内毒素性急性肝损伤实验动物模型的建立

目的:探讨脂多糖(LPS)对D-半乳糖胺(D-GalN)致敏大鼠在亚致死剂量下的肝损伤作用.方法:48只大鼠随机分为三大组,即6h、24h和48h取材组,每组各16只动物;每个大组再分为两个小组,即处理组和对照组,各8只大鼠.所有处理组大鼠均以LPS(50μg/kg)+D-GalN(300mg/kg),用1mL无菌生理盐水溶解后腹腔内注射,对照组大鼠仅腹腔内注射1mL生理盐水.在相应时间点,采血查谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和胆红素(BIL);肝组织常规固定,HE染色后光镜检查;肝组织细胞凋亡的TUNEL分析采用多聚甲醛固定;肝组织炎性细胞因子TNF-α、IL-1b和细胞凋亡诱导基因bax的表达通过RT-PCR的方法检测.结果:所有处理组大鼠ALT、AST和TBIL在6h内即显著升高,24h达到峰值,48h仍维持于高水平;肝脏大体形态显示:肝脏明显肿胀、失去正常红润光泽而略显苍白、表面见散在的点状及片状出血点、质地偏韧;HE染色可见药物处理6h,肝组织即呈现充血,碎片状坏死和大量炎性细胞浸润.24h肝细胞开始空泡变性、肿胀,并见大片坏死及中性粒细胞浸润.48h则多数肝细胞空泡状变性,肝组织小叶结构紊乱,点状坏死,炎症细胞浸润较前减少.TUNEL分析显示,对照组未见凋亡的肝细胞,6h处理组仅见少量凋亡细胞,凋亡指数(AI)为4.3±1.2%,24h和48h处理组肝组织内则见较多的凋亡细胞,AI分别为20.6±3.3%、21.2±5.7%,但两者P>0.05;24h处理组凋亡细胞百分数为15.83%,对照组凋亡细胞占0.39%,两组间存在显著差异(P<0.001);处理组各时间点TNF-α、IL-1b的表达均较对照组显著升高,其高峰值出现于6h.对照组未见bax的表达,而LPS的应用后6,24,48h的相对表达率为0.193±0.062、0.191±0.043、0.209±0.031.结论:亚致死剂量LPS可造成D-GalN致敏大鼠的急性肝损伤;细胞凋亡是该急性损伤的重要病理形态学改变,而凋亡的发生可能与LPS诱导bax的表达有关;本模型是较理想的内毒素性急性肝损伤的实验动物模型.

自噬与肿瘤

自噬作为一种细胞防御和应激调控的机制,目前成为癌症研究领域的又一热点。在不同种类的肿瘤以及肿瘤发生发展的不同阶段,自噬有抑制和促进两种对立的影响。自噬异常与恶性肿瘤的能量代谢、细胞死亡、炎症反应以及对肿瘤治疗的耐药性等方面都有密切的联系。全面正确地了解自噬可为肿瘤治疗提供一个崭新的思路。