北京黑猪AQP9和RPS10基因多态性及其与背膘厚的关联分析

旨在研究水通道蛋白9(aquaporins9,AQP9)及核糖体蛋白10(ribosomal protein S10,RPS10)基因多态性及其与北京黑猪背膘厚的相关性,以期能够获得北京黑猪背膘厚的有效标记。本研究以413头北京黑猪为研究对象,测定不同部位(肩部、6-7肋间、胸腰结合、腰荐结合)的背膘厚度。PCR扩增AQP9和RPS10基因的启动子区和外显子区序列筛选SNP位点,并将SNPs与各部位背膘厚进行关联分析。运用荧光定量PCR检测基因的差异表达。结果发现,AQP9基因启动子区有4个突变位点,其中1个SNP:rs332699245 A>C与胸腰结合处背膘厚关联显著(P<0.05),且该位点突变预测到了结合转录因子的改变;RPS10基因在3′UTR、CDS区共有8个突变位点,其中5个与背膘厚显著关联:rs80795904 C>G、rs80932213 T>C与6~7肋间背膘厚关联显著(P<0.05),rs3469834461 C>T与肩部背膘厚、四点平均背膘厚关联显著(P<0.05),rs80862457 C>T与胸腰结合处背膘厚、腰荐结合处背膘厚关联显著(P<0.05),rs336938272 A>C与6~7肋间背膘厚、腰荐结合处背膘厚、四点平均背膘厚均关联显著(P<0.05);且在3′UTR区检测到1个SNP(rs80862457 C>T),位于小RNA(microRNA,miRNA)结合靶点。基因表达差异分析表明,rs332699245 A>C中AA型个体的AQP9基因mRNA水平显著高于AC型个体(P<0.05),rs80862457 C>T中TT型个体的RPS10基因mRNA水平显著高于CC型个体(P<0.05)。综上所述,AQP9和RPS10基因与北京黑猪背膘厚显著关联,rs332699245 A>C和rs80862457 C>T位点可作为北京黑猪背膘厚选育的潜在分子标记,为北京黑猪的选育提供理论支撑。

缺氧缺血性脑损伤对新生小鼠脑组织AQP-9表达和空间学习记忆能力的影响

目的 探究缺氧缺血性脑损伤对新生小鼠脑组织水通道蛋白(AQP)-9表达和空间学习记忆能力的影响。方法 阻断子宫动脉怀孕雌鼠所产小鼠为缺氧缺血性脑病(HIE)新生小鼠,纳入HIE组;不阻断子宫动脉怀孕雌鼠所产小鼠纳入对照组。比较两组小鼠神经元分布情况。采用免疫组化法检测小鼠海马CA1区、CA3区和DG区小清蛋白的表达。采用Western blotting检测小鼠海马神经传递相关蛋白NR2B、EAAT1、AQP-9及谷氨酸脱羧酶(GAD)的表达。采用新事物识别实验检测小鼠空间学习记忆能力。结果 与对照组比较,HIE组CA1区、CA3区神经元密度减少(P<0.05),但与DG区神经元密度差异无显著性(P>0.05)。HIE组3个区域小清蛋白表达均高于对照组(P<0.05)。HIE组AQP-9、GAD表达水平高于对照组(P<0.05)。HIE组小鼠存在空间学习记忆缺陷。结论 HIE新生小鼠脑组织AQP-9表达水平升高,空间学习记忆能力降低。

水通道蛋白9商品化抗体和自制抗体识别位点的分析和应用

目的分析水通道蛋白9(AQP9)商品化抗体和自制抗体的抗原识别位点,并鉴别其应用效果。方法利用Western blotting对比3种商品化抗体与自制AQP9抗体鉴定基因型的效果。分析4种抗体的抗原识别位点,及其在实际应用中的特异性。结果Western blotting结果显示,3种商品化抗体在野生型(WT)和Aqp9^(-/-)小鼠中均可见蛋白条带。3种商品化抗体对应的血蓝蛋白(KLH)共轭合成肽依次为大鼠、人源和人源,与小鼠AQP9氨基酸序列存在一定差异。AQP3/7与AQP9分子量相近,且在肝中均有表达,同源性较高。自制抗体在WT鼠的27 kD位置可见一明显条带,但是Aqp9^(-/-)鼠的相应位置未见条带。结论1号和3号商品化抗体可用于辅助鉴别Aqp9^(-/-)鼠的基因型,自制抗体在蛋白水平上可以准确鉴定基因型。

AQP4、MMP-9及HMGB1预测癫痫患儿认知功能损害的价值分析

目的探讨血清水通道蛋白4(AQP4)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)与癫痫患儿认知功能损害的关系及其预测价值。方法选取2018年1月至2021年10月河北省邯郸市中心医院收治的150例癫痫患儿为研究对象。根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分将150例癫痫患儿分为认知障碍组(n=69)和认知正常组(n=81),并选取同期80例体检正常儿童纳入健康对照组,观察各组血清AQP4、MMP-9及HMGB1水平;进行Pearson相关分析各指标与认知功能损害的关系,并采用Logistic回归分析癫痫患儿认知功能损害危险因素;通过绘制受试者工作特征曲线(ROC)、计算曲线下面积(AUC)分析AQP4、MMP-9及HMGB1单独或联合对癫痫患儿认知功能损害的预测价值。结果三组癫痫患儿血清AQP4、MMP-9、HMGB1水平及MoCA评分差异均有统计学意义,进一步两两比较发现,认知损害组、认知正常组、健康对照组的AQP4水平依次升高,MMP-9及HMGB1水平依次降低(F值分别为1384.902、43.666、63.059,P<0.05);认知损害组MoCA评分低于认知正常组和健康对照组(F=1365.424,P<0.05),但认知正常组和健康对照组MoCA评分无显著差异;Pearson相关性分析显示,血清AQP4水平与癫痫患儿MoCA评分呈正相关(r=0.824,P<0.05),血清MMP-9及HMGB1水平与MoCA评分呈负相关(r值分别为-0.426、-0.463,P<0.05);Logistic回归分析结果显示,血清AQP4水平增加是癫痫患儿认知功能损害的保护因素(OR=0.557,P<0.05),MMP-9、HMGB1水平较高及病程较长是癫痫患儿认知功能损害的危险因素(OR值分别为1.658、2.124、1.215,P<0.05);ROC曲线分析显示三指标单独及联合应用时AUC(95%CI)分别为0.797(0.652~0.941)、0.720(0.519~0.920)、0.722(0.477~0.966)、0.862(0.742~0.972),其中联合应用诊断效能最高。结论AQP4、MMP-9及HMGB1在伴有认知功能损害的癫痫患儿血清中存在异常表达,是癫痫患儿认知功能损害的独立影响因素,三者联合检测对癫痫患儿继发认知功能损害的预测具有一定的临床意义。

枳术丸对脾虚证慢传输型便秘小鼠结肠黏膜AQP3、AQP9的影响

目的观察枳术丸对脾虚证慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)小鼠结肠AQP3、AQP9表达的影响,探讨枳术丸改善STC症状的可能作用机制。方法将50只SPF级昆明小鼠随机分成正常组(15只)和造模组(35只),造模组采用复合因素法(番泻叶+限水+控制饮食)建立脾虚证STC小鼠模型,造模成功后造模组小鼠按体质量随机分为模型组(10只)、枳术丸组(10只)、莫沙必利组(10只)。连续给药7 d后,检测各组小鼠的粪便含水量、肠道推进率、血清木糖含量及结肠黏膜组织病理学特征;免疫组化及Western blot法检测AQP3、AQP9蛋白表达。结果与正常组相比,模型组小鼠粪便含水量显著减少,肠道推进率显著降低,血清木糖含量显著降低,小鼠结肠黏膜AQP3表达显著增多,AQP9表达显著减少(P<0.01);与模型组相比,枳术丸组小鼠粪便含水量显著增加(P<0.05),肠道推进率显著升高(P<0.01),血清木糖含量显著升高(P<0.01),小鼠结肠黏膜AQP3表达显著减少,AQP9表达显著增加(P<0.01);与莫沙必利组相比,枳术丸组小鼠肠道推进率升高(P<0.05),血清木糖含量显著升高(P<0.01),结肠黏膜AQP3表达显著减少(P<0.01),AQP9表达显著增加(P<0.01),粪便含水量差异无统计学意义(P>0.05)。结论STC的发病与结肠黏膜AQP3上调、AQP9下调有关,枳术丸可以通过下调AQP3的表达、上调AQP9的表达,增加粪便的含水量而改善STC。

康益胶囊对缺血再灌注脑水肿大鼠脑组织AQP4、MMP-9蛋白的影响

目的研究康益胶囊对缺血再灌注脑水肿大鼠脑组织水通道蛋白(AQP)4、基质金属蛋白酶(MMP)-9的影响。方法选用清洁级健康雄性SD大鼠72只,采用数字表法随机分为假手术组、模型组、康益胶囊低剂量组(270 mg/kg)、中剂量组(540 mg/kg)、高剂量组(1080 mg/kg)、银杏叶片组(680 mg/kg),每组12只,模型组和用药组采用线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠模型,缺血1 h行再灌注,假手术组行假手术。术后连续灌胃给药14 d,给药期间定期观察各组脑损伤后神经功能症状,14 d后断头取脑,检测脑组织含水量、观察2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色后脑梗死面积、苏木素-伊红(HE)染色观察损伤脑区的病理损伤,Western印迹法检测AQP4、MMP-9蛋白表达水平。结果与假手术组相比,模型组神经功能缺损症状明显、脑组织含水量显著增加(均P<0.01);与模型组相比,康益胶囊低、中、高及银杏叶片组均能显著改善脑缺血再灌注大鼠神经功能缺损症状、显著降低脑组织含水量(均P<0.01);TTC染色结果表明,与假手术组相比,模型组脑梗死面积显著(P<0.01);与模型组相比,康益胶囊低、中、高及银杏叶片组脑梗死面积明显减小(均P<0.01);与银杏叶片组相比,康益胶囊高剂量组减少脑梗死面积明显(P<0.05);Western印迹法结果显示,与模型组相比,康益胶囊可显著降低脑缺血再灌注大鼠缺血侧脑组织中AOP-4及MMP-9蛋白表达水平(均P<0.01)。结论康益胶囊可降低缺血再灌注脑水肿大鼠脑组织中AQP4、MMP-9蛋白表达而发挥脑保护作用。

AQP4、AQP9在便秘小鼠结肠黏膜中的表达

目的检测便秘模型小鼠升、降结肠黏膜水通道蛋白4、9(AQP4、AQP9)mRNA表达情况,探讨AQP4、AQP9与便秘之间的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测便秘组及对照组小鼠升、降结肠黏膜细胞AQP4 mRNA、AQP9 mRNA表达。结果对照组及便秘组小鼠升、降结肠均有AQP4 mRNA、AQP9 mRNA表达;便秘组升结肠中AQP4 mRNA表达量高于对照组,两组升结肠中AQP9 mRNA表达差异不显著;便秘组降结肠中AQP9 mRNA表达低于对照组,AQP4 mRNA表达高于对照组。结论便秘患者结肠AQP4 mRNA表达上调,AQP9 mRNA表达下调,AQP4、AQP9含量的增减会影响肠道水分的吸收与分泌,可能与便秘的发生、发展有一定的关系。

脑缺血后AQP9表达与血脑屏障通透性的关系

目的研究脑缺血后水通道蛋白-9(AQP9)的表达变化与血脑屏障通透性之间的关系。方法采用阻断大鼠大脑中动脉制作脑缺血的动物模型,通过免疫组化方法检测AQP9的表达,并通过检测缺血脑组织中伊文思蓝(EvansBlue,EB)外渗的量,以反应血脑屏障通透性的变化。结果对照组AQP9表达和EB含量无明显改变。与对照组相比,缺血组AQP9的表达随缺血时间的延长而表达增加;且AQP9的表达在脑缺血后2d^3d表达最强;EB含量与AQP9的表达变化相似,EB含量分别在缺血后2d和3d增加更明显。AQP9的表达与EB含量的变化呈正相关(r>0.672,P<0.05)。结论脑缺血后AQP9表达增强,血脑屏障通透性增加,提示AQP9表达上调与血脑屏障通透性的改变有关,两者可能共同参与缺血性脑水肿的形成。

补肾养经汤对多囊卵巢模型大鼠子宫AQP9表达的影响

目的观察补肾养经汤对多囊卵巢(PCO)模型大鼠子宫水通道蛋白9(AQP9)表达的影响,探讨补肾养经汤治疗PCOS的机制。方法筛选未成年23日龄SD雌性大鼠64只,随机抽取16只作为对照组,其余48只用硫酸普拉睾酮钠建立PCO动物模型,造模成功后将模型动物随机分为模型对照组、克罗米芬组、补肾养经汤高剂量组、补肾养经汤中剂量组、补肾养经汤低剂量组。给药后处死动物,采用免疫组化SP法检测各组大鼠子宫中AQP9表达水平的变化。结果模型组与正常对照组比较,AQP9的表达明显降低(P<0.01);补肾养经汤高、中、低剂量组及克罗米芬组与模型组比较,AQP9的表达明显增高(P<0.05);与补肾养经汤低剂量组比较,补肾养经汤高剂量组AQP9的表达明显增加(P<0.01),补肾养经汤中剂量组AQP9的表达虽有增加,但两者之间差异无统计学意义(P>0.05);与补肾养经汤中剂量组比较,补肾养经汤高剂量组AQP9的表达明显增加(P<0.01);与克罗米芬组比较,补肾养经汤高剂量组AQP9的表达明显增加(P<0.01),而补肾养经汤中、低剂量组AQP9的表达虽有增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾养经汤可明显上调模型大鼠子宫内膜腔上皮及腺上皮细胞中AQP9的表达,可能通过调节子宫内膜容受性来治疗PCOS。

大鼠脑出血后AQP-4、IL-6及MMP-9的表达与脑水肿的相关性研究

目的探讨大鼠脑出血后不同时间AQP-4、IL-6及MMP-9的表达及其与脑水肿的相关性。方法将96只Wistar鼠分为对照组48只及实验组48只,对照组建立假出血模型,实验组建立大鼠脑出血模型。在脑出血后不同时点观察大鼠神经功能变化。分别断头取脑,采用ELISA法检测血清IL-6水平,免疫组化方法检测脑组织AQP-4及MMP-9水平。结果实验组Longa评分6h及14d高于对照组(P<0.05),24h、48h、3d及7d评分明显高于对照组(P<0.01)。AQP-4、IL-6及MMP-9表达在6h即升高,24h、48h、3d、7d明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。Longa评分与AQP-4、IL-6及MMP-9含量进行相关性检验,发病48h、3d显著相关(P<0.01),6h、24h、7d及14d具有相关性(P<0.05)。结论脑出血后AQP-4、IL-6及MMP-9呈现过度表达,其动态变化与大鼠脑出血后神经功能反应、脑细胞水肿具有正相关性。推测三者参与了脑出血脑水肿的形成与消退。

湿阻中焦证模型胃肠水通道蛋白9(AQP9)的病理特征性表达分布谱以及平胃散干预的研究

目的以前期较成熟湿阻中焦证动物模型为研究平台,研究湿阻中焦证动物模型胃肠组织AQP9的分布和含量以及平胃散的干预,揭示湿阻中焦证动物模型水通道蛋白病理特征性表达分布谱。从蛋白水平揭示湿阻中焦证在水液代谢失调病机方面以及平胃散治疗湿阻中焦证的科学内涵;搭建中药复方水通道调节剂的研究平台。方法模拟外湿过盛、困阻脾胃,饮食不节、湿从内生,情志不遂、气机受阻、水湿不运三大致湿病因,建立湿阻中焦证模型。用免疫组化技术测定胃肠组织AQP9的分布,用酶联免疫法(ELISA)测定胃肠组织AQP9的含量。结果湿阻中焦证AQP9在胃贲门粘膜、胃体中间组织、小肠中段粘膜下组织表达减少,AQP9在胃贲门粘膜下组织表达增加。平胃散增强湿阻中焦证胃体中间组织AQP9的表达。结论 AQP9在湿阻中焦证胃肠特征性表达分布谱可能是湿阻中焦证湿邪困阻脾胃,阻遏气机,散输水津失调所表现证候的分子基础之一。平胃散对湿阻中焦证胃肠AQP9表达的增强可能是平胃散燥湿运脾、行气导滞、散中焦之湿阻治疗湿阻中焦证湿邪困阻脾胃,阻遏气机,散输水津失调所表现证候的分子机理之一。平胃散增强正常大鼠胃肠AQP9的表达,可能是平胃散苦燥虽可祛湿但也可伤津液的分子机理之一。平胃散治疗湿阻中焦证的疾病临床疗效确切,但也不能乱服多服。

牦牛AQP9基因CDS全长序列克隆及其生物信息学特征分析

为了研究高原动物对青藏高原极端生境的适应机理,并为探讨高原动物适应机制提供基本数据。本研究运用基因克隆技术对牦牛脑AQP9基因CDS全长序列进行克隆,采用生物信息学方法进行分析,AQP9基因和编码序列特征进行了以下几方面的预测和分析:其物化性质、疏水性、跨膜结构和蛋白二级结构。结果表明,牦牛AQP9的CDS含有一个885bp的开放阅读框,编码295个氨基酸;牦牛AQP9基因编码蛋白分子量和理论等电点分别为31.89ku和6.21,其编码蛋白含有6次跨膜结构,属于疏水性蛋白;二级结构由α-螺旋、延伸链、β-折叠及无规则卷曲构成;牦牛AQP9基因编码氨基酸序列与黄牛、藏羚羊、绵羊等物种间同源性较高,系统进化情况与其亲缘关系远近一致。本研究将为牦牛低氧适应性研究提供一定的基础资料。

银杏叶提取物对高血压脑出血术后患者神经功能、血清炎症因子、MMP-9和AQP-4水平的影响

目的探究银杏叶提取物对高血压脑出血术后患者神经功能、血清炎症因子、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和水通道蛋白4(AQP-4)水平的影响。方法选择于2015年12月至2017年12月间于我院就诊的98例高血压性脑出血患者,采用随机数表法分为治疗组(49例)和对照组(49例),对照组给予微创颅内血肿清除术和对症支持治疗,治疗组在对照组的基础上先后应用银杏叶提取物注射液(10 d)和银杏叶提取物滴剂(30 d)。比较两组患者治疗前后的神经功能、生活能力、生活质量和预后,以及血清炎症因子、MMP-9和AQP-4水平。结果治疗5、10、15 d后,两组患者的美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分均出现明显降低(P <0. 05),治疗组的NIHSS评分均显著低于对照组(t=2. 560、2. 849、3. 400,P <0. 05);治疗10 d后,两组患者的IL-6、TNF-α、hs-CRP、MMP-9和AQP-4水平均较治疗前降低(P <0. 05),治疗组的上述指标水平均显著低于对照组(t=2. 731、4. 110、3. 043、7. 497、4. 774,P <0. 05);治疗30 d后,治疗组的改良Rankin量表(mRS)评级≤2的比例明显高于对照组(χ~2=4. 460,P <0. 05),改良Barthel指数(MBI)评分和脑卒中专门生活质量量表(SS-QOL)评分均显著高于对照组(t=4. 061,6. 197,P <0. 05)。结论银杏叶提取物能够改善高血压脑出血术后患者神经功能、生活能力和生活质量,调节血清炎症因子和MMP-9、AQP-4水平。

不同发育阶段大鼠睾丸水通道蛋白AQP9的表达研究

目的研究不同发育阶段大鼠睾丸水通道蛋白AQP9的表达情况.方法半定量RT-PCR.结果 4,8,12周大鼠睾丸AQP9mRNA表达逐渐增强.结论大鼠睾丸AQP9 mRNA表达与大鼠的不同发育阶段有关.

AQP9在脑出血大鼠脑组织中的表达变化

目的研究大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后水通道蛋白9(aquaporin 9,AQP9)在脑组织中的表达变化,初步探讨AQP9在脑出血脑组织病理变化中的作用。方法采用定量胶原酶注入大鼠尾状核建立脑出血模型,运用HE染色、免疫组化、免疫荧光双标、RT-PCR等方法检测脑出血大鼠脑组织AQP9表达的变化。结果HE染色显示,脑出血面积随着时间的延长而逐渐增大,24 h达到峰值,24 h后无明显变化。RT-PCR结果显示,除ICH1 h外,ICH早期,AQP9 mRNA含量较假手术组降低,于6 h降至最低;24 h及以后各时段明显增高,于48 h达到峰值,7 d仍明显高于对照。免疫组化和免疫荧光双标显示,AQP9在脑内表达部位随时段变化而变化,其中,ICH后48 h,AQP9强表达于脑室周围器官和渗透压感受器。结论ICH早期AQP9表达降低可延迟细胞内水肿的形成,而ICH后期AQP9表达上调,可能与水电解质平衡调节和能量代谢调节有关。

脑缺血后尼膜同对AQP9 mRNA表达和血脑屏障通透性的影响

目的研究脑缺血后尼膜同对AQP9 mRNA表达和血脑屏障通透性的影响以及脑缺血后尼膜同对脑的保护作用。方法采用阻断大鼠大脑中动脉制作脑缺血大鼠模型,通过原位杂交和图像分析方法测定梗死区AQP9mRNA的表达水平,同时电镜进行对应部位的病理观察,并检测缺血脑组织中伊文思蓝外渗的量。结果脑缺血后,在尼膜同组和对照组缺血组织均出现缺血性病理变化、AQP9 mRNA表达上调、血脑屏障通透性增加,其变化趋势一致,随着脑缺血时间延长其改变加重。尼膜同组AQP9 mRNA的表达变化与生理盐水对照组,虽有差别,但差异无显著性意义(P>0.05);尼膜同组血脑屏障通透性及病理变化明显低于生理盐水对照组,其差异有显著性意义(P<0.05)。结论脑缺血后,尼膜同可能阻滞血脑屏障通透性的增加,起到脑保护作用,但不影响AQP9mR-NA的表达。

灯盏花素注射液对卒中相关性肺炎大鼠肺损伤及AQP1、AQP4、MMP-9表达的影响

目的探究灯盏花素注射液对卒中相关性肺炎大鼠肺损伤及水通道蛋白-1(AQP1)、水通道蛋白-4(AQP4)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法将雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组(仅暴露颈总动脉,不阻断血管),模型组(脑缺血再灌注-肺损伤模型),灯盏花素注射液低、中、高剂量组(造模后尾静脉注射25mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg灯盏花素注射液)组,阳性组(造模后尾静脉注射1 mg/kg尼莫地平),每组15只。12周末,苏木精-伊红染色法(HE)观察大鼠肺部组织病理学变化,对各组肺组织大体以及病理形态进行评定,对大鼠肺组织湿干重(W/D)、氧合指数(OI)、动脉血氧分压(Pa O2)进行测定;酶联免疫法测定肺组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)与免疫印迹(WB)检测AQP1、AQP4、MMP-9表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠肺组织大体分级、病理评分升高(P <0. 05);与模型组相比,阳性组、灯盏花素治疗组大鼠肺组织大体分级、病理评分均降低,具有剂量依赖性(P <0. 05)。与假手术组相比,模型组W/D、MDA升高,PaO2、OI、SOD降低(P <0. 05);与模型组相比,阳性组、灯盏花素治疗组W/D、MDA降低,Pa O2、OI、SOD升高,具有剂量依赖性(P <0. 05)。与假手术组相比,模型组AQP1、AQP4 mRNA及蛋白表达降低,MMP-9 mRNA及蛋白表达升高(P <0. 05);与模型组相比,阳性组、灯盏花素治疗组AQP1、AQP4 mRNA及蛋白表达升高,MMP-9 mRNA及蛋白表达降低,具有剂量依赖性(P <0. 05)。结论灯盏花素注射液对卒中相关性肺炎大鼠肺损伤具有一定的保护作用,其机制可能与上调AQP1、AQP4表达,下调MMP-9表达有关。

AQP9在APP/PS1双转基因小鼠海马中的表达变化

目的:研究水通道蛋白9(aquaporin-9,AQP9)在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠海马中的表达变化。方法:9月龄APPswe/PS1d E9双转基因雄性小鼠和C57野生型雄性小鼠各12只,分别为AD模型组和对照组,采用水迷宫实验检测2组小鼠学习记忆能力,采用免疫组化、免疫印迹和q RT-PCR方法检测AQP9蛋白及其m RNA在以上2种小鼠海马中的表达。结果:水迷宫实验显示,与对照组比较,模型组小鼠找到平台的潜伏期显著加长,穿越平台次数明显减少(t=7.064,P=0.000)。免疫组化、免疫印迹和q RT-PCR结果分别显示:与对照组比较,AQP9的吸光度(absorbance,A)值在海马不同区域均增加(CA1:t=7.373,P=0.000;CA2:t=3.1,P=0.011;CA3:t=4.428,P=0.001;齿状回:t=5.285,P=0.000);AQP9蛋白表达增高(t=5.305,P=0.003);AQP9 m RNA表达水平增高(t=3.646,P=0.045)。结论:在APPswe/PS1d E9双转基因AD模型小鼠海马中,AQP9表达上调。

安脑平冲片对大鼠脑出血后血肿周围组织AQP-9表达的影响

目的通过观察大鼠脑出血后血肿周围组织内水通道-9(aquaporin-9,AQP-9)的表达变化的影响来探讨安脑平冲片对脑出血的保护机制。方法采用自体动脉血注入法制作大鼠脑出血模型。大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、安脑平冲片组、甘露醇组、联合用药组,各组分别给药,于脑出血后24、48、72 h处死开颅取脑,采用干湿称质量法测定脑组织含水量、免疫组化法测定AQP-9的表达。结果 (1)大鼠脑出血后血肿周围脑组织含水量逐渐增加(P<0.05)。安脑平冲片组、甘露醇组、联合用药组各时间点与模型组比较脑组织含水量均相应降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。其中给药后联合用药组72 h效果最佳。(2)大鼠脑出血后模型组各时间点AQP-9表达均显著增加(P<0.01)。与模型组比较,安脑平冲片组、联合用药组各时间点AQP-9表达均降低(P<0.01);与甘露醇组比较无统计学意义。联合用药组与安脑平冲片组比较于48、72 h时AQP-9表达降低更显著(P<0.05)。结论安脑平冲片可能通过减少脑组织内AQP-9的表达水平,以减轻脑水肿保护脑组织。

AQP9在大鼠消化道不同部位的分布及差异

目的研究水通道蛋白9(AQP9)在大鼠消化道不同部位的表达规律及差异性,旨在初步探讨AQP9与消化道各部生理功能的关系。方法SD大鼠经灌注固定后取食管、前胃、腺胃、近端小肠、远端小肠、近端结肠、远端结肠组织冰冻切片,采用免疫组织化学技术检测AQP9的分布情况,并利用病理图像分析系统比较表达水平差异。结果AQP9主要分布在小肠绒毛柱状上皮、结肠柱状上皮、小肠和结肠腺及杯状细胞,腺胃壁细胞。图像及统计学分析表明:消化道不同部位AQP9表达强度差异有统计学意义(P<0.05),由强到弱依次为近端小肠、远端小肠、近端结肠、腺胃及远端结肠、食管及前胃。结论在大鼠消化道,AQP9在近端小肠、远端小肠、近端结肠呈高表达,AQP9分布及表达强度与各部位吸收分泌功能及水电解质转运活跃程度有一定关系。