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成像流式细胞术和免疫荧光技术检测成纤维样滑膜细胞Ahr入核的比较
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作者 程梦 王燚 +2 位作者 董伟波 魏伟 常艳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第9期1524-1528,共5页
目的探究成像流式细胞术和免疫荧光技术检测成纤维样滑膜细胞中Ahr入核的差别。方法用15%的DMEM培养人来源的成纤维样滑膜细胞细胞株MH7A,分别用激光共聚焦显微镜和量化成像流式细胞仪(ImageStreamX MarkⅡ)检测空白对照组、Kyn组和Kyn+... 目的探究成像流式细胞术和免疫荧光技术检测成纤维样滑膜细胞中Ahr入核的差别。方法用15%的DMEM培养人来源的成纤维样滑膜细胞细胞株MH7A,分别用激光共聚焦显微镜和量化成像流式细胞仪(ImageStreamX MarkⅡ)检测空白对照组、Kyn组和Kyn+CH223191组对MH7A中Ahr的入核水平,并采用非参数检验比较两种检测技术检测结果的相关性。结果与空白对照组相比,免疫荧光技术和成像流式细胞术测得的MH7A细胞中Kyn组和Kyn+CH223191组Ahr入核能力增加(P<0.05),两种实验方法测得的三组结果相关性良好,R 2值分别是0.8638、0.9287和0.9018,差异有统计学意义(P<0.05)。结论相较于免疫荧光技术的操作和结果,成像流式细胞术数据处理比较复杂,但所得结果精确度高,避免了实验者的主观性,减少实验误差。 展开更多
关键词 免疫荧光技术 成像流式细胞术 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 芳香烃受体 入核 相关性
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The Relationship of CyclinD1 and Estrogen Receptor Expression in the Process of Proliferation and Metastasis in Breast Neoplasm 被引量:13
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作者 王欣 邹声泉 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2001年第3期231-232,共2页
The role of CyclinD1 and estrogen receptor (ER) in the process of proliferation and metastasis of breast neoplasm and their relationship were studied. The expression levels of CyclinD1 and ER in the tissue samples wer... The role of CyclinD1 and estrogen receptor (ER) in the process of proliferation and metastasis of breast neoplasm and their relationship were studied. The expression levels of CyclinD1 and ER in the tissue samples were detected by using flow cytometry and L SAB immunohistochemistry staining, respectively. The results showed that CyclinD1 and ER expression levels in breast cancer were significantly higher than in benign breast neoplasm (P<0.05). The CyclinD1 expression levels in stage I was much lower than in stages Ⅱ, Ⅲ, Ⅳ (P<0.05). The positive rate of ER was not related with tumor size, lymph node metastasis and TNM stage (P>0.05), but the CyclinD1 expression level in ER (+) group was significantly higher than in ER (-) group (P<0.05). It was concluded that CyclinD1 expression level might be obviously related with the proliferation and metastasis of breast neoplasm and ER. 展开更多
关键词 breast cancer CYCLIND1 flow cytometry estrogen receptor
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Hot Spring Hydro Therapy Regulates Peripheral Leukocyte Together with Emotional Hormone and Receptor Positive Lymphocytes According to Each Constitution/Condition
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作者 Yoshihiko Kitada Kazuhiro Okamoto +7 位作者 Takafumi Takei Xiufeng Jia Rui Chen Nobuo Yamaguchi Misao Tsubokawa Wen Hsin Wu Tsugiya Murayama Kenji Kawakita 《Open Journal of Rheumatology and Autoimmune Diseases》 2013年第3期140-153,共14页
Two primary defense systems develop in vertebrates, innate and adaptive. Despite those defense systems, the overwhelming problems of possessing this dual system, the innate or adoptive do not seem to guard or even pre... Two primary defense systems develop in vertebrates, innate and adaptive. Despite those defense systems, the overwhelming problems of possessing this dual system, the innate or adoptive do not seem to guard or even prevent the development of one internal threat to survival, moreover sometimes direct to autoimmunity accompanying hypersensitivity. Further, every individual exposes to the risk of immunodeficiency in daily life with both internal and external stimuli. In this report, we tried to report the suitable menu for regulating the immune system modulate and discuss how we can compare and select each menu by evidence-based manner more than VAS. In a series of investigation, we have assessed the various health promoting menus such as hot spring hydrotherapy, acupuncture & moxibustion, light walking, independent to the western medicine. In this report, we try to summarize the regulatory effect of hot spring hydrotherapy as our representative menu under the influence of hypothalamus system. Their effects of elements were evaluated by the total number of peripheral leukocyte, its subsets, granulocyte and lymphocyte ratio, emotional hormones, receptor positive lymphoid cells. The regulative effects were confirmed also by other menu than hydrotherapy, acupuncture, walking etc. However, just by the simple comparison between the group before and after the hydrotherapy, we cannot exhibit the real regulatory effect by each menu. So we tried to show the effect by trying to indicate the constitution/condition dependent manner. Because the effect was not uniformly to each individual but it was dependent on each condition/constitution before the start of the menu. This is the one of the main proposes of this report for summaries that it is important to regulate the number and levels of each factor as ideal value. In other words, the regulation of each factor affected under the hypothalamus system is regulated with each constitution, under the influence of daily circumstances. The mode of regulation was the same in each menu, indicating that the higher leveler was down regulated and lower leveler was up regulated. Moreover, each vector of change was reversely correlated to the value of the day before. The other purpose of this study was designed to establish the regulatory effect of this hydrotherapy being not limited in the number of leukocyte in peripheral but in the emotional hormones. They were adrenaline and dopamine but not found another hormone for healthy individuals. Hot spring hydrotherapy for a short duration was expected to influence the immune system combining with hormone levels in the blood quantitatively. These hormones were evidenced by adrenalin and dopamine as well as adrenergic receptor positive lymphocytes. The final subject was to confirm and compare the effect of hot spring hydrotherapy and other menu. The reproducible effects were expressed by the linear slant and could compare each other with the value of slope. We tried to discuss the advantage and demerit, how we can compare each medicine with the peripheral leukocyte in number and function. 展开更多
关键词 Hot Spring HYDROTHERAPY PERIPHERAL LEUKOCYTE LEUKOCYTE Subsets Ratio Adrenaline Dopamine β2-Adrenergic receptor flow-cytometry CONSTITUTION CAM Therapeutic Menu
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红细胞膜相关蛋白通过IL-6/STAT3/ROR-γt信号通路抑制小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎中Th17细胞分化 被引量:1
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作者 何可可 李远迪 +5 位作者 文廷浩 朱婕 高杰 胡蓉 韩锋 苏敏 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期538-545,共8页
目的探讨小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型中,外源性和内源性红细胞膜相关蛋白(ERMAP)通过白细胞介素6/信号转录及转录激活因子3(IL-6/STAT3)/维甲酸相关孤核受体γt/(ROR-γt)信号通路对辅助性T细胞17(Th17)细胞分化的影响。方... 目的探讨小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型中,外源性和内源性红细胞膜相关蛋白(ERMAP)通过白细胞介素6/信号转录及转录激活因子3(IL-6/STAT3)/维甲酸相关孤核受体γt/(ROR-γt)信号通路对辅助性T细胞17(Th17)细胞分化的影响。方法流式细胞术验证不同浓度ERMAP-Ig融合蛋白功能;琼脂糖凝胶电泳鉴定ERMAP基因敲除小鼠。流式细胞术检测ERMAP-Ig融合蛋白在体外对Th17细胞分化影响。40只6周龄普通C57BL/6小鼠随机分为2组建立EAE模型:对照(control)-Ig和ERMAP-Ig组,每组20只;记录临床评分;流式细胞术检测EAE小鼠体内Th17细胞分化情况。40只6周龄已鉴定的野生型和ERMAP基因敲除小鼠分为2组建立EAE模型:ERMAP^(+/+)和ERMAP^(-/-)组,每组20只。记录临床评分;脊髓HE和固蓝(LFB)染色并进行组织学半定量评分。流式细胞术检测IL-17A+CD4+T细胞百分比;Western blotting检测IL-6、白细胞介素17(IL-17)、STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、ROR-γt蛋白水平表达;Real-time PCR检测IL-17、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、STAT3和ROR-γt的mRNA表达;ELISA检测细胞水平IL-17和TNF-α的表达。结果1.外源性ERMAP-Ig融合蛋白抑制体内外Th17细胞分化且减轻小鼠EAE症状。2.与对照组相比,ERMAP^(-/-)组EAE小鼠炎性浸润和脱髓鞘症状加重,Th17分泌IL-17A增加。3.内源性ERMAP基因敲除后,IL-17、TNF-α、IL-6、STAT3及ROR-γt表达均增加。差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ERMAP可能通过IL-6/STAT3/ROR-γt信号通路调控Th17细胞分化,参与小鼠EAE发生发展。 展开更多
关键词 红细胞膜相关蛋白 实验性自身免疫性脑脊髓炎 辅助性T细胞17 白细胞介素-6 信号转录及转录激活因子3 维甲酸受体相关孤核受体γt 流式细胞术 小鼠
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1型糖尿病患者的B细胞及B细胞亚群中程序性死亡受体配体1的表达
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作者 李思诚 郭鹤鸣 +3 位作者 黄韵 刘翠平 方晨 胡吉 《实用临床医药杂志》 2023年第20期131-136,141,共7页
目的探讨1型糖尿病(T1DM)患者循环B细胞中程序性死亡受体配体1(PD-L1)的表达情况。方法采集健康对照者(n=25)和T1DM患者(n=25)的外周血标本。流式细胞术检测B细胞及其表面PD-L1的表达。结果T1DM患者B细胞亚群频率与健康对照者比较,差异... 目的探讨1型糖尿病(T1DM)患者循环B细胞中程序性死亡受体配体1(PD-L1)的表达情况。方法采集健康对照者(n=25)和T1DM患者(n=25)的外周血标本。流式细胞术检测B细胞及其表面PD-L1的表达。结果T1DM患者B细胞亚群频率与健康对照者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与健康对照者相比,T1DM患者CD19^(+)细胞、CD19^(+)CD27^(+)细胞和CD19^(+)CD27^(+)细胞上PD-L1的表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。健康对照者与T1DM患者的PD-L1在B10细胞、边缘区B细胞(MZB)和滤泡B细胞(FoB)上的表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。T1DM患者的PD-L1在过渡性T2-边缘区前体B细胞(T2-MZP)上的表达低于健康对照者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PD-L1在T1DM发病中可能起保护作用。PD-L1高表达的B细胞可能为自身免疫性糖尿病患者的治疗提供新策略。 展开更多
关键词 1型糖尿病 程序性死亡受体配体1 B细胞 流式细胞术
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VEGFR-3^(+)单核细胞对高血压小鼠左心室重塑的影响
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作者 杨国红 余芳芳 +5 位作者 蔡伟 牛秀珑 张芯 赵季红 李玉明 陈少伯 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第2期144-149,共6页
目的探讨高血压小鼠外周血血管内皮生长因子受体(VEGFR)-3^(+)单核细胞对高盐诱导的高血压性左心室重塑的影响。方法将6周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为正常盐饮食组(0.5%NaCl,NS组)、高盐饮食组(8%NaCl,HS组)、HS+N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-N... 目的探讨高血压小鼠外周血血管内皮生长因子受体(VEGFR)-3^(+)单核细胞对高盐诱导的高血压性左心室重塑的影响。方法将6周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为正常盐饮食组(0.5%NaCl,NS组)、高盐饮食组(8%NaCl,HS组)、HS+N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)组(HS+L组)以及HS+L-NAME+外周血VEGFR-3^(+)单核细胞(PBMV)干预组(HS+L+PBMV组),在饮食干预第9~12周对高血压小鼠进行PBMV干预。所有小鼠以标准的尾压法测定无创尾压;利用Vevo 2100超声影像系统测定心脏结构和功能;荧光定量PCR检测小鼠心肌组织张力应答增强子结合蛋白(TonEBP)及淋巴管内皮细胞标志物mRNA表达水平;以Masson染色观察心肌组织纤维化程度;以麦芽胚凝集素(WGA)荧光染色计算心肌细胞横截面积(CSA)。结果干预结束时,HS+L组收缩压显著高于其他3组(P<0.05);HS+L+PBMV组TonEBP的mRNA水平低于HS+L组,与淋巴内皮细胞相关的标志物VEGF-C、Prox-1、Podoplanin、LYVE-1的m RNA表达水平显著高于HS+L组(P<0.05);心脏超声结果显示,HS+L+PBMV组左心室舒张末期内径(LVEDD)及左心室后壁厚度(LVPWT)显著低于HS+L组,左心室射血分数(LVEF)及左心室缩短分数(LVFS)显著高于HS+L组(P<0.05);病理学结果显示,HS+L+PBMV组CVF及CSA明显低于HS+L组(均P<0.05)。结论PBMV能在降低高血压小鼠收缩压水平的同时,减轻左心室重塑,其机制可能与PBMV促进淋巴管增生有关。 展开更多
关键词 高血压 心室重构 血管内皮生长因子受体3 单核细胞 淋巴管生成 流式细胞术 高盐
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佛手苷内酯通过调控长链非编码RNA阿片样受体基因表达对糖氧剥夺诱导的PC12细胞损伤的影响
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作者 孙孟坊 程一升 +2 位作者 王丰 金孟浩 汪德秀 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期56-62,共7页
目的研究佛手苷内酯(BG)是否通过调控长链非编码RNA(lncRNA)阿片样受体基因(Oprm1)表达保护糖氧剥夺(OGD)诱导的PC12细胞损伤。方法将PC12细胞分为对照组(Con)、OGD组、OGD+BG低浓度(BG-L)组、OGD+BG中浓度(BG-M)组、OGD+BG高浓度(BG-H... 目的研究佛手苷内酯(BG)是否通过调控长链非编码RNA(lncRNA)阿片样受体基因(Oprm1)表达保护糖氧剥夺(OGD)诱导的PC12细胞损伤。方法将PC12细胞分为对照组(Con)、OGD组、OGD+BG低浓度(BG-L)组、OGD+BG中浓度(BG-M)组、OGD+BG高浓度(BG-H)组、OGD+pcDNA组、OGD+pcDNA-Oprm1组、OGD+BG+si-NC组和OGD+BG+si-Oprm1组。试剂盒测定丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。流式细胞术分析细胞凋亡率。Real-time PCR分析Oprm1表达水平。结果与Con组比较,OGD组PC12细胞凋亡率和MDA含量显著升高,Oprm1表达、SOD和GSH-Px活性显著降低(P<0.05)。与OGD组比较,OGD+BG-L组、OGD+BG-M组、OGD+BG-H组PC12细胞凋亡率和MDA含量显著降低,Oprm1表达、SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05)。与OGD+pcDNA组比较,OGD+pcDNA-Oprm1组PC12细胞凋亡率和MDA含量显著降低,SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05)。与OGD+BG+si-NC组比较,OGD+BG+si-Oprm1组PC12细胞凋亡率和MDA含量显著升高,SOD和GSH-Px活性显著降低(P<0.05)。结论BG可减轻OGD诱导的PC12细胞损伤,其机制与上调lncRNA Oprm1表达有关。 展开更多
关键词 佛手苷内酯 糖氧剥夺损伤 长链非编码RNA 阿片样受体基因 流式细胞术 实时定量聚合酶链反应 PC12细胞
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Flow Cytometry Analysis of Human Interferon α/β receptor Expression on H9,Raji and U937 Cells
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作者 陈应华 吴伟成 +2 位作者 肖翌 赵颖旭 于天维 《Tsinghua Science and Technology》 SCIE EI CAS 1997年第1期3-6,共4页
Using flow cytometry analysis with human type Ⅰinterferons (IFN) (IFN α and β) and IFN α/β receptor antibody (ligand binding and antibody binding), we compared human IFN α/β receptor expressions on human H... Using flow cytometry analysis with human type Ⅰinterferons (IFN) (IFN α and β) and IFN α/β receptor antibody (ligand binding and antibody binding), we compared human IFN α/β receptor expressions on human H9 (T cells), Raji (B cells) and U937 (monocyte cells). The results indicated that H9, Raji and U937 cells all expressed IFN α/β receptor on their cell surfaces and the Raji cells showed the highest level of expression. The flow cytometry analysis using the antiserum to human IFN α/β receptor more clearly showed a strong IFN α/β receptor expression on Raji cells and a weak expression on H9 and U937 cells. These results indicate that B cells (Raji) expressed more receptor molecules on their cell surface than on T cells (H9) and on monocytes (U937), and the number of receptor molecules expressed on the cells is enough to be measured with flow cytometry. 展开更多
关键词 IFN α/β receptor EXPRESSION flow cytometry
原文传递
淫羊藿苷调节成骨细胞骨形成和破骨细胞骨吸收的机制 被引量:49
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作者 马小妮 葛宝丰 +7 位作者 陈克明 周建 石文贵 谢艳芳 郭晓宇 吕享 成魁 高玉海 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期432-438,共7页
目的探讨淫羊藿苷(ICA)调节骨形成和骨吸收的机制。方法原代培养大鼠颅骨成骨细胞,茜素红钙化结节染色,加入10-5mol/LICA12、24、36、48h后,用real-time RT-PCR检测骨源性分化的调节基因OSX、Runt相关基因2(Runx-2)、碱性磷酸酶(ALP)、... 目的探讨淫羊藿苷(ICA)调节骨形成和骨吸收的机制。方法原代培养大鼠颅骨成骨细胞,茜素红钙化结节染色,加入10-5mol/LICA12、24、36、48h后,用real-time RT-PCR检测骨源性分化的调节基因OSX、Runt相关基因2(Runx-2)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)基因表达,Westernblotting检测OPG、RANKL和Ⅰ型胶原蛋白表达。加入10-5mol/LICA作用10~90min,流式细胞仪测定细胞内钙离子浓度。结果与对照组相比,ICA能明显促进骨形成,表现为OSX、Runx-2、ALP和Collagen Ⅰ基因表达量及Collagen Ⅰ蛋白表达量明显增加(P均<0.01),同时提高细胞内钙离子浓度。ICA也能明显抑制骨吸收,表现为提高OPG及OPG/RANKL基因和蛋白水平的表达量。结论 ICA可能是通过促进OSX、Runx-2、ALP和Collagen Ⅰ基因表达,提高CollagenⅠ蛋白表达量及细胞内钙离子浓度来促进成骨细胞骨形成;并通过促进OPG及OPG、RANKL基因和蛋白水平的表达量来抑制破骨细胞骨吸收。 展开更多
关键词 成骨细胞 核因子ΚB受体活化因子配体 骨保护素 淫羊藿苷 流式细胞仪
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中性粒细胞CD64与C反应蛋白对烧伤脓毒症的诊断价值 被引量:21
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作者 柳权 张立明 +4 位作者 王润秀 蒙诚跃 欧斌贤 高兴新 赵丽丽 《中国感染与化疗杂志》 CAS 北大核心 2014年第2期89-93,共5页
目的探讨联合检测血清中性粒细胞CD64与C反应蛋白(CRP)对烧伤脓毒症患者的早期诊断价值。方法采用前瞻性研究,选择烧伤住院患者76例,依据烧伤脓毒症诊断标准分为脓毒症组27例,局部感染组31例,非细菌感染对照组18例,入院后24~48 h内均以... 目的探讨联合检测血清中性粒细胞CD64与C反应蛋白(CRP)对烧伤脓毒症患者的早期诊断价值。方法采用前瞻性研究,选择烧伤住院患者76例,依据烧伤脓毒症诊断标准分为脓毒症组27例,局部感染组31例,非细菌感染对照组18例,入院后24~48 h内均以流式细胞术检测外周静脉血中性粒细胞CD64,蛋白分析仪检测CRP,五分类血液分析仪检测外周血白细胞计数(WBC)、中性粒细胞比率(N),并进行微生物培养,脓毒症组经常规抗感染治疗7 d和14 d后复查各指标。结果脓毒症组CD64及CRP均高于局部感染组和对照组(P<0.01),局部感染组CD64和CRP均高于对照组(P<0.01),CD64与CRP呈正相关;脓毒症组治疗7 d后CD64和CRP下降,但与治疗前相比差异无统计学意义;治疗14 d后CD64和CRP下降明显,与治疗前相比差异有统计学意义,但仍然高于对照组(P<0.01)。检测CD64联合CRP、CD64、CRP、WBC、N、ROC曲线下面积分别为0.952、0.923、0.904、0.756、0.728。结论中性粒细胞CD64对烧伤脓毒症有良好的早期诊断价值,其表达在革兰阳性菌和革兰阴性菌中无明显差异,联合检测CD64与CRP可以提高诊断率。 展开更多
关键词 烧伤 脓毒症 IgG受体 C反应蛋白 流式细胞术
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肝细胞表面去唾液酸糖蛋白受体的流式细胞分析 被引量:4
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作者 李文新 张荣军 +2 位作者 谭成 陶永辉 金坚 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第4期394-397,共4页
建立肝细胞表面去唾液酸糖蛋白受体 (ASGPR)的流式细胞分析方法 (FCM ) ,对正常及损伤鼠肝细胞、肝癌细胞 (BEL 740 2 )表面的ASGPR作同步比较分析 .以异硫氰酸荧光素标记的新半乳糖白蛋白 (FITC NGA)为ASGPR的特异性配体 ,以培养的正... 建立肝细胞表面去唾液酸糖蛋白受体 (ASGPR)的流式细胞分析方法 (FCM ) ,对正常及损伤鼠肝细胞、肝癌细胞 (BEL 740 2 )表面的ASGPR作同步比较分析 .以异硫氰酸荧光素标记的新半乳糖白蛋白 (FITC NGA)为ASGPR的特异性配体 ,以培养的正常肝细胞 (L 0 2 )为靶细胞 ,建立肝细胞表面ASGPR的FCM .测定并计算正常及损伤鼠肝细胞 ,BEL 740 2细胞与同一浓度的FITC NGA同步反应后的平均荧光强度 (MIF)值 .FITC NGA与L 0 2细胞表面ASGPR趋近饱和结合的浓度为 0 4mg/L ,该浓度下正常及损伤鼠肝细胞 ,BEL 740 2细胞的MIF值分别为 2 2 8 7、 5 81、 1 13.该结合可以被至少 5 0倍于FITC NGA的NGA或10mmol/L的EDTA完全抑制 .FCM能够良好地揭示FITC NGA同ASGPR之间的受配体结合特性 .该方法证实BEL 740 2细胞表面几乎没有ASGPR ,损伤鼠肝细胞表面ASGPR的数量较正常鼠肝细胞显著减少 . 展开更多
关键词 肝细胞 去唾液酸糖蛋白受体 流式细胞分析
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姜黄素对人肝细胞HepG2中低密度脂蛋白受体基因表达影响的研究 被引量:9
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作者 窦晓兵 沃兴德 +4 位作者 范春雷 俞颖 钱颖 黄小黎 凌霞 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期572-575,共4页
目的研究不同浓度姜黄素对人肝细胞HepG2中内源低密度脂蛋白受体(LDLR)表达的影响,在受体水平上探讨姜黄素的调脂作用机制。方法以荧光试剂标记配体法,利用流式细胞仪技术和荧光显微镜技术研究姜黄素对HepG2细胞LDLR表达活性的影响。利... 目的研究不同浓度姜黄素对人肝细胞HepG2中内源低密度脂蛋白受体(LDLR)表达的影响,在受体水平上探讨姜黄素的调脂作用机制。方法以荧光试剂标记配体法,利用流式细胞仪技术和荧光显微镜技术研究姜黄素对HepG2细胞LDLR表达活性的影响。利用细胞免疫技术、结合荧光显微镜技术流式细胞术研究姜黄素对HepG2细胞LDLR表达数量的影响。结果姜黄素可显著增加人肝细胞HepG2内源LDLR的表达(P<0.05)。结论姜黄素能够通过增加人肝细胞HepG2LDLR的表达起到调节血脂和抗动脉粥样硬化的作用。 展开更多
关键词 姜黄素 低密度脂蛋白受体 HEPG2 流式细胞术
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流式细胞仪检测CD64平均荧光强度指数在感染性疾病中的意义 被引量:15
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作者 于倩倩 王会平 +1 位作者 翟志敏 赵一鸣 《临床荟萃》 CAS 2011年第5期383-387,共5页
目的应用流式细胞术测定外周血粒细胞表面CD64表达强度,明确CD64平均荧光强度指数(CD64指数)在感染性疾病诊断和鉴别诊断中的意义。方法以2009年3月至2010年4月在本院住院的发热患者105例为研究对象,对照组为健康体检者25例,测定C反应蛋... 目的应用流式细胞术测定外周血粒细胞表面CD64表达强度,明确CD64平均荧光强度指数(CD64指数)在感染性疾病诊断和鉴别诊断中的意义。方法以2009年3月至2010年4月在本院住院的发热患者105例为研究对象,对照组为健康体检者25例,测定C反应蛋白(CRP)及外周血CD64指数并同时进行细菌培养,根据细菌培养等病原学检查,结合患者症状体征、外周血和骨髓细胞学、胸片等检查综合判断,将患者分为感染性疾病组(感染组)91例和发热待查组14例,再根据白细胞分类、病原学及血清学等检查将感染性疾病分为细菌性(75例)、病毒性(8例)和真菌性感染组(8例)。计算25例正常对照组CD64指数、CRP值和CD64指数95%可信区间,与以上各组比较;另将血培养阳性、确诊为败血症的患者(18例)和局部细菌感染患者(57例)进行比较,回顾性分析各组患者之间CD64指数的差异;根据绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算得出CD64指数及CRP最佳临界值,根据最佳截断值确定阳性阈值,从而重新对病例进行归类分析得出最终阳性意义结论。并对14例细菌性感染患者抗生素治疗前后CD64指数也进行了比较;同时对CRP、血培养及CD64指数几个指标的敏感度与特异度进行横向比较。结果细菌性感染组外周血CD64指数(10.49±6.65)明显高于正常对照(2.87±0.73)(P<0.05);败血症患者CD64指数(14.08±6.78)最高,且明显高于局部细菌感染患者(9.75±6.34)(P<0.05);病毒感染组患者CD64指数(2.96±0.78),真菌感染组患者CD64指数(3.66±0.92)明显低于细菌感染组,提示临床患者感染时CD64指数能起到鉴别作用;根据绘制ROC曲线确定了CD64指数和CRP的最佳截断值,根据最佳截断值及95%可信区间确定了CD64指数的阳性阈值,取CD64指数>4.0为弱阳性,CD64指数>9.0为强阳性,重新分组分析后验证了CD64指数在感染性疾病中的意义;14例细菌感染患者抗生素治疗前CD64指数(13.83±5.50)明显高于治疗后(8.44±3.01)(P<0.05),提示动态监测外周血CD64指数有助于治疗效果评价;同时,计算得出外周血CD64指数的敏感度(95.8%)和特异度(89.9%)明显优于C反应蛋白(79.2%,79.6%),血培养的特异度高(100%),但其敏感度(17%)则明显不如以上两者。结论测定外周血粒细胞CD64指数可以帮助早期诊断细菌性感染(尤其是败血症)、判断感染严重程度和评价治疗效果,其敏感度和特异度均明显优于C反应蛋白。 展开更多
关键词 感染 受体 IgG CD64 流式细胞术
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复发性口疮病灶γδT细胞增多及其临床意义 被引量:5
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作者 姜军松 杨志刚 +3 位作者 唐晓农 马景虎 范学东 吕兴标 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期200-202,共3页
为探明复发性口疮患者局部病灶单个核细胞有否免疫激活或免疫缺陷,通过三色免疫荧光染色技术结合流式细胞仪活细胞分析技术,检测研究对象的淋巴细胞表型,复发性口疮(RAU)活动期患者41例作为研究组,无RAU病史的口腔粘膜外... 为探明复发性口疮患者局部病灶单个核细胞有否免疫激活或免疫缺陷,通过三色免疫荧光染色技术结合流式细胞仪活细胞分析技术,检测研究对象的淋巴细胞表型,复发性口疮(RAU)活动期患者41例作为研究组,无RAU病史的口腔粘膜外伤35例作为对照组。结果显示,RAU活动期患者γδT细胞数量(平均9.0%)明显高于对照组(平均3.0%,P<0.001)。实验表明患者在发作期存在免疫刺激,但刺激物的本质尚未明确,巨细胞病毒和带状疱疹病毒可能涉及这一免疫刺激过程。 展开更多
关键词 口疮 受体 抗原 复发性 RAU ΓΔT细胞
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流式细胞术在抗血小板治疗中的临床应用 被引量:8
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作者 刘磊 龚辉 +2 位作者 魏建明 李剑 罗心平 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期540-544,共5页
目的 使用全血流式细胞术观察抗血小板治疗对急性冠脉综合症(acute coronary syndrome,ACS)患者血小板的影响,评估临床使用该方法的可行性.方法 选取2012.1.1至2012.5.31期间在华山医院首次确诊为ACS的患者.其中男性10例,女性10例,年... 目的 使用全血流式细胞术观察抗血小板治疗对急性冠脉综合症(acute coronary syndrome,ACS)患者血小板的影响,评估临床使用该方法的可行性.方法 选取2012.1.1至2012.5.31期间在华山医院首次确诊为ACS的患者.其中男性10例,女性10例,年龄57~72岁.分别于所有治疗开始前以及治疗后第8天采血.使用流式细胞仪检测患者血小板静息状态纤维蛋白原受体(PAC 1)和P选择素(CD62p)表达比例,以及二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)诱导血小板活化后的PAC-1、CD62p表达比例;使用血小板双通道聚集仪测定患者血小板聚集率.另设20例健康志愿者做为对照组.结果 治疗前,ACS患者静息血小板PAC 1和CD62p高表达;使用ADP体外刺激血小板活化,ACS患者血小板活化水平高于对照组.使用阿司匹林联合氯吡格雷治疗后,患者循环活化血小板数量下降,但仍高于对照组;使用ADP体外刺激血小板活化,ACS患者血小板PAC-1和CD62p较治疗前下降,其中,PAC-1表达水平低于对照组.结论 ACS患者PAC 1、CD62p表达高于健康人,循环活化血小板数量升高,抗血小板治疗可以显著抑制患者血小板功能.合理使用全血流式细胞术可以用于临床抗血小板治疗评估. 展开更多
关键词 流式细胞术 急性冠脉综合征(ACS) 纤维蛋白原受体 P-选择素
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大鼠海马神经元中μ阿片受体、CCK受体的表达及慢性吗啡作用对其表达的影响 被引量:8
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作者 闫玉仙 呼文亮 +4 位作者 丛斌 马春玲 倪志宇 牛增强 余磊 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第13期1214-1217,共4页
目的:研究MOR-1,CCK-AR,CCK-BR在海马神经元的分布和吗啡对其受体的影响.方法:用激光共聚焦扫描技术,以神经元特异性标记抗体NF-200对原代海马神经元进行鉴定,采用特异性的MOR-1,CCK-AR,CCK-BR的抗体观察观察它们在海马神经元上的表达.... 目的:研究MOR-1,CCK-AR,CCK-BR在海马神经元的分布和吗啡对其受体的影响.方法:用激光共聚焦扫描技术,以神经元特异性标记抗体NF-200对原代海马神经元进行鉴定,采用特异性的MOR-1,CCK-AR,CCK-BR的抗体观察观察它们在海马神经元上的表达.选用雄性Wister大鼠,用剂量递增法皮下注射盐酸吗啡,对照组以同样的方法给予生理盐水后,取出大鼠海马组织用流式细胞技术检测不同时间吗啡作用于海马神经元时上述受体的表达.结果:海马神经元上同时表达MOR-1,CCK-AR及CCK-BR;给予吗啡后2~4d,MOR-1在海马神经元上的表达较对照增高(P<0.05),5d时,MOR-1的表达显著下降(P<0.01);随吗啡作用时间延长,CCK-AR和CCK-BR在海马神经元的表达呈上调趋势,且CCK-BR的表达高于CCK-AR(P<0.01).结论:海马神经元上同时存在MOR-1,CCK-AR和CCK-BR,吗啡作用时间越长,MOR-1表达越弱,而CCK-AR和CCK-BR表达越强. 展开更多
关键词 阿片受体 CCK-A受体 CCK-B受体 吗啡依赖 原代海马神经元 激光共聚焦 流式细胞术
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三色和双色荧光标记流式细胞术对肾移植免疫反应新指标TLR4的监测 被引量:3
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作者 于立新 余玉明 +1 位作者 邓文锋 刘艳君 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期294-296,共3页
目的比较三色和双色荧光标记流式细胞术(FCM)在肾移植术后免疫指标TLR4监测中的优缺点。方法选取10例肾移植术后病例,分别采用三色和双色FCM检测外周血单核细胞中CD14、TLR4和CD80表达情况,计算CD14阳性单核细胞中TLR4和CD80的表达百分... 目的比较三色和双色荧光标记流式细胞术(FCM)在肾移植术后免疫指标TLR4监测中的优缺点。方法选取10例肾移植术后病例,分别采用三色和双色FCM检测外周血单核细胞中CD14、TLR4和CD80表达情况,计算CD14阳性单核细胞中TLR4和CD80的表达百分率并进行统计比较。结果两种方法检测CD14阳性单核细胞中TLR4和CD80阳性表达百分率均无显著性差异(P=0.198,P=0.872),两种方法对相同血标本的检测结果均呈正相关关系(积矩相关系数r=1,P=0.000;积矩相关系数r=0.999,P=0.000)。另外,应用三色FCM还可同时获得单核细胞中TLR4和CD80双阳性的表达情况。结论三色和双色FCM检测TLR4的结果无显著性差异,但三色FCM可同时显示TLR4与其下游分子CD80双阳性表达情况,对揭示TLR4参与移植免疫反应机制具有重要价值,而且血标本用量少,节约单克隆抗体。 展开更多
关键词 三色荧光标记流式细胞术 双色荧光标记流式细胞术 肾脏移植 TOLL LIKE receptor 4
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中性粒细胞黏附因子CD11b与CD64表达对新生儿感染的早期诊断价值 被引量:15
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作者 郝丽红 麻庆荣 +5 位作者 张文双 刘晓军 许俐 郭静 张芳 高海涛 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第4期325-328,共4页
目的:探讨外周血中性粒细胞黏附因子CD11b、CD64表达在新生儿细菌感染早期诊断及疗效评价中的价值。方法:记录我院新生儿病房住院疑为细菌感染的63例患儿的临床表现、血培养、脑脊液培养结果,检测5项非特异性指标。分为败血症组33例,... 目的:探讨外周血中性粒细胞黏附因子CD11b、CD64表达在新生儿细菌感染早期诊断及疗效评价中的价值。方法:记录我院新生儿病房住院疑为细菌感染的63例患儿的临床表现、血培养、脑脊液培养结果,检测5项非特异性指标。分为败血症组33例,非败血症感染组30例,另设对照组15例。各组患儿在入院后24-48h内取外周静脉血1mL,采用流式细胞仪检测中性粒细胞CD11b、CD64表达。败血症组在恢复期(治疗1周后)复查。结果:败血症组中性粒细胞CD11b、CD64表达均高于非败血症感染组和对照组(P〈0.05)。败血症组在恢复期CD11b、CD64表达水平下降(P〈0.05)。以CD11b≥320MFI(MFI为平均荧光强度)、CD64≥20MFI为临界值阳性标准,其诊断败血症的敏感度分别为72.73%和75.00%,特异度分别为94.74%和80.49%。CD11b和CD64在革兰阳性菌和阴性菌感染时表达差异无统计学意义。结论:应用流式细胞术测定中性粒细胞黏附因子CD11b、CD64,可作为早期诊断新生儿败血症的实验室依据之一,动态观察其水平变化,对判断感染程度、治疗效果评价具有临床应用价值。 展开更多
关键词 细菌感染 脓毒症 抗原 CD11b 受体 IgG 中性白细胞 流式细胞术 革兰阳性菌 革兰阴性菌 婴儿 新生
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染料木黄酮对小鼠T细胞体外活化及增殖的影响 被引量:4
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作者 王青 何贤辉 +2 位作者 肇静娴 杨志刚 曾耀英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期186-190,共5页
目的 :研究染料木黄酮 (Gen)对T细胞体外活化及增殖的影响 ,并探讨其机制。方法 :利用荧光标记的单克隆抗体染色结合流式细胞术 ,检测多克隆刺激剂佛波醇酯 (PDB)或刀豆蛋白 (ConA)刺激下小鼠T细胞表达活化抗原CD6 9、CD2 5的百分率 ;... 目的 :研究染料木黄酮 (Gen)对T细胞体外活化及增殖的影响 ,并探讨其机制。方法 :利用荧光标记的单克隆抗体染色结合流式细胞术 ,检测多克隆刺激剂佛波醇酯 (PDB)或刀豆蛋白 (ConA)刺激下小鼠T细胞表达活化抗原CD6 9、CD2 5的百分率 ;以羧基荧光素乙酰乙酸 (CFSE)标记技术结合流式细胞术 ,分析PDB +Ion (Iono mycin)或ConA刺激下T细胞增殖相关指数。结果 :Gen对ConA刺激组T细胞CD6 9、CD2 5表达有明显抑制作用 (P<0 0 5 ) ,且呈剂量依赖关系 ,而对PDB刺激组T细胞CD6 9及CD2 5表达的抑制需要较高浓度 (>5 0 μmol/L) ;Gen无论对ConA或PDB +Ion刺激组T细胞增殖均有显著抑制作用 (P <0 0 1) ,且均呈剂量依赖关系。结论 :Gen可明显抑制多克隆刺激剂诱导的T细胞体外活化及增殖 ,其作用机制可能是抑制早期活化相关蛋白酪氨酸激酶活性。 展开更多
关键词 染料木黄酮 抗原 CD69 受体 白细胞介素2 T淋巴细胞 流式细胞术
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高血压病患者外周血单核细胞Toll样受体4的表达 被引量:10
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作者 冯俊 王爱玲 +2 位作者 杨春 王静 余元勋 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1003-1007,共5页
目的探讨Toll样受体4(TLR4)在高血压伴靶器官损害患者外周血白细胞上的表达及其表达差异在高血压发病中的意义。方法采用流式细胞仪检测45例轻型高血压不伴靶器官损害患者、40例高血压伴靶器官损害患者及40名健康对照者外周血淋巴细胞... 目的探讨Toll样受体4(TLR4)在高血压伴靶器官损害患者外周血白细胞上的表达及其表达差异在高血压发病中的意义。方法采用流式细胞仪检测45例轻型高血压不伴靶器官损害患者、40例高血压伴靶器官损害患者及40名健康对照者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞上TLR4的表达。结果3组外周血淋巴细胞和中性粒细胞TLR4的阳性率平均值低于6%;高血压不伴靶器官损害组单核细胞的TLR4阳性率为(48.2±14.3)%,高血压伴靶器官损害组(55.9±15.2)%,均显著高于健康对照组的阳性率[(40.8±13.6)%,P均<0.01),高血压伴靶器官损害组的TLR4阳性率高于高血压不伴靶器官损害组(P<0.05)。结论TLR4主要表达于外周血单核细胞,在高血压及伴靶器官损害患者其阳性率升高;TLR4及其介导的炎性反应与高血压的发生发展存在一定的相关性。 展开更多
关键词 高血压 靶器官损害 TOLL样受体4 流式细胞术
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