Effects of arteannuin B,arteannuic acid and scopoletin on pharmacokinetics of artemisinin in mice

Objective:To explore the effects of arteannuin B,arteannuic acid and scopoletin on the pharmacokinetics of artemisinin in mice.Methods:Artemisinin and a combination of artemisinin,arteannuin B,arteannuic acid and scopoletin were administered together to mice via oral administration.Blood samples were collected at different time intervals and pretreated by liquid-liquid extraction.The contents of four compounds in mouse plasma were determined by a validated HPLC-MS/MS method.Results:Compared to single artemisinin group,the C_(max) values from the combination group rose from 947 ng/mL to 1 254 ng/mL.AUC_((0-t))(2 371 h·ng/mL) was significantly higher than that from single artemisinin group(747 h·ng/mL).The peak time lag and the CL values reduced at a proportion of 66%.Conclusions:Arteannuin B,arteannuic acid and scopoletin can markedly affect the pharmacokinetics of artemisinin.

Studies on the biosynthesis of arteannuin——Ⅳ.The biosynthesis of arteanniuin and arteannuin B by the leaf homogenate of Artemisia annua L.

Arteannuic acid and(-)11R,13-d(?)ydroarteannuic acid are the key intermediates in the biosynthesis of arteannuin by the leaf homogenate of Artemisia annua L.,and arteannuic acid and epoxyarteannuic acid are the intermediates of arteannuin B.and epoxyarteannuic acid can not be transformed into arteannuin by the homogenate.

HPLC法同时测定黄花蒿水提浸膏中青蒿素、青蒿乙素、猫眼草黄素和猫眼草酚D的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定黄花蒿水提浸膏中青蒿素、青蒿乙素、猫眼草黄素、猫眼草酚D的含量。方法采用Agilent ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈(A)-纯水(B),梯度洗脱;体积流量:0.8 mL·min^(-1);柱温:30℃;进样量:10μL;检测波长:210 nm。结果青蒿素、青蒿乙素、猫眼草黄素和猫眼草酚D进样量分别在1.6088~16.088μg(r=0.9999)、0.0141~0.1414μg(r=1)、0.1851~1.8509μg(r=0.9999)、0.1441~1.4414μg(r=0.9999)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率(n=6)分别为102.44%、97.82%、95.07%、95.55%,RSD分别为1.12%、1.44%、1.29%、1.53%。结论该方法简便准确、可靠稳定、重复性好,可用于同时测定黄花蒿水提浸膏中青蒿素、青蒿乙素、猫眼草酚D、猫眼草黄素的含量。

有抗肿瘤活性的青蒿B衍生物

从菊科值物黄花蒿(Artemisia annua L.)中分离得到的青蒿B(arteannuin B)是一个有α-次甲基五元环倍半萜内酯化合物。文献报道一些α-次甲基环内酯萜类化合物具有抗肿瘤活性,如模地胆宁(molephantinin)。

HPLC-UV-ELSD法同时测定青蒿中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量

用HPLC-UV-ELSD法同时测定青蒿药材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。采用Nucleodur C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μmID）；以乙腈-0．1％乙酸水（50：50）为流动相；紫外检测波长209nm，蒸发光散射检测器漂移管温度50℃。结果显示，青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸能够达到很好分离。它们的线性范围分别为0．52．2．6μg，r=0.9994（n=5）；0．022～4．4μg，r=0．9999（n=5）；0．203～8．12μg，r=0．9998（n=5）。平均回收率分别为99．45％（RSD=2．3％，n=6）；102．37％（RSD=1．7％，n=6）；101．10％（RSD=0．79％，n=6）。本法简单、准确、快速，可同时测定青蒿药材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。

高效液相色谱法测定不同来源青蒿中青蒿乙素的含量

目的 建立青蒿药材中青蒿乙素简便易行的高效液相含量测定方法以及测定不同来源青蒿中青蒿乙素的含量。方法 高效液相色谱法，石油醚超声提取，硅胶小柱净化，ODS柱，甲醇-水（6：4）为流动相，流速0．8mL-min^-1；检测波长为220nm。结果 青蒿乙素获良好分离，在0．02～0．40μg内呈现良好的线性关系，加样回收率为100．0％，RSD为2．22％（n=6）。不同来源最高含量为0．18％，最低含量为0．003％。结论 该方法简便易行、灵敏、重现性好，可用于青蒿药材中青蒿乙素的含量测定。不同来源青蒿中青蒿乙素的含量差别较大。

青蒿素类化合物专利格局分析

目的:青蒿素及其系列衍生物的抗疟作用已被广泛认可,该类化合物的其他生物活性也受到广泛关注,深入的实验研究产生了大量专利文献。本文对青蒿素、青蒿酸和青蒿乙素的专利申报情况进行了系统梳理,以展示其研发态势,为规划研究路线、制订专利申请策略提供参考。方法:制订检索策略,从多个专利数据库检索和下载题录信息,利用统计学软件对题录中的有效信息进行分析挖掘。结果:获得了青蒿素类化合物专利申请的生命周期、应用功效偏好、优秀申请机构和高价值专利等方面的格局情报。结论:该领域专利技术生命周期整体处于技术成熟期。其中,青蒿素发展空间相对较大,最受关注的应用功效包括抗寄生虫、抗肿瘤和抗感染,而内部引用的核心主题是治疗皮肤病、抑制癌症。

抗疟植物黄花蒿中青蒿酸的绝对构型研究

从中国东北部产黄花蒿中分离得到主成分青蒿酸（１）．通过分析青蒿酸对溴苯酰甲酯的Ｘ－衍射结晶学数据，确定了青蒿酸的绝对构型．另外，从同植物中还分离得到少量青蒿素（２），以及青蒿乙素（３），谷甾醇和豆甾醇．

HPLC法测定儿感退热宁口服液中连翘酯苷B、连翘酯苷A、连翘苷、去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、青蒿乙素和青蒿酸

目的建立HPLC法同时测定儿感退热宁口服液中连翘酯苷B、连翘酯苷A、连翘苷、去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、青蒿乙素和青蒿酸。方法 Agilent TC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈–0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长:275 nm(0~21.0 min检测连翘酯苷B、连翘酯苷A、连翘苷)和210 nm(21.0~55.0 min检测去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、青蒿乙素、青蒿酸);柱温25℃;体积流量0.9 mL/min;进样量:10μL。结果连翘酯苷B、连翘酯苷A、连翘苷、去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、青蒿乙素和青蒿酸分别在3.47~69.40μg/mL(r=0.999 5)、18.78~375.60μg/mL(r=0.999 2)、6.64~132.80μg/mL (r=0.999 7)、2.57~51.40μg/mL (r=0.999 5)、4.86~97.20μg/mL(r=0.999 3)、4.23~84.60μg/mL(r=0.999 8)、0.79~15.80μg/mL(r=0.999 1)、2.16~43.20μg/mL(r=0.999 9)线性关系良好,平均加样回收率分别为98.76%、100.12%、99.34%、97.57%、98.29%、99.25%、96.87%、98.02%,RSD值分别为1.53%、0.89%、0.91%、1.38%、1.02%、0.83%、1.26%、1.15%。结论所建立的方法结果准确,可用于儿感退热宁口服液中多成分的质量控制研究。

不同产地的青蒿药用成分含量研究

目的:研究不同产地的青蒿药用成分的含量。方法:从全国各地采集22批青蒿药材,通过高效液相色谱法测定药材中的青蒿酸、青蒿乙素、青蒿素和东莨菪内酯的含量,并以所测含量为指标,进行相关分析和聚类分析。结果:相关分析和聚类分析均显示,不同产地的青蒿中上述4种成分含量差异较大,各自聚为一类。结论:青蒿活性成分的积累与产地有一定的相关性。

不同种源黄花蒿室内水培条件下青蒿素和青蒿乙素含量差异分析

目的:建立不同种源黄花蒿内青蒿素及青蒿乙素含量测定的方法,比较不同来源黄花蒿种质在水培均一化生长条件下青蒿素与青蒿乙素含量的差异,分析影响黄花蒿主要成分含量差异的关键因素。方法:黄花蒿种子采用随机排列水培混合培养,运用超高效液相色谱-串联质谱法,ACQUITY UPLC?BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相选择水-乙腈(95∶5,含0.1%甲酸,A)-乙腈-水(95∶5,含0.1%甲酸,B)进行梯度洗脱(0~3.5 min,25%~1%A;3.5~3.6 min,1%~25%A;3.6~5.0 min,25%A),流速0.4 m L·min^(-1),电喷雾离子源,正离子模式,检测不同种源黄花蒿中青蒿素及青蒿乙素的含量差异。结果:所建立的方法灵敏度高、分离度良好。不同种源黄花蒿在相同培养条件下,即25℃恒温下循环水培养,青蒿素和青蒿乙素含量存在较大差异,其中青蒿素含量较高的黄花蒿种源产地是云南,质量分数达3 810.597μg·g-1;青蒿乙素含量较高的黄花蒿种源地是山西,质量分数1 691.747μg·g-1,青蒿素含量按照从高到低种源地排列依次为云南>海南>湖北>广西>浙江>山西>北京>山东>黑龙江>甘肃。相关性分析发现,以地域划分时,青蒿素含量与黄花蒿来源地的纬度呈显著负相关,但青蒿素与青蒿乙素含量均与经度无显著相关性。结论:同一培养环境不同种源黄花蒿内青蒿素及青蒿乙素含量存在显著差异,影响黄花蒿中青蒿素及青蒿乙素含量的主导因素可能是其遗传背景,提示改良青蒿品种是后续黄花蒿栽培中提升质量的关键因素。

青蒿有效部位及其成分的解热作用研究

目的:观察青蒿提取物有效部位及其主要成分对大鼠的解热作用。方法:采用鲜酵母致大鼠体温升高的模型,观察青蒿有效部位及其成分对大鼠体温的影响。结果:青蒿中的有效部位(BJQH-A)及主要成分(青蒿乙素、青蒿酸、东茛菪内酯)对鲜酵母致大鼠体温升高具有明显的解热作用。结论:青蒿中含有多个具有解热作用的成分,它们的作用强度、起效时间和作用维持时间各有差别,青蒿的解热作用可能是其活性成分群整合作用的结果。

HPLC-MS同时测定小鼠血浆中青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯的含量

青蒿素是一种常用的抗疟药,但青蒿中其他组分的药效作用很少被考察。研究发现,当青蒿中的青蒿乙素、青蒿酸、东莨菪内酯3种组分与青蒿素按照质量比为1:1:1:1的比例在小鼠体内考察药效时,与等剂量青蒿素单用组相比可以起到显著的抗疟增效作用。建立血浆中同时检测青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯4种组分含量的HPLC-MS方法,有助于这种增效现象在药动学层面研究的进一步开展。采用Agilent公司1200-6130液质联用系统,电喷雾电离源,正离子和负离子检测方式,SIM模式;色谱分离采用Agilent Zorbax SB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈-0.5%乙酸水溶液(60:40),流速0.3 mL·min^(-1),柱温为40.0℃,进样量5μL。结果显示,4组分血浆浓度在5~3 000μg·L^(-1)呈现良好线性关系,方法专属性、准确度、精密度良好,无基质效应。该方法适用于小鼠血浆中青蒿素、青蒿乙素、青蒿酸和东莨菪内酯的含量测定,可用于开展4组分小鼠体内药物动力学研究。

青蒿乙素对脂多糖诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症反应的抑制及机制

目的探讨青蒿乙素的抗炎活性及其作用机制。方法采用细菌脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7建立炎症反应模型,经青蒿乙素处理后,采用Griess试剂检测NO的含量;采用酶联免疫法(ELISA)检测促炎症因子的水平;采用Western Blot检测炎症相关蛋白及激酶的表达水平。结果青蒿乙素能明显抑制RAW264.7细胞中LPS诱导的NO生成,且呈现剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为4.72μmol·L^(-1)。同时,青蒿乙素也能明显抑制LPS刺激的RAW264.7细胞中诱导性一氧化氮合酶和环氧化酶2的蛋白表达,并降低肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的释放。青蒿乙素还能明显抑制LPS所致的IκBα蛋白降解,但是对LPS诱导的ERK、JNK、p38 MAPK活化无明显抑制作用。结论青蒿乙素对LPS所致的RAW264.7细胞炎症反应具有明显的抑制作用,其抗炎机制可能与减少IκBα蛋白降解,进而抑制核转录因子κB炎症信号通路有关。