1,25(OH)_(2)D_(3)对Aβ_(1-42)诱导阿尔茨海默病细胞模型中细胞焦亡的抑制作用

目的探讨1,25(OH)_(2)D_(3)对Aβ_(1-42)诱导阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)细胞模型中细胞焦亡的抑制作用及其机制。方法将PC12细胞分为对照组、模型组、Caspase-1-siRNA组、NC-siRNA组、1,25(OH)_(2)D_(3)组、联合干预组。对照组仅用DMEM高糖培养基培养细胞;模型组用20μmol/L Aβ_(1-42)处理细胞以造模;Caspase-1-siRNA组先用50 nmol/L Caspase-1-siRNA处理细胞,再加入20μmol/L Aβ_(1-42);NC-siRNA组先用50 nmol/L NC-siRNA处理细胞,再加入20μmol/L Aβ_(1-42);1,25(OH)_(2)D_(3)组用100 nmol/L 1,25(OH)_(2)D_(3)干预后加入20μmol/L Aβ_(1-42);联合干预组先用50 nmol/L Caspase-1-siRNA处理细胞,然后用100 nmol/L 1,25(OH)_(2)D_(3)干预,最后加入20μmol/L Aβ_(1-42)。细胞免疫荧光检测凋亡相关斑点蛋白(ASC)蛋白的表达;Western blot检测细胞焦亡通路相关蛋白表达,包括:NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、天冬氨酸蛋白水解酶-1前体(pro-Caspase-1)、天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、消皮素D-N端(GSDMD-N)、IL-1β、IL-1β前体(pro-IL-1β)、IL-18和IL-18前体(pro-IL-18)蛋白;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色检测细胞膜通透性。结果与对照组相比,模型组ASC蛋白荧光强度增强(P<0.01),细胞焦亡通路相关蛋白表达均增加(P<0.05),细胞膜通透性变大(P<0.01)。与模型组相比,1,25(OH)_(2)D_(3)组和Caspase-1-siRNA组ASC蛋白荧光强度减弱(P<0.01),pro-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD-N、pro-IL-1β、IL-1β、pro-IL-18和IL-18蛋白表达均下调(P<0.01),细胞通透性减小(P<0.01)。与Caspase-1-siRNA组相比,联合干预组GSDMD-N和IL-18蛋白表达降低(P<0.01),细胞通透性减小(P<0.01)。结论Aβ_(1-42)能够诱导PC12细胞发生细胞焦亡现象。1,25(OH)_(2)D_(3)可以通过抑制Aβ_(1-42)诱导的PC12细胞发生焦亡来发挥其抗炎的神经保护作用,其机制与Caspase-1的抑制密切相关。

原发性激素敏感型肾病综合征患儿血清25-(OH)D_(3)的相关性分析

目的:探讨儿童原发性激素敏感型肾病综合征(SSNS)患儿血清25羟基维生素D_(3)[25-(OH)D_(3)]与T淋巴细胞亚群及实验室相关指标的表达水平特点及相关性。方法:选取2021年8月—2022年8月在山西省儿童医院肾内科初治的确诊为原发性肾病综合征且经过标准剂量激素治疗4周后尿蛋白阴转的SSNS组患儿45例。同时选取同期年龄、性别相匹配的健康对照组儿童30例。比较两组儿童血清25-(OH)D_(3)、T淋巴细胞亚群、血浆白蛋白(Alb)、血脂测定[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)]及24 h尿蛋白定量(24 h TPU)水平,分析25-(OH)D_(3)与T淋巴细胞亚群及实验室相关指标的相关性。结果:(1)SSNS组血清25-(OH)D_(3)、Treg细胞、CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)(%)、Alb水平均低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);24 h TPU、TC、TG、CD_(3)^(+)CD_(4)^(+)(%)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)SSNS组中,血清25-(OH)D_(3)与Treg细胞、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)、Alb水平呈正相关(β=0.335、0.458、0.343,P<0.05),与CD_(3)^(+)CD_(8)^(+)(%)、24 h TPU、TG、TC呈负相关(β=-0.437、-0.323、-0.325、-0.325,P<0.05)。结论:SSNS患儿存在25-(OH)D_(3)降低及T淋巴细胞亚群失衡,25-(OH)D_(3)与CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)、Treg细胞、24 h TPU、Alb、血脂代谢密切相关。

分析咳嗽变异性哮喘患儿血清25-(OH)D3与IL-4的表达水平及相关性

对咳嗽变异性哮喘患儿的血清25-羧基维生素D3[25-(OH)D3]水平及白细胞介素-4(IL-4)水平进行检测并对两种指标之间的相关性进行分析。方法 选取60例在宜兴市第二人民医院进行治疗的CVA患儿归入至CVA组,起始治疗时间为2021年10月,截止时间为至2022年3月,将30例同期参与研究的健康志愿儿童受试者归入至对照组,比较CVA组与对照组、轻度与重度CVA患儿以及预后良好组和预后不良组CVA患儿血清25-(OH)D3及IL-4水平,针对两者相关性进行分析。结果 相比于对照组,CVA组25-(OH)D3水平更低,IL-4更高(P<0.05)。与轻度组相比,重度组患儿有着更低的25-(OH)D3水平及更高的IL-4水平(P<0.05)。与预后不良组相比,预后良好组患儿有着更高的25-(OH)D3水平及更低的IL-4水平(P<0.05)。CVA患儿25-(OH)D3与IL-4水平具有相关性且呈现为负相关(P<0.05)。结论 咳嗽变异性哮喘患儿血清25-(OH)D3水平及IL-4水平具有相关性,检测25-(OH)D3水平及IL-4水平有助于临床对咳嗽变异性哮喘患儿病情严重程度进行判断,还可对预后进行评估。

1,25-(OH)_2-VD_3下调糖尿病肾病肾脏组织p38MAPK和胶原蛋白的表达

目的研究2型糖尿病肾间质纤维化中p38丝裂原激活蛋白激酶（p38MAPK）、Ⅲ型胶原蛋白（Col3）和Ⅳ型胶原蛋白（Col4）表达，及1，25-（OH）2-VD3对其表达的影响；探讨p38MAPK与Col3和Col4表达的相关性。方法以高糖高脂饮食联合30mg／kg链脲佐菌素（STZ）诱导大鼠2型糖尿病模型。将60只大鼠随机平均分为对照组、模型组、1，25-（OH）2-VD3治疗组[建模后给予6ng／（100g·d）1，25-（OH）2-VD3治疗]、胰岛素组（建模后给予2～3U胰岛素治疗）。干预8周后检测4组血清肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、24h蛋白尿水平；过碘酸希夫反应（PAS）染色观察肾脏病变情况；采用Western blot及免疫组织化学染色检测大鼠肾间质p38MAPK、CoD和Col4的表达；采用Spearman法进行相关性分析。结果与模型组相比，1，25-（OH）2-VD3治疗组和胰岛素治疗组血清肌酐、尿素氮、24h蛋白尿和肾间质受损面积均降低；与对照相比，模型组p38MAPK、Col3和Col4水平增加，1，25-（OH）2-VD3治疗组和胰岛素治疗组明显降低；相关性分析发现24h蛋白尿与p38MAPK、CoB和Col4免疫组织化学的结果呈正相关，p38MAPK的表达与Col3和Col4表达呈正相关。结论2型糖尿病大鼠肾间质组织p38MAPK、Col3和Col4表达上调，1，25-（OH）2-VD3可能通过p38MAPK下调Col3、Col4的表达改善糖尿病肾病肾组织纤维化。

肺心病急性加重期患者 1 ,2 5- (OH)_2 D_3改变及其原因的研究(英文)

目的 探讨肺心病急性加重期 1,2 5 - (OH) 2 D3 改变及其改变的原因。方法 测定了 4 8例患者血1,2 5 - (OH) 2 D3 、2 5 - (OH)D3 、甲状旁腺素 (PTH)和血钙磷镁 (SCa、SP、SMg)。结果 与对照组相比 ,病人组 1,2 5 - (OH) 2 D3 、2 5 - (OH)D3 、PTH、SCa和SMg显著降低 (P均 <0 .0 1)。 2 5 - (OH)D3 低于均值组的 1,2 5 -(OH) 2 D3 值显著低于 2 5 - (OH)D3 高于均值组者 (P <0 .0 5 ) ;PTH低于均值组的 1,2 5 - (OH) 2 D3 值显著低于PTH高于均值组者 (P <0 .0 1)。结论 肺心病急性加重期时 1,2 5 - (OH) 2 D3 显著降低 ;2 5 - (OH)D3 和PTH的降低是 1,2 5 - (OH) 2 D3 降低的原因。应予该病患者适量补充药物性维生素D。

1,25-(OH)_2D_3对肺纤维化大鼠中PI3K、AKT、mTOR表达的影响及其机制研究

目的观察1,25-(OH)_2D_3对特发性肺纤维化(IPF)大鼠中PI3K、AKT、m TOR表达的影响,并探讨其对IPF的作用机制。方法90只雄性SD大鼠随机分为模型组、治疗组及对照组,每组30只。模型组和治疗组按5 mg/kg的剂量气管内注射博来霉素,复制肺纤维化模型,对照组注入无菌生理盐水(200μl/只)。注射后第2天起,治疗组腹腔注射1,25-(OH)_2D_3(2μg/kg),模型组和对照组分别腹腔注射1,25-(OH)_2D_3溶剂(200μl/只)和无菌生理盐水(200μl/只),均隔天1次。各组于第14、21和28天分别处死10只,检测各组大鼠肺组织中羟脯氨酸的含量,实时聚合酶链反应(real-time PCR)和免疫组织化学方法分别从m RNA水平和蛋白质水平检测肺组织中PI3K、AKT、m TOR的表达。结果模型组和治疗组大鼠肺组织羟脯氨酸的含量,PI3K、AKT、m TOR 3种基因的转录表达和蛋白质表达量,在第14、21和28天均高于对照组(P<0.05),且治疗组中的上述指标,在各时间又均低于模型组(P<0.05)。结论IPF的发生发展过程中,PI3K-AKT-m TOR通路具有重要作用,1,25-(OH)_2D_3对IPF有一定的治疗作用,其机制可能是通过抑制PI3K-AKT-m TOR通路发挥其治疗作用。

1,25-(OH)_2D_3对糖尿病肾病大鼠血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨1,25-(OH)2D3对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织VEGFmRNA及蛋白质表达的影响。方法SD大鼠分为3组,对照组,糖尿病肾病(DN)组,1,25-(OH)2D3组。链脲菌素腹腔注射诱导DM大鼠模型,尿蛋白定量≥30mg/24h为DN大鼠,诱导成功后1,25-(OH)2D3组给予3ng/(100g.d)皮下注射。实验12周末检测大鼠体重、血糖、血肌酐、24h尿白蛋白。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测VEGFmRNA及蛋白质的表达。结果DN组大鼠体重、血糖、尿白蛋白,肾脏VEGFmRNA及蛋白质的表达,肾小球细胞数,细胞外基质(ECM)均高于对照组(P<0.01)。与DN组相比,1,25-(OH)2D3组大鼠体重、血糖、尿白蛋白,肾脏VEGFmRNA及蛋白质的表达,肾小球细胞数,ECM聚积显著降低(P<0.01或P<0.05)。尿VEGF与尿白蛋白呈正相关(rs=0.41,P=0.037),与体重、血糖、血肌酐无相关性(rs分别为0.18,0.13,0.21,P>0.05)。结论1,25-(OH)2D3可减轻DN大鼠尿白蛋白的排泄,抑制肾小球系膜增殖,降低VEGFmRNA及蛋白质的表达。

1,25-(OH)_2-D_3对抗菌肽表达调控的影响

通过外源途径调控机体内源性抗菌肽表达,以增强动物的防御能力和提高动物的生产性能是实现"健康养殖"的一条新型途径。生物体受病原微生物入侵后可由TLR介导内源性抗菌肽表达。结果表明:由PAMP诱发抗菌肽合成机制的模式有TLR-NF-κB和TLR-VDR 2大信号传导通路。TLR-VDR通路的基本过程是激活相应TLR→诱导Cyp27B1表达→产生1,25-(OH)2-D3→激活VDR→识别抗菌肽基因VDRE序列而调节抗菌肽表达。1,25-(OH)2-D3作为TLR-VDR通路的重要调节物质,可诱导抗菌肽在许多细胞中表达并与其他物质对抗菌肽表达起协同作用。

1,25-(OH)_2D_3对肺纤维化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞中Ca^(2+)浓度和PI3K/AKT/mTOR通路的影响

目的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种慢性炎症性疾病,病因不明,缺乏有效的治疗方法。文中旨在探讨肺泡Ⅱ型上皮细胞中Ca^(2+)和PI3K/AKT/mTOR通路在大鼠IPF中的作用,以及1,25-(OH)_2D_3对Ca^(2+)浓度和PI3K/AKT/mTOR通路的影响。方法 150只雄性SD大鼠随机分为:预防组(对照组Ⅰ、模型组Ⅰ、给药组Ⅰ,每组20只)和治疗组(对照组Ⅱ、模型组Ⅱ、给药组Ⅱ,每组30只)。对照组Ⅰ/Ⅱ行气管暴露手术,气管内给以200μL/只的无菌等渗盐水,并分别于第2和14天开始腹腔注射等渗盐水(200μL/只);模型组Ⅰ/Ⅱ气管内灌注博来霉素(5 mg/kg),并分别于手术后第2和14天开始腹腔注射维生素D3的溶剂(0.1%乙醇和99.9%的丙二醇,1μL/g体重);给药组Ⅰ/Ⅱ气管内灌注博来霉素(5 mg/kg),并分别于手术后第2和14天开始腹腔注射1,25-(OH)_2D_3(2μg/kg体重)。大鼠气管内注射博来霉素建立IPF模型,给药组腹腔注射1,25-(OH)_2D_3进行预防和治疗。检测各组大鼠肺组织中羟脯氨酸的含量,分离肺泡Ⅱ型上皮细胞并用Fluo-3AM荧光负载,激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca^(2+)浓度。RT-PCR方法检测PI3K、AKT、mTOR mRNA的表达水平。结果模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ中大鼠肺组织中羟脯氨酸的含量、肺泡Ⅱ型上皮细胞内Ca^(2+)浓度以及PI3K、AKT、mTOR mRNA表达,在各时间点与相应对照组Ⅰ/Ⅱ相比均明显升高(P<0.05或P<0.01);给药组Ⅰ/Ⅱ与模型组Ⅰ/Ⅱ相比,上述指标均有显著降低(P<0.05或P<0.01)。模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ中Ca^(2+)浓度与PI3K、AKT、mTOR mRNA表达之间具有显著正相关(r=0.598 8、r=0.623 0、r=0.6603,P<0.01;r=0.7012、r=0.6323、r=0.7403,P<0.01)。结论 PI3K-AKT-mTOR通路在大鼠IPF的发生发展中起重要作用,1,25-(OH)_2D_3可以降低肺泡Ⅱ型上皮细胞内Ca^(2+)的浓度,抑制PI3K-AKT-mTOR通路,进而抑制IPF的发生发展。

1,25-(OH)_2D_3及LPS对2型糖尿病肾病尿毒症患者单核细胞维生素D受体表达的影响

目的探讨1,25-(OH)2D3及TLR4配体(脂多糖,LPS)对2型糖尿病(T2DM)和糖尿病肾病(diabetic ne-phropathy,DN)尿毒症患者血清干预的单核细胞维生素D受体(VDR)表达的影响,进一步探索1,25-(OH)2D3在T2DM和DN炎症性免疫反应中的作用。方法分离研究对象(健康对照组、T2DM组和DN尿毒症组)外周血血清,孵育THP-1单核细胞,然后于含或不含10-7mol/L的1,25-(OH)2D3培养液中培养48 h后,再用终浓度为1μg/ml的LPS干预24 h,收集单核细胞和培养上清。采用RT-PCR检测VDR mRNA表达,Western blot、免疫荧光检测THP-1单核细胞内VDR蛋白表达。ELISA法检测细胞培养上清IL-6和IL-10浓度。结果与正常对照组比较,在LPS的刺激下T2DM组和DN尿毒症组THP-1单核细胞内VDR mRNA水平下调[对照组(0.99±0.25);T2DM组(0.65±0.24);DN尿毒症组(0.62±0.27),P<0.05];DN尿毒症组THP-1单核细胞内VDR蛋白表达比正常对照组和T2DM组显著下调[对照组(0.48±0.05);T2DM组(0.50±0.06);DN尿毒症组(0.20±0.01),P<0.01],且LPS增强以上患者血清孵育的THP-1单核细胞炎症细胞因子IL-6的分泌[对照组(15.13±1.61);T2DM组(24.06±2.92);DN尿毒症组(70.77±5.48),P<0.05];而1,25-(OH)2D3可部分阻断上述作用。结论 LPS能下调T2DM和DN尿毒症患者单核细胞VDR mRNA和蛋白的表达,引起促炎和抗炎细胞因子失调。1,25-(OH)2D3可部分逆转LPS的作用,对T2DM和DN尿毒症可能具有一定的保护作用。

慢性阻塞性肺疾病患者血清25-(OH) D3水平与肺功能及免疫功能的相关性研究

目的了解慢阻肺患者中维生素D缺乏情况,同时探讨维生素D水平与慢阻肺肺功能、免疫功能的相关性。方法 122例慢阻肺稳定期患者和117例健康对照组,比较两组血清25-(OH)D3水平及两组维生素D缺乏的患病率。分析慢阻肺稳定期患者肺功能与血清25-(OH)D3水平关系,分析两组免疫功能与血清25-(OH)D3的关系。结果慢阻肺组平均血清25-(OH)D3水平为12.04±5.88 ng/mL,维生素D缺乏患病率为91.80%,维生素D不足占7.38%,足够占0.82%。对照组平均血清25-(OH)D3水平为18.15±6.45 ng/mL,维生素D缺乏患病率为64.10%,维生素D不足占31.63%,足够占4.27%。两组的血清25-(OH)D3水平有差异(P<0.01),维生素D缺乏的患病率也存在差异。慢阻肺组患者血清25-(OH)D3水平与FEV_1%、FEV_1/FVC呈正相关(r=0.269/0.299,P=0.013/0.05)。患者血清25-(OH)D3水平与CD4及CD4/CD8值呈正相关(r=0.270/0.259,P=0.012/0.017)。结论慢阻肺患者的血清25-(OH)D3水平较正常人群低。血清25-(OH)D3水平与慢阻肺患者肺功能严重程度相关。与T淋巴细胞分类也具有相关性。

1,25(OH)_2D_3对甲状旁腺素诱导的肾小管上皮细胞转分化和TGF-β_1的表达的影响

目的:探讨1,25(OH)2D3对甲状旁腺素(PTH)诱导的肾小管上皮细胞转分化和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)培养在含50 mL/L FCS的DMEM/F12培养液中。对照组:加入等体积含50 mL/L FCS的DMEM/F12培养液;PTH刺激组:加入终浓度为10-10 mol/L PTH的含50 mL/L FCS的DMEM/F12培养液;PTH+1,25(OH)2D3干预组:加入10-10 mol/L PTH,同时加入不同浓度(10-10、10-9、10-8、10-7 mol/L)的1,25(OH)2D3。刺激HK-2细胞48 h。半定量RT-PCR法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1的基因表达;Western blot法检测细胞中α-SMA和TGF-β1的蛋白表达;免疫细胞化学法检测细胞中α-SMA的表达;ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β1的含量。结果:半定量RT-PCR结果显示,对照组HK-2细胞中几乎无α-SMA的mRNA表达,仅有少量的TGF-β1 mRNA表达;PTH刺激组α-SMA和TGF-β1mRNA表达量与对照组比较明显增加;PTH+1,25(OH)2D3干预组表达量比PTH刺激组显著降低,且随着1,25(OH)2D3浓度的升高呈一定的剂量依赖性(P<0.05)。Western blot结果显示,对照组HK-2细胞中无α-SMA的蛋白表达,仅有少量的TGF-β1蛋白表达;10-10 mol/L的PTH能够明显诱导HK-2细胞中α-SMA的蛋白表达,增加TGF-β1的蛋白表达量;PTH+1,25(OH)2D3干预组,α-SMA和TGF-β1的蛋白表达量比PTH刺激组显著降低(P<0.05)。免疫细胞化学法结果显示,对照组几乎无α-SMA阳性表达的细胞,PTH刺激组可见大量细胞α-SMA表达阳性;PTH+1,25(OH)2D3干预组α-SMA表达阳性的细胞数明显低于PTH刺激组(P<0.05)。ELISA结果显示,对照组细胞上清液中可检测到少量的TGF-β1,PTH刺激组含量显著升高,PTH+1,25(OH)2D3干预组与PTH刺激组比较含量明显降低(P<0.05)。结论:1,25(OH)2D3能够部分拮抗PTH诱导的HK-2细胞转分化和TGF-β1的表达。

1，25-(OH)2D3负向调节糖尿病模型大鼠血管紧张肽活性

目的研究1,25-(OH)2D3对糖尿病(DM)模型大鼠肾素-血管紧张肽-醛甾酮系统(RAAS)活性的影响及对肾小球足细胞的保护作用。方法将40只SD大鼠分为正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)、血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)灌注组(C组)、AngⅡ+1,25-(OH)2D3灌注组(D组)。B、C、D组均腹腔注射链脲菌素(STZ)制作DM大鼠模型。C组皮下埋置渗透性微量泵,给予AngⅡ400ng·kg-1·min-1;D组经两条渗透性微量泵通路分别给予AngⅡ(400ng·kg-1·min-1)+1,25-(OH)2D3(450ng·kg-1·min-1)。两组均连用10周。检测大鼠血糖(BG)、收缩压(SBP)、24h尿蛋白定量(TP)和肾素活性(PRA)、血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)和醛甾酮(Ald)水平。检测尿沉渣足细胞特异性标志蛋白podocalyxin以检测尿液足细胞(UPC)水平,免疫荧光染色观察肾小球上皮细胞蛋白-1(GLEPP1)的分布。结果B组BG、SBP、UPC、TP、PRA、AngⅡ、Ald均较A组明显升高。C组SBP、UPC、TP、PRA、AngⅡ、Ald较B组均明显升高(P<0.05或P<0.01)。D组SBP、UPC、TP、AngⅡ、Ald较C组明显降低,D组AngⅡ较B组明显降低。病理组织肾小球荧光染色示A组GLEPP1正常分布,C组呈明显缺失,B和D组亦缺失。UPC与TP、AngⅡ呈正相关(rs=0.51,0.35,P<0.01,P<0.05)。结论1,25-(OH)2D3可能是RAAS的负向调节因子,通过下调RAAS活性,防止足细胞脱落排泄介导其肾保护作用。

产酶溶杆菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与表达

利用PCR方法从OH11菌株中克隆到β-1,3-葡聚糖酶基因,通过同源性比较发现其推测产物与产酶溶杆菌C3菌株和N4-7菌株的β-1,3-葡聚糖酶有90%以上的同源性。该基因经NdeⅠ、XhoⅡ或HindⅢ酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET21a(+)和载体pET30a(+)上构建重组质粒,并分别转化宿主菌BL21(AI)和BL21(DE3)产生表达菌株。表达菌株BLGluA和BLGluC经IPTG诱导后分别产生相对分子量约为29 000(GluA蛋白)和44 000(GluC蛋白)的蛋白。酶活性和抑菌活性测定结果表明,GluA蛋白和GluC蛋白能将海带多糖水解,在海带多糖培养基上产生透明的水解圈,并对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用,具有一定的生物防治作用。

血清25-(OH)D_3与自身免疫性甲状腺疾病体液免疫的相关性

目的:探讨自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者血清中25-(OH)D3与健康人群有无差异,及25-(OH)D3与AITD患者体液免疫紊乱之间的关系。方法:选取Graves病(GD)50例、桥本甲状腺炎(HT)30例,健康人20例,检测样本血清25-(OH)D3、甲状腺自身抗体(TSAb、TGAb、TPOAb)及甲状腺功能,并对25-(OH)D3水平与其他检测指标进行相关分析。结果:GD组及HT组25-(OH)D3均显著低于对照组,GD组25-(OH)D3与TSAb、FT3、FT4呈负相关,与TSH呈正相关;HT组25-(OH)D3与TGAb、TPOAb、TSH呈负相关,与FT3、FT4呈正相关。结论:AITD患者存在低25-(OH)D3血症,与患者的体液免疫紊乱密切相关。

1,25-(OH)_2D_3对糖尿病大鼠肾脏Nephrin蛋白表达的影响

目的探讨1,25-(OH)2D3对糖尿病(DM)大鼠肾脏Nephrin蛋白表达的影响。方法Wistar大鼠分为对照组、DM组、1,25-(OH)2D3组。建立糖尿病大鼠模型,实验12周末观察各组血尿、蛋白尿、肾组织光镜电镜、免疫组织化学,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测其肾皮质NephrinmRNA及蛋白的表达。结果与对照组及1,25-(OH)2D3组相比,DM组大鼠尿红细胞及尿蛋白排泄明显增多,肾小球细胞数亦增加(P<0.01,0.05),NephrinmRNA及蛋白质表达明显下调(Pa<0.01)。1,25-(OH)2D3组肾小球细胞数、NephrinmRNA及蛋白质表达与对照组相比无统计学差异(Pa>0.05)。结论1,25-(OH)2D3可减轻血尿、蛋白尿,上调NephrinmRNA及蛋白质的表达而有肾保护作用。

1,25-(OH)_2D_3对大鼠特发性肺纤维化的影响及机制

目的观察1,25-(OH)_2D_3对大鼠特发性肺纤维化(IPF)发生、发展的影响,探讨其作用机制。方法 90只雄性SD大鼠随机分为模型组、治疗组和对照组,每组30只。模型组和治疗组经气管内注射博来霉素5 mg/kg建立IPF模型,对照组注射生理盐水200μL/只。自注射后第2天开始,模型组腹腔注射1,25-(OH)_2D_3溶剂(0.1%乙醇、99.9%丙二醇,200μL/只),治疗组腹腔注射1,25-(OH)_2D_32μg/kg,对照组腹腔注射生理盐水200μL/只,均隔天1次。各组于给药后第14、21、28天分别处死10只大鼠,检测肺组织羟脯氨酸含量;分离培养肺成纤维细胞,采用Fluo-3AM荧光负载,激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca^(2+)浓度;采用Real-time PCR法检测肺成纤维细胞PI3K、AKT、mTOR mRNA表达。结果给药第14、21、28天,模型组肺组织羟脯氨酸含量、肺成纤维细胞内Ca^(2+)浓度及PI3K、AKT、mTOR mRNA表达均高于对照组,治疗组上述指标在各时间点均低于模型组,组间比较P<0.05或<0.01。模型组和治疗组肺成纤维细胞内Ca^(2+)浓度与PI3K、AKT、mTOR mRNA表达均呈正相关(r分别为0.784、0.647、0.805,P均<0.01)。结论 1,25-(OH)_2D_3可抑制IPF的发生、发展;降低肺成纤维细胞内Ca^(2+)浓度、抑制PI3K-AKT-mTOR通路可能是其作用机制。

毛细支气管炎患儿血清25-(OH)-D3水平、尿LTE4水平变化的临床意义及维生素D3干预对尿LTE4的影响

目的探讨毛细支气管炎患儿血清25-(OH)-D3水平、尿LTE4水平变化的临床意义及维生素D3干预对尿LTE4的影响。方法选择毛细支气管炎急性期患儿76例作为毛细支气管炎组,另选取同期在我院儿童保健门诊体检的60例健康儿童作为对照组。毛细支气管炎组患儿给予常规治疗,进入恢复期后,随机分为维生素D3干预组和未干预组,每组各38例,干预组予维生素D3滴剂400IU/天口服,未干预组不予处理,随访6个月。分别于入院次日(急性期)、维生素D3干预前一日(恢复期)检测各组患儿血清25-(OH)-D3和尿LTE4水平,并干预6个月后检测干预组及未干预组尿LTE4水平。结果毛细支气管炎重型及轻型患儿血清25-(OH)-D3水平均明显低于对照组;而尿LTE4则明显高于对照组;重型患儿血清25-(OH)-D3水平明显低于轻型患儿,尿LTE4水平明显高于轻型(P<0.05);急性期及恢复期血清25-(OH)-D3水平均低于对照组,尿LTE4水平明显高于对照组;急性期25-(OH)-D3水平明显低于恢复期;尿LTE4水平则明显高于恢复期(P均<0.01)。血清25-(OH)-D3与毛细支气管炎病情轻重呈负相关(r=-0.68,P<0.01),尿LTE4与病情轻重呈正相关(r=0.76,P<0.01);血清25-(OH)-D3与尿LTE4呈负相关(r=-0.63,P<0.05)。干预后,干预组及未干预组尿LTE4水平比较,两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论毛细支气管炎患儿急性期维生素D3干预对尿LTE4无下调作用。

1,25-二羟维生素D3联合ARB治疗早期糖尿病肾病疗效观察

目的:观察1,25-二羟维生素D3联合ARB治疗早期糖尿病肾病的临床疗效。方法:84例符合早期糖尿病肾病诊断标准的患者按性别、年龄配对再随机分为四组(对照组及治疗A组、治疗B组、治疗C组各21例)。所有入组患者均予以优化糖尿病治疗,治疗A组在常规治疗基础上加骨化三醇胶丸0.25μg每日1次,口服;治疗B组加厄贝沙坦片75mg每日1次,口服;治疗C组加骨化三醇胶丸0.25μg每日1次,联合厄贝沙坦片75mg每日1次,口服,疗程3个月。观察各组患者治疗前后空腹血浆血糖(FPG)及餐后2h血浆血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、尿微量白蛋白(U-mAlb)、尿β2微球蛋白(β2-MG),超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血浆肾素(PRA)等。结果:治疗C组hs-CRP与对照组、治疗A组及治疗B组其间差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗A组、治疗B组及治疗C组U-mAlb及PRA值分别于治疗前相比有明显下降,其前后间差异有统计学意义(P<0.05);治疗A组及治疗C组U-β2MG值分别于治疗前相比有明显下降,其前后间差异亦有统计学意义(P<0.05);治疗C组在U-mAlb、U-β2MG及PRA值变化方面分别与对照组、治疗A组及治疗B组相比其间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:联合应用1,25-二羟维生素D3及ARB可有效减轻或逆转早期糖尿病肾病患者肾小球及肾小管的损伤,其机制可能与联合用药加强抑制炎症反应及抑制RASS系统作用有关。

1,25-(OH)_2D_3对糖尿病大鼠ZO-1表达的影响

目的观察糖尿病(DM)大鼠肾小球ZO-1蛋白的表达,1,25-(OH)2D3对ZO-1蛋白表达及分布的影响。方法Wistar大鼠随机分为3组:对照组、糖尿病组(DM组)、1,25-(OH)2D3组。链脲菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病动物模型,1,25-(OH)2D3组在糖尿病建立时即开始渗透性微量泵按3ng/100g·d皮下给予1,25-(OH)2D3,给药10周处死小鼠,检测血糖、半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CysC)、尿红细胞、24h尿蛋白定量(24hUPE);光镜观察肾小球细胞数,细胞外基质(ECM)聚积;Western印迹检测ZO-1蛋白的表达;免疫金荧光染色电镜观察肾小球ZO-1分布的改变。结论DM组大鼠CysC、尿红细胞、24hUPE均高于1,25-(OH)2D3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。1,25-(OH)2D3组大鼠较DM组肾小球细胞数减少,细胞外基质聚积减轻(P<0.05或P<0.01)。Western印迹示1,25-(OH)2D3组和对照组肾小球ZO-1表达无显著差异,均明显高于DM组(P<0.01)。免疫金荧光染色显示DM组肾小球ZO-1表达缺失及易位分布明显,1,25-(OH)2D3组ZO-1的表达缺失及易位分布较轻。结论1,25-(OH)2D3可减少尿蛋白的排泄,抑制肾小球细胞数及细胞外基质的增殖,增加足细胞特异蛋白ZO-1的表达,减少其易位,对肾脏有保护作用。