血清sLOX-1、Apelin-13、YKL-40水平对急性脑梗死患者早期神经功能恶化的预测效能

目的探讨血清可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)、孤独G蛋白偶联受体配体-13(Apelin-13)、甲壳质酶蛋白-40(YKL-40)水平对急性脑梗死(ACI)患者早期神经功能恶化(END)的预测效能。方法选取2021年4月至2024年5月安阳市人民医院收治的219例ACI患者进行前瞻性研究,根据住院期间是否发生END分为END组(n=48)、无END组(n=171)。比较两组基线资料及血清s LOX-1、Apelin-13、YKL-40水平,采用Pearson法、偏相关性系数分析END组血清各指标与△美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性、偏相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析各指标对END的预测价值,采用K-M生存曲线分析各指标表达水平对ACI预后的影响。结果END组患者入院时的NIHSS评分及血清sLOX-1、YKL-40水平分别为(12.96±4.20)分、(3.07±0.93)ng/mL、(119.38±25.76)μg/L,明显高于无END组的(9.17±3.00)分、(2.44±0.78)ng/mL、(87.52±19.43)μg/L,Apelin-1为(40.94±9.58)ng/mL,明显低于无END组的(48.63±12.31)ng/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,血清sLOX-1、YKL-40水平与△NIHSS评分呈正相关性(r=0.679、0.730,P<0.001),Apelin-13与之呈负相关性(r=-0.814,P<0.001);偏相关性分析结果显示,血清s LOX-1、YKL-40水平仍与△NIHSS评分呈正相关性,Apelin-13仍与之呈负相关性(P<0.001);ROC分析结果显示,s LOX-1、Apelin-13、YKL-40联合预测END的曲线下面积(AUC)为0.931(95%CI:0.889~0.961),优于单独预测价值;以Cut-off值为界,K-M生存曲线显示,血清sLOX-1、YKL-40高水平亚组不良预后率分别为27.66%、30.77%,明显高于低水平亚组的4.80%、5.67%,Apelin-13高水平亚组不良预后率为8.41%,明显低于低水平亚组的20.54%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论sLOX-1、Apelin-13在急性ACI发生END患者血清中表达上调,YKL-40表达下调,且各指标水平均与预后相关,联合检测对END具有一定预测价值,可作为临床预测END、评估预后的辅助指标,并指导临床防治工作。

血清Apelin-13、脂肪酸结合蛋白4水平与绝经后骨质疏松症的相关性研究

目的探讨血清Apelin-13、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)水平与不同骨量绝经后女性代谢参数和骨代谢指标的相关性。方法选取145例绝经后女性作为研究对象,根据骨密度(BMD)检测结果分为骨量正常组49例、骨量减少(ON)组51例和骨质疏松(OP)组45例,测定并比较3组血清Apelin-13、FABP4水平和骨代谢指标、生化指标水平。采用Spearman相关分析法分析Apelin-13、FABP4等指标与BMD的相关性,采用多因素Logistic回归分析法分析OP的危险因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Apelin-13对绝经后骨质疏松症(PMOP)的预测价值。结果OP组血清Apelin-13水平低于ON组、骨量正常组,差异有统计学意义(P<0.05);3组血清FABP4水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);OP组血清甲状旁腺激素(PTH)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PⅠNP)、Ⅰ型胶原交联C端肽(CTXⅠ)、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)水平高于ON组、骨量正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。绝经后女性腰椎BMD与血清Apelin-13水平呈正相关(P<0.05),与血清FABP4水平无相关性(P>0.05);腰椎BMD与血清PTH、ALP、PⅠNP、CTXⅠ、BALP和年龄呈负相关(P<0.05),与体质量、体质量指数、T值、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,血清Apelin-13、PTH、ALP、PⅠNP、CTXⅠ、BALP水平均为绝经后女性发生OP的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清Apelin-13预测PMOP的最佳临界值为18.51 pg/mL,曲线下面积为0.716,敏感度为70.0%,特异度为64.4%。结论Apelin-13在PMOP患者血清中呈低表达,且其表达水平与腰椎BMD密切相关,或可作为PMOP的早期筛查指标和潜在治疗靶点。

Apelin可促进脊髓损伤大鼠运动和脊髓形态的修复

背景:研究表明,Apelin/APJ在调节细胞增殖、凋亡、抑制炎症反应和血管重建等方面显示出功能。因此,推测Apelin在脊髓损伤中具有类似的功能。目的:评价Apelin对大鼠脊髓损伤的治疗作用。方法:①体内实验选用大鼠横断脊髓损伤模型,采用45只雌性SD大鼠,随机分为假手术组、脊髓损伤组、Apelin-13组。脊髓损伤组和Apelin-13组大鼠采用横断损伤法建立脊髓损伤模型,Apelin-13组每日腹腔注射Apelin-130.2 mg/kg,其余2组每日注射等量生理盐水,连续治疗14 d。于大鼠造模后第1,3,7,14天采用BBB运动评定量表评定大鼠后肢运动功能;于第14天收集大鼠脊髓,用于免疫组化、免疫荧光、RT-PCR等分析。②体外实验利用H2O2诱导PC12细胞损伤,加入不同浓度(1,2,4μmol/L)的Apelin-13,CCK8法检测其对诱导损伤的PC12细胞的活力的影响,探索Apelin的神经保护作用。结果与结论:①脊髓损伤后大鼠后肢功能完全丧失,损伤后3 d开始观察到运动恢复,但脊髓损伤组各时间点之间差异无显著性意义;Apelin促进了脊髓损伤大鼠的运动功能恢复;②脊髓损伤导致脊髓局部连续性破坏,Apelin促进了大鼠损伤脊髓形态的修复;③假手术组仅有少数离子钙接头蛋白分子1(iba1)阳性细胞,脊髓损伤导致局部该阳性细胞数量和星形胶质细胞显著增加,Apelin干预减少了局部星形胶质细胞和小胶质细胞激活(P<0.05);④脊髓损伤后严重脱髓鞘,LFB染色阳性面积明显降低,Apelin减少了脊髓损伤带来的脱髓鞘;⑤脊髓损伤后生长相关蛋白43表达量显著增加(P<0.001),给予Apelin进一步增加了生长相关蛋白43蛋白的表达;⑥Apelin增加了H2O2诱导的PC12损伤的细胞活力(P<0.05)。总之,Apelin促进了脊髓损伤大鼠运动和脊髓形态的修复。

艾帕素13(apelin-13)通过阻断PINK1/parkin信号通路促进线粒体自噬改善大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的研究脂肪细胞因子艾帕素13(AP13)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中线粒体自噬水平的影响及机制。方法通过结扎大鼠冠状动脉分支建立MIRI模型,大鼠分为假手术组、AP13处理的假手术组、MIRI组、AP13处理的MIRI组。MIRI模型建立24 h后,采用ELISA检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平,2,3,4-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测大鼠心肌梗死面积,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测MIRI心肌区的心肌细胞凋亡水平,透射电镜观察受损心肌区心肌细胞线粒体损伤情况及自噬体的形成。取各组大鼠心肌梗死区组织,Western blot法检测细胞中微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)/LC3Ⅰ比值,泛素结合蛋白P62蛋白及线粒体自噬通路中磷酸酶与张力蛋白同源物诱导激酶1(PINK1)、泛素连接酶parkin和裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白表达。采用携带GFP-LC3的腺病毒感染分离的各组大鼠心梗区心肌细胞,并采用免疫荧光细胞化学染色观察线粒体外膜转位酶20(TOM20)和LC3的共定位。结果与假手术组或AP13处理的假手术组相比,MIRI组或AP13处理的MIRI组大鼠血清CK、LDH、cTnI和心肌梗死面积和细胞凋亡率均显著增加,前两组无明显差异。而与MIRI组相比,AP13处理的MIRI大鼠的上述变化均明显降低。与假手术组或AP13处理的假手术组相比,MIRI组或AP13处理的MIRI组大鼠心肌细胞中线粒体结构的完整性明显破坏,且包裹线粒体的自噬体大量出现,而与MIRI组相比,AP13处理的MIRI组大鼠的心肌细胞线粒体损伤明显减轻,自噬体的数量显著增加。MIRI组或AP13处理的MIRI组梗死心肌组织中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、PINK1、parkin及c-caspase-3蛋白表达均显著增加,P62表达水平明显降低,而与MIRI组相比,AP13处理的MIRI组中上述蛋白水平的变化趋势明显降低;MIRI造模后LC3与TOM20共定位于心肌细胞线粒体中,且在AP13处理的MIRI组中LC3的表达强度较MIRI组显著增加。结论AP13可能通过阻断PINK1/parkin信号通路,促进线粒体自噬水平减少MIRI造成的心肌梗死面积,降低细胞凋亡率。

心力衰竭患者心功能与血浆Apelin水平的关系

目的研究心力衰竭（简称心衰，HF）患者血浆活性肽Apelin浓度与心功能的关系，探讨心衰发生、发展的病理生理机制。方法选择住院心衰患者52例作为心衰组，门诊健康体检者59例作为对照组。所有受试者采集静脉血，应用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血浆Apelin含量。用SPSS11．5软件对数据进行分析。结果Apelin水平比较：心衰组明显低于对照组[（0．4074±0．1607）ng／ml比（0．5299±0．2613）ng／ml，P〈0．01]，差异有统计学意义。心功能与血浆Apelin浓度的关系：心衰Ⅲ级、Ⅳ级组Apelin水平低于Ⅱ级组[（O．3416±0．0911）ng／ml，（O．2998±0．1049）ng／ml比（O．4546±0．1172）ng／ml，P均〈O．05]，差异有统计学意义。Ⅳ级组略低于Ⅲ级组，但二者之间差异无统计学意义（P〉O．05）。结论慢性心衰患者血浆Apelin水平降低，且与心衰的严重程度呈负相关。提示Apelin与心衰的发生、发展有一定的关系。

急性脑梗死患者不同时期Apelin-13及应激相关蛋白水平的变化及其与预后的关系研究

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者不同时期Apelin-13和应激相关蛋白热休克蛋白70(HSP-70)、β内啡肽(β-EP)水平的变化及其与预后的相关性。方法选取2013年1月—2014年12月在复旦大学附属上海市第五人民医院确诊为ACI的患者50例作为ACI组,另选取同期在本院体检正常者40例作为对照组。采集两组受试者血液,并检测对照组和ACI组发病第1、3、7、14、21、30天Apelin-13、HSP-70、β-EP水平。ACI患者根据改良Rankin分级法评估预后,分为预后好(n=28)、一般(n=15)、差(n=7),并比较不同预后患者发病第1天的Apelin-13、HSP-70、β-EP水平、格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、美国国立卫生研究所卒中量表(NHISS)评分、洼田饮水试验分级。结果对照组、ACI组不同时期Apelin-13、HSP-70水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),β-EP水平比较差异无统计学意义(P>0.05);其中ACI组第1天Apelin-13水平低于对照组,ACI组第14、21、30天Apelin-13水平高于ACI组第1天(P<0.05);ACI组第1、3天HSP-70水平高于对照组,ACI组第3、7、14、21、30天HSP-70水平低于ACI组第1天(P<0.05)。ACI患者Apelin-13与HSP-70呈直线负相关(r=-0.909,P=0.012),Apelin-13与β-EP无直线相关性(r=-0.172,P=0.744),HSP-70与β-EP无直线相关性(r=0.121,P=0.820)。不同预后ACI患者β-EP水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同预后ACI患者Apelin-13、HSP-70水平、GCS评分、APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中预后差者Apelin-13水平、GCS评分均低于预后好和预后一般者,HSP-70水平、APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级高于预后好和预后一般者(P<0.05);预后一般者GCS评分低于预后好者,APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级高于预后好者(P<0.05)。结论Apelin-13水平在ACI发病第1天降低,随ACI病程逐渐升高;HSP-70水平在ACI发病第1天升高,随ACI病程逐渐下降。预后差的ACI患者发病第1天的Apelin-13水平、GCS评分低于预后一般和预后好者,而HSP-70水平、APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级高于预后一般和预后好者,可以根据这些指标的变化判断ACI患者预后。

Apelin-13对葡萄糖剥夺乳鼠心肌细胞自噬的影响及机制

目的观察血管紧张素1型受体相关蛋白配体(apelin-13)对损伤心肌细胞自噬的影响,探讨其可能的作用机制。方法体外培养3 d龄内的SD乳鼠心肌细胞,通过葡萄糖剥夺(glucose deprivation,GD)方法建立心肌细胞损伤模型,将细胞随机分为5组:正常对照组(Control组)、葡萄糖剥夺组(GD组)、Apelin-13预处理组(GD+Apelin-13组)、Tricribine+Apelin-13预处理组(GD+Apelin-13+Tricribine组)和阻断剂组(Tricribine组)。采用透射电镜观察细胞内自噬体的变化,免疫沉淀脂质激酶分析法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的活性,Western-blotting法检测细胞内自噬相关蛋白-微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达,以及信号通路相关蛋白Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR的表达。结果葡萄糖剥夺可诱导乳鼠心肌细胞自噬体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加(P<0.01);Apelin-13预处理能减轻葡萄糖剥夺引起的心肌细胞损伤,使自噬体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值下降,提高PI3K的活性,上调Akt、mTOR蛋白的磷酸化水平(P<0.01);Akt特异性阻断剂Tricribine可以使Apelin-13的上述保护作用减弱(P<0.01)。结论 Apelin-13在一定程度上可以抑制GD诱导的心肌细胞自噬,机制可能与激活PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

Apelin/APJ系统与血管发生

Apelin/APJ系统是一种新型G蛋白偶联受体系统,在人与动物的多种组织中广泛表达。Apelin/APJ系统可影响哺乳动物的许多生物学特性,包括神经内分泌系统、心血管系统等。血管发生是指在已有血管的基础上依赖于内皮细胞,以出芽方式增殖、迁移并相互联结形成血管内膜腔,最终形成新血管的过程。血管发生在血管生理和病理条件下发挥着重要的作用,文章就近年来Apelin在血管发生研究方面所取得的进展做一综述。

有氧运动对原发性高血压患者血浆Apelin-12蛋白影响的研究

目的通过研究原发性高血压患者有氧运动前后血浆Apelin-12蛋白的变化，探讨运动降血压的可能机理。方法选取80例32～59岁轻中度原发高血压患者随机分成运动组和对照组，实验前测定两组血浆Apelin-12蛋白和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平，然后运动组完成12周有氧运动，对照组则保留原有生活习惯，然后再测定两组血浆Apelin-12和AngⅡ水平，将获得的数据进行统计学处理。结果12周有氧运动后原发性高血压患者血压较运动前降低；血浆Apelin-12水平较运动前显著升高（P〈O．05），与之相反，血浆AngⅡ水平较运动前显著降低（P〈0．05），且运动组血浆Apelin-12和AngⅡ变化水平呈负相关；对照组实验前后血浆Apelin-12和AngⅡ则无明显变化。结论有氧运动可以下调原发性高血压患者血压，可能是通过提高血浆Apelin水平，下调AngⅡ水平，从而发挥下调血压的作用。

血清RBP4、Apelin水平与糖尿病视网膜病变的相关性

目的探讨血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)、Apelin水平与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性。方法选取2017年10月至2019年4月接受治疗的162例2型糖尿病(T2DM)并发DR患者,依据DR分期标准分为增生期糖尿病性视网膜病变(PDR)组90例和非增生期糖尿病性视网膜病变(NPDR)组72例,另选取同期接受治疗的单纯T2DM患者106例为T2DM组。3组患者均于入院时检测血糖、血脂指标及血清RBP4、Apelin水平,比较3组患者上述指标的差异,并分析T2DM患者并发DR的危险因素。结果3组患者糖尿病病程、FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、TC、HDL-C比较,差异均有统计学意义(P<0.05);PDR组、NPDR组血清RBP4、Apelin水平均明显高于T2DM组,且PDR组高于NPDR组,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,T2DM病程、HbA1c、HOMA-IR、HDL-C、RBP4、Apelin均是T2DM患者并发DR的危险因素(P<0.05)。结论DR患者血清RBP4、Apelin水平显著升高,RBP4、Apelin的高水平表达与DR的发生、病情进展密切相关。

Apelin-13通过调节YAP入核抵抗缺氧诱导的视网膜Müller细胞凋亡

目的:探讨Apelin-13在缺氧诱导的视网膜Müller细胞凋亡中的作用及机制。方法:以视网膜Müller细胞为研究对象,实验分为对照组、缺氧组和实验组,对照组细胞培养于正常环境中,缺氧组细胞培养于缺氧环境中,实验组细胞培养于缺氧环境中并以Apelin-13(1μmol/L)处理,MTT法检测细胞活力变化,结晶紫染色法观察细胞形态,免疫荧光染色法观察细胞GFAP和YAP的表达情况,TUNEL染色检测细胞凋亡并计算凋亡指数,蛋白印记实验检测p-LATS1、p-YAP、LATS1及YAP蛋白表达变化。结果:提取分离的Müller细胞传代后贴壁生长,细胞呈长梭形、多角形、圆形等形态,细胞质丰富,细胞核呈圆形,细胞GFAP表达阳性。0.1、1、10μmol/L Apelin-13处理显著抑制缺氧诱导的Müller细胞活力下降(P<0.05或P<0.01)。与对照组相比,缺氧组细胞凋亡指数明显升高(P<0.01);而与缺氧组相比,实验组凋亡指数明显降低(P<0.01)。对照组和缺氧组细胞p-LATS1和p-YAP蛋白表达无明显差异;与缺氧组相比,实验组细胞p-LATS1和p-YAP蛋白表达明显降低(P<0.01)。对照组和缺氧组细胞核YAP蛋白表达无明显差异;与缺氧组相比,实验组YAP细胞核表达明显升高(P<0.01)。结论:Apelin-13能抵抗缺氧诱导的视网膜Müller细胞凋亡,该作用可能与调节YAP入核有关。

血清视黄醇结合蛋白4和Apelin-12与稳定性心绞痛患者冠状动脉狭窄的相关性研究

目的：检测稳定性心绞痛患者血清视黄醇结合蛋白4（ RBP4）和Apelin-12水平的变化，探讨其与冠状动脉狭窄程度、病变部位的关系。方法以酶联免疫吸附法测定血清视黄醇结合蛋白4和Apelin-12水平；依据冠状动脉造影检查和Gensini评分结果分组，将Gensini积分（GS）按照四分位数间距划分为四组：GS≤18，18～32，32～47，＞47。结果与对照组比较，RBP4在GS1及GS2组中均明显高于对照组，Apelin-12明显低于对照组（P＜0．001）。与对照组比较，RBP4在单支、双支、三支病变组中均高于对照组（P＜0．001），单支、双支病变组之间差异无统计学意义（P＞0．05），但在单支与三支病变组之间差异有统计学意义（P＜0．001）；Apelin-12在单支、双支及三支病变组之间差异均有统计学意义（P＜0．001）。与对照组比较，RBP4在LAD病变组中高于对照组、Apelin-12在LAD病变组中显著低于对照组，两者在RCA、LCX病变组与对照组之间差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论血清RBP4、Apelin-12水平和稳定性心绞痛患者冠脉病变狭窄程度有关，并且与冠状动脉病变部位有关。

老年2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化患者外周血Apelin和超敏C-反应蛋白水平及其临床意义

目的分析老年2型糖尿病(T2DM)颈动脉粥样硬化患者外周血Apelin和超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平及其临床意义。方法选择61例老年T2DM患者,根据颈动脉超声结果分为颈动脉粥样硬化组32例和非颈动脉粥样硬化组29例,同时选择27例健康者为正常对照组,测定并比较3组空腹血清Apelin及全血hs-CPR,分析动脉粥样硬化组Apelin水平与hs-CPR水平的相关性。结果动脉粥样硬化组、非动脉粥样硬化组、正常对照组的Apelin及hs-CRP水平依次降低(P<0.05)。动脉粥样硬化组患者的Apelin与hs-CRP水平呈正相关(P<0.05)。结论老年T2DM合并动脉粥样硬化患者外周血Apelin水平、hs-CPR均升高,Apelin可能与炎症因子共同参与T2DM患者颈动脉粥样硬化的形成。

Apelin-13通过AMPK通路抑制同型半胱氨酸诱导的内皮细胞损伤

目的观察Apelin-13对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用并探讨其可能的作用机制。方法采用10 mmol/L Hcy处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24 h,诱导内皮细胞的损伤。采用不同浓度(0.1μmol/L、1.0μmol/L和10.0μmol/L)的Apelin-13预处理1 h,再加入含Hcy的培养基中继续孵育24 h,观察细胞的损伤情况。采用MTT法测定细胞活力,比色法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性。采用Western Blot检测HUVECs中磷酸化的腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)蛋白表达。结果与对照组比较,Hcy组细胞的存活率显著降低,细胞培养液中LDH活力显著性升高(均P<0.05)。与Hcy组组比较,Apelin-13(1.0和10.0μmol/L)预处理组细胞的存活率均显著升高,细胞培养液中LDH活力显著性降低(均P<0.05)。Hcy组HUVECs细胞中p-AMPK蛋白的表达与对照组比较没有显著性差异(均P>0.05)。与Hcy组比较,Apelin-13(1.0和10.0μmol/L)预处理组HUVECs细胞中p-AMPK蛋白的表达显著性下调(均P<0.05)。AMPK抑制剂Compound C部分取消了Apelin-13的内皮细胞保护作用。结论 Apelin-13抑制了同型半胱氨酸诱导的内皮细胞损伤,其机制与可能与上调AMPK的磷酸化有关。

Apelin-13对高血压性肾纤维化的影响及机制研究

目的探讨血管紧张素受体AT1相关的受体蛋白(APJ)激动剂Apelin-13对高血压性肾纤维化的影响及其机制。方法 12周龄雄性自发性高血压大鼠随机分为对照组、1μg/(kg·d)Apelin-13组、10μg/(kg·d)Apelin-13组、100μg/(kg·d)Apelin-13组;Apelin-13通过尾静脉给药。测量大鼠24 h尿蛋白量、血清肌酐和尿素氮浓度。采用套尾法测量尾动脉收缩压,HE染色和Masson染色观察大鼠肾脏组织学改变,Western blot检测肾脏组织中自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1和p62的表达。结果与对照组比较,10μg/(kg·d)Apelin-13组、100μg/(kg·d)Apelin-13组以剂量依赖方式降低大鼠收缩压、24 h尿蛋白量、血清肌酐和尿素氮水平、肾脏损伤评分和胶原容积分数(均P<0.05),减轻肾小管上皮细胞水肿,减少间质胶原沉积,降低肾间质纤维化程度。10μg/(kg·d)Apelin-13组、100μg/(kg·d)Apelin-13组也以剂量依赖方式增加大鼠肾脏组织中LC3-Ⅱ表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及Beclin-1表达,降低p62表达(均P<0.05)。结论 Apelin-13抑制高血压性肾纤维化的进展,其机制可能与Apelin-13抑制细胞自噬有关。

重症急性胰腺炎大鼠血清Apelin、C-反应蛋白、TNF-α水平的变化

目的:探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠血清中Apelin、C反应蛋白(CRP)、TNF-α水平的变化及其关系。方法:采用胆胰管内注射5%牛磺胆酸钠的方法制备SAP大鼠模型。将30只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分成正常对照组(正常饲养)、假手术组(仅进行十二指肠穿刺,不注射药物)、SAP组(制备SAP模型)3组,每组10只。各组动物于术后12 h处死,处死前抽静脉血,双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清Apelin、CRP、TNF-α水平;取大鼠胰腺组织,测定胰腺/体重比值,组织切片行HE染色,观察大鼠胰腺组织病理学变化。结果:SAP组血清Apelin水平较正常对照组、假手术组均明显降低(P<0.01),血清淀粉酶、TNF-α、CRP水平及胰腺/体重比值较其余两组明显升高(P<0.01)。SAP组大鼠胰腺有大量炎性细胞浸润,腺泡大片坏死,小叶结构破坏严重;正常对照组和假手术组均没有明显病理学变化。血清Apelin水平与胰腺组织病理学评分、血清CRP水平及血清TNF-α水平均呈负相关(r值分别为-0.792、-0.746和-0.733,P<0.01)。结论:Apelin可能与SAP的发生、发展有关,可以作为早期预测SAP严重程度的有效指标之一。

Apelin-13对鼠脑缺血-再灌注后的作用及机制

目的探讨apelin对鼠脑缺血-再灌注后的保护作用及机制。方法改良线栓法制备CD-1小鼠脑缺血-再灌注模型。实验1:实验动物随机分为假手术(Sham)组、溶剂对照(Vehicle)组、缺血-再灌注(I/R)组、apelin-13小剂量(APLN-L)组、apelin-13中剂量(APLN-M)组及apelin-13大剂量(APLN-H)组;实验2:实验动物随机分为Sham组、Vehicle组、APLN-M组、APLN-M+PD98059(APLN+PD)组、PD98059+I/R(PD)组。再灌注后23h时,实验1检测各组神经功能评分、脑梗死体积、脑水肿、细胞凋亡及细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)的表达;实验2检测各组ERK1/2、Bax、Bcl-2、caspase-3的表达及cleaved caspase-3的活性。结果实验1:1APLN-H组神经功能评分明显低于Vehicle组(P<0.05);2梗死体积APLN-L、-M、-H组较Vehicle组减小;3脑组织含水量APLN-H、-M组明显低于Vehicle组(P<0.05);4TUNEL阳性细胞数APLN-H、-M组明显低于Vehicle组(P<0.05);5APLN-L、-M、-H组Bax、caspase-3、cleaved caspase-3表达明显低于Vehicle组(P<0.05);Bcl-2表达明显高于Vehicle组(P<0.05);6APLN-H、-M、-L组cleaved caspase-3活性明显低于Vehicle组(P<0.05);7 APLN-L、-M、-H组p-ERK1/2蛋白表达明显高于Vehicle组(P<0.05)。实验2:1APLN+PD组Bax、caspase-3、cleaved caspase-3表达明显高于APLN-M组,Bcl-2表达明显低于APLN-M组(P<0.05);2APLN+PD组cleaved caspase-3活性明显高于APLN-M组(P<0.05)。结论 Apelin-13对脑缺血-再灌注具有神经保护作用;ERK1/2信号通路参与了apelin-13的抗凋亡作用机制。

男性冠心病患者不同类型药物洗脱支架植入对血浆apelin-12及hs-CRP水平的影响

目的:探讨不同类型药物洗脱支架:普通药物洗脱支架(Firebird 2代,上海微创)、可降解药物涂层支架(Excel,山东吉威)及无载体药物涂层支架(Nano,北京乐普二代),介入治疗对血浆apelin-12及hs-CRP水平的影响。方法:收集不稳定型心绞痛(UAP)患者184例,根据植入支架不同分为Firebird 2代支架组(57例)、Excel支架组(58例)及Nano支架组(69例),另选取同期经冠脉造影证实为非冠心病患者60例为对照组;分别于术前、术后24h抽血测定血浆apelin-12及hs-CRP。结果:4组患者术前一般临床资料、3组支架组支架植入情况均无明显差异(P>0.05);术前3组支架组血浆apelin-12及hs-CRP水平组间比较均无明显差异;术后24h,4组血浆apelin-12及hs-CRP较术前均有所升高(P<0.05);术后较术前升高幅度比较,3组支架组血浆apelin-12及hs-CRP比较无明显差异(P>0.05),但明显高于对照组(P<0.01)。结论:上述不同类型药物洗脱支架植入均会导致短期血浆apelin-12及hs-CRP升高;但3组间炎症因子水平均无明显差异。

Apelin-13对高糖诱导肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化的影响

目的观察Apelin-13对高糖诱导肾小管上皮细胞-间充质细胞转分化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响并探讨其可能机制。方法用Apelin-13(10^(-8)、10^(-7)和10^(-6)mol/L)预处理HK-2细胞30 min后,用含D-葡萄糖(30 mmol/L)的培养基培养HK-2细胞48 h。免疫荧光检测HK-2细胞中间充质细胞的标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,透射电镜观察HK-2细胞的超微结构,Western-Blot检测上皮细胞的标志物E-钙粘蛋白(E-cadherin)、α-SMA及自噬相关蛋白表达。结果与对照组比较,高糖组的细胞呈现长梭形,细胞间隙明显增宽,E-cadherin蛋白表达显著性下调(t=4.751,P=0.011),而α-SMA蛋白表达显著上调(t=3.846,P=0.016),自噬体数量明显增多,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著增加(t_1=5.271,t_2=4.695,t_3=6.753,P_1=0.009,P_2=0.012,P3=0.002),p62表达显著降低(t=4.562,P=0.012)。与高糖组比较,Apelin-13(10^(-7)和10^(-6)mol/L)+高糖与高糖组比较,明显抑制了细胞形态的变化,细胞形态大多数呈椭圆型,E-cadherin蛋白表达显著上调(t_1=3.495,t_2=4.124,P_1=0.019,P_2=0.013),而α-SMA蛋白表达显著下调(t_1=4.014,t_2=4.283,P_1=0.014,P_2=0.012),自噬体数量明显增多,Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值均显著增加(t_1=3.487,t_2=4.059,t_3=5.342,t_4=4.271,t_5=5.360,t_6=5.851,P_1=0.018,P_2=0.014,P_3=0.009,P_4=0.011,P_5=0.005,P_6=0.004),p62表达显著降低(t_1=4.342,t_2=3.557,P_1=0.012,P_2=0.019)。结论 Apelin-13抑制了高糖诱导的肾小管EMT,其机制可能与Apelin-13诱导肾小管上皮细胞自噬有关。

心血管活性肽Apelin生物学功能研究进展

G蛋白偶联受体是指一大类与G蛋白偶联并参与和介导细胞外信号传递的跨膜蛋白,信号传导过程中与受体偶联的物质称为配体,对于不清楚内源性配体物质的G蛋白偶联受体称为孤儿G蛋白偶联受体。血管紧张素受体样受体是一种孤儿G蛋白偶联受体。其内源性配体Apelin新近从牛胃抽提液中被分离出来,现发现apelin的功能涉及心血管系统,中枢神经系统,免疫系统等。Apelin在血管紧张素Ⅰ转化酶的同源酶血管紧张素Ⅰ转化酶2的作用下有活性形式转变成无活性的形式。现对apelin在心血管系统以及以其它众多生物学功能研究进展作一综述。