低密度脂蛋白(LDL)所含的色氨酸(Trp)、赖氨酸(Lys)发生氧化修饰是导致动脉粥样硬化(AS)形成的重要因素。为反映丁香乙酸乙酯相(EAFC)对LDL氧化过程中Trp、Lys修饰的抑制作用,本文首先对LDL氧化评价孵育体系中氧化剂Cu SO4及底物LDL浓...低密度脂蛋白(LDL)所含的色氨酸(Trp)、赖氨酸(Lys)发生氧化修饰是导致动脉粥样硬化(AS)形成的重要因素。为反映丁香乙酸乙酯相(EAFC)对LDL氧化过程中Trp、Lys修饰的抑制作用,本文首先对LDL氧化评价孵育体系中氧化剂Cu SO4及底物LDL浓度进行优化;进而以荧光为主要指标对这种抑制效果进行了评价。结果表明,选定CuSO_4浓度1.25、25μmol/L与LDL浓度500μg/m L为配比做后续实验。20μg/m L EAFC能抑制Trp降解导致的荧光淬灭,抑制作用显著高于1μg/m L阳性对照(2,6-二叔丁基对甲基苯酚,BHT)(p<0.01)。3μg/m L EAFC能抑制高反应活性醛修饰Lys,10μg/m L EAFC能显著抑制Lys与4-HNE共价结合(p<0.01)。15μg/m L EAFC能有效抑制Lys与MDA交联,抑制效果强于1μg/m L BHT。15μg/m L EAFC能显著抑制脂褐素形成(p<0.01)。本文为后期解析EAFC抑制LDL氧化修饰作用方式、抑制氧化LDL与清道夫受体之间识别等作用机理提供参考。展开更多
文摘低密度脂蛋白(LDL)所含的色氨酸(Trp)、赖氨酸(Lys)发生氧化修饰是导致动脉粥样硬化(AS)形成的重要因素。为反映丁香乙酸乙酯相(EAFC)对LDL氧化过程中Trp、Lys修饰的抑制作用,本文首先对LDL氧化评价孵育体系中氧化剂Cu SO4及底物LDL浓度进行优化;进而以荧光为主要指标对这种抑制效果进行了评价。结果表明,选定CuSO_4浓度1.25、25μmol/L与LDL浓度500μg/m L为配比做后续实验。20μg/m L EAFC能抑制Trp降解导致的荧光淬灭,抑制作用显著高于1μg/m L阳性对照(2,6-二叔丁基对甲基苯酚,BHT)(p<0.01)。3μg/m L EAFC能抑制高反应活性醛修饰Lys,10μg/m L EAFC能显著抑制Lys与4-HNE共价结合(p<0.01)。15μg/m L EAFC能有效抑制Lys与MDA交联,抑制效果强于1μg/m L BHT。15μg/m L EAFC能显著抑制脂褐素形成(p<0.01)。本文为后期解析EAFC抑制LDL氧化修饰作用方式、抑制氧化LDL与清道夫受体之间识别等作用机理提供参考。