砷对雄性大鼠睾丸组织AQP-8及survivin蛋白表达的影响

[目的]研究亚慢性砷中毒对大鼠睾丸组织AQP-8及survivin蛋白表达的影响。[方法]将40只健康成年清洁级SD雄性大鼠随机分为对照组以及低、中、高剂量砷染毒组,每组10只;采用自由饮水方式染毒,低、中、高剂量染毒组饮水中亚砷酸钠浓度分别为2.4、12.0、60.0 mg/L,连续染毒15周,对照组饮用蒸馏水;染毒试验结束后,对各组大鼠进行精子计数,计算精子存活率;制备睾丸组织切片进行病理学观察;利用免疫组化及Western blotting法测定大鼠睾丸组织中AQP-8及survivin蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比,中、高剂量染毒组大鼠精子计数与精子存活率均降低,且差异显著(P<0.05)。低剂量染毒组大鼠生精小管无明显变化;中剂量染毒组大鼠生精上皮层数减少,小管间隙增宽;高剂量染毒组大鼠部分生精小管出现基膜溶解,生精上皮细胞层次紊乱,细胞间隙增大,间质出现水肿、渗出。免疫组化分析结果显示,AQP-8蛋白主要表达于各级生精细胞的细胞膜和精子细胞,与对照组相比,各剂量染毒组大鼠睾丸组织中AQP-8阳性细胞平均光密度值显著(P<0.05)升高;survivin蛋白主要表达于次级精母细胞和精子细胞的胞浆,与对照组相比,各剂量染毒组大鼠睾丸组织中survivin阳性细胞平均光密度值显著(P<0.05)降低。Western blotting分析结果显示,对照组和各剂量染毒组大鼠睾丸组织中均存在AQP-8及survivin蛋白的表达;与对照组相比,低、中、高剂量染毒组AQP-8蛋白表达量显著(P=0)增加,survivin蛋白表达量显著(P=0)降低。[结论]砷暴露使睾丸组织AQP-8蛋白表达量增加,survivin蛋白表达量下降,这可能是导致其雄性生殖毒性效应的机制之一。

洛哌丁胺构建大鼠便秘模型对水通道蛋白AQP3和AQP8的影响

目的:观察洛哌丁胺构建的大鼠便秘模型中水通道蛋白家族中AQP3和AQP8蛋白及其mRNA定量表达,探讨洛哌丁胺构建大鼠便秘模型对AQP3和AQP8的影响.方法:SD♂大鼠30只,随机分为5组,造模开始时处死1组大鼠,检测结肠传输功能及结肠组织的AQP3,8表达水平,作为基准参考线.剩余4组予以洛哌丁胺1.5 mg/(kg·d)灌胃,诱导造模.分别于造模的第3、7天和造模成功后第3、7天各处死一组模型大鼠,检测结肠传输及AQP3,AQP8蛋白及其mRNA定量表达.结果:大鼠粪便含水量在诱导便秘模型的过程中明显减少,停药后7 d,粪便内的水分并不能自发恢复至正常(2.29 g±1.17 g vs 0.80 g±0.27 g,P=0.01<0.05).试验过程中,大鼠结肠传输功能未发生改变(67.72%vs 58.64%,P=0.971>0.05).AQP8远端表达停药7 d上升,与造模7 d时相比,差异有统计学意义(0.43±0.31vs 2.66±0.87,P=0.008).AQP8近端表达给药后迅速上升至较高水平,与正常组对照具有统计学意义(15.96±2.13,P=0.00),停药7 d后其表达再次上升,与给药7 d相比,差异有统计学意义(6.37±0.23 vs 0.79±0.13,P=0.015).停药后,AQP3在结肠近端持续表达下降,与正常对照组相比,差异有统计学意义(0.20±0.06,P=0.04).结论:洛哌丁胺能够提高模型大鼠结肠AQP8表达,促进肠道跨膜水运输,减少粪便含水量而导致便秘.

肠易激综合征患者结肠黏膜AQP8的表达

目的探讨肠易激综合征(IBS)患者结肠黏膜水通道蛋白8(AQP8)的表达,揭示肠易激综合征的病因和可能的发病机制。方法运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法定量分析研究结肠黏膜AQP8表达量在升、降结肠黏膜的表达变化,并与正常组比较。结果 AQP8在人结肠黏膜广泛表达,与正常对照组相比,IBS-D组AQP8表达明显降低(P<0.05),IBS-C组AQP8表达显著升高(P<0.05),并且IBS-C组AQP8表达明显高于IBS-D组(P<0.05)。但在三组升、降结肠黏膜AQP8比较,仅IBS-D组升结肠表达明显高于降结肠(P<0.05),而正常对照组和IBS-C组差异不显著(P>0.05)。结论 AQP8在IBS患者结肠黏膜上皮细胞水的转运过程中起重要作用,参与结肠黏膜水的调节,可能是IBS产生腹泻和便秘的重要原因之一。

增液汤干预干燥综合征模型鼠AQP1/AQP8的表达规律研究

目的:观察增液汤干预下干燥综合征(Sjogren's Syndrome,SS)模型小鼠肺及结肠组织中水通道蛋白AQP1(aquaporin1)、AQP8(aquaporin8)的表达规律。方法:选用BALB/c小鼠,各组10只,免疫诱导法建立干燥综合征小鼠模型,产生SS特异性临床表现和病理改变,采用免疫组化和Western blot蛋白质印迹法观察增液汤对SS模型小鼠肺及结肠组织中AQP1/AQP8表达的影响。结果:增液汤可以增强肺及结肠组织中AQP1的蛋白表达(P<0.01),对AQP8无影响。结论:AQP1在干燥综合征模型鼠多组织中的表达下调,可能是干燥综合征水液代谢障碍,多脏器损伤的机制之一;增液汤恢复机体阴液,起到"增水"功效可能与上调AQP1蛋白表达有关。

AQP8在正常人绒毛滋养层细胞与绒癌JAR细胞株中的表达

目的:探讨AQP8在正常人绒毛滋养细胞和绒癌JAR细胞株中的表达差异,及其表达改变与绒癌发生的关系。方法:正常人绒毛滋养细胞(正常组)的原代培养、纯化及鉴定;人绒癌JAR细胞株(绒癌组)的培养。以免疫组织化学法、免疫荧光激光共聚焦和RT-PCR技术检测AQP8蛋白和AQP8 mRNA在正常人绒毛滋养细胞和绒癌JAR细胞株细胞膜上的表达。结果:(1)应用免疫组化方法,在正常组中,仅能从显微镜中肉眼看到AQP8的极低表达,摄影效果不佳,而在绒癌组中AQP8的阳性细胞率为93.27%±14.45%,远高于正常组。(2)应用免疫荧光染色后行激光共聚焦成像技术发现,在相同的条件及激发强度下,可见AQP8在绒癌组呈绿色阳性表达,而在正常组中未见绿光,但当加强激发强度后,仍可探及AQP8在正常组的表达。(3)应用RT-PCR技术,在正常组与绒癌组中,均检测到AQP8 mRNA的表达。绒癌组AQP8的OD值(0.98±0.35)明显高于正常组AQP8的OD值(0.32±0.04)(P<0.05)。结论:AQP8表达异常上调,滋养细胞内、外水、电解质平衡将被破坏,可能是导致绒癌发生的原因之一。

复方地芬诺酯建立便秘模型与AQP8的相关性研究

目的:通过复方地芬诺酯法建立大鼠慢传输型便秘模型,探索一种简便易行的大鼠便秘造模方法,并探讨大鼠便秘造模过程中对结肠AQP8表达的影响。方法:SD大鼠30只随机分为空白组和便秘模型组。空白组大鼠用生理盐水灌胃,便秘模型组用复方地芬诺酯灌胃,观察两组大鼠大便粒数及大便湿重。大鼠便秘模型建立后。将大鼠集体处死,取大鼠近端结肠标本,用免疫组织化学的方法检测两组大鼠结肠AQP8的表达情况。使用彩色病理图像分析系统对阳性表达的平均光密度值进行半定量分析。结果:建立便秘模型末次给药后,便秘组24 h大便粒数、大便湿重均低于空白对照组(P<0.05),差异有统计学意义,表明大鼠慢传输型便秘模型成功建立;免疫组化结果显示:便秘组结肠AQP8的MD值大于空白对照组(P<0.05),差异有统计学意义。结论:复方地芬诺酯灌胃法成功建立大鼠便秘模型,便秘模型的建立与大鼠结肠AQP8的表达增高相关。

灭幽汤对幽门螺杆菌相关性胃炎脾胃湿热证小鼠AQP4、IL-6、IL-8的影响

目的研究灭幽汤对幽门螺杆菌(Hp)相关性胃炎脾胃湿热小鼠水通道蛋白4(AQP4)蛋白、白介素-6、白介素-8(IL-6、IL-8)的相关性,探讨其治疗慢性胃炎的作用机制。方法将70只BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、灭幽汤高浓度组(灭高组)、灭幽汤低浓度组(灭低组)、胃三联组(替硝唑+克拉霉素+枸橼酸铋钾颗粒),每组14只;采用复合因素(肥甘食物+湿热环境+Hp感染)建立BALB/c小鼠Hp相关性胃炎脾胃湿热证模型;造模成功后连续给药14 d,采用免疫组化检测AQP4的表达情况,Elisa检测血清IL-6、IL-8含量。结果与正常对照组比较,模型组AQP4、IL-6、IL-8表达增加(P<0.01);与模型组比较,灭高组、灭低组、胃三联组小鼠AQP4、IL-6、IL-8表达降低,差异显著(P<0.01);灭高组AQP4、IL-6、IL-8低于胃三联组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论灭幽汤可能通过影响AQP4、IL-6、IL-8表达而发挥治疗Hp相关性胃炎脾胃湿热证的作用。

加味茵陈蒿汤对雌激素致肝内胆汁淤积症大鼠肝脏AQP8 mRNA和蛋白表达的影响

目的:观察加味茵陈蒿汤对雌激素致肝内胆汁淤积症大鼠肝脏水通道蛋白8(AQP8)m RNA和蛋白表达的影响,探讨加味茵陈蒿汤治疗妊娠肝内胆汁淤积症可能的分子机制。方法:50只SD雌性大鼠,体质量180-200 g,随机分为正常组(N,n=10)和模型组(M’,n=40)。M’组大鼠皮下注射17-α乙炔雌二醇5 mg·kg-1·d-1,连续5天,建立肝内胆汁淤积症模型,N组大鼠给予相同体积的丙二醇皮下注射。5天后,M’组大鼠随机分为模型组(M,n=10)、加味茵陈蒿汤高剂量(Zg,n=10)、中剂量(Zz,n=10)和低剂量组(Zd,n=10),分别给予生理盐水和高、中、低剂量的加味茵陈蒿汤灌胃,连续7天。7天后处死大鼠,留取肝脏组织,置于液氮中保存,分别运用实时定量PCR法及蛋白免疫印迹法检测AQP8 m RNA与蛋白表达情况。结果:与正常组(N)比较,模型组(M)大鼠肝脏组织AQP8 m RNA与蛋白表达水平降低(P<0.01)。与模型组(M)比较,高、中和低剂量的加味茵陈蒿汤均可增加大鼠肝脏组织AQP8 m RNA与蛋白表达水平(P<0.05)。此外,研究还发现,随着加味茵陈蒿汤给药剂量的增加,其上调AQP8 m RNA和蛋白表达的作用增强。结论:加味茵陈蒿汤治疗妊娠肝内胆汁淤积症的分子机制可能是通过增加肝脏组织AQP8 m RNA与蛋白表达水平实现的。

AQP5和AQP8在人结肠癌中的表达及意义

目的研究水通道蛋白5和水通道蛋白8在人结肠癌组织中的表达,初步探讨其在人结肠癌发生发展中的意义。方法采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,检测人结肠癌组织和癌旁组织中AQP5和AQP8的表达。结果 AQP5主要表达于人结肠癌组织中肿瘤细胞,癌旁正常组织基本没有表达;AQP8主要表达于癌旁正常组织,而在人结肠癌组织肿瘤细胞则基本没有表达。结论 AQP5在人结肠癌组织肿瘤细胞中高表达,AQP8在人结肠癌癌旁正常组织中高表达,二者在结肠癌组织和癌旁组织中的表达与肿瘤的TNM分期和淋巴转移相关,在人结肠癌的发生发展及转移过程中起重要作用。

NH_4Cl对人肝细胞系LO2氨转运相关蛋白RHCG和AQP8表达的影响

目的检验氯化铵是否能够特异性地刺激肝细胞,使其内部与氨离子转运有关的RHCG和AQP8基因表达发生变化。方法培养人正常肝脏细胞(LO2)、甲状腺癌细胞(TPC-1)、卵巢癌细胞(SKOVR-3)和食管癌细胞(9706),NH4Cl(2.5、5、10、20、40和50 mmol/L)对4种细胞作用24 h后,MTT法检测细胞的增殖;荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测LO2细胞经5、10和20 mmol/L的NH4Cl处理不同时间(6、12和24 h)后,AQP8和RHCG基因及蛋白的表达;10 mmol/L的NH4Cl处理TPC-1、SKOVR-3和9706细胞不同时间(6、12和24 h)后,AQP8和RHCG基因及蛋白的表达。结果随着NH4Cl浓度的增加,氨对肝细胞LO2的增殖抑制率逐渐增加且明显大于其他细胞系;10 mmol/L NH4Cl作用于LO2细胞6 h时,RHCG基因表达量明显下调(P<0.05),而AQP8基因的表达量在作用12 h后较对照组明显增加(P<0.05);10 mmol/L NH4Cl作用于LO2细胞24 h时,AQP8蛋白表达量较对照组显著增加(P<0.0.5),而RHCG无变化;相同浓度NH4Cl作用其他细胞系相同时间时,AQP8和RHCG的基因和蛋白水平均未见显著性变化。结论在氨升高的环境中,人肝细胞通过调节氨转运相关蛋白AQP8和RHCG的量来维持对氨摄取的平衡,减少氨对肝细胞的特异性损伤,在其他细胞系中无此现象。

AQP1、AQP8在病变宫颈上皮组织中的表达及临床意义

目的:探究水通道蛋白1(aquaporin-1,AQP1)及水通道蛋白8(aquaporin-8,AQP8)在病变宫颈上皮组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学法、蛋白质印迹法对32例宫颈炎、95例宫颈癌及30例宫颈上皮内瘤变Ⅲ患者AQP1、AQP8的表达进行检测并分析。结果:3组AQP1微血管密度及AQP8阳性表达率差异均具有统计学意义(P<0.05),且3组AQP1/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、AQP8/GAPDH差异均具有统计学意义(P<0.05);宫颈癌患者AQP1、AQP8的表达与临床分期、浸润深度、肿瘤直径等显著相关(P<0.05)。结论:不同宫颈上皮组织病变程度的AQP1、AQP8表达差异具有统计学意义(P<0.05),且AQP1、AQP8在宫颈癌病情发生、发展过程中具有重要的临床病理意义。

运用FQ-RT-PCR研究鼠结肠AQP8的表达

目的:通过设计特异引物和探针,运用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法研究小鼠结肠AQP 8表达。方法:应用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法。结果:数值可以发现降结肠高于升、横结肠,但通过方差分析结肠各部位间AQP 8mRNA表达量的差别无统计学意义(P>0.05)。结论:荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)具有特异性强、灵敏度高、定量准确性高等优点;小鼠结肠均有AQP 8表达。

健脾益肝方对肝硬化大鼠AQP8的影响

目的:观察健脾益肝方对肝硬化模型大鼠肝组织水通道蛋白AQP8表达的影响。方法:将90只Wist-ar大鼠随机分为空白对照组、模型组、健脾益肝方高、中、低剂量组及秋水仙碱组,运用CCL4法造肝硬化模型,并对肝脏组织作AQP8 PCR定量及Western Blotting检测。结果:模型组AQP8蛋白含量及平均光密度值和积分光密度值均很低,与空白组相比有极显著差异(P<0.01);经过治疗后健脾益肝方可以使AQP8蛋白含量及平均光密度值和积分光密度值均升高,其中疗效与中药使用剂量正相关,健脾益肝方低剂量组与模型组相比有显著差异(P<0.05),而健脾益肝方中剂量组及高剂量组与模型组相比具有极显著差异(P<0.01);秋水仙碱组与模型组比较没有显著差异(P>0.05)。结论:健脾益肝方对AQP8蛋白的升高作用是治疗肝硬化的靶点之一。

AQP8和MCM3在子宫内膜癌中表达的临床意义

目的探究AQP8 和MCM3 在子宫内膜癌中表达的临床意义.方法：选取正常子宫内膜组织36 例,子宫内膜样腺癌组织63 例.采用分析免疫组化分析AQP8 及MCM3 结果.结果：子宫内膜样癌中AQP8 及MCM3 的阳性表达率明显高于正常子宫内膜组（P〈0.05）;AQP8的阳性表达率在病理分期Ⅲ＋Ⅳ期及组织学分级G2 ＋ G3 中高表达（P〈0.05）;而MCM3 的阳性表达率在组织学分级G2 ＋ G3 及肌层浸润深度〉1/2 中高表达（P〈0.05）结论：AQP8 和MCM3 在子宫内膜癌中高度表达,与肿瘤分期,分化以及浸润深度密切相关,考虑可以作为一组新的免疫组化组合,对于患者预后评估意义十分重大.

温补肾阳法影响慢性腹泻大鼠模型结肠AQP8表达和cAMP/cGMP比值的实验研究

目的探讨中医温补肾阳法对慢性泄泻大鼠模型结肠黏膜组织水通道蛋白(AQP)8表达和c AMP/c GMP比值的影响。方法健康雄性Wistar大鼠54只,以随机分配方式,分为正常组、模型组、对照组(蒙脱石散组、参苓白术丸组)和干预组(右归丸高剂量组、右归丸低剂量组),共6组。除正常组外均采用水环境小平台站立法复合高乳糖饲料喂养的方法复制慢性腹泻模型,模型成功后,6组分别给予生理盐水(15 ml/kg)、生理盐水(15 ml/kg)、蒙脱石散溶液(1.0 g/kg)、参苓白术丸溶液(2.4 g/kg)、右归丸高剂量溶液(2.3 g/kg)、右归丸低剂量溶液(1.2 g/kg)灌胃,每天1次,连续给药7 d。取结肠组织,通过免疫组化的方法观察结肠黏膜组织AQP8-mRNA、AQP8、c AMP/c GMP的变化。结果与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜组织AQP8-mRNA、AQP8、c AMP/c GMP的表达呈"显著降低"的数值反应;相较于模型组,右归丸高剂量组大鼠结肠粘膜组织AQP8-mRNA、AQP8的表达及c AMP/c GMP比值呈"显著提高"之数值反应。右归丸低剂量组和参苓白术丸组可部分提高AQP8-mRNA、AQP8的表达及c AMP/c GMP比值,西药组实验数据改善情况不明显。结论温补肾阳法(右归丸)可以在慢性腹泻大鼠模型体内充分发挥药效,使c AMP/c GMP比值升高,使大鼠模型结肠黏膜组织中的AQP8-mRNA、AQP8的表达水平提升,致使对水分的吸收作用增强,从而达到止泻的目的。

三阴性乳腺癌中AQP8的表达及其与血管生成、增殖和预后的相关性

目的探讨水通道蛋白8(AQP8)在三阴性乳腺癌(TNBC)中的表达及其与血管生成、增殖和预后的关系。方法通过免疫组织化学法在2010年1月至2013年1月在首都医科大学附属复兴医院接受TNBC根治性手术治疗的127例患者的肿瘤和癌旁组织石蜡切片中检测AQP8的表达情况。同时,采用免疫组织化学法检测TNBC组织中血管内皮生长因子(VEGF)和Ki-67的表达,分析TNBC组织中VEGF、Ki-67的表达与AQP8的关系。结果与癌旁组织相比,TNBC组织中AQP8表达显著增加。这种现象伴随着Ki-67和血管生成相关标志物VEGF的异常表达。此外,AQP8高表达与侵袭性临床病理因素、低总体存活时间(OS)和低无病生存时间(DFS)相关。多变量分析结果显示,AQP8表达可能是TNBC患者低OS、DFS的独立预测因子。结论AQP8高表达与TNBC患者的血管生成、增殖和预后不良有关。

电针不同穴组对功能性便秘大鼠结肠黏膜超微结构及AQP3、AQP8表达的影响

目的探讨电针不同穴组治疗功能性便秘(FC)大鼠的作用机理。方法 FC动物模型采用0℃0.9%氯化钠溶液对SD大鼠灌胃复制,随机分为模型组、电针1组(EAⅠ组)、电针2组(EAⅡ组)和电针3组(EAⅢ组),正常组采用SD大鼠。EAⅠ组取天枢、大肠俞(双侧)、EAⅡ组取曲池、上巨虚(双侧)、EAⅢ组取天枢、大肠俞、曲池、上巨虚(单侧)进行电针治疗。观测粪便性状和肠道炭末推进率评定大鼠肠动力,透射电镜检测大鼠结肠黏膜超微结构,Western blot检测大鼠结肠AQP3、AQP8蛋白表达,qPCR检测大鼠结肠AQP3、AQP8mRNA表达。结果 EAⅡ组大鼠24h粪便粒数、24h粪便含水量和肠道炭末推进率均显著增加,首次黑便时间显著减少(P<0.05),结肠黏膜超微结构经EAⅡ干预后显著改善,模型组大鼠结肠黏膜AQP3、AQP8蛋白和AQP3、AQP8mRNA表达显著高于正常组(P<0.05),经EAⅡ干预后表达显著降低,具有统计学意义(P<0.05)。结论电针刺激曲池、上巨虚可能通过降低FC大鼠结肠黏膜AQP3、AQP8蛋白和AQP3、AQP8mRNA表达,减少结肠水分重吸收,增加结肠粪便含水量,调节水分转运,改善结肠黏膜超微结构,增强肠动力,起到改善便秘症状的作用。

AQP8在胰腺导管腺癌中的表达及其临床意义

目的研究水通道蛋白8(AQP8)在胰腺导管腺癌癌组织(PC)、癌旁正常胰腺组织(Non-PC)中的表达及其临床意义。方法通过免疫组织化学(IHC)方法检测AQP8在87例胰腺导管腺癌患者配对的石蜡包埋PC、Non-PC中的表达,并对AQP8的表达与胰腺导管腺癌患者临床资料间的关系进行分析。同时利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及Western blot方法各检测10例配对新鲜冻存PC、Non-PC中AQP8的表达。结果 IHC显示AQP8主要表达于PC导管细胞的细胞质中,AQP8在PC组中的阳性表达率为79.31%(69/87),而Non-PC组阳性表达率为18.39%(16/87),两组阳性表达差异有统计学意义(P<0.001),AQP8的表达与肿瘤瘤体直径(P<0.001)、分化程度(P<0.001)、淋巴结的转移(P<0.001)以及TNM分期(P<0.001)有显著相关性。qRT-PCR及Western blot显示PC组中AQP8 mRNA及其蛋白表达量均显著高于配对的Non-PC组,两组间差异有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论 AQP8的表达与胰腺导管腺癌的瘤体直径、分化程度、淋巴结的转移以及TNM分期均有显著相关性,AQP8的检测有助于胰腺导管腺癌患者病情严重程度评估。

基于AQP8和线粒体细胞凋亡途径相关性探讨马兰草乙醇提取物对活化的大鼠肝星细胞HSC-T6体外增殖和凋亡的影响

目的研究马兰草乙醇提取物在体外对转化生长因子-β1(TGF-β1)活化的大鼠肝星形细胞(HSC-T6)增殖、凋亡及基于AQP8蛋白靶点调控活化的HSC-T6细胞线粒体凋亡途径的影响,探究该药抗肝硬化腹水的作用机制。方法体外培养HSC-T6,用TGF-β1刺激24 h后,用不同浓度的马兰草乙醇提取物体外干预12、24、36、48 h,用MTT法检测马兰草乙醇提取物对活化HSC-T6存活率的影响,流式细胞术检测HSC-T6细胞凋亡和细胞线粒体膜电位的影响,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测AQP8mRNA的表达水平,Western Blot检测AQP8、Cty-C的蛋白表达。结果阴性对照组相比,各组OD值和细胞存活率均有下降,基质对照组的凋亡率下降(P<0.05),其余各组的凋亡率均有所上升(P<0.05),基质对照组和马兰提取物组(20、40μg/mL)的AQP8mRNA的表达水平明显上升(P<0.05);与基质组相比,大黄素各剂量组和马兰乙醇提取物各剂量组的细胞存活率均呈时间/剂量依赖性下降,大黄素组的早期凋亡有所上升(P<0.05),马兰提取物各剂量组各时期的凋亡增加的同时呈剂量依赖性升高(P<0.05),且线粒体细胞膜电位呈剂量依赖性显著下降(P<0.05)。Western Blot检测结果显示,Cty-C和AQP8的表达趋势一致,大黄素组的表达较较阴性对照组和基质对照组均有明显增多(P<0.05),马兰提取物组(40μg/mL)的表达量最多(P<0.05)。结论马兰草乙醇提取物在体外可抑制活化的HSC-T6增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与激活线粒体细胞凋亡途径和上调AQP8表达有关。

芪榔合剂对便秘模型小鼠结肠水通道蛋白4、8表达的影响

目的:观察芪榔合剂对功能性便秘模型小鼠结肠AQP4、AQP8表达的影响,以探讨芪榔合剂治疗功能性便秘的作用机制。方法:小鼠随机分为阴性对照组、便秘模型组和芪榔合剂大、小剂量组,除阴性对照组以外均造功能性便秘模型,造模成功后进行药物干预。7d后取小鼠近端结肠5cm,采用RT-PCR法、Western-blot法检测水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)、水通道蛋白8(aquaporin8,AQP8)的表达。结果:便秘模型组与阴性对照组比较AQP4、AQP8表达明显升高;芪榔合剂大小剂量组与便秘模型组比较,AQP4、AQP8表达明显降低。结论:便秘小鼠结肠的AQP4、AQP8表达明显升高,芪榔合剂对功能性便秘小鼠结肠AQP4、AQP8表达有一定的下调作用。