A NEW ARISTOLOCHIC ACID FROM ARISTOLOCHIA CINNABARINA

A new compound, aristolochoc acid Ⅲ a- 6-0-β-D-glucoside, was isolated along with four known compounds from Aristolochia cinnabarina. The structure of the new,compound was elucidated on the basis of spectral evidences

马兜铃属(Aristolochia L)药用植物研究概况

总结了常见马兜铃属药用植物的化学成分及生物活性研究情况。

生地对广防己减毒作用最佳配伍比例的研究

目的通过测定生地对广防己中马兜铃酸A含量的影响,初步研究生地对广防己减毒作用的最佳配伍比例。方法广防己与生地配伍以95%的乙醇超声提取后,用反相高效液相色谱法测定马兜铃酸A的含量,并观察含量的变化情况。结果加入不同配比的生地后,广防己中马兜铃酸A的含量均降低,其中以广防己∶生地=2∶1的比例最为明显。结论生地可降低广防己中马兜铃酸A的含量,具有减毒作用,以广防己∶生地=2∶1为最佳配伍比例。

反相离子对色谱法测定青木香中马兜铃酸A的含量

建立反相离子对色谱法测定青木香中马兜铃酸A含量。采用HypersilC18色谱柱(2 0 0mm× 4 6mm ,5 μm) ,以甲醇∶1 2 8%四丁基溴化氨∶pH 3 6醋酸 醋酸钠缓冲液 (体积比2∶1∶1)为流动相 ,流速 1 0mL/min ,检测波长 316nm。线性范围 2 0 8～ 10 4 0 μg/mL(r =0 9998) ,样品平均加样回收率为 97 0 % (n =6 ) ,精密度RSD为 1 5 % (n =6 )。该法简便、快速、准确 。

慢性马兜铃酸肾病动物模型的建立及牛磺酸对其早期保护作用

目的:建立大鼠慢性马兜铃酸肾病模型,初步观察牛磺酸对其保护作用。方法:雄性 SD 大鼠分为3组,观察12周。模型组给关木通浸膏水溶液间断灌胃;治疗组在饮水中补充1%牛磺酸;对照组仅给自来水灌胃。第1、4、8和12周每组各处死6只,测体重,取血、尿和肾脏标本做相关检查。结果:模型组各周体重显著低于对照组(P<0.05或 P<0.01),血肌酐与体重比值(SCr/BW)和24h 尿蛋白定量显著高于对照组(P<0.01)。治疗组第1、4周 SCr/BW 和24h 尿蛋白定量显著低于模型组(P<0.01),模型组与治疗组体重比较差异无显著性(P>0.05)。光镜下见模型组和治疗组逐渐出现肾小管变性、萎缩及间质纤维化,第4周起纤维化面积显著高于对照组(P<0.01),而两组间比较差异无显著性(P>0.05)。电镜下见模型组和治疗组肾小管上皮细胞凋亡,微绒毛脱落,线粒体肿胀,溶酶体及吞噬泡增多;第4周起肾间质出现胶原纤维,并逐渐增多。对照组无明显病变。结论:建立了关木通致大鼠慢性马兜铃酸肾病模型;牛磺酸对该模型早期肾损伤可能发挥一定的保护作用。

反相高效液相色谱法测定关木通水煎剂中马兜铃酸A含量

目的 :建立反相高效液相色谱法测定关木通水煎剂中马兜铃酸A的含量。方法 :色谱柱 :SpherisorbODS2(4 6mm×250mm ,5μm ) ;流动相 :甲醇 -水 -冰醋酸 (72∶27∶1) ;流速 :1 0ml/min ;检测波长 :250nm。结果 :马兜铃酸A在0 0128μg～0 4096μg范围内线性关系良好 ,回归方程 :Y=4553 7 +5388319 3X ,r=0 9999 ;平均回收率为97 33 % ,RSD为2 34 %。结论 :本方法简便、灵敏、准确。

中药关木通中总马兜铃酸的含量测定

目的：测定关木通中总马兜铃酸的含量，保证临床用药安全有 效。方法：紫外分光光度法，检测波长为310 nm。结果：20 批关木通样品中总马兜铃酸含 量为0.63%～2.84%。结论：各地所用商品关木通中总马兜铃酸含量差异较大，且与药材性 状具一定关系。

龙胆泻肝汤配伍减毒的化学研究

目的:探讨含关木通的龙胆泻肝汤及其相关配伍制剂的减毒机制。方法:采用HPLC法测定关木通及龙胆泻肝汤相关配伍制剂中马兜铃酸A含量。结果:关木通甲醇提取液;关木通水提取液;龙胆泻肝汤;去除当归、生地、甘草的龙胆泻肝汤中马兜铃酸A含量分别为0.193 6,0.062 7,0.032 4,0.045 4 mg.mL-1。结论:龙胆泻肝汤全方中马兜铃酸A含量明显低于单味关木通和去除当归、生地、甘草的龙胆泻肝汤方,提示龙胆泻肝汤全方相对较低的肾毒性与其水提过程中马兜铃酸A溶出减少有关,方中佐使药味当归、生地、甘草的配伍可能起重要作用。

广防己致大鼠慢性肾小管-间质损伤的实验研究Ⅰ

目的: 观察广防己醇提取物(RAFE)急性以及不同剂量的RAFE对肾脏慢性毒性。方法:采用常规的急性毒性实验方法和用不同剂量的RAFE(2 5 . 0 ,12 .0 0 ,2 0 0. 0mg·kg-1·d-1)以及马兜铃总酸(10. 0mg·kg-1·d-1)给大鼠间断灌胃13周,分别于给药第4 ,8,13周留取血、尿和肾组织标本,检测相关肾功能和组织学变化。结果:RAFE的LD50 为36. 8g·kg-1,LD50 95 %可信限为38 .8～2 .8 .9g·kg-1;不同剂量的RAFE作用早期,大鼠肾功能改变为氮质血症、大量蛋白尿以及尿NAG酶升高。肾脏组织形态学:中、大剂量和总酸组给药早期主要表现以皮髓质交界为主的急性肾小管坏死,而后可见部分动物肾间质纤维化。结论:NAG可作为大鼠早期肾功能损伤的观测指标之一;RAFE中、大剂量间断灌胃13周均可导致大鼠肾小管功能损害。

HPLC法同时测定马兜铃中4种成分

目的建立同时测定马兜铃Aristolochia debilis Sieb.et Zucc.中马兜铃酸III、7-羟基马兜铃酸Ⅰ、马兜铃内酰胺Ⅰ、马兜铃酸Ⅰ的HPLC方法。方法马兜铃70%甲醇提取液的分析采用Agilent Extend C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相为乙腈（A）-0.1%甲酸水（B）,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃,检测波长254 nm。结合大鼠口服马兜铃酸I的半数致死量（LD50）及细辛药材中马兜铃酸I的限量,确定马兜铃中马兜铃酸的限量。结果马兜铃酸Ⅲ、7-羟基马兜铃酸Ⅰ、马兜铃内酰胺Ⅰ、马兜铃酸Ⅰ分别在0.34-31.90、0.32-30.20、0.12-28.10和0.21-41.30μg/mL范围内线性关系良好。马兜铃中马兜铃酸Ⅰ或马兜铃总酸的限量为0.000 3%。结论该方法准确可靠,可用于马兜铃中马兜铃酸的限量测定。

反相高效液相色谱法测定关木通及配伍中药中马兜铃酸A

为了全面、系统、深入地研究有毒中药关木通，采用乙腈-酸水系统，用反相高效液相色谱法分析关木通及其配伍中药中马兜铃酸A的含量，与文献方法相比，缩短了测定时间，并从总体上降低了分析成本。色谱条件是：C18柱，流速：1mL／min。检测波长：250nm。流动相：乙腈：（水＋冰醋酸）=58：42。该法精密度高，稳定性好，线性范围为0．07～0．42μg，回归方程为Y=5．0×10^6X-32827，相关系数r=0．9999，加样回收率为99．12％。实验结果表明，关木通与生地、当归、大黄、生甘草等中药配伍后，AAⅠ含量均有不同程度的降低，其中以关木通配伍生地组和大黄组最为明显，分别降低了57％和56％。

三叶木通野生资源的分布

简述了不同木通的药性差别,说明了关木通中所含马兜铃酸的毒害作用;阐述了三叶木通的应用价值;初步调查了陕西镇安的生态环境及三叶木通野生资源分布,为三叶木通野生资源抚育及利用提供了基础信息．

土木香能否代替青木香用药的探讨

目的:考证土木香是否可以代替青木香用药。方法:通过文献调研,比较土木香和青木香在植物来源、功能主治、化学成分、药理作用和临床应用等方面的不同。结果与结论:土木香和青木香在上述各方面均不相同,二者不应替代。

关木通药材中马兜铃酸A的药动学研究

目的采用高效液相色谱法测定血浆中马兜铃酸A的浓度,研究小鼠灌胃给予关木通提取液后体内马兜铃酸A的药动学特点.方法采用DiamonsilTMC18色谱柱(250mm ×4.6mm,5μm),以甲醇-水-冰乙酸(72:27:1)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长315nm.小鼠按马兜铃酸A 4.0mg·kg-1灌胃给予关木通提取液后,经HPLC法测定血浆药物浓度.结果马兜铃酸A在0.1098～3.66mg·L-1的浓度范围内线性关系良好(r=0.9998,n=7),最低检测浓度为0.0183mg·L-1.马兜铃酸A高、中、低3种不同浓度的平均回收率及相对标准偏差分别为97.07%(1.0%),97.10%(1.1%)和99.36%(0.8%),该法的日内和日间精密度RSD值均小于9.3%.小鼠给药后,药动学房室模型为一室模型,主要药动学参数T1/2(ka),T1/2(ke),Tmax,AUC,Cmax,CL/F(s),V/F(c)分别为:3.94,16.29,10.65min,188.88(mg/L)·min,2.84mg/L,0.038mg/kg/min/(mg/L),0.89(mg/kg)/(mg/L).结论本实验建立了关木通药材中马兜铃酸A血药浓度的HPLC测定方法,阐明了马兜铃酸A的药动学特征.

利用炮制技术去除关木通毒性成分的方法学研究

目的:根据马兜铃酸的化学性质,借鉴传统中药炮制经验,对去除马兜铃酸的炮制方法学进行研究。方法:以关木通为研究对象,马兜铃酸A为指标,采用正交试验等方法对关木通的碱制和醋制工艺进行优化。结果:确定了关木通的炮制工艺为以0.1mol·L-1碳酸氢钠多次浸泡后醋制的方法。炮制过程中温度对毒性成分的去除率影响较大。不同含量的关木通在实验室小试炮制中,毒性成分去除率在90%以上,10批中试毒性成分的去除率在80%以上,使马兜铃酸A的含量降低到0.35-0.60mg·g-1。马兜铃酸在药材中部分是盐的形式存在的。结论:该炮制新工艺能够选择性的去除关木通中的绝大部分毒性成分,达到了去毒的目的。

促红细胞生成素对慢性马兜铃酸肾病大鼠的肾脏保护作用

目的观察促红细胞生成素(EPO)对慢性马兜铃酸肾病(CAAN)大鼠血管性假血友病因子(vWF)表达的影响,探讨促红细胞生成素对慢性马兜铃酸肾病大鼠的肾脏保护作用。方法雌性Wistar大鼠30只,随机分三组:①CAAN模型组,②EPO治疗组,③正常对照组,每组各10只,关木通水煎剂灌胃12周制备CAAN大鼠模型。从第13周起,治疗组大鼠给予皮下注射重组人EPO每次50 IU/kg,每周3次,共6周。第19周检测各组大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、尿蛋白、血红蛋白(Hb)、血vWF水平;免疫组化法检测肾组织vWF的表达。结果与CAAN组比较,EPO治疗组BUN、SCr、尿蛋白水平、vWF水平下降,Hb水平升高(均P<0.05)。同时EPO治疗组大鼠肾组织vWF的表达减少(P<0.05)。结论 EPO治疗可以改善CAAN大鼠的肾功能,可能与其下调vWF,减轻内皮损伤有关。

HPLC-MS用于中药马兜铃中6种马兜铃酸类成分的检测

目的建立HPLCMS同时检测6种马兜铃酸类成分的方法。方法采用高效液相质谱联用法检测,色谱柱为DiamonsilC18柱(250mm×4.6mm,5μm);乙腈水系统,分别含0.1%的乙酸和0.1%的四氢呋喃,采用梯度洗脱程序;流速:1.0ml/min,采用DAD检测,波长范围190～400nm。质谱采用ESI负离子模式和选择性离子扫描(SIM)。结果马兜铃酸A、B、C、D、7OH马兜铃酸A和去硝基马兜铃酸A等6种成分可在1h内达到分离并得到同时检测。结论该法可用于含有或可疑含有马兜铃酸类有毒成分中药材及制剂的检测,方法灵敏,快速,专属性较强。

中药配伍对关木通中马兜铃酸A含量的影响

目的:运用高效液相色谱法找出同关木通配伍后,使其中马兜铃酸A含量显著降低的中药及其最佳配比。方法:关木通与筛选药物配伍后,用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定马兜铃酸A吸收值判断其含量是否降低。结果:当归、丹皮、生地、熟地、大黄可显著降低关木通中马兜铃酸A的含量。其中,当归与关木通质量比为1∶1,生地与关木通质量比为0.5∶1,丹皮与关木通质量比为1∶1是最佳配比。结论:关木通配伍上述中药后,马兜铃酸A的含量能显著降低。

不同剂量竹叶对关木通中马兜铃酸A溶出量的影响实验研究

目的观察不同剂量竹叶对关木通中马兜铃酸A溶出量的影响。方法采用反相高效液相色谱法测定不同剂量竹叶配伍关木通中马兜铃酸A的溶出量。结果关木通马兜铃酸A溶出量为0.106 mg/ml;竹叶与关木通1∶4配伍其溶出量为0.041 mg/ml。结论中药竹叶可明显降低关木通马兜铃酸A溶出量61%;竹叶与关木通以1∶4配比对其马兜铃酸A的溶出量降低最明显。

关木通生品及其制品的药效学及毒理学研究

目的为评价关木通生品及其制品是否具有利尿作用和其安全性,对二者进行药效学、急性毒性和长期毒性的比较研究。方法采用正常大鼠水负荷的动物模型,观察关木通生品、制品水煎剂的一次性给药和连续3d(1次/d)给药的利尿作用。结果关木通生品、制品水煎剂均无明显的利尿作用。关木通生品水煎剂的LD50为50.32g/kg,关木通制品的LD50为226.62g/kg,且该药急性毒性小鼠的死亡时间主要分布于药后48～72h之间。经过本研究初步拟定的炮制工艺炮制后的关木通制品,对肾脏的毒性明显低于同等剂量的关木通生品。结论关木通生品及其制品均没有利尿作用,炮制可以达到减毒的目的。