苗药矮地茶的HPLC指纹图谱研究

目的:建立苗药矮地茶的HPLC指纹图谱分析方法。方法:采用HPLC法,Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温35℃,检测波长为250 nm。结果:对10批贵州不同产地样品进行了分析,确定了32个共有峰,构成了矮地茶的HPLC指纹图谱,其中4个共有峰得到指认,分别为没食子酸、岩白菜素、绿原酸、槲皮苷。结论:此方法简便,准确,重复性好,可用于矮地茶的HPLC指纹图谱测定,为今后规范其药材资源及质量评价提供科学依据。

半夏、水半夏RAPD分析及构建特异DNA探针

目的:建立鉴定半夏、水半夏的分子标记方法。方法:利用22条随机引物,对四川两种半夏、广西两种水半夏基因DNA进行RAPD扩增,并对其差异条带进行测序、标记构建探针和Southern杂交。结果:半夏、水半夏基因DNA之间扩增的差异条带较多。通过测序、标记构建探针和杂交确认一半夏特异的标记分子。结论:通过RAPD和构建特异DNA探针能准确鉴别半夏和水半夏。

真伪半夏二维相关红外光谱法的鉴别研究

本文采用红外光谱法 (FTIR)并结合二维相关光谱分析技术 (Two DimensionalCorrelationSpectroscopy) ,对正品半夏和伪品水半夏进行了无损快速鉴别研究。半夏和水半夏在一维谱图上差别不显著 ,而在二维谱图上具有显著性的差别。在 12 2 0～ 170 0cm- 1 波段范围内 ,半夏在同步图上有 1个较强的自动峰 ,在 14 10cm- 1 附近。而水半夏不仅在 14 10cm- 1 有一个比正品半夏较强的自动峰 ,还在 15 4 0和 16 80cm- 1 附近出现了自动峰 ;同样在 94 0～ 12 2 0cm- 1 波段范围内半夏有 3个较强的自动峰 ,分别在 980 ,10 80和 115 0cm- 1 附近 ,而水半夏只有 2个较强的自动峰 ,在 10 80和 115 0cm- 1 附近。在 980cm- 1 处未出现自动峰。两个波段的异步谱也显示出较大的差别。结果表明 :正品半夏和伪品水半夏的二维相关谱可以用于药材真伪品的鉴别依据。该法快速、准确 ,为中药材的快速鉴别提供了一种新的方法和手段。

中药矮地茶不同洗脱部位抗病毒活性研究

采用细胞体外抗病毒实验CPE法结合CCK-8试剂盒,以TI值(治疗指数)为研究指标,研究矮地茶及其不同洗脱部位对呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒(HSV-1)、柯萨奇病毒(COX-B5)和手足口病毒(EV71)的抑制作用。结果表明矮地茶对RSV、HSV-1、COX-B5有显著杀灭作用。70%乙醇部位对COX-B5直接杀灭效果较好,TI值为16.709,较阳性对照药利巴韦林(TI值为17.482)作用效果相差不大。说明矮地茶提取物具有抗RSV、HSV-1、COX-B5的活性。

苦丁茶对NO_2^-和·OH清除作用的体外试验研究

以粗壮女贞苦丁茶[Ligustrum rbutum(Roxb)B lum e]、大叶冬青苦丁茶(IlexlartifoliaThunb)为试材,在体外模拟胃液pH条件下,对比研究了不同冲泡条件下苦丁茶浸出液对NO2-和.OH的清除效果。结果表明,不同处理的茶样对NO2-的清除作用多随冲泡温度上升或冲泡时间延长而增强;磨碎冲泡的清除效果比直接冲泡好;大叶冬青苦丁茶对NO2-的清除作用优于粗壮女贞苦丁茶。但粗壮女贞苦丁茶对.OH的清除作用较大叶冬青苦丁茶好,直接冲泡对.OH的清除效果略比磨碎冲泡好,较好的冲泡温度在80~90℃。

半夏药材中蛋白质IEF电泳图谱的研究

目的通过对半夏及其近缘植物的蛋白质电泳图谱比较,研究半夏药材的电泳鉴别方法。方法应用等电聚焦(isoe lectrofocus ing,IEF)技术,对不同产地半夏及其近缘植物块茎进行比较。结果半夏具有稳定的IEF电泳图谱,显示具有8条特征蛋白质带,并测定了其等电点(P I)值,半夏与其几种近缘植物的IEF谱有明显的区别。结论半夏IEF电泳图谱可作为半夏药材的鉴别依据,半夏特征蛋白质的P I值为半夏的鉴定和蛋白质分离纯化提供了参数。

模拟增温对紫金牛光响应和生物量分配的影响

本研究采用模拟增温的方式,探讨了全球气候变暖对阴生植物紫金牛光响应和生物量分配的影响。结果表明:模拟增温显著提高了紫金牛的光补偿点和叶绿素含量,而对最大净光合速、饱和光强和暗呼吸速率等参数无显著影响。模拟增温显著增加了紫金牛的分株数,增幅达25%;但对株高无显著影响。增温还导致紫金牛的总生物量、地上生物量显著增加,根冠比显著降低。其中叶和地上茎的生物量(干重)增幅分别达到35.54%和31.60%,生物量(鲜重)增幅分别达到25.3%和18.9%。

半夏水半夏叶片细胞叶绿体超微结构的研究

本文采用电子显微镜对半夏Pinelliaternata(Thunb .)Breit.和水半夏Typhoniumflagelliforme(Lodd .)Blume叶片细胞叶绿体超微结构进行研究 ,发现它们有些差异。这些差异可以作为半夏与水半夏鉴别的依据。

基于ITS2序列的矮地茶药材基因识别

目的:采用ITS2序列鉴定从市场上收集的矮地茶药材,为保证矮地茶用药安全提供可靠的基因识别方法。方法:收集矮地茶药材基原物种紫金牛及其混伪品共17个物种56份样品,并从NCBI下载6条相关序列,分析上述物种ITS2序列的种内和种间变异位点、Kimura 2-parameter(K2P)距离,以邻接(NJ)法构建系统树,建立基于ITS2序列的矮地茶药材DNA条形码鉴定技术方法。同时,从市场上随机收集15份矮地茶药材样品,通过ITS2序列比对和构建系统聚类树判定药材真伪。结果:紫金牛ITS2序列种内K2P距离最大值(0.0059)和平均值(0.0010)均明显小于其与混伪品种间K2P距离最小值(0.0364)和平均值(0.1159),系统NJ树能将紫金牛与混伪品明显区分开;15份矮地茶药材的序列比对和系统NJ树鉴定结果表明,其中13份为正品,2份为混伪品。结论:本研究建立了基于ITS2序列的矮地茶药材DNA条形码鉴定技术方法,为快速检测市场流通的矮地茶药材真伪提供了可借鉴的基因识别方法。

紫金牛的资源分布调查

通过野外资源调查的方法,对四川省彭州市紫金牛科植物紫金牛Ardisia japonica(Thumb.)Blume的资源分布状况,资源量进行实地抽样调查,并走访了其民间利用历史及方法。归纳概述了彭州市紫金牛的地理分布、资源量、药用价值及其观赏性,结合文献资料为紫金牛持续合理开发利用提出有效的建议和措施。

平地木化学成分及含量分析

目的:研究平地木的化学成分,测定平地木中化学成分的含量。方法:利用硅胶、D101大孔吸附树脂、C18等色谱方法分离,制备色谱仪纯制,用质谱(mass spectrometry,MS)、紫外光谱(ultraviolet and visible spectrum,UV)、红外图谱(infrared spectroscopy,IR)、核磁共振谱(nuclear magnetic resonance spectroscopy,NMR)等波谱方法鉴定其分子结构。以自制的化合物2单体为对照品,用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定平地中化合物2的含量。结果:从平地木中发现四种化合物,分别为2-甲基-5-[10′(顺)-十五烯基]-间苯二酚(1),2-甲基-5-[8′(顺)-十三烯基]-间苯二酚(2),2-甲基-5-十三烷基间苯二酚(3),2-甲基-5-十五烷基间苯二酚(4)。平地木根、茎、叶中化合物2的含量分别为16.79 mg·g、19.39 mg·g和24.59 mg·g。结论:化合物1为新化合物,化合物3和化合物4为首次从平地木中发现。

一测多评法定量分析半夏及其混伪品中的4种核苷类成分

目的建立一测多评法测定半夏Pinellia ternate及其混伪品天南星Arisaema erubescens、水半夏Typhonium flagelliforme和虎掌南星Pinellia pedatisecta中尿苷、腺嘌呤、鸟苷及腺苷的含量方法。方法利用高效液相色谱法,采用Shim-pack Scepter C_(18)-120色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相10%乙腈-水,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;检测波长260 nm;柱温20℃。以腺苷为内标,建立尿苷、腺嘌呤和鸟苷的相对校正因子,同时采用外标法和一测多评法测定多批次药材中4种成分的含量,验证一测多评法的准确性和可行性。结果尿苷、腺嘌呤、鸟苷及腺苷在各自线性范围内线性关系良好(r>0.9999),平均加样回收率95.40%~104.02%,一测多评法和外标法测得的含量无显著差异(RSD<3%),不同产地的半夏中4种核苷含量显示有明显差异。除天南星外,基于核苷的含量测定结果结合化学计量分析可以很好地区分半夏、水半夏和虎掌南星。结论该方法简便准确度高,可为半夏的质量控制和评价提供参考。