基于单细胞测序数据分析养阴活胃合剂下调AQP3对MC细胞表型的影响及机制

目的 观察养阴活胃合剂对MC细胞(MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1恶性转化)增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,探讨其下调AQP3抑制IL-10/JAK1/STAT3信号通路激活进而阻断或逆转慢性萎缩性胃炎(CAG)病变的作用机制。方法 选取GEO数据库中的CAG单细胞转录组测序数据,绘制数据的表达矩阵。采用R语言的Seurat 4.3.0包进行处理后分群绘制UMAP可视化图谱。将MC细胞分为养阴活胃合剂组(YYHWM组)、AQP3低表达慢病毒转染组(AQP3低表达组)、养阴活胃合剂+AQP3高表达慢病毒转染组(YYHWM+AQP3高表达组)并以MC细胞和正常人胃黏膜上皮细胞GES-1分别作为模型组(MC组)和空白对照组(Control组)。采用平板克隆、划痕实验、Transwell及流式细胞术检测细胞表型变化情况,采用ELISA检测细胞培养上清IL-10表达水平,Western blot检测酪氨酸激酶1(JAK1)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)蛋白表达水平。结果 单细胞测序数据集分析显示AQP3在CAG样本及上皮细胞群中表达升高,AQP3可能通过IL-10抗炎性信号通路影响胃癌前病变病理进程。与MC组相比,AQP3低表达组和YYHWM组细胞侵袭、迁移、增殖能力减弱,凋亡率增加,细胞培养上清中的IL-10水平降低,细胞中JAK1、STAT3蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01),YYHWM+AQP3高表达组差异均不显著(P>0.05)。结论 养阴活胃合剂可通过下调AQP3表达抑制IL-10/JAK1/STAT3信号通路激活进而减弱MC细胞侵袭、迁移及增殖能力,促进细胞凋亡进而阻断或逆转CAG病理进程。

芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠AQP3、5-HT水平及血管活性肠肽表达的影响

目的 探究芳香化浊调气法对功能性腹泻大鼠水通道蛋白(AQP)3、5-羟色胺(HT)及血管活性肠肽的影响。方法 将大鼠随机分为正常组、模型组、药物1组、药物2组、药物3组和对照组,每组10只。检测各组一般状态;检测粪便性状指标(BSS评分、稀便率、腹泻指数);检测血清及组织中血管活性肠肽(VIP)含量;检测肠道组织中5-HT含量;免疫荧光检测结肠组织中AQP3表达。结果 造模后大鼠出现活动减少,精神萎靡,呈缩肩拱背样,体质量下降,毛色无泽,粪便湿软或不成形;药物干预后各组一般状态得到明显改善。与正常组相比,模型组BSS评分、稀便率和腹泻指数均显著增加(P<0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均不同程度降低,且药物3组降低最为显著(P<0.05)。模型组血清及胃窦、十二指肠、结肠、下丘脑组织中VIP含量较正常组显著降低(P<0.05);和模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组均显著升高,且药物3组变化最显著(P<0.05)。与正常组相比,模型组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著升高,结肠组织中AQP3水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,药物1组、药物2组和药物3组回肠和结肠组织中5-HT含量均显著降低,结肠组织中AQP3水平明显升高,且呈浓度依赖(P<0.05)。结论 芳香化浊调气法可增加功能性腹泻大鼠AQP3水平和血管活性肠肽水平,减少5-HT水平,对肠道水液吸收功能和运动功能进行改善,进而改善腹泻。

基于NFKB/STAT3信号通路探究防风多糖对过敏性鼻炎大鼠行为学、AQP5及鼻粘膜组织的影响

目的基于NF-κB/STAT3信号通路探究防风多糖对过敏性鼻炎大鼠行为学、AQP5及鼻粘膜组织的影响。方法选取40只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(N)组,模型(M)组,糠酸莫米松(F)组,防风多糖(W)组,每组10只,采用卵清蛋白致敏法建立过敏性鼻炎模型,N组不建立该模型,建模成功后,对F组给予1喷/侧的糠酸莫米松喷鼻治疗,对W组灌胃600㎎/㎏的防风多糖,N组、M组同期给与灌胃同体积生理盐水,观察大鼠一般情况并对其行为学进行评分,HE染色法检测鼻黏膜组织病理形态,免疫组化法检测鼻黏膜组织中AQP5表达,免疫印迹法检测鼻黏膜组织中NF-κB/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果实验开始前各组大鼠均活动饮食正常且精神状态良好,未见流涕、喷嚏、挠鼻等症状,造模完成后,可见大鼠精神状态明显变差,进食及活动明显减少,且可见被毛凌乱无光泽,出现常见抓鼻动作,喷嚏频发,大量鼻分泌物流出鼻前孔,给药后,大鼠纳食摄水都逐渐恢复正常,精神状态良好,喷嚏、流涕、挠鼻等症状都较治疗前有明显缓解,均无脏器损伤,但各组大鼠体重无明显变化(P>0.05);与N组相比,M组行为学评分显著升高(P<0.05),与M组比较,F、W两组行为学评分显著降低(P<0.05),且W组比F组降低显著(P<0.05);N组大鼠鼻黏膜组织结构完整、平滑且排列整齐,腺体大小正常,未见明显上皮坏死脱落、炎性细胞浸润及明显血管扩张或充血现象,M组鼻黏膜上皮结构紊乱且不完整,可见鼻粘膜上皮细胞破坏变性,出现纤毛坏死甚至脱落现象,可见明显腺体增生、肿胀、出血及炎性细胞浸润,与M组相比,F组、W组病理状态明显改善,炎性细胞明显减少;与N组比较,M组鼻黏膜组织中AQP5蛋白表达显著降低(P<0.05),与M组比较,F组、W组鼻黏膜组织中AQP5蛋白表达显著升高(P<0.05),且W组比F组升高显著(P<0.05);与N组比较,M组鼻黏膜组织中NF-κB、P-NF-κB、STAT3、P-STAT3蛋白表达显著升高(P<0.05),与M组比较,F组、W组鼻黏膜组织中NF-κB、P-NF-κB、STAT3、P-STAT3蛋白表达显著降低(P<0.05),且W组比F组变化显著(P<0.05),而B组与W组相比无明显差异(P>0.05),O组比B组降低明显(P<0.05)。结论防风多糖可有效改善过敏性鼻炎大鼠行为学及鼻黏膜病理形态,并可显著促进AQP5表达,其机制可能与抑制NF-κB/STAT3信号通路有关。

助阳通便膏影响功能性便秘小鼠AQP3表达的实验研究

目的 检测功能性便秘小鼠使用助阳通便膏治疗前后,结肠组织中水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)表达的变化,探究助阳通便膏缓解功能性便秘与结肠组织中AQP3的关系。设计梯度浓度的助阳通便膏,为临床治疗浓度提供依据。方法 100只昆明小鼠,随机选取16只设为空白组,余下小鼠制备便秘模型(盐酸洛哌丁胺制备)。便秘小鼠随机分为模型组,助阳通便膏高、中、低浓度组,麻仁软胶囊对照组。各组应用相应药物连续灌胃14 d后观察疗效,应用免疫组化法观察各组小鼠结肠组织AQP3表达。结果 通过免疫组化染色法,与模型组相比,各组AQP3均有减少,差异具有统计学意义(P<0.05),其中助阳通便膏中浓度组小鼠粪便重量、粪便含水比、首次排黑便时间以及结肠组织中AQP3表达与空白组之间差异均无统计学意义(P>0.05),且与麻仁软胶囊对照组之间差异均不具有统计学意义(P>0.05)。结论 助阳通便膏可能是通过减少功能性便秘小鼠结肠组织中AQP3的异常表达,改善便秘。在设计的不同浓度组别中,助阳通便膏中浓度组效果最优。

肉桂醛对炎性IPEC-J2细胞AQP4和NHE3基因表达的影响

本试验旨在探讨肉桂醛(CA)对炎性猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)水通道蛋白4(Aquaporin 4,AQP4)和钠-氢交换蛋白3(Na+-H+Exchanger3,NHE3)表达的影响,以揭示肉桂醛抗炎止泻的分子作用机制。将IPEC-J2细胞随机分为对照组、脂多糖组(5.00μg/mL LPS)和LPS+CA组(5.00μg/mL LPS+0.05μL/mLCA)组,各组按剂量孵育12h后,每组3个重复。采用CCK-8法检测细胞活力,RT-qPCR检测IL-1α、TNF-α、AQP4及NHE3 mRNA的相对表达水平,ELISA检测细胞中IL-6、TNF-α、IL-1α含量,Western blotting检测AQP4及NHE3蛋白表达。结果显示:与对照组相比,5μg/mL LPS能显著提高IPEC-J2细胞中IL-1α和TNF-α mRNA丰度及IL-6、TNF-α、IL-1α含量,说明5μg/mL LPS能诱导IPEC-J2细胞的炎症反应;与LPS组相比,0.05μL/mL CA与LPS共处理后,IPEC-J2细胞中IL-1α和TNF-α mRNA的表达水平显著下降,IL-6、TNF-α、IL-1α含量也明显降低,提示0.05μL/mL CA能缓解细胞炎症反应。与对照组相比,5μg/mL LPS能下调细胞中AQP4和NHE3的mRNA和蛋白表达;与LPS组相比,0.05μL/mL CA与LPS共处理后,IPEC-J2细胞中AQP4和NHE3的mRNA和蛋白表达均升高。综上,CA能抑制猪小肠上皮细胞的炎症反应,在炎症状态下激活AQP4和NHE3的表达发挥止泻作用。

枳术丸对脾虚证慢传输型便秘小鼠结肠黏膜AQP3、AQP9的影响

目的观察枳术丸对脾虚证慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)小鼠结肠AQP3、AQP9表达的影响,探讨枳术丸改善STC症状的可能作用机制。方法将50只SPF级昆明小鼠随机分成正常组(15只)和造模组(35只),造模组采用复合因素法(番泻叶+限水+控制饮食)建立脾虚证STC小鼠模型,造模成功后造模组小鼠按体质量随机分为模型组(10只)、枳术丸组(10只)、莫沙必利组(10只)。连续给药7 d后,检测各组小鼠的粪便含水量、肠道推进率、血清木糖含量及结肠黏膜组织病理学特征;免疫组化及Western blot法检测AQP3、AQP9蛋白表达。结果与正常组相比,模型组小鼠粪便含水量显著减少,肠道推进率显著降低,血清木糖含量显著降低,小鼠结肠黏膜AQP3表达显著增多,AQP9表达显著减少(P<0.01);与模型组相比,枳术丸组小鼠粪便含水量显著增加(P<0.05),肠道推进率显著升高(P<0.01),血清木糖含量显著升高(P<0.01),小鼠结肠黏膜AQP3表达显著减少,AQP9表达显著增加(P<0.01);与莫沙必利组相比,枳术丸组小鼠肠道推进率升高(P<0.05),血清木糖含量显著升高(P<0.01),结肠黏膜AQP3表达显著减少(P<0.01),AQP9表达显著增加(P<0.01),粪便含水量差异无统计学意义(P>0.05)。结论STC的发病与结肠黏膜AQP3上调、AQP9下调有关,枳术丸可以通过下调AQP3的表达、上调AQP9的表达,增加粪便的含水量而改善STC。

槐角苷通过调控AQP1、AQP3表达对萎缩性阴道炎大鼠的保护作用

目的观察槐角苷对萎缩性阴道炎大鼠的保护作用。方法将50只大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组、赋型剂组、槐角苷组,切除卵巢进行造模,假手术组和模型组不给药,其余组连续阴道给药14 d后,观察用药前后大鼠一般体征变化(体质量、阴道pH、阴道健康状况、乳酸杆菌、内糖原),血清E2和FSH水平,阴道上皮黏膜中AQP1、AQP3蛋白和mRNA表达。结果与模型组比较,槐角苷组大鼠体质量、血清E2和FSH水平无明显变化(P>0.05),阴道健康评分、乳酸杆菌数量、上皮细胞数量、内糖原表达、AQP1、AQP3蛋白和mRNA表达升高(P<0.05),炎细胞数量、阴道pH降低(P<0.05)。结论槐角苷对萎缩性阴道炎大鼠具有保护作用,其机制与提高大鼠阴道上皮黏膜AQP1和AQP3表达有关。

参苓白术散通过ERK/p38 MAPK信号通路干预溃疡性结肠炎大鼠结肠组织AQP3、AQP4的表达

目的探讨细胞外信号调节激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(ERK/p38MAPK)信号通路在参苓白术散调控脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)3、AQP4表达中的作用。方法将60只Wistar大鼠按照随机数字表均分为正常组、模型组(氯化钠注射液)、参苓白术散组、U0126+参苓白术散组、SB203580+参苓白术散组。除正常组外,脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸/乙醇灌肠,结合环境与饮食干预复制。14 d后采用蛋白质印迹法检测各组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白的表达,实时荧光定量PCR法检测其mRNA表达情况。结果模型组大鼠AQP3、AQP4蛋白表达及其mRNA的表达水平明显低于正常组(P<0.05),参苓白术散组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达较模型组明显升高,组间比较有显著性差异(P<0.05),SB203580+参苓白术散组及U0126+参苓白术散组大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达较模型组有较小幅度升高,与正常组和参苓白术散组相比均有显著性差异(P<0.05)。结论参苓白术散可显著改善大鼠结肠组织AQP3、AQP4蛋白及mRNA表达,ERK/p38 MAPK信号通路参与了参苓白术散对脾虚湿困型溃疡性结肠炎大鼠结肠组织AQP3、AQP4表达的调节作用。

湿阻中焦证模型大鼠胃肠水通道蛋白3(AQP3)的病理特征性表达分布谱以及平胃散干预的研究

目的:研究湿阻中焦证动物模型胃肠组织AQP3的分布和含量以及平胃散的干预,揭示湿阻中焦证动物模型水通道蛋白病理特征性表达分布谱。方法:SD大鼠60只,雌雄各半,随机分空白组、空白给药组、模型组、平胃散组和自然恢复组,每组12只。用免疫组化技术测定胃肠组织AQP3的分布,用酶联免疫法(ELISA)测定胃肠组织AQP3的含量。结果:模型组AQP3分布在胃贲门和小肠中段的黏膜增加,在小肠中段的外膜增加。经平胃散干预后,AQP3分布在胃贲门的黏膜减少,与自然恢复组比较,在小肠中段的黏膜有所增加。结论:AQP3在湿阻中焦证胃肠特征性表达分布谱可能是湿阻中焦证的分子基础之一。平胃散对湿阻中焦证胃肠AQP3表达的增强可能是平胃散治疗湿阻中焦证的分子机理之一。

AQP3在不同年龄段正常人皮肤组织中的表达及意义

目的探讨水通道蛋白3(AQP3)与人皮肤自然衰老的关系。方法收集55例整形外科手术患者非曝光部位皮肤标本,根据年龄分为3组:青年组(<20岁)、中年组(30～45岁)和老年组(>55岁),用RT-PCR及Western blot检测每例皮肤组织中AQP3 mRNA和蛋白的表达量,分析不同年龄组之间AQP3表达水平的差异。结果老年组皮肤中AQP3 mRNA、蛋白的表达量较青年组和中年组均显著性减少(P<0.01)。结论 AQP3的表达下调可能是导致皮肤自然衰老的原因之一。

洛哌丁胺构建大鼠便秘模型对水通道蛋白AQP3和AQP8的影响

目的:观察洛哌丁胺构建的大鼠便秘模型中水通道蛋白家族中AQP3和AQP8蛋白及其mRNA定量表达,探讨洛哌丁胺构建大鼠便秘模型对AQP3和AQP8的影响.方法:SD♂大鼠30只,随机分为5组,造模开始时处死1组大鼠,检测结肠传输功能及结肠组织的AQP3,8表达水平,作为基准参考线.剩余4组予以洛哌丁胺1.5 mg/(kg·d)灌胃,诱导造模.分别于造模的第3、7天和造模成功后第3、7天各处死一组模型大鼠,检测结肠传输及AQP3,AQP8蛋白及其mRNA定量表达.结果:大鼠粪便含水量在诱导便秘模型的过程中明显减少,停药后7 d,粪便内的水分并不能自发恢复至正常(2.29 g±1.17 g vs 0.80 g±0.27 g,P=0.01<0.05).试验过程中,大鼠结肠传输功能未发生改变(67.72%vs 58.64%,P=0.971>0.05).AQP8远端表达停药7 d上升,与造模7 d时相比,差异有统计学意义(0.43±0.31vs 2.66±0.87,P=0.008).AQP8近端表达给药后迅速上升至较高水平,与正常组对照具有统计学意义(15.96±2.13,P=0.00),停药7 d后其表达再次上升,与给药7 d相比,差异有统计学意义(6.37±0.23 vs 0.79±0.13,P=0.015).停药后,AQP3在结肠近端持续表达下降,与正常对照组相比,差异有统计学意义(0.20±0.06,P=0.04).结论:洛哌丁胺能够提高模型大鼠结肠AQP8表达,促进肠道跨膜水运输,减少粪便含水量而导致便秘.

脾胃湿热证模型大鼠胃黏膜AQP_3、AQP_4基因的表达

目的探讨脾胃湿热证大鼠动物模型建立方法及脾胃湿热证模型大鼠胃黏膜水通道蛋白AQP3、AQP4基因表达。方法40只大鼠随机分为四组,造模20d,对照组正常喂饲;脾虚组隔日喂饲,非喂饲日灌喂番泻叶水煎液;模型组20%蜂蜜水自由饮用,隔日灌服油脂,每日2%水杨酸钠灌胃。造模开始后第16～20日每日20:00至次日8:00将大鼠置入人工气候箱中;治疗组前20d处理同模型组,第21～25日灌服清热化湿方。观察结束后,FQ-PCR方法测定大鼠胃黏膜AQP3、AQP4基因表达。结果模型大鼠在造模过程中出现脾胃湿热证的特征性表现;模型组AQP3、AQP4基因表达水平高于对照组、脾虚组、治疗组。结论通过对大鼠施加内、外湿因素的造模方法可复制出临床脾胃湿热证的证候特征;AQP3、AQP4的异常表达可能是脾胃湿热证的发生机制之一。

基于水通道蛋白AQP1/AQP3的表达探讨石膏对急性软组织损伤大鼠模型的影响

目的研究生石膏和煅石膏对急性软组织损伤大鼠模型水通道蛋白AQP1、AQP3表达的影响,对石膏消肿的作用机制进行初步研究。方法采用砝码自由落体运动制备急性软组织损伤大鼠模型,造模成功后将动物随机分为模型组,阳性药组(双氯芬酸0.75 g/kg),煅石膏高、中、低剂量组(1.0、0.5、0.25 g/kg)、生石膏高、中、低剂量组(1.0、0.5、0.25 g/kg),另设空白对照组,每组10只。除模型组与空白对照组外,其余各组均给予相应药物,每天换药1次,连续7 d。采用Western blotting和免疫组化法检测各组大鼠损伤组织中AQP1/AQP3表达变化。结果与空白对照组比较,模型组大鼠损伤骨骼肌中AQP1/AQP3表达明显下降(P<0.01);与模型组比较,煅石膏高、中、低剂量组和阳性药组大鼠损伤骨骼肌中AQP1/AQP3表达明显增加(P<0.01),生石膏组无明显差异。结论石膏煅制后可能通过调节急性软组织损伤模型骨骼肌中AQP1/AQP3的表达从而发挥消肿的作用。

乐胃饮对慢性萎缩性胃炎大鼠AQP3、AQP4蛋白表达的影响

目的:观察乐胃饮对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜AQP3、AQP4蛋白表达的影响。方法:60只Wistar大鼠,随机分为正常对照组、模型组、维酶素组、乐胃饮低、中、高剂量组,除正常对照组外,其余大鼠用2%水杨酸钠灌胃、自由饮用MNNG溶液结合饥饱失常等综合因素诱发慢性萎缩性胃炎模型。造模后各组予以灌胃治疗4周。结果:与模型对照组比较,乐胃饮各剂量组胃黏膜AQP3、AQP4蛋白表达显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论:乐胃饮可增强慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜AQP3、AQP4蛋白的表达,可能通过改善胃黏膜水盐代谢,调节胃酸分泌,进而达到治疗CAG的作用。

基于大肠主津理论下助阳通便膏对便秘模型小鼠结肠组织中MUC2、AQP3的影响

目的通过观察助阳通便膏对便秘模型小鼠结肠黏膜蛋白2(MUC2)、水通道蛋白3(AQP3)的影响,探讨助阳通便膏改善功能性便秘的作用机制。方法将120只雄性巴比西小鼠随机分成5组,每组24只。即正常组、模型组、助阳通便汤组、助阳通便膏组、麻仁软胶囊组。除正常组外,其余各组造模便秘小鼠模型,采用复方地芬诺酯灌胃的方法造模。造模成功后各组分别给予相应的药物,连续灌胃给药14 d后取材,应用免疫组化、Wester Blot的方法观察各组小鼠结肠黏膜蛋白2(MUC2)和水通道蛋白3(AQP3)的含量。结果通过免疫组化的方法发现,与模型组比较,各组MUC2、AQP3平均光密度值均有不同程度增高,且助阳通便膏组与汤剂组比较MUC2平均光密度值差异有统计学意义(P<0.05)。通过Wester Blot的方法发现,与模型组比较,各组MUC2、AQP3蛋白相对表达水平灰度值均有不同程度增高。且AQP3助阳通便膏剂组与汤剂组比较(P<0.05)。结论助阳通便膏可提高MUC2、AQP3含量,改善便秘。助阳通便膏剂增加便秘小鼠结肠AQP3蛋白表达水平的作用及增加便秘小鼠结肠MUC2阳性细胞数量的作用明显优于助阳通便汤。

版纳微型猪近交系AQP3克隆、序列分析及组织表达

目的克隆版纳微型猪近交系aquaporin 3(AQP3)基因,并利用生物信息学方法分析其序列特征,研究其在猪各组织中的表达情况。方法从版纳微型猪近交系脾脏中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增猪AQP3编码区序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化宿主菌DH 5α,筛选阳性克隆进行测序。并采用半定量RT-PCR方法分析版纳微型猪近交系不同组织中AQP3基因的表达情况。结果成功克隆出AQP3基因编码区全长873 bp的序列,GenBank登录号为HQ888860,其编码290个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明,与牛的AQP3基因同源性最大,达99%。多组织半定量RT-PCR研究表明AQP3 mRNA在BMI猪的脾脏、肾脏、肺、小肠中均有表达,其中脾脏中表达最高。结论成功克隆出了版纳微型猪近交系AQP3基因全长编码区,并对其编码的蛋白质功能进行了预测,为进一步的功能研究奠定了基础。

治伤巴布剂对大鼠急性软组织损伤模型骨骼肌中AQP-3表达的影响

目的:观察治伤巴布剂对大鼠急性软组织损伤模型骨骼肌中水通道蛋白3(AQP-3)表达的影响。方法:SD大鼠54只,随机分成3组,造模前1 d使用10%的硫化钠对每只大鼠左后肢大腿外侧区域进行脱毛处理。正常对照组:仅在左后肢大腿外侧进行脱毛处理,并标记打击范围,不予打击造模;模型组:使用软组织打击器在脱毛区标记范围内予以打击建立急性软组织损伤肿胀的模型,不给任何药物处理;药物处理组:急性软组织损伤肿胀模型建立后立即在局部予治伤巴布剂外敷,另予胶布加强固定。造模后1 h,6 h,1 d,3 d,5 d,7 d六个时间点处死动物,每组每个时相点3只,在标记的区域切取肌肉组织,采用干湿比重法测定骨骼肌组织的含水量,应用实时荧光定量PCR、Western印迹法检测AQP-3 mRNA及蛋白的表达水平,并行相关分析。结果:检测的六个时间点中,模型组和药物处理组的肌肉组织含水量均高于正常对照组(P<0.05),在3,5,7 d三个时间点,药物处理组的含水量低于模型组(P<0.01);药物处理组、模型组的AQP-3 mRNA及蛋白表达水平均高于正常对照组,且药物处理组高于模型组(P<0.01)。结论:治伤巴布剂具有减轻急性软组织肿胀的作用,从而加速急性软组织损伤后修复的进程。

益气养阴祛瘀方对干燥综合征颌下腺细胞AQP5及M3R表达的影响

目的观察益气养阴祛瘀方含药血清对干燥综合征(SS)患者颌下腺细胞AQP5及M3R表达的影响。方法制备不同剂量SD大鼠益气养阴祛瘀方含药血清,再分别给予以下处理:空白组(仅含RPMI1640培养液),空白血清组(10%空白血清+RPMI1640培养液),分别予含5%、10%、15%、20%不同浓度的含药血清+RPMI1640培养液组,共6组。培养细胞24 h后,分别以倒置相差显微镜、激光共聚焦显微镜观察细胞,Western blot检测细胞中AQP5及M3R蛋白表达水平。结果益气养阴祛瘀方含药血清作用后,激光共聚焦显微镜观察抗体标记细胞的荧光强度明显增强。Western blot检测AQP5与M3R的蛋白表达均有上调。含药血清组中的AQP5及M3R蛋白的表达明显高于空白血清组,且10%、15%含药血清组高于5%含药血清组(P<0.05),但与20%相差不大(P>0.05)。结论益气养阴祛瘀方可以上调颌下腺细胞中AQP5及M3R蛋白的表达,而且与之成一定的剂量依赖关系。

润肠通便合剂对便秘模型小鼠结肠MUC2、AQP3的影响

目的:研究润肠通便合剂对便秘模型小鼠的治疗作用及对结肠黏蛋白(MUC2)、水通道蛋白(AQP3)表达的影响。方法:将小鼠分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组及润肠通便合剂高、中、低剂量组(40、20、10 ml/kg)(n=10),通过复方地芬诺酯(30 mg/kg灌胃1次或20 mg/kg灌胃14 d)来复制便秘动物模型,观测润肠通便合剂给药3 d对便秘小鼠排便、小肠推进的影响,给药14 d对便秘小鼠结肠病理学、含水量、结肠灌洗液(CLAF)中Muc2以及结肠AQP3基因表达水平,观测润肠通便合剂给药3 d或14 d对便秘小鼠排便、小肠推进、结肠病理学、含水量、结肠灌洗液(CLAF)中Muc2以及结肠AQP3基因表达水平的影响。结果:与空白对照组比较,模型对照组小鼠给予30 mg/kg复方地芬诺酯1次后,小肠推进长度及推进率显著降低,首便时间延长,6 h排便粒数减少;给予20 mg/kg复方地芬诺酯14 d后,小鼠结肠出现明显病理学变化,CLAF中Muc2的含量降低,近端结肠AQP3的基因表达水平升高,结肠湿干重比值降低(P<0.01)。与模型对照组比较,给予润肠通便合剂能明显增加小肠推进长度及推进率,缩短首便时间,增加6 h排便粒数,改善便秘小鼠结肠病理学,提高CLAF中Muc2的含量,抑制近端结肠AQP3的基因表达,提高结肠湿干重比值(P<0.05, 0.01)。结论:润肠通便合剂可加速排便,改善结肠病理学,其中促进Muc2分泌、下调AQP3 mRMA表达而改善结肠水代谢是其通便的机制之一。