定针刺深度;12只经腹膜手术,L3、4、L4、5、L5、6椎间盘使用21G针分别行纤维环部分针刺或全层针刺,L6S1椎间盘作为对照,术前及术后4、8周行MRI检查,然后处死,椎间盘行HE染色。[结果]测量大鼠腰椎间盘纤维环厚度后,确定适用于L3、4、L4、5、L5、6、L6S1椎间盘纤维环部分针刺深度为1.5mm,纤维环全层针刺深度为2.3mm。MRI检查在纤维环全层针刺4周,部分针刺8周后的椎间盘信号强度显著降低。组织学检查发现纤维环全层针刺和部分针刺椎间盘4周时都发生退变,而纤维环全层针刺退变较严重。[结果]纤维环部分针刺或全层针刺方法可以成功建立大鼠腰椎间盘退变模型,方法可靠、有效、重复性好。

纤维环穿刺诱导椎间盘退变动物模型的实验研究

目的:探讨纤维环穿刺诱导椎间盘退变建立动物模型的可行性。方法:新西兰大白兔24只,用持针器夹持18G皮肤穿刺针从左前外侧刺入L3/4、L4/5、L5/6椎间盘的纤维环,深度控制在5mm。术前及术后3、6、10周对造模后的椎间盘及对照的椎间盘(L2/3)行MRI检查,并行免疫组化及组织学观察。结果:术后第3周到第10周,造模后的椎间盘MRIT2WI信号呈现持续减弱趋势,免疫组化及组织学观察发现髓核细胞的数量及Ⅱ型胶原含量较对照间盘进行性减少(P<0.01)。结论:纤维环穿刺法可以诱导兔椎间盘的缓慢退变,为研究椎间盘的退行性变提供有效的动物模型。

腰椎间盘内破裂模型的建立

目的:建立腰椎间盘内破裂模型并行组织学和椎间盘造影CT观察。方法:15只山羊,手术损伤L5,6前部全层纤维环,L6,7后部纤维环内层,术后3周和3、6个月观察椎间盘造影CT的变化,并进行组织学检查,评定纤维环损伤后的病理改变。结果:组织学和椎间盘造影CT显示L4,5和L5,6在实验期间未发现有后部纤维环内破裂,L6,7后部纤维环内层破裂处未愈合,并在3、6个月时破裂向纤维环外部不断延伸,但均未穿破纤维环外层。结论:经山羊腰椎间盘前方人为损伤后部纤维环内层,可以可靠、一致地制备椎间盘内破裂动物模型。

腰椎间盘损伤后MRI表现及组织学改变的实验研究

目的:探讨山羊腰椎间盘损伤后不同时间点MRI表现和组织学改变。方法:15只山羊,人为刺伤L5/6椎间盘前纤维环全层和L6/7后部纤维环内层,在伤后3周、3个月、6个月进行腰椎MRI检查观察髓核和纤维环的信号改变,光镜下观察实验椎间盘后部纤维环组织学改变。结果:L6/7椎间盘损伤后部纤维环内层后,在实验期间未发生愈合,通过MRI定性、定量分析发现,椎间盘出现退变,并随时间进行性加重(3周,3、6个月),且退变过程较L5/6加速。T2像上未发现一例出现HIZ。结论:经山羊椎间盘前方损伤后部纤维环内层后,纤维环内层很难愈合,早期出现椎间盘退变。

CT引导下经皮纤维环穿刺建立兔腰椎间盘退变模型

目的：在CT引导下经皮纤维环穿刺建立兔腰椎间盘退变模型，并通过影像学和病理学验证其退变过程及效果。方法：3月龄新西兰大白兔18只，体重2.7~3.3kg，雌雄不限，术前均行X线及MRI检查。每只兔在螺旋CT引导下，用18G穿刺针经侧方皮下穿刺兔L5/6椎间盘（穿刺组），确认刺入椎间盘纤维环深度约为5mm，并对L4/5椎间盘进行假性穿刺（穿刺达椎间盘边缘，但不刺入纤维环内；假穿刺组），L3/4椎间盘作为对照椎间盘（对照组）。术后4周、8周、12周随机选取6只兔行X线片及MRI检查，观察各组椎间隙高度、邻近骨质改变及椎间盘信号改变，以“术后椎间隙高度/术前椎间隙高度×100”计算椎间盘高度相对值（DHRV），并进行椎间盘改良Thompson分级法分级；X线片及MRI检查结束24h内处死动物，选取对照、假穿刺和穿刺组椎间盘进行组织形态学及免疫组织化学分析。结果：对照组及假穿刺组术后4、8、12周，X线片示椎间隙高度无降低，无终板骨质硬化与骨赘形成；MRI T2加权成像图像示各椎间盘均呈高信号；组织学检查见髓核细胞数量较多，分布均匀，纤维环排列呈同心圆层状；免疫组化分析髓核呈Ⅰ型胶原染色强阳性，Ⅱ型胶原染色阴性，在各时间点表现无明显差别。穿刺组椎间盘在术后4周X线片即可见椎间隙高度轻度降低（DHRV=70.78±4.55），MRI示椎间盘信号强度轻度下降，组织学上见纤维环结构紊乱、髓核细胞轻度减少；术后8周椎间隙高度明显降低（DHRV=50.63±4.04），开始出现终板骨质硬化，MRI示椎间盘信号强度明显下降，组织学上髓核被胶原组织分裂为含较多椭圆形细胞的细胞岛，出现纤维软骨细胞，纤维环层状结构变形、部分断裂；术后12周椎间隙高度继续下降（DHRV=44.78±2.61），骨赘形成、终板骨质硬化明显，MRI示椎间盘信号强度继续减弱，组织学上见髓核被纤维软骨组织所代替，纤维环层状组织碎裂、解体；免疫组织化学分析示术后4、8、12周髓核Ⅰ型胶原染色逐渐增强，Ⅱ型胶原染色逐渐减弱。各时间点对照组椎间盘的DHRV及改良Thompson分级与假穿刺组比较均无统计学差异（P＞0.05）；穿刺组在术后不同时间点的DHRV降低、改良Thompson分级增高与对照组及假穿刺组比较均有统计学差异（P〈0.05）；随着穿刺时间的延长，穿刺组DHRV呈进行性降低趋势，改良Thompson分级进行性升高，两者在术后4、8、12周间均有统计学差异（P〈0.05）。结论：CT引导下经皮纤维环穿刺法诱导兔椎间盘退变模型构建成功，操作方法简单、创伤小，经影像学及病理学证实其退变过程为渐进性。

兔腰椎间盘退变模型的建立及影像学分析

目的探讨针刺抽吸法建立椎间盘退变动物模型的可行性。方法新西兰大白兔18只,用持针器夹持21 G皮肤穿刺针从椎间隙正前方刺入L3-4、L4-5、L5-6椎间盘的纤维环,深度控制在5 mm,拔出针芯,抽吸出部分髓核组织。术前及术后4、8、12周分别对造模后椎间盘及对照椎间盘(L2-3)行MRI及CR检查。结果术后第4周到第12周,造模后的椎间盘MRI的T2W1信号呈现持续减弱趋势;椎间盘高度指数持续下降,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论针刺抽吸法可诱导兔椎间盘的缓慢退变,从而为研究椎间盘退行性变的机制及治疗提供有效的动物模型。

纤维环损伤诱导兔椎间盘退变模型

目的：探讨纤维环刺伤法诱导腰椎间盘退变建立动物模型的可行性。方法：普通级新西兰大白兔（雄性,体质量约3.5 kg,1岁龄）。分为正常对照组及模型组,以腰4～5椎间盘为正常对照组,以每只兔的腰2～3椎间盘为模型组。用16号穿刺针于腰2～3椎间盘纤维环前外侧刺入,分别于术前及术后4、8、16周对模型组及正常对照组椎间盘进行磁共振（MRI）检查,动物处死取材后行组织学及免疫组织化学观察。结果：术后4～16周,模型组椎间盘髓核MRI T2W1信号呈逐渐减弱趋势,组织学观察髓核脊索细胞逐渐减少,免疫组织化学观察到髓核中Ⅰ型胶原表达较正常对照组逐渐增多,而Ⅱ型胶原表达较对照组逐渐减少。结论：本实验可为椎间盘退变的进一步研究提供动物模型。