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含Arg-Gly-Asp肽与仿生PLGA-(ASP-PEG)材料结合的实验研究 被引量:2
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作者 宋玉林 郑启新 +1 位作者 郭晓东 郝杰 《生物医学工程学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期860-863,共4页
设计合成含Arg-Gly-Asp[Arg(R)-精氨酸,Gly(G)-甘氨酸,Asp(D)-天冬氨酸]的非病毒基因载体的肽(K16-GRGDSPC)(K-赖氨酸,S-丝氨酸,P-脯氨酸,C-半胱氨酸),用其作材料聚(丙交酯-co-乙交酯)-(天冬氨酸-聚乙二醇)交替预聚物[PLGA-(ASP-PEG)]... 设计合成含Arg-Gly-Asp[Arg(R)-精氨酸,Gly(G)-甘氨酸,Asp(D)-天冬氨酸]的非病毒基因载体的肽(K16-GRGDSPC)(K-赖氨酸,S-丝氨酸,P-脯氨酸,C-半胱氨酸),用其作材料聚(丙交酯-co-乙交酯)-(天冬氨酸-聚乙二醇)交替预聚物[PLGA-(ASP-PEG)]的表面修饰。合成K16-GRGDSPC,将PLGA-(ASP-PEG)制成A、B、C三块薄片。薄片A、B与交联剂反应,反应后的薄片A再与肽反应,薄片C作为对照。质谱仪(MS)、高效液相色谱分析仪(HPLC)检测肽的分子量及纯度;x线光电子能谱法(XPS)检测材料表面硫元素;分光光度仪检测残液未反应肽含量。HPLC检测肽的纯度为94.13%,MS检测肽分子量为2741.26。XPS检测改性薄片A中硫元素结合能为164eV,碳、硫元素的含量比值(C/S)为99.746∶0.1014;反应后薄片B中硫元素结合能为162eV与164eV,C/S为99.574∶0.4255;薄片C中无硫元素。残液管OD值为0.069,薄片A表面接枝肽密度为0.04mg/mm2。提示通过交联剂可将所合成的肽K16-GRGDSPC结合到仿生材料PLGA-(ASP-PEG)表面。 展开更多
关键词 arg-gly-asp 仿生 表面修饰 组织工程
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细胞粘附肽Arg-Gly-Asp的合成与生物活性检测 被引量:1
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作者 王巍 王丽萍 +1 位作者 李然 石玉红 《长春大学学报》 2006年第6期65-68,共4页
采用固相多肽合成法合成Ag-G ly-Asp(RGD)三肽,以天门冬氨酸计RGD三肽收率为75%,采用MTT法进行合成肽RGD抑制人纤维肉瘤细胞HT1080转移机理方面的研究,证实了人工合成的RGD肽能抑制人纤维肉瘤细胞HT1080与纤维连接蛋白(FN)的粘附。
关键词 arg-gly-asp 多肽 固相合成法 粘附
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Arg-Gly-Asp(RGD)Modified Biomimetic Polymeric Materials
3
作者 Xufeng NIU, Yuanliang WANG +2 位作者 Yanfeng LUO Juan XIN Yonggang LI 《Journal of Materials Science & Technology》 SCIE EI CAS CSCD 2005年第4期571-576,共6页
The new generation of biomaterials focuses on the design of biomimetic polymeric materials that are capable of eliciting specific cellular responses and directing new tissue formation. Since Arg-Gly-Asp (RGD) sequen... The new generation of biomaterials focuses on the design of biomimetic polymeric materials that are capable of eliciting specific cellular responses and directing new tissue formation. Since Arg-Gly-Asp (RGD) sequences have been found to promote cell adhesion in 1984, numerous polymers have been functionalized with RGD peptides for tissue engineering applications. This review gave the advance in RGD modified biomimetic polymeric materials,focusing on the mechanism of RGD, the surface and bulk modification of polymer with RGD peptides and the evaluation in vitro and in vivo of the modified biomimetic materials. 展开更多
关键词 arg-gly-asp (RGD) Biomimetic materials POLYMER
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一种新的含有Arg-Gly-Asp三肽序列蛇毒解离素的分离纯化及生物活性研究 被引量:3
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作者 柯璐琳 陈艺云 +4 位作者 赵宁宁 张琼 陈婉琼 邱秀梁 许云禄 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期897-905,共9页
蛇毒是一种具有特殊药理活性的物质,其含有一系列能拮抗整合素的小分子多肽,称之为解离素。解离素可以阻断整合素依赖性血小板聚集、肿瘤生长和肿瘤转移等活性。从江浙短尾蝮蛇毒(Gloydius brevicaudus venom, GBV)中分离纯化出含有精... 蛇毒是一种具有特殊药理活性的物质,其含有一系列能拮抗整合素的小分子多肽,称之为解离素。解离素可以阻断整合素依赖性血小板聚集、肿瘤生长和肿瘤转移等活性。从江浙短尾蝮蛇毒(Gloydius brevicaudus venom, GBV)中分离纯化出含有精氨酸、甘氨酸和天门冬氨酸即RGD序列(Arg-Gly-Asp)的解离素,并鉴定其理化性质,测定其生物活性。应用Superdex 75凝胶过滤色谱,从江浙短尾蝮蛇粗毒中分离蛋白峰,参照Born方法对分离成分进行活性筛选,活性成分蛋白峰再通过Sephadex G-25凝胶过滤、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换色谱和Lichrospher C18反相色谱纯化分离得纯品; SDS-PAGE (Tris-Tricine系统)凝胶电泳及高效液相色谱分析活性成分的纯度; Bradford法测定蛋白浓度;凝胶成像法及质谱法测定其相对分子质量;盘状等电聚焦电泳测定等电点; Rick方法测定蛋白酶活力;自动电位滴定测定磷脂酶A活力;氨基酸测序结果用BLAST程序进行同源性比较; Born方法测定其对血小板聚集的影响。结果显示,粗毒经Superdex 75色谱分离后,获得7个蛋白峰,其中Ⅳ峰有抑制血小板聚集活性,以光密度计算该峰得率约占粗毒的10%;该组分用Sephadex G-25凝胶色谱纯化得主蛋白峰1个,得率约为57.2%; HiPrep DEAE Sepharose FastFlow16/10柱进一步纯化,得到8个蛋白峰,经鉴定第4峰暂定名为:GBV-Ⅳ4,它具有抑制血小板聚集作用,得率约为1.2%;经HPLC和SDS-PAGE证实为单一组分,相对分子质量约为7.442 kDa,等电点为6.3,蛋白酶活力及磷酯酶A_2活力均为0。GBV-Ⅳ4对ADP、凝血酶诱导的血小板聚集的IC_(50)分别为0.339和0.577μg·mL^(-1)。综上,从江浙短尾蝮蛇毒中分离得到一个含有RGD三肽序列的解离素GBV-Ⅳ4,具有抑制血小板聚集的活性。 展开更多
关键词 短尾蝮蛇 精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸序列 解离素 分离纯化 生物学活性
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In Vitro Biocompatibility of MC3T3-E1 Osteoblast-like Cells on Arg-Gly-Asp Acid Peptides Immobilized Graphite-like Carbon Coating on Carbon/Carbon Composites
5
作者 Sheng Cao He-Jun Li +2 位作者 Ke-Zhi Li Jin-Hua Lu Lei-Lei Zhang 《Acta Metallurgica Sinica(English Letters)》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第6期558-566,共9页
Carbon/carbon (C/C) composites were deposited with graphite-like carbon (GLC) coating, and then, Arg-Gly- Asp acid (RGD) peptides were successfully immobilized onto the functionalized GLC coating. GLC coating wa... Carbon/carbon (C/C) composites were deposited with graphite-like carbon (GLC) coating, and then, Arg-Gly- Asp acid (RGD) peptides were successfully immobilized onto the functionalized GLC coating. GLC coating was utilized to prevent carbon particles releasing and create a uniform surface condition for C/C composites. RGD peptides were utilized to improve biocompatibility of GLC coating. Surface chemical characterizations of functionalized GLC coating were detected by contact angle measurement, X-ray photoelectron spectroscopy and Raman spectra. Optical morphology of GLC coatings was observed by confocal laser scanning microscopy. In vitro biological performance was determined using samples seeded with MC3T3-E1 osteoblast-like cells and cultured for 1 week. Surface characterizations and morphological analysis indicated that C/C composites were covered by a dense and uniform GLC coating. Contact angle of GLC coating was reduced to 27.2° when it was functionalized by H202 oxidation at 40 ℃ for 1 h. In vitro cytological test showed that the RGD peptides immobilized GLC coating had a significant improvement in biocompatibility. It was suggested that RGD peptides provided GLC coating with a bioactive surface to improve cell adhesion and proliferation on C/C composites. 展开更多
关键词 MC3T3-E1 osteoblast-like cells Carbon/carbon composites Graphite-like carbon (GLC) coating arg-gly-asp acid (RGD) peptides Surface modification
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特异性细胞粘附Arg-Gly-Asp-Cys/三乙二醇单-11-巯基十一烷基醚界面的制备与电化学表征 被引量:1
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作者 单梅 胡家金 +2 位作者 周珍 赵佳 周铁安 《化学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1133-1137,共5页
采用自组装技术将人工合成的细胞粘附分子精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-半胱氨酸(RGDC)和防止细胞非特异性粘附的三乙二醇单-11-巯基十一烷基醚(TGME)修饰于金电极表面,制备了致密的、稳定的、对细胞具有特异性粘附作用的传感界面。通过调整R... 采用自组装技术将人工合成的细胞粘附分子精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-半胱氨酸(RGDC)和防止细胞非特异性粘附的三乙二醇单-11-巯基十一烷基醚(TGME)修饰于金电极表面,制备了致密的、稳定的、对细胞具有特异性粘附作用的传感界面。通过调整RGDC与TGME的比例,比较了其对大鼠心肌细胞(H9C2)的特异性粘附效果。以铁氰化钾为探针的实验结果表明,该界面对大鼠心肌细胞有很好的特异粘附作用。此外,还考察了该界面在Cr(Ⅵ)溶液中的电化学行为。结果表明,随着Cr(Ⅵ)浓度的增高氧化还原峰的峰电流增大,而峰电位均负向移动。其电化学参数变化与显微镜下观察到的Cr(Ⅵ)对细胞形态的模拟结果表明,所构建的细胞特异性粘附界面及电化学分析技术可望用于重金属对细胞的毒性研究。 展开更多
关键词 细胞特异性粘附界面 精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-半胱氨酸 三乙二醇单-11-巯基十一烷基醚大鼠心肌细胞 Cr(Ⅵ)影响
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Integrin beta 3-overexpressing mesenchymal stromal cells display enhanced homing and can reduce atherosclerotic plaque
7
作者 Hai-Juan Hu Xue-Ru Xiao +4 位作者 Tong Li De-Min Liu Xue Geng Mei Han Wei Cui 《World Journal of Stem Cells》 SCIE 2023年第9期931-946,共16页
BACKGROUND Umbilical cord(UC)mesenchymal stem cell(MSC)transplantation is a potential therapeutic intervention for atherosclerotic vascular disease.Integrin beta 3(ITGB3)promotes cell migration in several cell types.H... BACKGROUND Umbilical cord(UC)mesenchymal stem cell(MSC)transplantation is a potential therapeutic intervention for atherosclerotic vascular disease.Integrin beta 3(ITGB3)promotes cell migration in several cell types.However,whether ITGBmodified MSCs can migrate to plaque sites in vivo and play an anti-atherosclerotic role remains unclear.AIM To investigate whether ITGB3-overexpressing MSCs(MSCs^(ITGB3))would exhibit improved homing efficacy in atherosclerosis.METHODS UC MSCs were isolated and expanded.Lentiviral vectors encoding ITGB3 or green fluorescent protein(GFP)as control were transfected into MSCs.Sixty male apolipoprotein E-/-mice were acquired from Beijing Vital River Lab Animal Technology Co.,Ltd and fed with a high-fat diet(HFD)for 12 wk to induce the formation of atherosclerotic lesions.These HFD-fed mice were randomly separated into three clusters.GFP-labeled MSCs(MSCs^(GFP))or MSCs^(ITGB3)were transplanted into the mice intravenously via the tail vein.Immunofluorescence staining,Oil red O staining,histological analyses,western blotting,enzymelinked immunosorbent assay,and quantitative real-time polymerase chain reaction were used for the analyses.RESULTS ITGB3 modified MSCs successfully differentiated into the“osteocyte”and“adipocyte”phenotypes and were characterized by positive expression(>91.3%)of CD29,CD73,and CD105 and negative expression(<1.35%)of CD34 and Human Leukocyte Antigen-DR.In a transwell assay,MSCs^(ITGB3)showed significantly faster migration than MSCsGFP.ITGB3 overexpression had no effects on MSC viability,differentiation,and secretion.Immunofluorescence staining revealed that ITGB3 overexpression substantially enhanced the homing of MSCs to plaque sites.Oil red O staining and histological analyses further confirmed the therapeutic effects of MSCs^(ITGB3),significantly reducing the plaque area.Enzyme-linked immunosorbent assay and quantitative real-time polymerase chain reaction revealed that MSC^(ITGB3)transplantation considerably decreased the inflammatory response in pathological tissues by improving the dynamic equilibrium of pro-and anti-inflammatory cytokines.CONCLUSION These results showed that ITGB3 overexpression enhanced the MSC homing ability,providing a potential approach for MSC delivery to plaque sites,thereby optimizing their therapeutic effects. 展开更多
关键词 ATHEROSCLEROSIS INFLAMMATION Integrin beta 3 Mesenchymal stem cells arg-gly-asp structure Umbilical cord
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合成肽RGD和YIGSR的聚合衍生物对PG细胞侵袭重组基底膜能力的影响 被引量:5
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作者 曹凯 赵铁华 +3 位作者 陈治宇 高巍 杨鹤松 施波 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2002年第1期20-22,共3页
目的 探讨 RGD和 YIGSR的聚合衍生物对 PG细胞侵袭重组基底膜能力的影响。方法 利用 Transwell细胞培养小室。结果 适量 PG细胞经趋化剂作用 10h,侵袭细胞已达便于统计分析的数量范围;25~100μg/m... 目的 探讨 RGD和 YIGSR的聚合衍生物对 PG细胞侵袭重组基底膜能力的影响。方法 利用 Transwell细胞培养小室。结果 适量 PG细胞经趋化剂作用 10h,侵袭细胞已达便于统计分析的数量范围;25~100μg/ml的合成肽 RGD、YIGSR及多数衍生物与细胞作用 48h可对抗 PG细胞对重组基底膜的侵袭。结论 高转移性人肺白细胞癌 PG细胞系是肿瘤细胞体外侵袭实验筛选有关抗肿瘤转移药物的适用细胞。其中 RGD和 YIGSR的杂叉聚合肽及 YIGSR均叉聚合肽的抗肿瘤侵袭活性较强。 展开更多
关键词 arg-gly-asp RGD Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg YIGSR 聚合肽 癌侵袭
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RGD和YIGSR衍生物的抗肿瘤侵袭、转移活性 被引量:3
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作者 赵铁华 杨鹤松 +3 位作者 高巍 邓淑华 石艳华 施波 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期176-179,共4页
目的 研究抗肿瘤转移肽Arg Gly Asp(RGD)和Tyr Ile Gly Srg Arg(YIGSR)的均叉、杂叉聚合肽的抗肿瘤侵袭、转移作用。方法 MTT法测定药物对PG和LA795细胞粘附Matrigel能力的影响 ;Transwell细胞培养小室测定药物对PG细胞侵袭重组基底... 目的 研究抗肿瘤转移肽Arg Gly Asp(RGD)和Tyr Ile Gly Srg Arg(YIGSR)的均叉、杂叉聚合肽的抗肿瘤侵袭、转移作用。方法 MTT法测定药物对PG和LA795细胞粘附Matrigel能力的影响 ;Transwell细胞培养小室测定药物对PG细胞侵袭重组基底膜能力的影响 ;观察药物对LA795小鼠肺腺癌细胞自发肺转移模型抗肿瘤转移的影响。结果 在 5 0~ 10 0 μg/ml浓度范围 ,RGD和YIGSR的杂叉肽WF12和YIGSR的均叉肽WF2 7的抗粘附作用强于RGD和YIGSR肽 ;以上二肽在 10 0 μg/ml浓度的抗肿瘤侵袭作用优于RGD和YIGSR肽 ;以上二肽 10 0 μg/只 ,静脉给药仅 5次可显著抑制移植LA795细胞肺转移小鼠的肺脏重量和肺转移结节数。结论 RGD与YIGSR的杂叉肽WF12和YIGSR的均叉肽WE2 7具有较强的抗肿瘤侵袭、转移活性。 展开更多
关键词 抗肿瘤转移肽 arg-gly-asp YIGSR 抗肿瘤作用 抗肿瘤侵袭 抗肿瘤转移
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4种含RGD的短肽对细胞粘附作用的影响 被引量:3
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作者 黄宜兵 吴胜男 +1 位作者 徐力 张学忠 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期128-134,共7页
从两方面对比研究了4种含Arg-Gly-Asp(RGD)的细胞粘附肽RGD,RGDS,RGD-(NH2)2即RGE-NH2和RGDS-NH2对细胞粘附的影响.一方面研究了固定在聚乙交酯丙交酯共聚物(PLGA)膜上的4种细胞粘附肽通过其细胞定向作用对大肠癌细胞(HCT-8)和人成骨肉... 从两方面对比研究了4种含Arg-Gly-Asp(RGD)的细胞粘附肽RGD,RGDS,RGD-(NH2)2即RGE-NH2和RGDS-NH2对细胞粘附的影响.一方面研究了固定在聚乙交酯丙交酯共聚物(PLGA)膜上的4种细胞粘附肽通过其细胞定向作用对大肠癌细胞(HCT-8)和人成骨肉瘤细胞(OS732)细胞粘附性的促进作用;另一方面研究了外源性细胞粘附肽对HCT-8和OS732在纤维连接蛋白(FN)上粘附的竞争性抑制作用.结果发现,除了RGD-(NH2)2,其他3种肽都具有明显抑制细胞粘附的作用且具有一定的浓度依赖关系,其中以RGDS和RGDS-NH2的能力最强,RGD稍弱.对于HCT-8细胞,3种肽的最大抑制率分别为53.3%,56.3%,37.5%;而对OS732细胞,3种肽的最大抑制率分别为50.9%,49.8%,34%. 展开更多
关键词 细胞粘附肽 arg-gly-asp 聚乙交酯丙交酯共聚物 大肠癌细胞 人成骨肉瘤细胞 纤维连接蛋白
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将RGD模体改变为RGDNM可减弱Echistatin对血小板聚集的抑制但增强血管新生的抑制作用 被引量:1
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作者 杨涛 牛勃 +3 位作者 程牛亮 解军 张悦红 杨利军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期834-838,共5页
为了研究去整合素echistatin RGD(Arg-Gly-Asp)模体周边氨基酸突变后对其生物学功能的影响,根据echistatin序列设计合成6个片段,利用重叠延伸PCR法合成cDNA,使echistatin RGD模体周边序列变为ARGDNM(D27→N),与载体pTXB1连接后转化E.col... 为了研究去整合素echistatin RGD(Arg-Gly-Asp)模体周边氨基酸突变后对其生物学功能的影响,根据echistatin序列设计合成6个片段,利用重叠延伸PCR法合成cDNA,使echistatin RGD模体周边序列变为ARGDNM(D27→N),与载体pTXB1连接后转化E.coliBL21(DE3),建立echistatin(ARGDNM)的表达体系.工程菌经IPTG诱导后融合蛋白表达量占菌体总蛋白约30%,几丁质亲和纯化后,DTT裂解释放目的蛋白分子量约5.4kD.体外血小板聚集和体内鸡胚绒毛尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)血管新生实验结果表明,echistatin(ARGDNM)抑制血小板聚集的作用减弱,而其抑制血管新生的作用增强.RGD模体周围氨基酸的改变影响了去整合素的生物学功能,echistatin(ARGDNM)增强了与αⅤβ3结合的特异性,本工作为研究特异性更强的去整合素药物奠定了基础. 展开更多
关键词 去整合素 ECHISTATIN RGD(arg-gly-asp) 突变
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RGDS的抗血小板聚集及舒血管效应
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作者 赵明 彭师奇 +4 位作者 蔡孟深 唐朝枢 李长龄 于学敏 王振南 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 1993年第1期18-23,共6页
血小板聚集是正常止血的要素,并依赖于膜糖蛋白Ⅱ_b/Ⅲ_a(GPⅡ_a/Ⅲ_a)复合物与血浆粘附糖蛋白(包括纤维蛋白原 von Willebrand 因子和 fibronectin)的相互作用。研究 GPⅡ_b/Ⅲ_a 受体与纤维蛋白结合确定了在介导其自身与 GP Ⅱ_b/Ⅲ_a... 血小板聚集是正常止血的要素,并依赖于膜糖蛋白Ⅱ_b/Ⅲ_a(GPⅡ_a/Ⅲ_a)复合物与血浆粘附糖蛋白(包括纤维蛋白原 von Willebrand 因子和 fibronectin)的相互作用。研究 GPⅡ_b/Ⅲ_a 受体与纤维蛋白结合确定了在介导其自身与 GP Ⅱ_b/Ⅲ_a 接触的纤维蛋白分子中存在两种不同的氨基酸序列。其中一种序列是 Arg-Gly-Asp(RGD),该序列不仅出现在纤维蛋白 Aα链中,也出现在 fibronectin 和 von Willebrand 因子中。为了阐明其生物学效应本文合成了RGDS,并进行了与抗栓有关的生物学评价。本研究提供的数据证实 RGDS 明显抑制 PAF或 ADP 诱发的血栓形成(对 PAF 诱导的血小板聚集抑制率为67%,RGDS 浓度为9.6×10^(-7)mol/L;对 ADP 诱导的血小板聚集抑制率为87%,RGDS 浓度为9.6×10^(-7)mol/L)。该观察与 RGDS 延缓血栓形成的发现相符。虽然 RGDS 对 ADP 比对 PAF 更敏感但它对 PAF 的抑制仍十分明显这些结果均属首次报道。本研究进一步揭示了 RGDS 有舒血管作用,而且它对大鼠主动脉肌条的舒张作用不可忽视(与对照相比1×10^(-5)mol/L 的 RGDS 在 NE 处理的鼠动脉肌条上的舒张幅度为8.08±5.0%,P<0.05)。对组织内 cGMP 的累积水平(与对照相比1±10^(-5)mol/L 的RGDS 引起 cGMP 水平增高4.68±1.9pmol/mg,P<0.05)研究结果表明,提高体内 cGMP 的水平可能是 RGDS 发挥生物学作用的机制之一。RGDS 的舒血管和抗血小板聚集两种作用均可作为设计与合成新型抗栓剂的实验依据。 展开更多
关键词 arg-gly-asp-Ser 抗血小板聚集 舒血管效应
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N-末端引入RGD序列的葡激酶突变体表达、纯化及性质研究 被引量:2
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作者 狄静芳 贺进田 +2 位作者 徐瑞光 陈希 赵宝华 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第1期99-104,共6页
为解决葡激酶存在的溶栓后再栓塞问题,利用PCR介导的定点突变技术,在野生型葡激酶(wt-SAK)N-末端的第3、4位氨基酸之间插入Arg-Gly-Asp(RGD)序列构建了葡激酶突变体MD2-SAK,另将N-末端的前3位氨基酸替换为RGD序列构建了葡激酶突... 为解决葡激酶存在的溶栓后再栓塞问题,利用PCR介导的定点突变技术,在野生型葡激酶(wt-SAK)N-末端的第3、4位氨基酸之间插入Arg-Gly-Asp(RGD)序列构建了葡激酶突变体MD2-SAK,另将N-末端的前3位氨基酸替换为RGD序列构建了葡激酶突变体MD4-SAK。将突变体基因分别连接表达载体pBV220,转化大肠杆菌DH5α,经过热激诱导后,突变体均以可溶性形式得到高效表达,表达蛋白占菌体总蛋白的50%以上。破菌上清液通过SP-Sepharose FF、Sephadex G-50和Q-Sepharose FF三步连续的色谱层析纯化得到纤溶活性分别为10.1×10^4AU/mg、11.2×10^4AU/mg,纯度均大于96%的突变体蛋白。进一步研究了突变体的性质,结果表明葡激酶突变体不仅保留了野生型葡激酶的纤溶酶原激活活性,并具有较强的抗血小板聚集活性。同时发现,葡激酶突变体的N-末端序列会影响其N-末端甲硫氨酸的酶切加工。 展开更多
关键词 葡激酶 arg-gly-asp(RGD) 抗血小板聚集
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转铁蛋白与RGD共修饰脂质体用于脑胶质瘤靶向性研究 被引量:7
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作者 邵云 俞向荣 +2 位作者 吴一平 姚建社 羊正祥 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期592-595,共4页
目的构建转铁蛋白与整合素受体精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)三肽序列共修饰脂质体,并对其脑胶质瘤靶向性进行初步研究。方法采用薄膜分散法制备RGD修饰脂质体,采用后插入法制备转铁蛋白与RGD共修饰脂质体,观察其形态、粒径... 目的构建转铁蛋白与整合素受体精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)三肽序列共修饰脂质体,并对其脑胶质瘤靶向性进行初步研究。方法采用薄膜分散法制备RGD修饰脂质体,采用后插入法制备转铁蛋白与RGD共修饰脂质体,观察其形态、粒径、电位。通过U87脑胶质瘤细胞摄取实验以及裸鼠脑组织离体成像实验考察脂质体的脑胶质瘤靶向性。结果所制备的双配体脂质体粒径在RGD/TF-LP为(120.0±8.5)nm,电位为(-5.00±1.15)mV。体外细胞摄取实验表明,U87脑胶质瘤细胞对共修饰脂质体的摄取效率分别是转铁蛋白修饰脂质体和RGD修饰脂质体的2.1倍和2.7倍。肿瘤球摄取实验以及裸鼠脑组织离体成像实验表明共修饰脂质体具有良好的肿瘤靶向性以及脑部肿瘤传递能力。结论转铁蛋白与RGD共修饰脂质体具有一定的脑胶质瘤靶向性,是一种潜在的脑胶质瘤给药系统。 展开更多
关键词 转铁蛋白 精氨酸 甘氨酸 天冬氨酸三肽序列 脂质体 脑胶质瘤
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脂质体作为溶栓药物载体靶向抗血栓的实验研究 被引量:6
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作者 王红霞 杨慧 +6 位作者 郝刚 曾翔俊 芦玲巧 江瑛 朱宪 姚兴海 张立克 《首都医科大学学报》 CAS 2004年第3期290-293,共4页
为观察血小板膜蛋白受体拮抗剂RGDS肽 (精 甘 天冬 丝氨酸肽 )作为溶栓的归巢装置 ,连接包有溶栓剂的脂质体 (LIP)的溶栓效果 ,用FeCl3复制腹主动脉血栓模型 ,各组自股静脉滴注 :①缓冲液 (PBS) ;② 5 .2万IU/kg尿激酶 (UKl) ;③ 1 5 .6... 为观察血小板膜蛋白受体拮抗剂RGDS肽 (精 甘 天冬 丝氨酸肽 )作为溶栓的归巢装置 ,连接包有溶栓剂的脂质体 (LIP)的溶栓效果 ,用FeCl3复制腹主动脉血栓模型 ,各组自股静脉滴注 :①缓冲液 (PBS) ;② 5 .2万IU/kg尿激酶 (UKl) ;③ 1 5 .6万IU/kg尿激酶 (UKh) ;④ 5 .2万IU/kg尿激酶、脂质体与RGDS的混合物 (ULR) ;⑤包裹 5 .2万IU/kg尿激酶的脂质体与RGDS的混合物 (U LR) ;⑥包裹 5 .2万IU/kg尿激酶的脂质体与RGDS偶连物 (U L R)。发现 :UKh组和U L R组的血压与其他各组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 )。ULR组〔( 2 7.1± 5 .7)mg〕及U LR组〔( 2 6.6± 6.1 )mg〕的血栓湿质量与U L R组〔( 2 0 .3± 5 .1 )mg〕相比差异有显著性 (P <0 .0 5 )。UKh及U L R组与其他各组相比血栓缩小。提示 :脂质体作为溶栓药物载体 ,经RGDS修饰后 ,具有较好的靶向性抗血栓作用。 展开更多
关键词 脂质体 尿激酶 UK 溶栓药物 靶向 抗血栓 实验研究 载体 丝氨酸 归巢
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精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽表面修饰多孔钽对软骨细胞黏附、增殖和分泌功能的促进作用 被引量:5
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作者 甘洪全 王茜 +6 位作者 张辉 赵宏坤 王辉 宋会平 毕成 王志强 李琪佳 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期510-516,I0005,共8页
目的:研究精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)多肽表面修饰多孔钽(Ta)对软骨细胞黏附、增殖和分泌功能等生物学行为的影响,探讨RGD/软骨细胞/多孔钽复合物作为软骨组织工程支架材料修复软骨缺损、促进软骨再生的可行性。方法:通过物理吸附的... 目的:研究精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)多肽表面修饰多孔钽(Ta)对软骨细胞黏附、增殖和分泌功能等生物学行为的影响,探讨RGD/软骨细胞/多孔钽复合物作为软骨组织工程支架材料修复软骨缺损、促进软骨再生的可行性。方法:通过物理吸附的方法将不同浓度RGD肽及Ⅱ型胶原(ColⅡ)吸附于多孔钽表面,分为Ta-RGD组、Ta-ColⅡ组、Ta-RGD/ColⅡ0.2g·L-1组、Ta-RGD/ColⅡ1.0g·L-1组、Ta-RGD/ColⅡ5.0g·L-1组、Ta-RGD/ColⅡ10.0g·L-1组及纯Ta组。分离培养新西兰幼兔关节软骨细胞,取第2代细胞种植于修饰前后多孔钽使其成为RGD/软骨细胞/多孔钽复合物;扫描电镜观察RGD/软骨细胞/多孔钽复合物形貌特征以及软骨细胞生长状态,沉淀法检测多孔钽修饰前后软骨细胞黏附率,MTT法检测多孔钽修饰前后软骨细胞的增殖水平,羟脯氨酸法测定软骨细胞分泌功能。结果:多孔钽经RGD修饰后各组软骨细胞黏附率均高于修饰前(P<0.05),其中黏附效果最好的是4h的Ta-RGD/ColⅡ5.0g·L-1组,同时各组间黏附率比较差异有统计学意义(P<0.05)。扫描电镜下各组软骨细胞在修饰后的多孔钽表面生长状态良好,细胞在多孔钽表面及孔隙内生长,分泌细胞外基质覆盖于多孔钽表面;MTT检测,多孔钽经RGD修饰后各组软骨细胞增殖水平均高于修饰前(P<0.05),其中增殖效果最好的是13d的Ta-RGD/ColⅡ1.0g·L-1组;羟脯氨酸检测,Ta-RGD/ColⅡ1.0g·L-1组羟脯氨酸水平高于其他各组(P<0.05)。结论:RGD多肽可有效加强软骨细胞在多孔钽表面及孔隙内的黏附及增殖,对软骨细胞的分泌有促进作用。 展开更多
关键词 多孔钽 精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽 黏附 软骨细胞
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^(99)Tc^m-3PRGD_2 SPECT/CT在肺部良恶性病变中的诊断价值 被引量:10
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作者 王爽 刘晓芳 +3 位作者 李眉 罗莎 刘黎洁 张润武 《中国医学影像技术》 CSCD 北大核心 2017年第10期1512-1516,共5页
目的探讨^(99)Tc^m-3PRGD_2 SPECT/CT对肺部良恶性病变的诊断价值。方法回顾性分析于治疗前行^(99)Tc^m-3PRGD_2平面显像、胸部SPECT/CT显像,并最终获得病理结果的37例肺部病变患者资料,其中恶性病变27例,良性病变10例。将肺部病变对99 ... 目的探讨^(99)Tc^m-3PRGD_2 SPECT/CT对肺部良恶性病变的诊断价值。方法回顾性分析于治疗前行^(99)Tc^m-3PRGD_2平面显像、胸部SPECT/CT显像,并最终获得病理结果的37例肺部病变患者资料,其中恶性病变27例,良性病变10例。将肺部病变对99 Tcm-3PRGD2的摄取灰度与肝脏对比,分为低度增高、中度增高、高度增高;计算病变(L)最高摄取值与对侧正常肺(N)、肝脏(H)、纵隔(Me)、对侧三角肌(Mu)平均摄取值的比值,并进行统计学分析,评价其诊断效能;选取肺良恶性病变各1例行免疫组织化学分析整合素αvβ3表达。结果 37例患者肺部病变对^(99)Tc^m-3PRGD_2摄取均增高,66.67%(18/27)恶性病变高度增高,90.00%(9/10)良性病变轻、中度增高;恶性肺部病变摄取比值均高于良性病变(P均<0.05),以L/N=5.45或L/Mu=4.65为阈值,诊断肺恶性病变的敏感度、特异度和准确率均为77.80%、80.00%、78.40%;免疫组化结果显示肺恶性病变高表达整合素αvβ3,良性病变仅少量表达。结论 ^(99)Tc^m-3PRGD_2 SPECT/CT对肺部良恶性病变的鉴别具有诊断价值。 展开更多
关键词 甘氨酸-精氨酸-天冬氨酸 体层摄影术 发射型计算机 单光子 肺肿瘤
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兔Vx2肿瘤血管生成靶向成像磁共振扫描技术研究 被引量:4
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作者 曲海源 邓意辉 +4 位作者 徐克 刘屹 韩洪波 李松柏 陈春园 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期163-166,共4页
目的建立靶向性超顺磁性长循环脂质体靶向探针,进行兔Vx2肿瘤磁共振靶向成像,评价小动物磁共振扫描序列及方法。方法将精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)短肽通过硫醚键连接在包封超顺磁性氧化铁(SPIO)的长循环脂质体表面,合成靶向性和非靶... 目的建立靶向性超顺磁性长循环脂质体靶向探针,进行兔Vx2肿瘤磁共振靶向成像,评价小动物磁共振扫描序列及方法。方法将精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)短肽通过硫醚键连接在包封超顺磁性氧化铁(SPIO)的长循环脂质体表面,合成靶向性和非靶向长循环脂质体。流式细胞分析确定其受体亲和力。建立兔皮下荷Vx2肿瘤模型并进行磁共振靶向成像研究。对比不同磁共振扫描方法的区别及影响图像质量的相关因素。结果靶向超顺磁性脂质体对αvβ3整合素受体具有较高的特异性亲和力(P<0.01)。该靶向造影剂能够在肿瘤内缓慢浓聚,给药后15h达最大值。非靶向造影剂给药后2h即达最大浓聚。磁敏感加权(SWI)扫描序列图像质量较好。动物摆位、给药剂量及匀场对图像质量影响较大。结论RGD-超顺磁性长循环脂质体能在肿瘤内特异性浓聚,并能够用SWI序列MRI扫描进行证实。 展开更多
关键词 超顺磁性脂质体 精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽 αvβ3整合素 血管生成 VX2肿瘤
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RGD肽涂层微种植体对Beagle犬骨整合的促进作用 被引量:3
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作者 武秀萍 HEE Moon Kyung +3 位作者 胡小璐 李冰 李世峰 冯云霞 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期501-505,I0004,I0005,共7页
目的:探讨精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)肽涂层微种植体在不同愈合时间时骨组织中Ⅰ型胶原(ColⅠ)和骨钙蛋白(OC)表达水平的变化,阐明RGD肽涂层对微种植体骨整合的促进作用。方法:选取6只成年雄性Beagle犬,将36枚微种植体分为2组,实验组... 目的:探讨精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)肽涂层微种植体在不同愈合时间时骨组织中Ⅰ型胶原(ColⅠ)和骨钙蛋白(OC)表达水平的变化,阐明RGD肽涂层对微种植体骨整合的促进作用。方法:选取6只成年雄性Beagle犬,将36枚微种植体分为2组,实验组为RGD肽涂层微种植体,对照组微种植体表面未做处理(n=18)。采用随机对照原则,在第0、4、6周时分别在Beagle犬上颌骨左、右侧植入区(第2、第3、第4前磨牙根分叉区域随机选取任一部位)各植入1枚种植体,一侧为实验组,对侧为对照组。实验第8周时处死动物,获得愈合时间为2、4和8周的微种植体-骨组织标本,行HE及免疫组织化学染色,并检测微种植体周围骨组织中ColⅠ和OC的表达情况。结果:HE染色,实验组与对照组均显示有一定的成骨反应,愈合2和4周时,实验组与对照组比较骨组织表现为较强的成骨反应,8周时骨反应趋于一致,均可见板层状骨组织。实验组微种植体周围骨组织中ColⅠ和OC表达水平在2和4周时高于对照组(P<0.05),8周时2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。实验组愈合4周时微种植体周围骨组织中ColⅠ表达水平高于2和8周时,且差异有统计学意义(P<0.05)。对照组仅2周与8周时ColⅠ表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。实验组与对照组微种植体周围骨组织中OC表达水平随愈合时间延长而逐渐升高,8周时表达水平明显高于2周时(P<0.05);实验组愈合4周时OC表达水平明显高于2周时(P<0.05),而对照组2周与4周时比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:RGD肽涂层能够提高微种植体周围骨组织中ColⅠ和OC的表达,其在促进微种植体初期骨整合过程中起重要作用。 展开更多
关键词 骨组织 精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸 微种植体 BEAGLE犬
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生物活性短肽RGD在骨组织诱导再生中的研究进展 被引量:3
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作者 邱凯 陈馨 +1 位作者 李天全 万昌秀 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 2003年第3期546-549,共4页
临床上对创伤、感染和肿瘤切除后所造成大范围骨缺损的修复至今未得到有效的解决。在基质材料中的生物活性物质能对其周围组织及长入基质材料中的纤维组织发生诱导作用 ,使其向骨组织方向生长 ,从而促进骨缺损区的修复。精氨酸 -甘氨酸 ... 临床上对创伤、感染和肿瘤切除后所造成大范围骨缺损的修复至今未得到有效的解决。在基质材料中的生物活性物质能对其周围组织及长入基质材料中的纤维组织发生诱导作用 ,使其向骨组织方向生长 ,从而促进骨缺损区的修复。精氨酸 -甘氨酸 -天冬氨酸序列 (Arg- Gly- Asp,RGD)是细胞膜整合素受体与细胞外配体相结合的识别位点。在一定条件下 ,人工合成的 RGD序列的可溶性小分子多肽能够竞争性地与细胞表面的整合素结合 ,将细胞外信息传入细胞内 ,引起细胞一系列的生理变化。目前 ,国内外研究报道合成的 RGD肽具有诱导成骨细胞的生长 ,抑制破骨细胞之间、破骨细胞与基质之间的黏附 ,具有诱导骨再生的能力。本文仅就 RGD肽在骨组织诱导再生中的应用及其进展作一简要综述。 展开更多
关键词 生物活性短肽 RGD 骨组织工程 生物材料 诱导再生 精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸
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