组蛋白去乙酰化酶抑制剂Apicidine对宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及机制研究

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂Apicidine对宫颈癌细胞的杀伤作用和机制。方法:用不同浓度的Apicidine作用于体外培养的宫颈癌细胞株HeLa和正常呼吸道上皮细胞REC;用MTT法检测细胞生长存活率;用流式细胞术(FCM)定量检测细胞凋亡及细胞周期的变化;用RT-PCR法和Western blot法分析Apicidine作用后宫颈癌细胞中p21WAF1和p53表达的变化。结果:Apicidine纳摩尔级浓度即能有效地抑制宫颈癌细胞增殖,对正常细胞无明显抑制效应。FCM结果表明,Apicidine能显著诱导宫颈癌细胞发生凋亡,对正常细胞无明显促凋亡作用;加入2μmol/L Apicidine作用24h和48h后宫颈癌细胞HeLa凋亡率分别为(10.11±0.63)%和(23.28±0.34)%,差异有显著性(P<0.05),正常呼吸道上皮细胞REC凋亡率分别为(5.81±0.92)%和(6.8±0.55)%,差异无显著性(P>0.05);FCM结果亦表明,Apicidine主要引起G0/G1期细胞周期阻滞,1μmol/L Apicidine处理24h后HeLa细胞G0/G1期细胞显著增多,由(46.8±3.2)%增至(69.5±6.1)%,差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR和Western blot结果显示,Apici-dine能显著诱导p21WAF1RNA和蛋白水平表达,对p53表达无明显影响。上述结果都呈现明显的量-效与时-效关系。结论:Apicidine在体外能有效地抑制人宫颈癌细胞生长,对人正常细胞无明显影响,其抗肿瘤生长机制之一可能是通过上调p21WAF1蛋白水平和引起G0/G1期细胞周期阻滞实现的。

组蛋白脱乙酰酶抑制剂apicidin及其类似物的抗原虫与抗肿瘤作用研究进展

Apicidin是镰刀菌代谢产物,属环四肽类分子,能结合组蛋白脱乙酰酶(HDAC)使组蛋白过度乙酰化,具有广谱抗顶复亚门原虫和广谱抗肿瘤作用,可抑制肿瘤细胞转移、增殖和促使肿瘤细胞凋亡、分化。对apicidin类似物的生物学活性研究表明,apicidin的癸酸侧链、大环结构和色氨酸侧链是药效基团元件,使其能竞争性结合HDAC,发挥其生物学效应。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂Apicidin对口腔鳞癌细胞Tca-8113凋亡的研究

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂Apicidin对Tca-8113细胞增殖及细胞凋亡的影响。方法:倒置显微镜、荧光显微镜观察Apicidin对Tca-8113细胞的影响;CCK-8法观察24h、48h、72h不同浓度Apicidin对Tca-8113细胞增殖的影响;DNA ladder检测细胞凋亡;流式细胞术检测凋亡率。结果:不同浓度的Apicidin对Tca-8113细胞均有一定的增殖抑制作用,且呈量效和时效关系;Apicidin能诱导Tca-8113细胞的凋亡且随着时间和剂量的延长越明显。结论:组蛋白去乙酰化酶抑制剂Apicidin能抑制人口腔鳞癌Tca-8113细胞增殖,诱导细胞凋亡。

Apicidin选择性抑制ClassⅠ HDACs分子动力学研究

采用模拟方法研究组蛋白脱乙酰酶抑制剂(Apicidin)选择性抑制组蛋白去乙酰化酶(Histone deacety-lases,HDACs)中的HDAC1和HDAC8.通过HDAC8晶体结构同源模建HDAC1三维结构模型,将Apicidin分别与HDAC1和HDAC8对接并进行分子动力学模拟,结果表明,HDAC1活性口袋入口处的Arg270是Apici-din-HDAC1形成稳定结构的重要因素;HDAC1中Tyr303及His178与Apicidin形成2个持续存在的氢键,而在HDAC8中未发现,这是Apicidin选择性抑制HDAC1高于HDAC8的另一重要原因.

组蛋白去乙酰化酶抑制剂Apicidin/SAHA体外抑制人卵巢浆液性囊腺癌细胞的实验研究

目的:卵巢恶性肿瘤是妇科三大恶性肿瘤之一,其死亡率居妇科恶性肿瘤第一位。目前手术是治疗卵巢恶性肿瘤的主要方法,且术后常辅以紫杉醇和铂类为主的化疗,但化疗常常由于肿瘤细胞发生耐药而导致化疗失败。因此对于卵巢癌的治疗迫切需要寻找新的突破。方法:是对体外培养人卵巢浆液性囊腺癌上皮细胞,取对数生长期细胞接种于96孔细胞培养板上,每组设6个复孔。采用全定量PCR方法检测p21基因mRNA含量的表达。结果:体外实验证实组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)能够诱导肿瘤细胞周期阻滞于G0/G1期和/或G2/M期,从而抑制肿瘤细胞的增殖率,具有很强的临床应用价值。结论:本次实验探讨不同浓度下的组蛋白去乙酰化酶抑制剂Apicidin、SAHA在人卵巢浆液性囊腺癌细胞系的作用和机制,为巢浆液性癌的治疗提供新的思路。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂Apicidin对胶质瘤细胞的凋亡及Nanog和p53表达的影响

目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂Apicidin对胶质瘤细胞系U87Nanog和p53表达及细胞增殖、周期、凋亡的影响。方法体外常规培养U87细胞，MTT检测0．2、0．5、1．0、2．0ixmol／LApicidin处理24、48、72h后细胞抑制率的变化，同时设对照组，RT．PCR和Westernblotting法检测1．0μmol／LApicidin处理48h后细胞Nanog与p53mRNA和蛋白水平的改变。DAPI染色检测1．0μmol／LApicidin作用后细胞凋亡的改变；流式细胞仪检测0．2、0．5、1．0μmol／LApicidin作用48h后U87细胞凋亡率和细胞周期的变化。结果MTT显示不同浓度Apicidin处理后细胞生长出现抑制，并呈剂量、时间依赖性，48h细胞增殖的半数抑制浓度（IC茹为（1．74±0．13）μmol／L；RT．PCR检测发现1．0ixmoFLApicidin组细胞NanogmRNA表达较对照组降低，p53mRNA表达增高。Westernblotting检测显示与对照组比较，Nanog蛋白水平降低，而p53蛋白水平增高，差异有统计学意义（P〈0．05）。DAPI染色发现1．0μmol／LApicidin组细胞核出现凋亡表现；流式细胞仪检测发现，0．5、1．0μmol／LApicidin作用48h后U87细胞凋亡率为11．57％、19．67％，高于对照组（2．2％）。S期细胞比例分别为（42．92±0．56）％、（56．95±0．53）％，高于对照组的（32．68±0．49）％，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Apicidin可以显著抑制U87胶质瘤细胞系生长，诱导细胞周期阻滞和凋亡产生，其机制可能与抑制干细胞标志性基因Nanog的表达和抑癌基因p53的转录及蛋白表达增加有关。

组蛋白去乙酰化酶抑制剂apicidin对子宫内膜癌细胞凋亡及HDAC4和p21表达的影响

子宫内膜癌是女性生殖器官三大恶性肿瘤之一，占女性生殖道恶性肿瘤的20％-30％，近年来在世界范围内发病率呈上升趋势。表观遗传学改变是恶性肿瘤发生的主要机制之一，组蛋白去乙酰化是表观遗传学改变的一种。

Apicidin对人舌鳞癌CAL-27细胞作用的初步研究

目的探讨Apicidin对体外培养人舌鳞癌CAL-27细胞影响及作用机制。方法体外培养人舌鳞癌CAL-27细胞,采用不同浓度的Apicidin作为实验组,并设立对照组,倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞增殖、TUNEL、流式细胞仪检测Apicidin对CAL-27细胞凋亡作用。结果 Apicidin可显著抑制CAL-27细胞的生长(P<0.05),呈时间剂量依赖性。通过TUNEL法、流式细胞仪检测显示CAL-27细胞的凋亡,并且使CAL-27细胞停留在G2期。结论 Apicidin能显著抑制CAL-27的体外生长并能诱导细胞凋亡。

硼替佐米联用组蛋白去乙酰化酶抑制剂诱导血液肿瘤细胞凋亡的效率

目的探讨组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase，HDAC）抑制剂曲古菌素A（trichostatin A，TSA）、Apicidin与Bortezomib单药及联合应用对恶性血液病肿瘤细胞凋亡的影响。方法应用200～2000nmol／L TSA、Apicidin，5～80μmol／L Bortezomib分别处理恶性血液病肿瘤细胞株K562、SHI-1、Jurkat 24h，用流式细胞仪检测细胞凋亡。根据流式细胞术结果选取TSA 800nmol／L，Apicidin 400nmol／L分别与5～80μmol／L Bortezomib联合作用于K562细胞，TSA 1000nmol／L，Apicidin 400nmol／L分别与Bortezomib联合作用于SHI-1细胞，TSA 600nmol／L，Apicidin 600nmol／l，分别与Bortezomib联合作用于Jurkat细胞。以上药物作用24h后应用流式细胞仪检测细胞凋亡并绘制浓度-凋亡曲线。分别以Apicidin 200nmol／L，Bortezomib 20μmol／L及Apicidin 200nmol／L与Bortezomib 5μmol／L联用作用于K562细胞24h，用Western blot检测Bcl-XL蛋白的表达差异。结果TSA、Apicidin、Bortezomib均可促进K562、Jurkat、SHI-1细胞凋亡。TSA、Apicidin分别与Bortezomib联用，可导致K562、SHI-1细胞系凋亡率的明显提高，而对Jurkat细胞系没有明显影响。Bcl-XL蛋白在Apicidin与Bortezomib联用24h组较对照组及单一药物处理组表达水平明显下调。结论小剂量Bortezomib联合TSA或Apicidin应用于K562、SHI-1细胞系，可以明显提高细胞凋亡率，此时，TSA、Apicidin用量较用单药时显著减少。

取代乙酸己(庚)硫酯类化合物的合成与体外抗肿瘤活性

将天然产物apicidin分子中大环结构简化,并对锌离子结合区结构修饰,设计了两类取代乙酸己(庚)硫酯类化合物。所合成的26个化合物结构经1H NMR、IR、MS与HR-MS确证。采用MTT法与台盼蓝染色法对目标化合物进行了体外抗肿瘤活性筛选,药理结果显示,化合物II-1、II-3、II-6、II-13针对HL-60肿瘤细胞活性较好,IC50值达到微摩尔级,化合物II-7、II-8针对MCF-7肿瘤细胞的抑制作用优于阳性对照药伏立诺他,IC50值分别为3.19和6.29μmol·L-1。