载脂蛋白A-I基因启动子区域G→A置换对血浆HDL水平的影响

采用ＰＣＲ扩增法和限制性片段长度多态性分析法，对１１５例正常人和１１８例冠心病患者的载脂蛋白Ａ－Ｉ基因启动子区域－７８ｂｐ位点腺嘌呤与鸟嘌呤置换进行检测，并观察此位点基因变异对血浆ＨＤＬ－ｃｈ和ａｐｏＡ－Ｉ含量的影响。结果显示，血浆 ＨＤＬ－ｃｈ和 ａｐｏＡ－Ｉ含量在三种基因型中无显著性差异（Ｐ＞０．０５），基因型在正常 ＨＤＬ－ｃｈ和低ＨＤＬ－ｃｈ水平中的分布差异亦无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论：ａｐｏＡ－Ｉ基因启动子部位－７８ｂｐ位点基因变异不影响血浆ＨＤＬ含量，Ａ等位基因与升高的ＨＤＬ水平无相关性。

载脂蛋白B/载脂蛋白A-I比值及高敏C反应蛋白与糖尿病合并冠心病的相关性分析

目的探讨载脂蛋白B/载脂蛋白A-I比值(ApoB/ApoA-I)及高敏C反应蛋白(hs-CRP)与糖尿病合并冠心病的相关性。方法选取本院2015年6月至2019年5月经冠状动脉造影确诊为冠心病患者200例,其中非糖尿病组100例,糖尿病组100例。比较两组患者的临床资料及临床检验指标;采用双变量Pearson相关分析法分析血脂和hs-CRP水平与冠脉病变血管数。结果两组患者的年龄、性别、吸烟史、高血压史、体重指数(BMI)、服用他汀药物比较差异均无统计学意义;糖尿病组空腹血糖、hs-CRP、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、ApoB/ApoA-I均高于非糖尿病组(P<0.05),糖尿病组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于非糖尿病组(P<0.05);两组患者hs-CRP、TC、TG、LDL-C、ApoB/ApoA-I水平与冠脉病变血管数呈显著正相关(P<0.05),而HDL-C水平与冠脉病变血管数呈显著负相关(P<0.05),糖尿病组相关系数最高的是ApoB/ApoA-I。结论 ApoB/ApoA-I及hs-CRP与糖尿病患者发生冠心病具有一定的相关性,对于诊断糖尿病患者是否合并冠心病具有一定的指导意义。

人载脂蛋白A～Ⅰ的基因克隆﹑原核表达及多克隆抗体的制备

目的获取人载脂蛋白A～Ⅰ(ApoA～Ⅰ)的重组蛋白,并用于多克隆抗体的制备。方法从人肝细胞(LO2)中提取总RNA后,经RT～PCR法得到人ApoA～Ⅰ基因片段,用以构建融合表达载体pGEX～6P～1～ApoA～Ⅰ的重组质粒;将该重组质粒转化至大肠埃希菌BL21中,用异丙基硫代～β～D～半乳糖苷(IPTG)诱导表达GST～ApoA～Ⅰ包涵体蛋白,通过蛋白复性和纯化后免疫小鼠得到多克隆抗体,并用ELISA法检查其效价。结果经PCR扩增出的ApoA～Ⅰ基因片段(746bp)与理论值大小基本一致。SDS～PAGE(十二烷基磺酸钠～聚丙烯凝胶电泳)以及West-ern blotting(蛋白印迹分析)验证纯化后的蛋白质分子量与质谱分析数据相符。免疫小鼠所得的免疫血清通过ELISA显示其抗体效价也具有高度特异性。结论成功地在大肠埃希菌中诱导表达出了ApoA～Ⅰ,蛋白质通过纯化免疫小鼠,得到了特异性的多克隆抗体。

SR-BI Associates with ABCG1 and Inhibits ABCG1-mediated Cholesterol Efflux from Cells to HDL3

Reverse cholesterol transport(RCT)is assumed to play a critical role in the pathogenesis of atherosclerosis.Cellular cholesterol efflux,by which cholesterol is transported from peripheral cells to high-density lipoprotein(HDL)

脓毒症中高密度脂蛋白、载脂蛋白A-I和血清淀粉样蛋白A的作用研究进展

高密度脂蛋白(HDL)在脓毒症期间可通过载脂蛋白A-I(ApoA-I)结合和移动革兰氏阴性菌的内毒素和革兰氏阳性菌的脂磷壁酸。脓毒症时,血清淀粉样蛋白A(SAA)的表达显著增加,HDL中的ApoA-I被SAA替代,使血浆HDL水平显著降低,是脓毒症的独立危险因素。HDL在脓毒症期间出现功能失调,SAA在HDL结构及功能的变化中的具体作用机制尚未明确,本文就脓毒症期间HDL、ApoA-I和SAA的变化趋势,相互之间的作用,以及各指标在临床中的应用作一综述,为脓毒症中脂蛋白及相关载脂蛋白的进一步研究提供理论基础。

载脂蛋白A—I半胱氨酸突变体重组高密度脂蛋白对内毒素血症小鼠的作用

目的探讨载脂蛋白A．I及其半胱氨酸突变体重组高密度脂蛋白（rHDL）的抗炎作用。方法选择了前期构建的4种载脂蛋白A—I半胱氨酸突变体[A—I（N74C）、A—I（G129C）、A—I（K195C）、A．I（S228C）]及野生型A—I结合二棕榈酰磷脂酰胆碱（DPPC）构建rHDL（rHDL74、rHDI．129、rHDLl95、rHDL228、rHDLwt）干预组，用酶联免疫吸附实验（ELISA）方法验证5种rHDL干预后对肿瘤坏死因子（TNF）-α，自细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）的影响。并分别设脂多糖（LPS）组，生理盐水组对照。结果LPS注射24h后，rHDL74组比rHDLwt组血清中TNF—α和IL-1β水平更低[TNF—α：（24±3）pg／ml比（135±12）pg／ml、IL-1[3（45±5）pg／ml比（82±8）pg／ml，P〈0．05]的水平，与LPS组比较只有rHDL74组能降低IL-6水平[（1936±58）pg／ml比（2022±73）pg／ml，P〈0．05]。同时组织切片HE染色显示，rHDL74组能明显抑制炎症细胞的浸润，肺泡壁的增厚。结论rHDL74拥有更强的抗炎能力，它可能会成为临床上极具潜力的抗炎药物之一。